Curs 1.

FIZIOLOGIA MEMBRANEI CELULARE

CUPRINS 1.Organizarea morfo-funcional a membranei celulare
1.1. Lipidele membranare. Rol structural i funcional 1.3. Structurile specializate ale membranei 1.2. Proteinele membranare. Rol structural i funcional

2.Funcia de transport a membranei celulare. Transportul pasiv

2.1. 2.2. 2.3. 2.4. Difuziunea Osmoza Filtrarea Canalele ionice membranare
ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 1

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

OBIECTIVELE CURSULUI 1 Studentul trebuie s: Explice organizarea i rolul matricei fosfolipidice n permeabilitatea selectiv a membranei Cunoasc criteriile de clasificare i funciile principale ale proteinelor membranare Enumere criteriile generale de clasificare a mecanismelor de transport membranar Defineasc principalele caracteristici ale transportului pasiv Descrie transportul pasiv prin difuziune i osmoz Defineasc i s descrie caracteristicile generale ale transportul pasiv prin canale ionice Descrie transportul pasiv prin canale ionice voltaj dependente i operate de ligand
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 2

STRUCTURA GENERAL A CELULEI

MEMBRANA CELULAR CITOPLASMA NUCLEUL

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

1.Organizarea morfo-funcional a membranei celulare

DEFINIIE: complex molecular lipidoproteic care delimiteaz celula de mediul extracelular (membrana celular = PLASMALEM) STRUCTUR: modelul mozaicului fluid lipido-proteic FUNCIE PRINCIPAL: barier cu permeabilitate selectiv i dinamic care controleaz schimburile dintre celul i mediul extracelular

Modelul mozaicului fluid lipoproteic (Singer i Nicolson (1972)

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 4

STRUCTUR LIPIDE fosfolipide, colesterol, glicolipide PROTEINE periferice, integrale, glicoproteine STRUCTURI SPECIALIZATE ALE MEMBRANEI microvili, joniuni

LEGEND: 1. glucid, 2. glicoprotein, 3. glicolipid, 4. colesterol, 5. protein periferic, 6. protein integral, 7. filamente ale citoscheletului celular, 8. extremiti hidrofile ale fosfolipidelor, 9. matrice fosfolipidic, 10. extremiti hidrofobe ale fosfolipidelor
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 5

1.1. LIPIDELE MEMBRANARE rol structural i funcional (S1.slide 6-10)

FOSFOLIPIDELE - formeaz matricea fosfolipidic alctuit din dou straturi monomoleculare de fosfolipide. Fiecare strat prezint: - 1 extremitate hidrofil spre poriunea periferic a membranei - 1 extremitate hidrofob spre poriunea mijlocie a membranei

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

COLESTEROLUL dispus n interiorul matricei fosfolipidice asigur flexibilitatea i stabilitatea membranei contribuie la caracterul selectiv al permeabilitii membranei GLICOLIPIDELE - intr n structura nveliului celular numit glicocalix sau atmosfera pericelular care stabilete contacte cu structuri ale mediului extracelular

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

FUNCIILE MATRICEI FOSFOLIPIDCE

(a) ASIGUR PERMEABILITATEA SELECTIV A MEMBRANEI permeabil pentru molecule liposolubile mici, nepolare impermeabil pentru molecule hidrofile mari - nepolare (ex: glucoz, aminoacizi) - polare (ex: ioni) parial permeabil pentru ap gaze (O2 CO2), acizi grai, glicerol, hormoni steroizi, uree, etanol

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

(b) SURS DE MESAGERI INTRACELULARI sub aciunea fosfolipazei C (PLC) membranare Sursa - inozitolfosfolipidele (PIP2) membranare Mesageri intracelulari IP3 (inozitol-trifosfat) DAG (diacil-glicerol) Roluri IP3 stimuleaz eliberarea Ca2+ din reticulul sarcoplasmatic (ER) DAG activeaz proteinkinaza C membranar care regleaz contractilitatea muchiului neted, metabolismul i secreia celular (prin activarea unor enzime intracelulare)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 9

