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INDICE
1. INTRODUCCION 3
2. TOMA DE MUESTRAS 3
3. CUADRO HEMATICO 3
3.1 HEMOGLOBINA (Hb) 4
3.2 HEMATOCRITO 4
3.3 ÍNDICES ERITROCITARIOS 4
3.4 RECUENTO CELULARES 4
3.4.1 RECUENTO HEMATIES 4
3.4.2 RECUENTO DE LEUCOCITOS 4
3.4.3 RECUENTO DE PLAQUETAS 5
3.5 VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG) 5
3.5.1 MONTAJE E INTERPRETACION 5
3.5.2 ALTERACIONES 5
3.6 ÍNDICES ERITROCITARIOS SECUNDARIOS 6
3.7 CUADRO HEMATICO AUTOMATIZADO 6
3.7.1 PARAMETROS CALCULADOS 6
3.7.2 DIFERENCIAL LEUCOCITARIO 7
3.7.3 HISTOGRAMAS 7
3.7.3.1 PLAQUETAS 7
3.7.3.2 ERITROCITOS 7
3.7.3.3 LEUCOCITOS 7
3.8 PARAMETROS ERITROCITARIOS 7
3.9 PARAMETROS LEUCOCITARIOS 8
3.10 PARAMETROS PLAQUETARIOS 8
3.11 VALORES DE REFERENCIA 9
4. ANALIZADOR DE HEMATOLOGIA STKS DE BECKMAN COULTER 9
4.1 PARAMETROS MEDIDOS Y CALCULADOS 10
4.1.1 GUIA RAPIDA DE OPERACIÓN COULTER STKS 11
4.1.2 PROCEDIMIENTOS DE MANTENIMIENTO COULTER STKS 15
4.1.2.1 MANTENIMIENTO SEMANAL 15
4.1.2.1.1 MANTENIMIENTO MENSUAL 16
4.1.2.2 PROCEDIMIENTO DE MANTENIMIENTO 16
5. FROTIS DE SANGRE PERIFERICA 17
5.1 METODO DE LOS DOS PORTA OBJETOS 17
5.2 REACTIVOS PARA LA COLORACION 18
5.2.1 COLORACION 18
5.2.2 LECTURA DEL RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS 18
5.2.2.1 CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE LOS LEUCOCITOS 19
5.3 MORFOLOGIA DE LOS GLOBULOS ROJOS 19
5.3.1 ALATERACIONES MORFOLOGICAS ERITROCITARIAS 19
5.3.1.1 ALTERACIONES DEL TAMAÑO (Anisocitosis) 20
5.3.1.2 MACROCITOSIS 20
5.3.1.3 MICROCITOSIS 20
5.3.1.4 ALTERACIONES MORFOLOGICAS (Poiquilocitosis) 20
5.3.1.5 ALTERACIONES DEL COLOR 20
5.3.1.6 HIPOCROMIA 20
5.3.1.7 POLICROMATOFILIA 20
5.4 RANGOS DE ANISOCITOSIS DE A CUERDO AL VCM 20
Elaboró: Ligia Estella Ome Revisó: Celmira Angel Validó: Luis Gerardo Cano Villate
Bernal
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PRESTACION DE SERVICIOS DE SALUD CODIGO: AC – ADX – G003
APOYO DIAGNOSTICO VERSION: 01-2007
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HEMATOLOGIA CLINICA
1. INTRODUCCION
2. TOMA DE MUESTRAS
La punción se realiza, por lo general, en la parte anterior del brazo, en el pliegue del
codo. Se debe limpiar la zona de venopunción, con un algodón impregnado de alcohol,
del centro hacia fuera en círculos.
Las muestras deben ser procesadas en el menor tiempo posible y lo más conveniente
es refrigerarlas mientras esto sucede.
3. CUADRO HEMATICO
Sin duda alguna el cuadro hemático (CH), es de las pruebas más solicitadas al
laboratorio clínico como un perfil de exámenes relacionados con los diferentes
elementos celulares en la sangre y seguimiento de entidades hematológicas como no
hematológicas.
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Montaje manual: Llenar un capilar hasta las 2/3 partes aprox., sellando la
parte inferior con plastilina y llevarlo a la micro centrífuga, por 5 a 10 minutos
entre 10000 y 5000 rpm respectivamente. Se lee con una tabla estándar, y se
informa en porcentaje %.
El tamaño d los glóbulos rojos, será otra variable que influye en la valoración del
hematocrito, si los glóbulos rojos son muy pequeños, ocupan menor volumen y de
igual manera si son mas grandes ocuparan mayor volumen, ambas situaciones de
hecho son patológicas y cursarán con estado anémico.
