Rani Ralph Segunda-feira, 30 de Outubro de 2006. Bactrias anaerbias. Profa. Ana Paula.

Microbiologia

A maioria das infeces causadas por bactrias anaerbias diagnosticada clinicamente. Com relao respirao as bactrias podem ser: Bactrias aerbias: so aquelas que utilizam oxignio como aceptor final de eltrons. Bactrias anaerbias obrigatrias: so aquelas que no utilizam oxignio como aceptor final de eltrons. Esta tarefa realizada por substncias como nitrognio, compostos de enxofre e ferro. Estas bactrias so sensveis ao oxignio porque no possuem sistemas antioxidantes para eliminar os radicais derivados do oxignio, entre eles: O2-, OH- e H2O2. De outro modo, bactrias anaerbias no possuem superxido dismutase, catalase e peroxidase para eliminar os radicais livres ou, se possuem, esto em pequena quantidade no sendo eficientes a ponto de garantir a sobrevivncia na presena de oxignio. Enfim, bactrias anaerbias obrigatrias no utilizam oxignio como aceptor de eltrons e este gs txico para elas. Obs: Bactrias anaerbias facultativas realizam fermentao na escassez de oxignio. Limitao diagnstica Do exposto acima, percebe-se uma limitao diagnstica enorme uma vez que difcil realizar o cultivo dessas bactrias em atmosfera ausente de oxignio e tambm porque a obteno da espcime para anlise em laboratrio extremamente trabalhosa haja vista que se houver exposio ao oxignio ocorrer perda do microrganismo. Alm disso, outros problemas enfrentados no diagnstico de infeces por anaerbios estritos o alto custo para cultivar esse tipo de bactria e tambm o fato dessas bactrias apresentarem uma distribuio ubiquitria no organismo, podendo ser mais prevalentes at mesmo do que anaerbios facultativos, o que funciona como um fator de confundimento. Enfim, a pesquisa microbiolgica vai ser mais importante a partir de stios estreis ou a partir da pesquisa das toxinas produzidas pelos anaerbios obrigatrios. Distribuio das bactrias anaerbias na microbiota normal H grande concentrao de anaerbios na microbiota oral e no TGI: para cada uma clula de E. coli, h pelo menos 1000 clulas de anaerbios, entre esporuladas e no esporuladas, colonizando o intestino. Nesta regio, auxiliam na digesto e fornecem nutrientes a partir da quebra de compostos (ex. vitaminas essenciais). A quebra desse equilbrio entre o organismo e as bactrias pode propiciar infeces. Na pelve, especialmente na mucosa vaginal, tambm existem anaerbios: a vaginite comum envolve este tipo de bactria que pode at mesmo estar em simbiose com Trichomonas. Desse modo, a utilizao de Metronidazol que promove a eliminao dos anaerbios contribui tambm para por fim no protozorio. Como as infeces por anaerbios se caracterizam por relaes de simbiose e sinergismo entre os anaerbios obrigatrios e os anaerbios facultativos deve-se pensar em ATB que atacam as duas categorias de bactrias.

Tipos de infeces relacionadas com anaerbios Estas infeces esto mais relacionadas com os anaerbios que formam esporos porque as bactrias noesporuladas esto mais adaptadas ao organismo humano.

