Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV Introducere

n ultimii ani s-a constatat c inciden a cancerului cutanat a crescut n mod alarmant (Shore, 2001). Aceast observa ie a dirijat interesul specialitilor spre investigarea efectelor biologice ale radia iilor UV solare. Este cunoscut faptul c expunerea la radia ii UV determin efecte imediate (eritem i pigmentare) i efecte ntrziate (mbtrnirea prematur a pielii i diferite forme de cancer) (Robert, 1999). Spectrul UV al luminii solare cuprinde domeniile: UVC (190-290 nm), UVB (290320 nm) i UVA (320-380 nm). ntruct stratul de ozon al stratosferei re ine n totalitate radia iile UVC i par ial radia iile UVB, la suprafa a Pmntului ajung numai radia ii UVA, i n mic msur radia ii UVB (Huda, 2000). Radia iile din domeniul UVA i UVB ac ioneaz prin mecanisme diferite. Radia iile UVB au o energie mai mare comparativ cu radia iile UVA i sunt absorbite direct de o serie de constituen i celulari, ca de exemplu acizii nucleici, proteinele i acidul urocanic. Radia iile UVB exercit un efect mutagen, fiind principalul agent responsabil de apari ia cancerului cutanat (de Gruijl, 2000). Fotonii UVA au o energie mai mic dect fotonii UVB, dar au o pondere de peste 90% din energia solar din spectrul UV de la suprafa a Pmntului. In plus, radia iile UVA penetreaz cu uurin epiderma, ac ionnd asupra stratului proliferativ bazal al epidermei i chiar asupra componentelor sanguine din derm (Leszczynski i colab., 1996). Radia iile UVA ac ioneaz asupra constituen ilor celulari n mod indirect, prin mecanisme oxidative ce implic formarea speciilor reactive de oxigen (anioni superoxid, peroxid de hidrogen, radicali hidroxil, radicali peroxil, i oxigen singlet). Speciile reactive de oxigen au o durat de via relativ scurt, dar sunt extrem de reactive, reac ionnd cu cea mai mare parte a constituen ilor celulari: acizi nucleici, proteine, lipide, polizaharide. Ac iunea lor induce de cele mai multe ori modificri ireversibile. Radia iile UVA exercit un efect mutagen mai slab dect radia iile UVB, dar joac un rol important n etiologia cancerului de piele, avnd n vedere predominan a lor n spectrul UV la suprafa a Pmntului (Stary i colab., 1997). Dei n cea mai mare parte radia iile UV solare exercit efecte nocive, nu poate fi neglijat efectul lor benefic legat de sinteza vitaminei D, precum i efectul psihologic pozitiv al expunerii la soare.

1. Efectele radia iilor UV solare asupra organismului uman

1.1. Efectele radia iilor UV la nivelul pielii

Pielea este organul cel mai expus la radia iile solare. Pielea este alctuit din epiderm, derm i esut subepidermal. n structura epidermei se eviden iaz (1) stratul bazal (stratum germinativum), (2) stratul spinos (stratum spinosum), (3) stratul granular (stratum granulosum) i (4) stratul cornos (stratum corneum). Epiderma este separat de derm printr-o membran bazal. Derma are o grosime de circa 1000-4000 m i are n structura sa fibre elastice i de colagen produse de fibroblaste, vase de snge i limfatice,
Referat.clopotel.ro