(c) SURS DE MESAGERI EXTRACELULARI sub aciunea fosfolipazei A (PLA) membranare Sursa - acidul arahidonic membranar Mesageri calea ciclooxigenazei: PROSTAGLANDINE (PG) TROMBOXAN A2 calea lipooxigenazei: LEUCOTRIENE (LT) Roluri - efecte biologice multiple fiziologice - reglarea microcirculaiei - coagulare patologice inflamaie
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 10

CARACTERISTICI reprezint jumtate din masa membranei specifice ale membranei

1.2. PROTEINELE MEMBRANARE rol structural i funcional (S2.slide 11-13)

reprezint elementul activ care determin proprietile i funciile

CLASIFICARE n funcie de relaia cu matricea fosfolipidic proteine periferice (extrinseci) proteine integrale (intrinseci)

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

11

(a) PROTEINELE PERIFERICE slab ancorate de matricea fosfolipidic prin fore electrostatice au mobilitate mare n planul membranei, controlat metabolic ROLURI - n principal de ENZIME MEMBRANARE Externe acetilcolinesteraza inactiveaz acetilcolina (Ach) Interne adenilatciclaza genereaz AMPc (mesager intracelular)

stabilesc CONTACTE cu citoscheletul celular menin forma celulei i particip la micrile celulare FIXEAZ celula pe fibre ale matricei extracelulare
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 12

(b) PROTEINELE INTEGRALE strbat ntreaga matrice de pe o fa pe alta structur asimetric, puternic glicozilate extern sunt puternic ancorate de matricea fosfolipidic prin legturi covalente au o mobilitate mai redus n planul membranei ROLURI CANALE (ioni i ap) TRANSPORTORI (carrier) RECEPTORI MEMBRANARI PROTEINE de ataare intercelular PROTEINE de recunoatere intercelular
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 13

1.3.STRUCTURILE SPECIALIZATE ALE MEMBRANEI

DEFINIIE: prelungiri ale citoplasmei acoperite de plasmalem temporare i neordonate pseudopodele emise de leucocite permanente microvilii i jonciunile intercelulare (a) MICROVILII extensii n deget de mnu mresc suprafaa de contact a plasmalemei cu mediul extracelular, la nivelul unei suprafee de schimb Ex: epiteliul intestinal i renal
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 14

(b) JONCIUNILE INTERCELULARE structuri complexe care asigur CONTACTUL dintre dou celule sunt de 3 categorii: strnse, de ancorare i largi JONCIUNI STRNSE (tight jonction) impermeabile asigur o barier mecanic i chimic Ex: epiteliul digestiv (GASTRIC) barier mecanic mpotriva ptrunderii microorganismelor n snge barier chimic mpotriva aciditii (HCl) i enzimelor digestive proteolitice (pepsin)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

15

JONCIUNI DE ANCORARE = DESMOZOMII asigur CONTACTUL dintre celulele supuse unui stres mecanic Ex: celulele epidermale fibrele musculare cardiace JONCIUNI LARGI (gap jonction) = CONEXONII permit transferul bidirecional de molecule mici ntre 2 celule adiacente sunt structuri excitabile (sinapse electrice) care permit pasajul ionic i conducerea excitaiei Ex: fibrele musculare cardiace i netede unele sinapse din SNC
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 16

2. FUNCIA DE TRANSPORT A MEMBRANEI CELULARE

DEFINIIE: procesul de traversare substanelor prin membrana celular CLASIFICARE n funcie de dimensiunea substanei sisteme de microtransfer (micromolecule) sisteme de macrotransfer (macromolecule) n funcie natura forelor care asigur transferul micromoleculelor transport pasiv transport activ macromoleculele traverseaz membrana prin transport vezicular (transport activ)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 17