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1. Linfocitos (LYMPH).
2. Neutrófilos (NEUT).
3. Células mixtas (MXD): Sumatoria de los eosinófilos, basófilos y monocitos. Si
estas células son más de un 6% de los leucocitos o se detecte otra
anormalidad, el laboratorio informara un diferencial manual.
Recuento de Eritrocitos.
Hemoglobina.
Hematocrito: El hematocrito electrónico es el resultado de relacionar el número
de eritrocitos con el tamaño de los mismos.
Promedio Eritrocitario: Conocido como promedios corpusculares este se obtiene
por mediación directa de los glóbulos rojos al momento de hacer el recuento de
eritrocitos, en un promedio de 75.000 células.
El promedio de Hemoglobina corpuscular (PCPC): Se obtiene con fórmulas
matemáticas incorporadas al computador del equipo sobre la base del recuento
de eritrocitos, el hematocrito y hemoglobina.
Ancho de distribución de los eritrocitos (ADE): Corresponde al coeficiente de
variación en el tamaño de los eritrocitos que se obtiene por métodos
electrónicos, clasificando morfológica las anemias.
Gaussiana, y una segunda población, más pequeña, conocida como ¨dedo¨ entre 130
y 185fl que aparece a la derecha de la población principal. Los dedos del histograma
presentan eritrocitos aglutinados o artefactos. Mediante el histograma es posible
identificar varias poblaciones de eritrocitos cunado se presentan.
450000
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Especificaciones Técnicas:
Tecnología VCS—diferencial de 5 partes
22 parámetros, Histogramas y Dispersogramas.
Reticulocitos y CD3-CD4 opcional.
109CBC + DIF por hora
138 CBC por hora
Modo primario 250 microlitros de ST.
Tubos 13x100 o pediátricos con adaptador
Modo secundario 150 microlitros de ST
Identificación de muestras con código de barras.
4 Reactivos líquidos listos para el uso con estabilidad a bordo > 30 días
Verificación de reproducibilidad en recuentos celulares.
Data Base hasta 5.000 resultados
Host Quero
Fácil mantenimiento por parte del usuario
Programa de control de calidad interno.
Iqap.
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Stara Up: Es indispensable realizar el startup siempre que el equipo se haya dejado
con detergente durante el procedimiento de shutdown.
Desde la pantalla principal pulse ENTER en STARTUP, aquí aparecen los resultados del
banco de hemoglobina, del conteo de fondo (background), presiones, vacío y las
pruebas electrónicas de rampa y precisión. En el software del analizador se encuentran
los valores límite de estas pruebas, si alguno de estos resultados lo sobrepasa,
aparecerá en color rojo y deberán tomarse acciones correctivas.
Como pasar los controles Latron Control: Desde la pantalla principal pulse ENTER sobre
el menú CONTROLS. Pulse ENTER sobre el submenu CONTROL RUN. En esta pantalla
aparecen los valores asignados para correr el Latron Control. En el caso que aparezca
un control diferente pulse F2 (file) y seleccione el LATRON 2 que corresponda al
numero de lote que esta utilizando.
Teniendo en la pantalla los valores para el Latron 2 pulse F3 (Primer), aparece una
ventana en la parte superior derecha de la pantalla.
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En el teclado del dilutor pulse F55 y ENTER (debe estar en esta función para poder
pasar el Latron). En la pantalla del dilutor aparece ¨oprima manual¨.
Asegúrese de limpiar muy bien la sonda de aspiración y pase el frasco #1 (latron
primer – tapa blanca). Retire el frasco cuando escuche un beep.
Una vez termina el conteo el resultado aparece en la pantalla. El conteo debe ser
inferior a 300.
Para pasar el Latron Control, pulse F3 (Latex). En el teclado del dilutor active F55
pulsando ENTER. Mezcle bien el frasco #2 (laton control- tapa negra) y páselo por
modo abierto igual que el frasco #1. Retire el frasco cuando escuche un beep.
Una vez termine el conteo los resultados aparecen en la pantalla. Asegúrese que los
resultados estén dentro del rango.
Tenga la precaución de usar la función 55 exclusivamente para pasar los controles
Latron; usar otra muestra en esta función causaría graves daños en el instrumento.
Para salir de la función F55 presione dos veces la tecla STOP en el teclado del
analizador.