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Os anaerbios esto amplamente distribudos na natureza (solo, sedimento de rios e oceanos, alimentos, animais) e so prevalentes na cavidade oral e TGI humanos. Causam: Infeco intra-abdominal: abscessos, SSI e peritonites devido perfurao do intestino. Infeco pulmonar: a partir do sangue ou pela aspirao de bactrias do TRS. Infeces plvicas: infeces na vagina ou no tero devido cirurgia ginecolgica ou associadas a cncer. O cncer costuma promover imunossupresso e reao inflamatria que resulta na modificao da anatomia normal do rgo e, em ambas as situaes, facilita infeces. Abscesso cerebral: os anaerbios so uma causa comum deste tipo de infeco. Ela advm de bactrias do TRS, da boca e da rea subgengival. Infeces de pele ou de tecidos moles: na maioria das vezes polimicrobiana. Normalmente a infeco num stio mais externo e superficial (por exemplo, a ocasionada por trauma/cirurgia com instrumental contaminado) favorece o estabelecimento de anaerbios num stio mais interno. Infeco oral ou dental: freqentemente se estende para a face ou pescoo e at mesmo para o crebro (abscessos). Bacteremia e endocardite: uma complicao a partir de um foco infeccioso primrio (ex. abscesso intestinal ou os outros abscessos j mencionados) de onde realizam disseminao hematognica. Os anaerbios que esporulam constituem um nico gnero que ser objeto de estudo agora: Clostridium Bacilo Gram-positivo (BGP). Formador de esporos. Presena ou no de flagelos, dependendo da espcie. Mais de 100 espcies reconhecidas, poucas relacionadas com infeces em humanos. Encontradas no TGI ou no ambiente. Causam trs tipos de doena: No-invasiva: a toxina responsvel pela doena. A subunidade A da toxina indutora da destruio celular e vai ser internalizada aps a interao da subunidade B com o receptor celular. A produo de toxina uma caracterstica comum entre os anaerbios. O mesmo mecanismo responsvel pela formao de endosporos tambm conduz expresso de toxinas: condies desfavorveis como a diminuio de carbono e o aumento do oxignio e da temperatura influenciam um receptor que por meio de uma cascata envia sinais ao DNA e leva expresso de genes relacionados esporulao/produo de toxinas. Estas toxinas se acumulam no interior das clulas (no so necessariamente secretadas) e, como as bactrias quando produzem seu endosporo tem seu corpo celular lisado, so liberadas e causam os efeitos deletrios de certas doenas. Invasiva: com destruio tecidual e infeco progressiva. Purulenta: geralmente mista e ocorre na cavidade peritoneal.

Rani Ralph Espcies patognicas

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Clostridium perfringens Espcie comumente isolada de espcimes clnicos. Presente no solo, gua, esgoto, intestino de animais e humanos (compe microbiota intestinal). Presena de 12 toxinas e enzimas (fatores de virulncia): a alfa-toxina uma hemolisina. Causa uma grande variedade infeces: celulites, pneumonia necrotizante, bacteremia, sepse intrabdominal, etc. Gangrena gasosa: em traumas pode ocasionar a gangrena gasosa que possui aspecto bolhoso devido liberao de gases com odor ftido (amnia, sulfdrico). H uma destruio tecidual elevada, progressiva e em reas de insuficiente vascularizao. Dependendo do local afetado pode levar morte. O tratamento envolve amputao da parte com gangrena e ATB. Principal agente da gangrena gasosa (mionecrose) com 80% de prevalncia. Destruio muscular mediada por toxina.

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Clostridium botulinum O C. botulinum o agente de uma doena muito antiga conhecida como botulismo. O botulismo baseia-se na ao neurotoxinas que levam paralisia flcida. Existem vrios sorotipos de neurotoxinas (A-F) e algumas possuem especificidade com clulas humanas. J os sorotipos C e D possuem importncia veterinria porque s atacam animais. Mecanismo de ao da neurotoxina: a subunidade B possui especificidade com os receptores pr-sinpticos de ACh na placa motora e aps se ligar aos mesmos permite a internalizao da subunidade A. Desse modo, como a ACh no exocitada e no alcana seus receptores, a neurotoxina leva inibio da contrao muscular (o msculo uma vez relaxado, permanece relaxado).

Atenta-se para o fato de que a toxina no leva destruio tecidual e, ento, a alta taxa de mortalidade da doena est relacionada parada respiratria. Desse modo, quanto mais cedo o diagnstico e socorro do paciente, maiores as chances de reverter o quadro. O tratamento do botulismo tambm envolve suporte respiratrio. Ressalta-se ainda que nanogramas da toxina botulnica purificada podem ser utilizadas para tirar as rugas de expresso (contrao involuntria dos msculos faciais). As fontes de aquisio da bactria: Botulismo alimentar: qualquer tipo de alimento (industrializado ou no) se estiver contaminado pode ser fonte de endosporo e/ou de toxina. A clula bacteriana pode esporular e sobreviver ao processamento de alimentos ou, como a toxina botulnica termoestvel, mesmo o alimento processado com eliminao da viabilidade da clula, pode causar botulismo. A incidncia deste tipo de botulismo muito baixa porque a principal via de contaminao foi controlada uma vez que a indstria alimentcia evoluiu o mecanismo de enlatamento. Uma lata estufada pode significar que houve produo de gases por anaerbios, ou seja, que o alimento est contaminado. Botulismo infantil: relacionado com crianas pequenas (de meses) que so mais vulnerveis e consomem alimentos silvestres (ex. mel).