Marina Tamara Nechifor

foliculi piloi, glande sebacee i sudoripare, fibre musculare netede i nervi. esutul subepidermal este un esut adipos. Expunerea organismului uman la radia ii solare din regiunea 290-315 nm este esen ial pentru formarea vitaminei D3 n piele, cu consecin e benefice asupra dezvoltrii sistemului osos. Studiile in vivo au aratat c transmisia prin epiderma uman a radia iilor cu lungimi de und de 313, 365 i 436 nm se face n propor ie de 9,5, 19 i respectiv 34% din radia ia incident (Kohen i colab., 1995). Efectele imediate dup expunerea la soare, observate la nivelul tegumentului, sunt apari ia eritemului i pigmentarea. Eritemul este o consecin a dilatrii vaselor de snge din derm. Acest efect este mediat de produii de reac ie ai acidului arahidonic forma i sub ac iunea ciclo-oxigenazei i lipoxigenazei. Generarea prostaglandinelor, asociat eritemului n primele 6-12 ore de la iradiere, poate fi blocat de agen i anti-inflamatori nesteroidici, ca de exemplu indometacinul. Aceti agen i antiinflamatori nu sunt eficien i n cazul eritemului nregistrat dup 24 de ore de la iradiere i care este modulat de produii lipoxigenazei. Mai mult de 80% din radia ia UVA este transmis prin stratul superficial cornos al pielii i determin efectul de pigmentare imediat (Kuusilehto, 2000). Bronzarea pielii implic dou procese separate: pigmentarea imediat i pigmentarea ntrziat (melanogeneza). Pigmentarea imediat este determinat de radia iile UVA i const n foto-oxidarea melaninei preformate. Pigmentarea ntrziat are loc la 72 de ore dup expunerea la radia ii UVA sau UVB i este asociat cu melanogeneza. n cursul melanogenezei se constat o cretere de 2-3 ori a numrului de melanocite DOPA-pozitive i o dublare a volumului corpului celular al melanocitelor. Radia iile UV amplific transferul melanozomilor de la melanocite la keratinocite. Radia iile UV pot determina, pe lng efectul de pigmentare, mbtrnirea prematur a pielii numit fotosenescen actinic. Cele mai afectate sunt tegumentele expuse cel mai mult la radia iile solare. Alterarea structurii cutanate este nso it de deshidratare i reducerea elasticit ii, ns cea mai grav consecin a expunerii la radia iile UV const n apari ia i dezvoltarea unor tumori, cu evolu ie posibil letal. Tumorile cutanate pot fi de tip melanom (denumirea provine de la faptul c au originea la nivelul melanocitelor, celulele productoare de pigment), sau tip carcinom, numite i cancere tip non-melanom, ce au ca origine keratinocitele (Wang i colab., 2001). Cele mai frecvente forme de carcinom cutanat, pentru care s-a stabilit o rela ie de cauz-efect n raport cu expunerea la radia ii UV, sunt carcinoamele de tip bazocelular i squamos (van der Leun, 1996). Keratoza actinic este o stare precanceroas determinat de expunerea la radia ii UV solare care poate evolua spre o form de cancer de piele. 1.2. Efectele radia iilor UV asupra sistemului imunitar

Expunerea la radia iile UV determin o scdere a rspunsului imun (imunosupresie), ce are drept consecin reducerea capacit ii de aprare fa de infec ii i fa de dezvoltarea tumorilor (Halliday i colab., 1998). La persoanele infectate cu HIV, expunerea la radia ii UV amplific imunosupresia deja existent. Trebuie subliniat faptul c pigmentarea pielii nu ofer protec ie fa de ac iunea de imunosupresie exercitat de radia iile UV. Exist totui cteva situa ii n care supresia sistemului imunitar prin iradiere poate fi benefic. Astfel, acest efect este exploatat n terapia unor boli de piele, ca de exemplu psoriazis vulgaris. Modificrile imunologice sunt determinate de ac iunea radia iilor UV asupra celulelor Langerhans. Ac iunea se exercit att direct, ct i indirect, prin intermediul
112

Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV

factorilor solubili elibera i n urma lezrii keratinocitelor. Acidul urocanic (acid 4-imidazol acrilic) este prezent n stratul cornos al pielii. n mod normal, acidul urocanic se afl n forma trans, dar sub efectul iradierii UV sufer izomerizarea la forma cis. Se consider c acidul cis-urocanic este unul dintre ini iatorii procesului de imunosupresie asociat apari iei tumorilor non-melanom. 1.3. Efectele radia iilor UV la nivel ocular