Control 5C: Lugo de haber pasado los controles Latron y antes de analizar las sangres
control, el sistema debe purgarse con una muestra cualquiera de sangre normal, esto
para preparar las líneas y principalmente la celda de flujo para recibir muestras de
sangre. Puede analizarse por modo secundario colocándose cualquier numero de
identificación en el teclado del analizador con la tecla ID y mínimo tres dígitos (por
ejemplo 001), luego presiones la tecla ENTER. Los resultados de este análisis no son
válidos.
En el monitor, en el menú CONTROLS, CONTROL RUN, pulse F2 (FILE) para buscar los
archivos de los controles de sangre. Entre a cada uno de los archivos para ver en
pantalla los resultados.
Los controles de sangre se pueden pasar por modo primario, colocando los tubos con
los códigos de barras hacia arriba en un cassette, o por modo secundario colocándole
como ID el número del código de barras.
Lista de trabajo: Todas las muestras se pasen por modo primario o por modo
secundario deben ser incluidas en una lista de trabajo.
Para acceder a la lista de trabajo pulse ¨SAMPLE ANALYSIS¨ desde el menú principal y
selecciones el submenu ¨WORKLIST¨.
Usted puede hacer dos listas de trabajo diferentes, una para CBC y otra para CBC-
DIFF, dependiendo de cómo quiera que se procesen las muestras. El tipo de lista
aparece en la parte superior de esta pantalla. Para cambiar entre una lista u otra
presione la flecha hacia la derecha (cursor).
Una vez seleccionada la lista de trabajo, pulse F5 (sequence) para activar el modo de
autosecuencia. En esta pantalla se activan los identificadores para las muestras. Los
identificadores que se deben activar dependen de la forma como se vayan a pasar las
muestras por el equipo: modo primario (cerrado) o modo secundario (abierto).
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Modo Primario: Tenga en cuenta que para trabajar en modo primario (cerrado), el
volumen mínimo de sangre en los tubos debe ser de 1ml, y en lo posible los tubos no
deben ser destapados antes de ser pasados por el equipo.
El tamaño de los tubos adecuado para colocar en estos cassettes es 13x150mm, para
tubos pediátricos existen unos adaptadores especiales o de lo contrario deberán
pasarse por modo secundario.
Coloque los tubos en los cassettes en el orden como fueron programados en la lista de
trabajo. Coloque los cassettes en el e quipo y pulse en el teclado del dilutor
¨start count¨.
Una vez haya ingresado la información, pulse F8 (execute) para comenzar a buscar en
la base de datos. Cuando termina la búsqueda, el paciente o los pacientes aparecen en
la pantalla.
Sitúe el cursor sobre el paciente que desea revisar.
Pulse F12 para ver los histogramas y los resultados numéricos del paciente.
Pulse F4 (Print) para imprimir el resultado.
Funciones Especiales
Modo CBC/CBC+DIFF: El STKS puede trabajar en modo CBC (resultados sin analisis
diferencial) o modo CBC+DIFF (resultados con todos los parámetros). Para activar o
inactivar modos, vaya a la pantalla superior del dilutor, presione PRINCIPAL, aparece
una pantalla de Configuración del Sistema con una opcion de Modo de Operación,
oprima la tecla que esta en frente de esta opción hasta que aparezca el modo de
operación que desea CBC o CBC+DIFF. Presione Retorno 2 veces para llegar a la
pantalla principal.
Purga de reactivos
F02: Purga del Lyse
F16: Purga del Isoton
F17: Purga del Scatter Pak
Estas funciones se usan cuando se carga alguno de los reactivos en el sistema con el
fin de purgarlos.
Desobstrucción de aperturas
CLEAR APERTURE: Limpieza de las aperturas.
F01: Limpieza de las aperturas
F09: Choque eléctrico aparturas.
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Estas funciones se usan con el fin de desobstruir las aperturas de los baños de WBC y
RBC:
Otras
ALARM RESET: Para callar la alarma sonora.
STOP: Para detener el analizador.
PRIME APERTURE: Para activar el compresor cuando ha entrado en reposo (luego de
una hora sin usarse el instrumento).
Luego, adicionar hipoclorito hasta el nivel indicado y teclear F12 para que se laven
los drenajes de los baños, continuar adicionando hipoclorito hasta el nivel indicado.
Cuando termine la función 12 teclear STOP y dejar reposar 5 minutos.
Luego, adicionar hipoclorito hasta el nivel indicado y teclear de nuevo F11 y cuando
termine teclear STOP para salir de la función y luego DRAIN para drenar los
baños.
Proceder a realizar el STARTUP y los demás procedimientos iniciales.
