Determinarea zahrului prin reducerea omogen de sruri de Au: Un roman de msurare optice 1.

Introducere Nanoparticulelor metalice de diferite compoziii i dimensiuni au fost folosite n ultimii ani ca marcatori versatil i sensibile pentru transducia electronice, optice, i microgravimetric de diferite evenimente biomoleculare recunoatere [1-3]. Un elegant exemplu, este de Willner et al. care au dezvoltat o amplificat biocatalitice optic testul n legtur cu enzimatic induse de particule de cretere proceselor [4]. De extindere, astfel biocatalitice de nanoparticule de aur (AuNPs) implicat reducerea i depunerea unui metal pe un nanoparticulelor de ctre un agent enzimatic generat de reducere. Recent, procesele de detectare a colorimetric, bazat pe o cretere AuNPs, au fost folosite pentru senzor de antioxidanti din alimente [5]. Astfel de protocoale se bazeaz pe formarea cantitativ a AuNPs de intrinseci reducerea puterii de analit n cauz. Aici, vom dezvolta un nou test colorimetric pentru senzor de zaharuri bazate pe creterea de AuNPs dintr-o soluie care conine Au sruri. Reacia de carbohidrati cu aceste sruri Au n alcaline mass-media genereaz AuNPs la temperatura camerei (RT), fr Au nevoie de semine n soluie sau plas fibroase (vezi Schema 1 din Fig. 1). Proprietile optice ale AuNPs rezultate se refer la coninutul total de zaharuri reductoare a probelor analizate. Dezvoltarea de analiz ieftine pot fi de ajutor pentru a controla glucoza Coninutul de dieta, mai ales n diabetici, sau uor de extins ntr-o gazd de domenii industriale, biomedical i clinic
2. Traducere din Englez n Romn 3.

4. 2. Experimentale

2.1. Aparatur, reactivi i eantioane Msurtori de absorbie au fost efectuate folosind un spectrofotometru UV (V Cary, Varian). Electrochimice msurtori au fost efectuate folosind un CHI 1010. Electrochimice Analyzer (CH Instrumente, Austin, TX), cu o perioad de trei electrod set-up. Aceasta a constat unui Ag / AgCl (3M) electrod de referin, un fir de platin contra-electrod i un electrod carbon vitros acoperite cu un strat de cupru. O mas de 0.2mgcm-2 din cupru a fost depus la suprafa de carbon sticlos de electrodepunere, aplicnd un potenial fix de-0.3V n 5 10-2M CuSO4 [6]. Toate produsele chimice au fost primite de la Sigma Aldrich i i utilizate fr purificare suplimentar. 1 g de eantioane de miere a fost dizolvat n 10 ml de ap distilat. Suspensie Enzyme cuprinse 4mgmL-1 (5-7 U / ml) de invertazice n ap distilat. 2.2. Procedura de nanoparticule de aur Soluia a constat n cretere AuNPs HAuCl4 3H2O

5. ntuneric), reacia a fost oprit prin adugarea NaOH la o concentraie final de 0.1M. Soluia rezultat a fost folosit n aur nanoparticule testul. 3. Rezultate i discuii Studii preliminare axat pe nelegerea de cretere a AuNPs n prezena de diferite zaharuri n mediu alcalin (NaOH, 0.1M). Fig. 1 Detalii spectrele de absorbie rezultate obinute atunci cnd diferite tipuri de zaharuri reducnd au fost adugate la soluii care conin HAuCl4 i surfactant CTAC. n absena oricror zahr nu vrfuri absorbanei se observ, ns adugarea de zahr pentru soluie, duce la o absorbie ascuit caracteristic plasmonilor de particule banda de la 540 nm, indicativ de cretere AuNPs. Astfel de generaie veniturilor AuNPs fr adaos de seminte AuNPs, la RT, i implic reducerea de aur (III) pentru aur (0) prin reducerea de zahr. Acesta poate fi de ateptat ca rata de cretere i optice proprietile AuNPs va depinde n mod semnificativ pe reducerea putere de aldose corespunztoare sau a cetozei utilizate. Astfel de corelaie este de ateptat, deoarece capacitatea acestor compui de a reduce Au (III) reflect tendina lor de a dona electroni, i, prin urmare, pentru a reduce ioni de aur. Fig. 1 arat c maximele absorbanei obinute la 540 nm depinde de varietatea de zaharuri introduse n o soluie coninnd 1 10-3M HAuCl4 i 10-3M 3.7 CTAC surfactant. Acesta poate fi vzut clar c absorbana scade n ordinea:> galactoz glucoz> fructoz> zaharoz> maltoz. n Pentru a demonstra c aceast tendin se refer la puterea reductoare de zahr, experimentele amperometric de reducere a diferitelor zaharuri (1 10-3 M) la un potenial fix de 0.3 V au fost astfel fost efectuate. Actual corespunztoare anodic a urmat tendin: fructoz (65 ACM-2?) galactoz> (32 ACM-2?) glucoz> (20? ACM-2), maltoza> (7 ACM-? 2) zaharoz> (1? ACM-2), n acord cu studiile anterioare [7]. Motivele pentru aceast tendin poate fi astfel legate de disponibilitatea diferite ale aldehid liber grup (vezi Schema 1 din Fig. 1). Acest lucru este, de asemenea, n concordan cu Fig. 1 n cazul n care absorbana AuNPs a sczut n aceeai ordine de zaharuri, cu excepia de fructoz, care sa dovedit a fi mai puin predispuse de a reduce ionii de aur n soluie. Fructoz produs cea mai mare rspunsul actual, dar mai mic de absorbie plasmonilor trupa printre monozaharidelor analizate. Discrepan de fructoz pot fi explicate cu uurin. Reacie omogen a