Dintre efectele negative exercitate de radia iile solare UV trebuie men ionate o serie de modificri la nivel ocular, cum sunt degenerarea macular i cataracta (Balasubramanian, 2000). Aceste modificri sunt corelate n principal cu naintarea n vrst, dar studiile experimentale au dovedit c i radia iile UV au un rol important n instalarea i evolu ia acestor modificri oculare (Zigman i colab., 1995; Zigman, 2000). Radia iile UV amplific oxidarea proteinelor din cristalin (n special a resturilor de Met i Cys) i induc formarea unor agregate proteice cu mas molecular mare (Finley i colab., 1997). Aceste modificri determin apari ia unor zone opace la nivelul cristalinului corelate cu dezvoltarea cataractei. 1.4. Factorii care determin susceptibilitatea la iradierea UV

Susceptibilitatea de a suferi leziuni n urma iradierii UV este condi ionat de factorii genetici, de anumite maladii, de factori corela i cu vrsta, precum i de administrarea unor medicamente i substan e chimice. n func ie de sensibilitatea de apari ie a arsurilor i de gradul de pigmentare exist ase tipuri de piele (tipul I corespunde celei mai mari sensibilit i indivizii sufer ntotdeauna arsuri i nu se bronzeaz niciodat; tipul VI corespunde celei mai bune protec ii - pielea este pigmentat i nu sufer niciodat arsuri). Exist o serie de maladii ereditare care determin o susceptibilitate marcant la radia ile UV, dintre care pot fi men ionate: xeroderma pigmentosum, sindromul Bloom, sindromul Rothmund-Thomson, porfiriile, i fenilcetonuria. De asemenea, creterea susceptibilit ii la leziunile determinate de radia iile UV poate fi asociat administrrii antibioticelor pe cale oral, medicamentelor antihipertensive, psoralenului, agen ilor imunosupresori i anti-inflamatori nesteroidici.

2. Mecanismele de ac iune ale radia iilor UVA

Radia iile UVA ac ioneaz asupra mediilor biologice prin mecanisme oxidative, corelate cu formarea speciilor reactive de oxigen: oxigen singlet, radicali hidroxil (OH.), anioni superoxid (-O2), peroxid de hidrogen (H2O2). Speciile reactive de oxigen se mpart n: a) specii cu caracter de radical liber: anionul superoxid, radicalul hidroxil, oxidul nitric; b) specii neradicalice: oxigenul singlet, peroxidul de hidrogen, acidul hipocloros, hidroperoxizii lipidici. Dei termenul de specii reactive de oxigen este cel mai adecvat, n literatura biochimic i medical se folosete termenul de radicali liberi ai oxigenului, n care sunt incluse toate speciile respective, indiferent dac au sau nu caracter de radical liber. 2.1. Formarea speciilor reactive de oxigen Radia iile UVA sunt absorbite slab de acizi nucleici i proteine, dar evenimentul ini ial n declanarea efectelor biologice const n absorb ia fotonilor UVA de ctre diferi i
113

