Universidad Nacional Autnoma de Nicaragua UNAN-LEON Facultad de Ciencias Mdicas Escuela de Bioanlisis Clnico III ao Departamento de Microbiologa

Componente: Bacteriologa II

TEMA: Urocultivo INSTRUCTOR: Lic. Erick Amaya Ph D ELABORADO POR: Br. Ramiro Ignacio Guido Martnez. #14

Un da emite palabra a otro da, Y una noche a otra noche declara sabidura. [salmos 19:2]

Fecha 31-05-11

INTRODUCCION Cuando se les pregunta directamente durante un chequeo sanitario habitual, muchas mujeres reconocen tener sntomas inespecficos de secrecin vaginal sin relacin con signos objetivos de inflamacin ni de infeccin real. Sin embargo, la notificacin espontnea de secrecin vaginal anormal hace pensar en vaginosis bacteriana o en tricomonosis. En concreto, uno o los dos cuadros antes mencionados se vinculan con una secrecin anormalmente abundante con un olor anormal y un color amarillo infrecuente. La infeccin cervicouterina por N. gonorrhoeae o C. trachomatis no parece dar lugar a mayor cantidad ni a coloracin anormal de la secrecin, pero la cervicitis, igual que la tricomonosis, puede hacer que aumente el nmero de neutrfilos en el lquido vaginal, al que prestan un color amarillo. Los cuadros vulvares, como el herpes genital o la candidosis vulvovaginal, causan prurito, sensacin de quemazn, irritacin o lesiones de la vulva y disuria externa (cuando la orina pasa por la vulva inflamada) o una dispareunia vulvar. Chlamydia trachomatis es un patgeno exclusivo del ser humano, que se identific en el decenio de 1940 como agente causal del tracoma. Desde entonces se le conoce como un importante agente infeccioso de transmisin sexual y perinatal. Las clamidias son parsitos intracelulares estrictos que se clasifican como bacterias pertenecientes a un orden propio (Chlamydiales). Poseen DNA y RNA, tienen pared celular y ribosomas similares a los de las bacterias gramnegativas y se inhibe su proliferacin por antibiticos como la tetraciclina. T. vaginalis es un microorganismo mvil, piriforme, que mide aproximadamente 10 x 7 m, se replica por fisin binaria y habita en el aparato genital inferior de la mujer y en la uretra y la prstata masculinas. En Estados Unidos, es responsable de tres millones de infecciones anuales en mujeres.

Aunque el microorganismo puede sobrevivir durante varias horas en ambientes hmedos y se puede adquirir por contacto directo, casi todos los casos de tricomonosis se deben a transmisin venrea interpersonal. OBJETIVOS. Utilizar el mtodo adecuado para el transporte de exudados vaginales. Aplicar las diferentes pruebas para el anlisis completo del exudado vaginal. MATERIAL Y MTODOS Una muestra de exudado vaginal que estaba contenida en un frotis, un tubo con solucion salina y un medio de transporte AMIES. Esta muestra fue proporcionada por una enfermera en el Centro de Salud Perla Norori. Los procedimientos de anlisis fueron seguidos segn a como establece el capitulo 14 manual de bacteriologa del MINSA. El primer procedimiento realizado fue una observacin en fresco en busca de microorganismos con movimientos rotatorios correspondiente a Trichomonas vaginales y se midio el pH de la muestra, ambas pruebas se realizaron de la muestra contenida en solucion salina. Despues se realiz una tincin de Gram con el frotis preparado desde el momento de toma de muestra, para buscar celulas pistas o las diferentes morfologas que sugirieran Mobiluncus spp. o incluso levaduras de Candida albicans. Se realiz la prueba de las aminas que es para confirmar la presencia de Gardnerella vaginales.

La siembra del espcimen desconocido se realiz desde el medio de transporte AMIES en Agar Sangre y Agar chocolate, utilizando la tcnica de sembrado descrita en el Manual de microbiologa general. Esto fue realizado con el objetivo de observar el patrn de crecimiento de las colonias. Luego que los platos fueron incubados anaerbicamente a 37C por 24 horas, la morfologa de las colonias fue observada y registrada. Se realiz una nueva tincin de Gram. RESULTADOS. Tabla 1. Principio y resultado de las pruebas. Prueba pH Propsito Reactivos Observaciones Resultados

Determinar la Cintas reactivas Viraje de color 7.0 concentracin de iones que se compara H+ con los patrones proporcionados.