(1 10-3 M), CTAC (3,7 10-3 M), n NaOH 0.1M, mpreun cu diferite niveluri de zaharuri. Reacia a fost realizat la RT. Spectrele de absorbie au fost nregistrate ntre 900 i 350 nm. 2.3. Invertaza reacie Invertaza soluie enzim a fost adaugat la creterea concentraiei de zaharoz n tampon de acetat de 0,1 M, pH 4.6. Dupa 30min (n

fructoz cu ioni de aur are li manoz. Acest lucru a fost confirmat ntr-un experiment de control, n cazul n care fructoz (2 10-4 M) a fost lsat n mass-media alcaline pn complet convertit la forma aldehid liber, i apoi adugate la aur Soluia: banda de absorbie plasmonilor obinut a fost comparabil cu cel obinut cu o concentraie echivalent de glucoz i aur. Faptul c zaharoz artat absorbana minim i actuale se datoreaz indisponibilitatea grupurilor aldehid liber limitarea reacie cu sare de aur. Cum era de ateptat creterea de AuNPs este pH-ul a fost limitat doar observat n mediu alcalin (NaOH, 0.1M), n cazul n care transformarea, de non-ciclice reductibile hemiacetal form de zahr pentru a forma aldehide este favorizat. Next capacitile analitice de utilizare a acestui proces de reacie la determina concentraiile de zahr n soluii omogene au fost analizat. Capacitile analitice ale metodologiei de detectare va depind de condiiile de reacie relevante, cum ar fi concentraia de componente sare de aur i CTAC (care afecteaz stabilitatea i creterea de AuNPs) i pH-ul. Toi aceti factori au fost optimizate cu ajutorul unui liniar analiza multivariat n cazul n care vrf de absorbie generate de glucoz (3 10-4 M) a fost de ieire pentru a maximiza. Rezultatele acestui Analiza varianei a artat c toate componentele sunt eseniale pentru a stimula creterea AuNPs. PN cea mai favorabil spectral schimbri plasmonilor correspondedtoAuCl4 - i CTACconcentrations, de 1 10-3M i 3,7 10-3M, respectiv, n conformitate cu anterioare Studiile [6]. Ca interaciunea withAusalts zahr este o reacie chimic aceasta va avea o rat constant definit, i poate fi prezis c cantitatea de AuNPs i semnal, prin urmare, de analiz va crete cu timp. Acest lucru ar avea efecte benefice atunci cnd examineaz mass-media cu concentraii sczute de zahr, ori mai mare de reacie se va produce Limitele inferioare de detectare. Acest lucru a fost observat performante testul de la un timp de reacie de 1 i 5min, cu diferite soluii de glucoz n intervalul de concentraie de pn la 3 10-4 M. cum era de ateptat, limita de detecie mai mici de la 4.02 10-5M la 2.45 10-5 M, cu limita de detecie calculat de propagare a erorilor abordare [7]. De asemenea, perioade mai lungi de reacie a afectat sensibilitatea i coeficientul de determinare (linearitatea) a testului. Acest lucru este prezentat n Fig. 2a n cazul n care variaia n sensibilitate i coeficientul de determinare este afiat timp vs. Rezultatele indic faptul c mai mult timp de reacie mai sensibil este testul. Acest poate fi cauzat de cantitate mai mare de particule produse n soluie. Oricum, n cretere de AuNPs nu este liniar n timp, deoareceoc numai dup transformarea ei n glucoz