TRANSPORTUL PASIV (S3.slide 18-40)

CARACTERISTICI este spontan are loc fr consum de energie (ATP) se desfoar sub aciunea unor fore fizice i n sensul reducerii unor gradiente de potenial electrochimic de presiune osmotic de presiune hidrostatic MECANISME DE TRANSPORT PASIV Difuziunea Osmoza Filtrarea
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 18

2.1. DIFUZIUNEA
DEFINIIE: transportul substanelor printr-o membran permeabil pe baza gradientului electrochimic GRADIENTUL CHIMIC mai mic (C2) GRADIENTUL DE POTENIAL ELECTRIC contrar
extracelular K+ = 4 mEq/l

asigur difuziunea substanei dinspre

partea cu concentraie mai mare (C1) spre partea cu concentraie asigur difuziunea
Gradient electric

ionilor ctre faa membranei ncrcat electric cu sarcina de semn

C2

intracelular K+ = 140 mEq/l

C1

Gradient chimic

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

19

EXEMPLU: difuziunea K+ prin membrana neuronal n repaus Concentraia K+ intracelular=140 mEq/l, K+ extracelular = 4 mEq/l pe baza gradientului chimic are loc difuziunea K+ dinspre interiorul spre exteriorul celulei = eflux de K+ Membrana este pozitiv la exterior i negativ la interior pe baza gradientului electric are loc difuziunea K+ dinspre exteriorul spre interiorul celulei = influx de K+
extracelular K+ = 4 mEq/l

C2

Gradient electric

intracelular K+ = 140 mEq/l

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

C1

Gradient chimic
20

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

MECANISMELE DE TRANSPORT PASIV PRIN DIFUZIUNE (a) Difuziunea simpl prin matricea fosfolipidic pentru: molecule de gaz (O2 i CO2) molecule liposolubile (uree, etanol, h.steroizi, etc.) ap (n proporie redus) (b) Difuziunea simpl prin canale Canale ionice (Na+, K+, Ca2+, Cl-) voltaj dependente (variaii de potenial membranar) operate de ligand (activate de liganzi) operate mecanic (activate prin ntindere) Canale de ap (acvaporine) operate de ligand
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

Difuziunea simpl

Difuziunea prin canale ionice

21

(c) Difuziunea facilitat asigur transportul pasiv al substanelor organice nepolare ex: glucoza, AA
Difuziunea facilitat

necesit o protein carrier specific viteza de transfer este crescut transportul este limitat de capacitatea transportului pn la o valoare maxim (Tmax) poate fi influenat de substane biologic active ex: insulina crete de 10-20 ori difuziunea facilitat a glucozei prin creterea numrului de proteine transportoare (GLUT)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

22

RATA DIFUZIUNII DEFINIIE: numrul de particule difuzate n unitatea de timp RATA difuziunii simple depinde de: permeabilitatea membranei mrimea gradientului electrochimic mrimea suprafeei de schimb RATA difuziunii facilitate depinde de: mrimea gradientul electrochimic capacitatea transportorului (valoarea Tmax)
Tmax

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

23

2.2. OSMOZA
DEFINIIE: difuziunea net a APEI dintr-o soluie osmotic activ, printr-o membran semipermeabil, pe baza gradientul de presiune osmotic (Posm) Membrana semipermeabil permeabil pentru solvent = APA impermeabil pentru solvii = particule osmotic active Soluie osmotic activ soluie care conine solvii care atrag apa NaCl Glucoz Uree Proteine
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 24

Osmoza

H2O2d

H2O2d

PARAMETRII Concentraia osmotic (Cosm) = numrul de particule osmotic active dizolvate n unitatea de volum Presiunea osmotic (Posm) = fora care se opune trecerii apei printr-o membran semipermeabil Posm (atm) = Cosm x R x T
Cosm = Osmol/L, R = constanta gazelor (0,082) T = temperatura soluiei (K)