Marina Tamara Nechifor

cromofori din mediul celular: chinone, steroizi, porfirine, flavin coenzime i proteine cu grupri hem (citocromi, peroxidaze, catalaz). Absorb ia fotonilor UVA de ctre cromofori are ca rezultat formarea speciilor reactive de oxigen sau transferul energiei acumulate ctre anumite molecule int. Peroxidul de hidrogen se formeaz prin iradierea UVA a triptofanului, iar anionii superoxid pot fi produi prin iradierea UVA a NADH i NADPH (Cunningham i colab., 1985). n prezen a ionilor de fier, peroxidul de hidrogen i anionii superoxid pot participa in vivo la reac ia Haber-Weiss soldat cu producerea radicalilor hidroxil: Fe2+ + H2O2 Fe3+ + OH- + OH. Fe3+ + -O2 Fe2+ + O2 2.2. Ac iunea UVA asupra constituen ilor celulari O mare parte a constituen ilor celulari reprezint inte ale atacului speciilor reactive de oxigen generate de iradierea UVA. Astfel, radicalii hidroxil reac ioneaz cu aproape toate tipurile de molecule din componen a celulelor: glucide, fosfolipide, nucleotide, acizi organici i aminoacizi (Kohen si colab., 1995). n tabelul 1 sunt prezentate constantele de vitez ale reac iilor radicalilor hidroxil cu diverse molecule din sistemele biologice. Tabelul 1. Constantele de vitez ale reac iilor radicalilor OH. cu diverse molecule din sistemele biologice. Compusul testat Valoarea pH Constanta de vitez (M-1s-1) Adenina 7,4 3,0 x 109 AMP 5,4 1,8 x 109 Arginina 7,0 2,1 x 109 Cisteina 1,0 7,9 x 109 Citozina 7,0 2,9 x 109 Glucoza 7,0 1,0 x 109 Glutation 1,0 8,8 x 109 Guanina 1,0 x 1010 Hemoglobina 3,6 x 1010 Histidina 6-7 3,0 x 109 Metionina 7,0 5,1 x 109 Timina 7,0 3,1 x 109 Triptofan 6,0 8,5 x 109 Uracil 7,0 3,1 x 109 Modificrile oxidative ale proteinelor sub ac iunea speciilor reactive de oxigen pot determina inactivarea enzimelor i a proteinelor membranare (Dovrat i Weinreb, 1999), i pot produce modificri structurale soldate cu destabilizarea morfologiei celulelor atunci cnd inta atacului oxidativ sunt elementele citoscheletului (Somosy, 2000). n cazul enzimelor, efectul speciilor reactive de oxigen const, n general, n diminuarea capacit ii catalitice, determinat frecvent de oxidarea gruprilor sulfhidril i modificarea gruprilor amino prin malonilare (Dumitru i Nechifor, 1994; Dean i colab., 1997). Amploarea modificrilor este determinat de localizarea relativ a situsului de formare a speciilor reactive de oxigen, a sistemelor antioxidante i a proteinei int. O int major a atacului radicalic sunt lipidele membranare, datorit prezen ei dublelor legturi din structura acizilor grai polinesatura i. n structura fosfolipidelor membranare acizii grai polinesatura i cel mai frecvent ntlni i sunt acidul linoleic (C18:2
114

Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV

9,12), acidul linolenic (C 18:3 6,9,12) i acidul arahidonic (C 20:4 5,8,11,14) Radia iile UVA s-au dovedit ini iatori eficien i ai procesului de peroxidare lipidic (Morliere i colab., 1995). Mecanismul peroxidrii acizilor grai polinesatura i este prezentat n Figura 1.

Figura 1. Mecanismul peroxidrii acizilor grai polinesatura i.

Procesul de peroxidare a acizilor grai polinesatura i cuprinde urmtoarele etape: un radical liber extrage un atom de hidrogen din pozi ia alilic, cu transformarea acidului gras polinesaturat ntr-un radical lipidic; urmeaz rearanjarea intramolecular a dublelor legturi cu formarea unei diene conjugate; n urma reac iei dintre diena conjugat i oxigenul molecular se formeaz un radical peroxil; radicalul peroxil poate reac iona cu alt molecul de acid gras polinesaturat, formnd radicali lipidici, cu transformarea radicalului peroxil n hidroperoxid lipidic. Alternativ, radicalul peroxil poate forma peroxizi ciclici. Peroxizii lipidici odat forma i sufer sciziuni ce duc la propagarea lan ului de reac ii, la reac ii de ramificare i de descompunere. Prin descompunerea peroxizilor lipidici se formeaz o mare diversitate de compui: alcani (etan, pentan), aldehide (dialdehid malonic, hexanal, 4hidroxinonenal), acizi grai epoxi i hidroxi. Peroxidarea lipidelor membranare afecteaz structura i func iile membranei plasmatice i a membranelor organitelor. Astfel, sunt perturbate poten ialele transmembranare, fluxurile ionice i transportul transmembranar, sunt inactiva i receptorii de membran i sunt dereglate cile de semnalizare. Prin procesul de peroxidare lipidic se modific nu numai componentele membranare de natur lipidic, ci chiar i proteinele, n urma reac iei unor aminoacizi (Cys, Lys) cu produii aldehidici de
115