Clear Aperture o F01: con esta funcion se aplica vacio a las aperturas para tratar de
remover las partículas que estén causando obstrucción.
ZAP o limpieza eléctrica de las aperturas (F09): con esta función se activa el circuito de
quemado que limpia eléctricamente las aperturas y adiciona detergente. Luego de
aplicar esta función debe dejarse en reposo 15 minutos el analizador y posteriormente
realizar los procedimientos iniciales.
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F44: con esta función se aplica bajo presión y bajo vacío para desobstruir la celda de
flujo.
F45: con esta función se aplica alta presión y alto vacío para desobstruir la celda de
fljo.
F46: con esta función se aplica alta presión, alto vacío, corriente eléctrica y detergente
para desobstruir la celda de flujo. NO DEBE UTILIZARSE DE RUTINA Y NO DEBE
REALIZARSE MAS DE UNA VEZ porque desestabiliza la celda y la daña. Luego de este
procedimiento, dejar en reposo 30 minutos el analizador y realizar los procedimientos
iniciales.
En cualquier método que se utilice para la realización del frotis, deberá tenerse en
cuenta las siguientes precauciones:
5.1 Método de los dos porta objetos: se debe colocar una gota de sangre en la
parte anterior de la superficie del porta objeto. Formando un ángulo de
aproximadamente
45 o, colocar el otro porta objeto sobre la gota de sangre, esperando que por
capilaridad toda la sangre se distribuya, no dejando que llegue al extremo y luego
desplazarlo suavemente, a velocidad moderada, en sentido longitudinal hasta que la
gota de sangre quede bien extendida.
El grosor del frotis sanguíneo, varia según el ángulo que se forme entre los dos porta
objetos. El frotis se deja sacar a temperatura ambiente y en posición horizontal, este
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Colorante de Wright .
Solucion de buffer
5.2.1 Coloración: Para conseguir los mejores resultados hay que colorear las
extensiones en cuanto se hayan secado al aire, sin dejar en ningún caso mas de una
hora.
5.2.2 Lectura del recuento diferencial de leucocitos: Con objetivo de 100x del
microscopio óptico, en la parte media del frotis, se comienza en un punto no muy
cercano al borde y se va recorriendo a lo ancho del frotis, hasta llegar a contar un total
de 100 leucocitos consecutivos diferenciándolos morfológicamente. Se realizan siempre
a muestras de bebes y a muestras que se quiera confirmar el resultado.
A diferencia de otros tejidos, la sangre esta constituida por tres tipos de células muy
diferentes entre sí, tanto del punto de vista morfológico, estructural y de funcional.
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Desde el punto de vista morfológico, los leucocitos se han clasificado en dos grupos:
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5.3.1.7 Policromatofilia: Los hematíes con tonalidad gris azulada, esto es signo de
inmadurez celular, observándose en ciertas anemias acompañadas de reticulocitos en
sangre periférica. Los hematíes se caracterizan por ser de mayor tamaño y su
coloración azulada, debido al contenido de ARN.
6. RECUENTO DE RETICULOCITOS
6.2 Reactivos: Colorante Reticulocitos: New Methylene Blue, listo para usar.
6.4 Procedimiento: Usando una pipeta para glóbulos tome sangre capilar o venosa
hasta la marca 0.5 y luego a 1.0 con el colorante. Lleve la mezcla al bulbo de la pipeta,
mezcle bien y deje en reposo 10 minutos.
Pasado el tiempo y descartando la primeras gotas, coloque una gota de la mezcla en
una lamina portaobjetos limpia y efectúe un extendido de la manera usual.
Deje secar y examine directamente al microscopio usando aceite de inmersión y
objetivo 100x
Calculo ¨
% Reticulocitos= No reticulocitos por 500 Eritrocitos X0.2
Notas
Una buena coloración depende del extendido, este no debe ser muy grueso y se debe
evitar la formación de grumos y estrías.
Usar placas preferiblemente nuevas, sin ralladuras y libres de grasa.
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7. HEMOSTASIA Y COAGULACION
INR=R (isi)
El valor del ISI es determinado para cada reactivo y en la mayoría va de acuerdo con
las normas de l OMS.
PRT: La tecla de PRT puede ser utilizada en todo momento excepto durante los ciclos
de las técnicas. Nota: La tecla para el avance del papel se encuentra en la tapa de la
impresora (Tecla de color gris)
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PROG: Esta tecla se utiliza para seleccionar los programas de utilidades o para salir
del menú de utilidades volviendo al menú principal.
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8.2 MANTENIMIENTO
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9. BIBLIOGRAFIA
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