Examen alDeterminar Solucin salina Movimientos Negativo. fresco visualmente la rotatorios y presencia de T. vacilantes. vaginales Tincin de Determinar la reaccin Cristal violeta, Bacilos prpura. Bacilos Gram Gram de Gram de la bacteria Alcohol, Levaduras positivos Safranina, lugol. prpura. levaduras Prueba de Determinar la KOH al 10% las presencia de aminas Gardnerella vaginalis Olor a pescado Negativo

Las colonias que crecieron en Agar Sangre y Agar Chocolote fueron 4 diferentes, de las cuales se pudieron distinguir su morfologa mediante la tincin de Gram que revel bacilos Gram-positivos largos, levaduras gemantes Grampositivas y diplococos Gramnegativos.

DISCUSIN DE RESULTADOS El hecho de no haberse encontrado T. vaginales en el examen al fresco no significa que estos microorganismos no estan presentes en esta paciente porque esta prueba solo tiene una sensibilidad de 50-60%. Aunque el cultivo de estos parasitos es el gold standart, no es una prueba de rutina en los laboratorios del pais. En la tincin de Gram no se observaron clulas pistas y la prueba de aminas di negativa por lo que se descarta la presencia de Gardnerella vaginalis. Slo se observaron unos bacilos largos Gram-positivos, pero estos tienen una minima posibilidad de ser parte de la flora normal que por lo general se encuentra el Lactobacillus acidofillus porque cuando la estos se hallan normales, el pH de la vagina es <4.5, lo que difiere de esta muestra que tenia un pH de 7, es demasiado alcalino.

En estas condiciones de pH alcalino no es posible que sea una vaginosis bacteriana, ni candidiasis porque estas no modifican el pH de la vagina y la unica que modifica el pH es T. vaginalis. La alcalinidad del pH no necesariamente se debe la presencia de T. vaginales, posiblemente la paciente esta embarazada o fue sometida a una antibioticoterapia prolongada que alter la flora normal de la vagina y por consiguiente el pH. Aunque se observaron levaduras, se necesitara realizar un cultivo y las diferentes pruebas bioqumicas para identificar la especie de hongo y de esta manera valorar si esta causando dao o simplemente esta como flora normal de la vagina como lo es Candida albicans.

He aqu la importancia de la informacin clnica de la paciente para brindar un diagnostico de laboratorio vlido al mdico. Porque si la paciente no presenta ningn otro factor que provoque la modificacin del pH, entonces esto permite seguir buscando T. vaginalis. Aunque se observaron diplococos Gram-negativos que sugieren la presencia de Neisseria gonorrhoeae, la mucosa vaginal de las mujeres sanas est revestida de un epitelio escamoso estratificado que no se suele infectar por N. gonorrhoeae. Sin embargo, puede darse una vaginitis gonoccica en mujeres anestrognicas (p. ej., nias prepberes y mujeres posmenopusicas), en las cuales las capas de epitelio escamoso estratificado vaginal se adelgazan hasta el nivel basal, vulnerable a la infeccin por N. gonorrhoeae. Esta intensa inflamacin de la vagina determina que la exploracin fsica (con espculo y tacto bimanual) resulte dolorosa en sumo grado purulenta. La vaginitis gonoccica se acompaa muchas veces de infeccin de la uretra y de las glndulas de Skene y de Bartholin, por lo cual el hallazgo de estas bacterias al parecer corresponden a una portadora sana, porque si hubiera sido una mujer con enfermedad activa no hubiera sido la recoleccin de la muestra de la forma normal por las molestias graves que este procedimiento le causara a la mujer. Tambin si esta paciente hubiera presentado sntomas de gonorrea, se hubieran encontrado gran cantidad de leucocitos en el frotis teido con la tincin Gram. CONCLUSIN La muestra fue examinada siguiendo el protocolo del manual de bacteriologa del MINSA , se observaron cocos Gram-negativos, el pH que estaba mas alto de lo normal, pero que no es indicativo de vaginosis, a menos que los sntomas sean relevantes, pero ya esto le corresponde al clnico establecer el diagnostico definitivo con estos datos o sugerir mas examenes de laboratorio de acuerdo al estado de la paciente.

BIBLIOGRAFIA 1. FAUCI, et al. (2009), Principios de Medicina interna de Harrison, C.V Mxico,McGraw-Hill interamericano editores, S.A. 17a Ed, 2. LPEZ S.R., et al., Manual de procedimientos de bacteriologa mdica. Centro Nacional de Diagnstico y Referencia MINSA. Nicaragua 2004. 3. PRESCOTT H., Laboratory exercises in microbiology, 15th Ed. The McGrawHill Companies, 2002. 4. BENSON., Microbiological applications, 8th Ed, The McGrawHill Companies, 2010 5. MURRAY P. Microbiloga mdica. MMVI Elsevier Espaa, S.A. 5 Ed