Marina Tamara Nechifor

peroxidare (dialdehida malonic, hexanal, 4-hidroxinonenal). ntruct maximul de absorb ie al acizilor nucleici este la 260 nm, radia iile UVA sunt slab absorbite de acest tip de macromolecule (Kuluncsics, 1999). Se consider c radia iile UVA interac ioneaz cu DNA prin mecanisme indirecte, mediate de compuii fotosensibilizatori endogeni (Kielbassa i colab., 1997). Faptul c iradierea celulelor n absen a oxigenului diminueaz considerabil efectul letal al radia iilor UVA, sugereaz implicarea speciilor reactive de oxigen n interac ia UVA-acizi nucleici. Studiile experimentale pe culturi de celule umane au artat c radia iile UVA induc mai multe tipuri de leziuni ale DNA: scindarea legturilor fosfodiesterice la nivelul unei singure catene, formarea de legturi ncruciate DNA-proteine, dimerizarea pirimidinelor adiacente. Fotonii UVA determin clivri monocatenare prin scindarea legturilor fosfodiesterice cu o eficien foarte mare (de 30 de ori mai mult comparativ cu fotonii UVB i UVC), i acest tip de leziune a fost semnalat ntr-o propor ie semnificativ mai mare comparativ cu dimerii pirimidinici (Peak i colab., 1987). Repararea clivrilor monocatenare dup iradierea UVA este un proces extrem de rapid, astfel nct 90% dintre leziuni sunt reparate n numai 15 minute dup iradiere (Peak i colab., 1991). Formarea dimerilor pirimidinici nu reprezint o modificare major a DNA n cursul iradierii UVA, comparativ cu iradierea UVB i UVC. Radia iile UVA induc vacuolizarea reticulului endoplasmic, separarea nucleului de citoplasma i formarea corpusculilor Heinz n eritrocite. Formarea corpusculilor Heinz este corelat cu leziuni ale citoscheletului eritrocitar n condi ii de stres oxidativ. Studiile dermatologice au indicat c o iradierea cronic cu UVA determin leziuni ale membranelor mitocondriale din toate tipurile de celule ale dermei. 2.3. Efectul UVA de activare a transcrip iei Radia iile UVA activeaz expresia unui set de gene prin mecanisme dependente de redoxul celular. Astfel, chiar la doze reduse care aparent nu determin leziuni tisulare radia iile UVA determin activarea transcrip ional a genelor ce codific hem oxigenaza I (HO-1), metalotioneina, CL 100 fosfataza i colagenaza. Activarea HO-1 reprezint un mecanism de reglare a nivelului intracelular al ionilor de fier la valori minime. Un nivel ridicat al ionilor de fier ar promova reac ia Fenton, reac ie nociv generatoare de radicali hidroxil cu efect poten ial letal la nivel celular (H2O2 + Fe2+ Fe3+ + OH- + OH.), precum i peroxidarea lipidic dependent de ionii de fier (Tyrrell, 1999). Degradarea hemului este catalizat de cele dou izoenzime ale hem oxigenazei: HO-1 i HO-2 (Maines i colab., 1986; Stocker, 1990). Dintre cele dou tipuri de hem oxigenaz numai izoenzima HO-1 este inductibil. Expresia HO-1 ca rspuns la ac iunea unor agen i oxidan i i la scderea concentra iei de glutation redus, n esuturi care nu sunt implicate n degradarea hemoglobinei, sugereaz c degradarea hemului i a proteinelor cu hem constituie un mecanism de protec ie fa de stresul oxidativ (Applegate i Frenk, 1995). Trebuie men ionat faptul c produsul de degradare al hemului, bilirubina, reprezint un puternic antioxidant (Stocker i colab., 1989), n timp ce compuii cataboliza i de hem oxigenaz, porfirinele, ac ioneaz ca fotosensibilizatori n condi iile iradierii UVA, genernd oxigen singlet. n celulele epidermei i dermei, mecanismele de protec ie constitutiv (HO-2) i inductibil (HO-1) sunt strns corelate, fiind modulate de nivelul intracelular al feritinei. Radia iile UVA induc expresia genei ce codific metalotioneina (Dudek i colab., 1993). Metalotioneina este o protein cu afinitate mare de legarea a ionilor de zinc, cadmiu
116

Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV

i cupru. Metalotioneina este implicat n protec ia fa de stresul oxidativ, ac ionnd ca scavenger al speciilor reactive de oxigen. Astfel, metalotioneina poate capta radicalii hidroxil i superoxid i o serie de radicali organici. n plus metalotioneina chelateaz ionii de fier mpiedicnd desfurarea reac iei Fenton. Un nivel ridicat al metalotioneinei poate fi asociat unei rezisten e crescute la iradierea UVA. Gena CL 100 codific o protein fosfataz cu dubl specificitate (Tyr/Thr fosfataz) care inactiveaz specific o MAP kinaz implicat n rspunsul la stres. Activarea colagenazei ca rspuns la iradierea UVA nu reprezint un mecanism de protec ie, ci dimpotriv un rspuns distructiv ce contribuie la degenerarea colagenului intersti ial i la fenomenul de mbtrnire prematur a pielii.

3. Mecanisme de protec ie
Organismele sunt protejate de agresiunea speciilor reactive de oxigen prin mai multe modalit i: compartimentalizarea celular, protec ia conferit de compuii antioxidan i i sistemele enzimatice, capacitatea organismelor de a elabora rspusuri adaptative inductibile n condi ii de stres oxidativ. In plus, procesele de reparare i turnover ajut la minimalizarea leziunilor rezultate din atacul speciilor reactive de oxigen. n condi ii normale exist un echilibru ntre sistemele antioxidante i sistemele generatoare de specii reactive de oxigen. Perturbarea acestui echilibru n favoarea sistemelor prooxidante determin instalarea stresului oxidativ, cu implica ii patologice (Sies, 1991; Morel i Barouki, 1999). Sistemul enzimatic de protec ie cuprinde: superoxid dismutaza, catalaza, glutation peroxidaza, glutation transferaza, glutation reductaza i glucozo-6-fosfat dehidrogenaza (Hasegawa si colab., 1992). Aceste enzime au o localizare preponderent intracelular, mediul extracelular fiind mult mai expus atacului radicalic. Compuii antioxidanti sunt clasifica i dup modul lor de ac iune n: a) scavengeri compui ce previn stresul oxidativ prin captarea radicalilor liberi; b) antioxidan i preventivi compui ce ac ioneaz prin sechestrarea ionilor metalelor tranzi ionale, prevenind reac ia Fenton (Chapple, 1997). In Tabelul 2 sunt prezenta i principalii compui antioxidan i i mecanismul lor de ac iune.

Tabelul 2. Principalii compui antioxidan i, localizarea i mecanismul lor de ac iune.

ANTIOXIDANT Proteine Feritina Transferina Lactoferina Ceruloplasmina Albumina

LOCALIZARE - citoplasm - fluid extracelular - fluid extracelular - fluid extracelular - fluid extracelular
117

MOD DE AC IUNE - chelatare Fe2+ - chelatare Fe2+ - chelatare Fe2+ - chelatare Cu2+, oxidare Fe2+, scavenger O2- chelatare Cu2+, scavenger OH., LOO., HOCl

Marina Tamara Nechifor

Compui cu mas molecular mic Vitamina E Ubichinona Carotenii Vitamina C Glutationul redus Acidul uric Bilirubuna

- membrane - membrane - membrane - citoplasm - citoplasm, mitocondrii - snge - snge

- scavenger OH., LOO., HOCl - scavenger OH., LOO., HOCl - scavenger OH., LOO., HOCl, 1 O2 - scavenger OH., O2- scavenger OH., O2- previne peroxidarea lipidelor - previne peroxidarea lipidelor