O botulismo pode ser facilmente prevenido por tcnicas adequadas de cozimento e conservao dos alimentos.

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Clostridium tetani Para identificao do C. tetani pode ser feita a colorao de Gram, entretanto, algumas solues melhoram o contraste para visualizar a presena de endosporos. O fato de este endosporo possuir forma de raquete (endsporo terminal) e ser maior do que a clula vegetativa auxilia no fechamento do diagnstico. O C. tetani produz neurotoxinas que conduzem paralisia espstica, ou seja, que promovem contraes musculares. Assim, as toxinas geram espasmos musculares e dependendo da rea afetada pode ocorrer morte do paciente. Mecanismo de ao da neurotoxina (tetanospasmina): a neurotoxina atua sobre os terminais prsinpticos dos interneurnios inibitrios que liberam glicina. Ela se liga de forma bastante estvel com o receptor pr-sinptico e assim, menos glicina liberada e menor a inibio do axnio responsvel pela liberao de ACh na placa motora. Desse modo, h maior liberao de ACh e o msculo fica rgido, contrado (paralisia hipertnica).

A toxina pode se acumular e atuar de forma sistmica. Neste ltimo caso, haver espasmos de contrao que levam curvatura do indivduo. Nestas circunstncias poder haver estiramento de msculos e quebra de ossos longos (como fmur). Incio e sintomas do ttano Dificuldade de deglutio e de fala: os primeiros mm. a serem afetados so os da face, e assim, manifesta-se o sorriso sardnico (risus sardonicus).

Fontes de infeco Diferentemente do botulismo, no ttano a contaminao alimentar no possui muita importncia. Os profissionais da rea de sade devem tomar a vacina anti-tetnica. H notificao de ttano em recm-nascidos devido ao uso de instrumental contaminado, por exemplo, no corte do coto umbilical. Assim, pode-se dizer que a inoculao da bactria ocorre por meio de traumas. Nos locais traumatizados h colonizao do patgeno, e, mesmo se a bactria esporular, as neurotoxinas podem se acumular e cair na corrente sangunea. Considerando que a disseminao da toxina e a manifestao do ttano no to rpida quanto a que ocorre no botulismo pode-se intervir com a neutralizao das toxinas circulantes. Para isto usa-se soro anti-toxina, ou seja, imunoglobulinas que s exercem efeito sobre as toxinas circulantes. Alm disso, fornece-se suporte ao paciente a fim de melhorar os espasmos e procede-se com cautela na antibioticoterapia uma vez que ao lisar a bactria pode-se elevar a concentrao de toxinas circulantes. Clostridium difficile

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O C. difficile considerado por alguns autores como presente na microbiota normal do TGI. o agente das diarrias associadas a antimicrobianos, em ambiente hospitalar. Relaciona-se com pacientes acamados, imunodeprimidos e em uso de ATBS. Estes eliminam os outros microrganismos que controlam a densidade do C. difficile. Este patgeno produz dois tipos de toxinas, causa diarrias e pode levar colite pseudomembranosa (focos de inflamao ao longo de todo intestino). At que ponto o C. difficile seria da prpria microbiota do indivduo? Estudos tm demonstrado que as diarrias e a colite, dentro do ambiente hospitalar, esto relacionadas a uma origem exgena. Ao atingir o intestino, a bactria encontra condies propcias para se desenvolver e leva a esses quadros. Ou seja, o C. difficile um agente de infeco hospitalar.