H2O2d

H2O2d

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

25

GRADIENTUL DE PRESIUNE OSMOTIC determin sensul i mrimea transferului de AP: APA trece dinspre partea cu Posm mai mic (soluie mai diluat) spre partea cu Posm mai mare (soluie mai concentrat) transferul de AP se oprete atunci cnd Posm1 Posm2 soluia cu Posm mai mare i mrete volumul soluia cu Posm mai mic i micoreaz volumul

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

26

2.3. FILTRAREA
DEFINIIE: reprezint transportul apei i a substanelor micromoleculare prin membrane permeabile, presiune hidrostatic (Ph) Ph = presiunea exercitat de o coloan de lichid pe o suprafa, datorit greutii sale: Ph = x g x h
= densitatea lichidului g = acceleraia gravitaional h = nlimea coloanei de lichid

pe baza gradientul de

GRADIENTUL DE PRESIUNE HIDROSTATIC asigur transferul dinspre partea cu Ph mai mare spre partea cu Ph mai mic
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 27

2.4.CANALELE IONICE MEMBRANARE

DEFINIIE: proteine integrale care asigur transportul pasiv al ionilor n sensul gradientului electrochimic CLASIFICARE (a) n raport cu DINAMICA canalului Canale de scurgere - asigur un flux continuu de ioni (ex: canalul de scurgere Na+/K+) Canale ionice controlate (cu pori) - configuraii moleculare tranzitorii care au o dinamic de canal deschis/nchis (ex: canale de Na+, K+, Ca2+, Cl-)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

28

(b) n raport cu SELECTIVITATEA canalului Canale selective - pentru 1 ion (ex: Na+,K+,Ca2+, Cl-) Canale parial selective - pentru 2 ioni (ex: Ca2+ i Na+, Na+ i K+) Canale neselective - pentru 3 sau mai muli ioni (ex: canale pentru Na+, Ca2+, K+ i Ba2+) SELECTIVITATEA canalului este condiionat de: sarcina ionului mrimea ionului gradul de hidratare a ionului (c) n raport cu FACTORUL care condiioneaz dinamica canalului Canale ionice voltaj dependente Canale ionice operate de ligand Canale ionice operate mecanic (ntindere)
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 29

2.4.1.CANALELE IONICE VOLTAJ-DEPENDENTE

DINAMICA CANALULUI determinat de modificrile conformaionale induse proteinei integrale prin variaia de potenial transmembranar
STRUCTUR 1.Filtrul de selectivitate 2.Porul sau canalul de trecere 3.Una/dou pori 4.Senzorul de voltaj

TIPURI DE CANALE Canale rapide de Na+ Canale de K+ Canale lente de Ca2+ Canale de ClCURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 30

(a) CANALELE RAPIDE DE Na+

DISTRIBUIE membrana neuronal membrana fibrei musculare scheletice membrana fibrei musculare miocardice PARTICULARITI STRUCTURALE sunt puternic ncrcate electric negativ care asigur nlturarea moleculelor de H20 (dehidratarea Na+) prezint dou pori de activare (m) i de inactivare (h) STRI FUNCIONALE repaus: poarta h deschis, poarta m nchis activare: ambele pori deschise inactivare: poarta m deschis, poarta h nchis
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 31

DINAMICA PORILOR sub aciunea unui stimul prag (atingerea potenialului prag) canalul de Na+ se activeaz i asigur un influx de Na+ depolarizant (faza ascendent a potenialului de aciune) condiioneaz excitabilitatea membranei canalele de Na+ activate sau inactivate canalele de Na+ n repaus membran inexcitabil membran excitabil

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

32

(b) CANALELE DE K+
DISTRIBUIE: membrana tuturor structurilor excitabile PARTICULARITI STRUCTURALE NU sunt ncrcate electric negativ au o singur poart n - de activare DINAMICA PORILOR mai lent, asociat cu repolarizarea membranei, prin eflux de K+ (faza descendent a potenialului de aciune)

