INSAMANTAREA PRODUSULUI PATOLOGIC PE UN MEDIU DE CULTURA

A. MEDII DE CULTURA

Def.: Reprezinta substratul biologic si energetic necesar cresterii si dezvoltarii bacteriilor

Mediile de cultura

 Artificiale ( pt bacterii )

 Celulare vii ( in virusologie )

1. Culturi de cel. Eucariote

2. Oua embrionate de gaina

3. Animale de laborator

MEDIILE DE CULTURA ARTIFICIALE

CONDITII

1. Sa fie nutritiv (sursa de: C, N, f. de crestere, vitamine, saruri, proteine)

2. Sa asigure umiditatea ( apa suficienta )

3. Sa fie steril ( urmarim cresterea bacteriilor insamantate)

4. Ph= 7,2-7,6

5. Osmolaritate ( NaCl 0,9%)

6. aerob / anaerob

Hrana, apa, caldura asig de mediul de cultura

Temperatura asig de incubator.

CLASIFICAREA MEDIILOR DE CULTURA IN FUNCTIE DE:

1.STAREA DE AGREGARE:

 M. lichide: bulion simplu ( supa de carne de vita-macerat-fiert-filtrat ) / apa peptonata

(peptone+ apa distilata+ NaCl)

 M. solide: geloza simpla (bulion simplu + 20g/l agar-agar = solidificare). Agar-agar se topeste la
80 grd; noi incubam la 37 grd.

 M. semisolide: geloza moale

2. SURSA INGREDIENTELOR:

 Ingrediente de orig. animala: sg , lapte, bila

 Ingrediente de orig. vegetala: soia, cartofi,

morcovi,orez

 Ingrediente de orig. artificiala( industriale): vitamine

3.COMPLEXITATE :

 Simple ( bulionul simplu, apa peptonata)

 Complexe:

1. Elective

2. Selective

3. De imbogatire

4. Diferentiale

4. IN FUNCTIE DE UTILIZARE:

 M. de transport: asig viabilitatea bacteriilor in timpul transportului( CARRY-BLAIR, STUART)

 M. de izolare: m. simple/elective/selective/de imbogatire( p.p monobacteriene/ pp

pluribacteriene)

 M. de identificare: se folosesc m.diferentiale

 M. pt testarea sensibilitatii: m. Mueller- Hinton

 M. de conservare: pt stocarea unor culturi bacteriene ( frigider, congelator) – M. Lowenstein

- pt b. Koch

M. electiv: contine ingrediente care favorizeaza cresterea unei anumite bacterii, fara a influenta
cresterea florei de asociatie

Exp: m. LOFFLER ( geloza + ser coagulat de bou ) – b. difteric creste in 12 h, restul bacteriilor cresc in 24
h

M. selectiv: contine ingrediente, care inhiba cresterea florei de asociatie ( m. Lowenstein)

 M. cu selectivitate redusa: m. MAC – CONKEY( cu s. biliare) – inhiba cresterea b. G+ si permite

dezv enterobacteriilor
  M. cu selectivitate medie: m.ADCL – inhiba multiplicarea b. lactozo + ( nepatog) si stim. cresterea
b. lactozo –

( patogene)

 M cu selectivitate inalta: m.WILLSON- BLAIR – inhiba toate b. mai putin cresterea Salmonellei

M de imbogatire: - are un substrat ce stimuleaza flora patogena si inhiba flora saprofita

- are prop. selective si elective

- folosit pt p.p care au un nr scazut de bact patogene

Exp.: m. CHAPMAN – pt stafilococi

M. diferential: contine ingrediente care pot fi modificate vizibil sub actiunea metabolismului
bacterian( diferentiaza speciile in fctie de echipamentul enzimatic)

Exp.: a) m. AABTL – pt enterobacterii( de explicat)

- Lactozo - : patogene, nu utilizeaza lactoza din mediu, raman in culoarea initiala a mediului
( albastru-verzui )

- Lactozo + : nepatogene/ cond patog, utilizeaza lactoza, modifica culoarea mediului ( galben )

b) m. geloza sange: diferentiaza speciile hemolitice ale streptococului de speciile nehemolitice

 Nehemolitice: bact cresc, culoarea mediului nu se modifica ( gama )

 Hemoliza totala: bacteriile cresc , in jur apare o zona transparenta de hemoliza ( beta)

 Hemoliza partiala: in jurul bacteriilor apare o zona verde - hematii sparte, Hb modificata partiala
pana la un produs intermediar verde ( alfa)

B. TEHNICI DE INSAMANTARE

 Insamantare simpla pe m.lichid

 Insamantare simpla pe m. solid ( geloza inclinata)

 Dispersia in pentagon – m. solid- pt obt colonii izolate ( daca distanta dintre bacterii este
suficient de mare atunci cresc colonii dispersate )