Bactrias no esporuladas Compreendem diversos gneros, dos mais variados morfotipos celulares: Bacterioides, Porphyromonas, Prevotella e Fusobacterium. So BGN anaerbios. Bacterioides fragilis o principal constituinte da microbiota normal do Clon (para cada E. coli do intestino existem 1000 bactrias anaerbias: 600 so Bacteroides e 100 so B. fragilis) e encontrado em menor quantidade no Trato Genital. Atualmente tem sido destacado como espcie patognica, de natureza endgena, possuidora de fatores de virulncia e causadora de abscessos cerebrais e peritonites. Pertence a um grupo que antigamente tinha 10 espcies de bacteriides (Bacteriides fragilis). Hoje, o Bacterioides fragilis uma nica espcie com potencial patognico elevado sobre certas condies. Seu principal fator de virulncia a cpsula polissacardica que possui variao de fase e pode contribuir para sua disseminao (ex. bacteremia abscessos cerebrais). A infeco por B. fragilis facilitada pelo sinergismo com bactrias fermentadoras que deixam o ambiente em condies que de suportar o bacteriide. Algumas cepas produzem uma toxina chamada de fragilisina (enterotoxina). So cepas lisognicas (ETBF). Estudos demonstram que ETBF tem importncia em diarrias no gado e que o ambiente teria papel importante na contaminao oro-fecal. A fragilisina age sobre a molcula de caderina, que faz parte de complexos juncionais, e se conecta dentro do citoplasma actina do citosqueleto por meio de outras protenas. Como essa ligao entre as clulas responsvel pela conformao da mucosa intestinal, ao clivar a caderina, a flagilisina promove desarranjo das microvilosidades, o que justifica a diarria. Em humanos no se observou a relao entre diarrias e ETBF. Prevotella e Porphyromonas: so anaerbios pigmentados encontrados na cavidade oral. Fusobacterium nucleatum: espcie de Fusobacterium mais prevalente em infeces. agente de infeces plvicas e periodontais. Actinomyces e Propionibacterium So BGP anaerbios. No formam esporos. Esto presentes na pele, TRS, gengiva e Trato Urogenital. Actinomyces: agente da actinomicose cervicofacial. Como esta bactria comum na mucosa oral, traumas podem permitir sua internalizao. Uma das caractersticas que fecham o diagnstico o fato de que ao drenar o abscesso observar-se a presena de grnulos de enxofre (amarelo). Deve-se drenar a regio e tentar uma antibioticoterapia. Propionibacterium acnes: agente da acne. Esta ocorre pela quebra do equilbrio bactria-hospedeiro. A bactria encontra-se associada a folculos pilosos e glndulas sebceas e utiliza lipdeos complexos produzidos e secretados pelas ltimas como substrato. Assim, libera cidos graxos menores que exercem ao antifngica. Em algumas situaes h um aumento da atividade das glndulas sebceas o que disponibiliza mais lipdeos permitindo o aumento da densidade da bactria e a elevao da quantidade de cidos graxos. Tudo isso excita

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uma resposta inflamatria local que suprime a atividade das glndulas. Esta bactria pode-se associar a Staphylococcus aureus na formao da acne. Fusobacterium, Porphyromas, Peptoestreptococcus, e Peptococcus Estas bactrias esto em estado de equilbrio na microbiota oral. A quebra desse equilbrio permite o aparecimento de gengivite e doena periodontal. Na placa subgengival uma espcie regula positivamente ou negativamente outra (consrcio bacteriano). Neste consrcio a maioria das bactrias estabelece relao com o Fusobacterium nucleatum. Identificao (parte mais importante) Coleta adequada de material deve seguir a regras especficas. Qualquer tipo exposio impede pesquisa de anaerbio. O espcime deve ser colocado em um meio de cultura especfico: meio pr-reduzido que favorece o metabolismo do anaerbio. A este meio adiciona-se uma mistura de gases hidrognio, nitrognio e gs carbnico, ou somente este ltimo. Pode-ser realizar hemocultura. Pode-se fazer swab: especialmente realizado por cirurgies em cavidades profundas. A maioria das feridas exige desbridamento: amputao, escovamento do peritnio, etc. Cultivo: em jarra de anaerobiose. Trata-se de uma jarra hermeticamente fechada. Neste recipiente fazse uso do GasPak: que consome oxignio e libera gs carbnico. Pode-se utilizar tambm um catalisador para acelerar esta reao. Outra opo a jarra ter orifcios para permitir a ao das bombas de gases. Cultivo em vela no para anaerbios: este meio facilita o crescimento de bactrias captofilicas (ex. alguns Estreptococos), mas no permite a sobrevivncia de anaerbios estritos porque garante somente uma diminuio da tenso de oxignio. Assim, o meio continua sendo deletrio para os anaerbios obrigatrios.

Rani Ralph ANAERBIOS

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BACILOS GRAM-POSITIVOS Clostridium Actinomyces Bifidobacterium Eubacterium Propionibacterium

BACILOS-GRAM-NEGATIVOS Bacterioides Fusobacterium Prevotella Porphyromonas

COCOS GRAM-POSITIVOS Peptococcus Peptostreptococcus

COCOS GRAM-NEGATIVOS Veilonella