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

33

(c) CANALELE LENTE DE Ca2+

sunt n general canale parial selective: Ca2+ > Na+ se activeaz n urma depolarizrii membranei determin un influx de Ca2+ implicat n reglarea: excitabilitii celulare contraciei musculare secreiei celulare TIPURI DE CANALE tip L (long lasting) fibra muscular cardiac i neted - rol n cuplarea excitaie/contracie tip T (transient) celula pacemaker a miocardului - rol n generarea spontan a excitaiei tip N (neuronal) membrana neuronal presinaptic - rol n exocitoza veziculelor presinaptice
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 34

(d) CANALELE DE Clse gsesc n membrana neuronului i a fibrei musculare striate se deschid n urma depolarizrii membranare determin un influx de Clrol de stabilizare a potenialului de repaus

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

35

2.4.2. CANALELE IONICE OPERATE DE LIGAND

DINAMICA CANALULUI modificrile conformaionale ale proteinei integrale sunt induse sub aciunea unei substane biologic active care se numete LIGAND Ligandul se fixeaz pe un situs specific de la nivelul porilor TIPURI DE CANALE operate de liganzi extracelulari operate de liganzi intracelulari operate de receptori prin proteine G canale intercelulare - conexonii
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

Canal nchis

Canal deschis

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

36

(a) Canalele ionice operate de LIGANZI EXTRACELULARI CARACTERISTIC: canalul intr n structura unor receptori ai membranei postsinaptice, iar ligandul este un mediator chimic
Tip canal ionic Canale de Na+ Ligand ACh Sinapse Excitatorii din SNC i SNP Placa motorie Canale de ClGABA Glicin Inhibitorii din SNC Excitatorii din SNC Efect influx de Na+ depolarizant influx de Na+ i eflux de K+ influx de Clhiperpolarizant influx cationic depolarizant

Canale cationice Glutamat neselective Ca2+, Na+, K+

SNC = sistem nervos central SNP = sistem nervos periferic

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ACh = acetilcolin GABA = acid gama amino butiric

37

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

(b) Canale ionice operate de LIGANZI INTRACELULARI CARACTERISTIC: canalele sunt localizate n membrana celulelor epiteliale (canale de Na+, K+, Cl-), iar ligandul este un mesager intracelular (AMPc, Ca2+) n membrana RS (canal de Ca2+), iar ligandul este IP3
Tip canal Canale de Na+ Canale de K+ Canale de ClCanale de Ca2+ Canale de ap Ligand AMPc Ca2+ Ca2+ IP3 AMPc Localizare Celule epiteliale (nefrocit, glande exocrine) Membrana fibrei miocardice Celule epiteliale (glande exocrine, intestinal i a cilor aerifere) Membrana reticulului sarcoplasmatic Celule epiteliale (nefrocit, mucoasa intestinal, glande exocrine)
ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 38

mucoasa

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

(c) Canale ionice operate de RECEPTORI prin proteinele G CARACTERISTIC: sunt canale de Ca2+ sau K+ activate: direct - prin subunitatea a proteinei G indirect - prin activarea de ctre proteina G a mesagerilor intracelulari (Ca2+, AMPc, GMPc)

CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011)

ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU

39

(d) Canale intercelulare - CONEXONII CARACTERISTICI se gsesc la nivelul jonciunii permeabile dintre 2 celule formnd gap jonction reprezint sinapse electrice n fibrele musculare cardiace i netede sunt permeabile pentru molecule cu diametru mic (ap, electrolii, mesageri intracelulari, produi de metabolism) SUPRIMAREA CONDUCTANEI se realizeaz prin: acidoz intracelular (pH) creterea Ca2+ n una dintre celule depolarizarea simultan a ambelor celule
CURS 1 FIZIOLOGIE MG ANUL I (2011) ef.lucr.dr.LAVINIA NOVEANU 40