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TINCIN GIEMSA
FUNDAMENTO Las tinciones hematolgicas utilizan azul de metileno y sus productos de oxi dacin como colorantes bsicos, combinndolos con la eosina como colorante cido. De este modo, obtenemos una tincin diferencial, es decir, una tincin que es capaz de discriminar entre las distintas estructuras celulares segn se tian stas con el colorante cido, con el bsico o con la mezcla de ambos. Utilizamos como colorante la mezcla de azul de metilen o y eosina propuesta por Giemsa. MATERIAL Frotis sanguneo Microscopio ptico. Puentes de tincin. Cristalizador Pipetas Pasteur. Frascos lavadores.
PROCEDIMIENTO 1. Preparamos un frotis sanguneo segn la tcnica descrita con anterioridad. 2. Colocamos el frotis sobre el puente de tincin, en el cristalizador y en posicin horizontal. 3. Cubrimos el frotis con metanol durante 5 -10 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire. Con esto fijamos el frotis. 4. Cubrir con Giemsadiluda (3 gotas) durante 20 -30 minutos 5. Escurrimos y lavamos con agua. Dejamos secar en posicin vertical. 6. Observacin a microscopio: a. Eritrocitos color rosa b. Plaquetas color violeta c. Neutrfilos con ncleo violeta, citoplasma rosa y granulacin violeta rojizo.
PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. Preparamos un frotis sanguneo segn la tcnica descrita con anterioridad. Cubrir la extensin con 20 gotas de la solucin MayGrnwald durante 1 minuto. Aadir otras 20 gotas de agua y dejar actuar otro minuto. Retirar y cubrir con Giemsadiludo durante 15 minutos Lavar con agua, secar y observar a microscopio.
REACTIVOS Solucin n 1: Solucin alcohlica de triarilmetano. Solucin n 2: Solucin tamponada de xanteno Solucin n 3: Solucin tamponada de tiazina Agua destilada Aceite de inmersin.
PROCEDIMIENTO 1. En tres cubetas se disponen los colorantes solucin n 1, n 2 y n 3. 2. Realizar cinco inmersiones de un segundo en cada uno de los reactivos. Entre uno y otro reactivo, escurrir bien. 3. Secar y observar