Mecanismele de protec ie fa de radia iile UVA de la nivelul pielii. Pielea prezint o serie de structuri cu rol de protec ie, cum sunt stratul cornos i melanina. Dei stratul superficial cornos ndeplinete func ia de barier optic, determinnd reflexia, dispersia i absorb ia radia iei incidente, cea mai mare parte a radia iilor UVA ptrund profund n piele, pn la nivelul dermei. Se estimeaz c radia iile UVA pot fi absorbite de diferite componente ale sngelui, la nivelul vaselor de snge din derm (Tyrrell, 1996; Nechifor i colab., 1999). Radia iile UVA ac ioneaz ca inductori ai enzimelor responsabile de sinteza poliaminelor. Poliaminele accelereaz derularea ciclului celular, stimulnd proliferarea celular i implicit ngroarea epidermei i a stratului cornos. ngroarea stratului cornos (hiperkeratinizarea) ajut la protec ia pielii prin reflectarea razelor solare. Totui, hiperkeratinizarea nu reprezint un mecanism de protec ie eficient pentru radia iile UVA (eficien a este mai mare pentru radia iile UVB). Un mecanism suplimentar de protec ie a epidermei const n stimularea pigmentrii cu melanin. Trebuie subliniat faptul c protec ia prin pigmentarea cu melanin este dependent nu numai de cantitatea total de pigment ci i de compozi ia sa chimic. Astfel, eumelanina este componenta de culoare neagr a melanozomilor care are un efect protector datorit capacit ii sale de a forma compui stabili cu radicalii liberi, n timp ce phaeomelanina este componenta de culoare galben ce nu are efect protector, ci dimpotriv ac ioneaz ca fotosensibilizator. Pe lng stimularea producerii de melanin de ctre melanocite, radia iile UVA determin efectul de pigmentare imediat ce const n fotooxidarea melaninei pre-existente, conducnd la o amplificare pe termen scurt a pigmentrii, dar care nu confer protec ie fa de expunerea ulterioar la radia ii UV. n figura 2 sunt prezentate mecanismele de protec ie constituiv i inductibil de la nivelul pielii. Nivelul antioxidan ilor este constitutiv crescut n piele, cu men iunea c acest nivel este semnificativ mai mare n epiderm comparativ cu derma. n schimb, n epiderm nu au fost eviden iate mecanisme de protec ie inductibile. n derm a fost eviden iat mecanismul inductibil men ionat anterior, de activare transcrip ional a hem oxigenazei I, corelat cu creterea nivelului de feritin.

Protectie constitutiva
Nivelele de antioxidanti sunt constitutiv mai mari in epiderma comparativ cu derma

Protectie inductibla

118

Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV

Glutation Vitamina E Acid ascorbic Acid uric Ubiquinol Catalaza Superoxid dimutaza Hemoxigenaza-2 Feritina

Epiderma

Necunoscut

Derma

Hemoxigenaza-1

Feritina

Protectie celulara
Nu apar leziuni membranare Nu apar leziuni DNA

Preventia
mortii celulare mutagenezei carcinogenezei

Figura 2. Mecanismele de protec ie constitutiv i inductibil de la nivelul pielii fa de agresiunea radia iilor UV.

n ultimii ani industria farmaceutic i cosmetic a lansat o gam larg de substan e ce ac ioneaz ca filtre capabile s absoarb fotonii UV, dintre care pot fi men ionate: Parsol 1789, Mexoryl SX, Octil Metoxicinnamat i Octocrilen. Produsele fotoprotectoare sunt caracterizate prin factorul de protec ie. Acesta reprezint o cifr ce indic de cte ori este prelungit durata proprie de protec ie la soare, n condi ii de siguran , fiind exclus apari ia eritemului actinic. O apreciere corect a eficien ei produselor fotoprotectoare trebuie fcut i n func ie de capacitatea lor de a inhiba reac ia de izomerizare a acidului urocanic i de a preveni acumularea proteinei p53 (Forestier i Mascotto, 1999; Cole, 2001).

Concluzii
Radia iile solare exercit un efect benefic antirahitic prin stimularea sintezei vitaminei D, precum i un efect antidepresiv. Cu toate acestea, radia iile UV constituie un factor de risc pentru apari ia cancerului cutanat i a unor tulburri oculare. Pentru a minimaliza acest risc se recomand limitarea expunerii la radia iile solare. Pentru persoanele care fac tratament cu agen i imunosupresori, recomandarea este i mai strict, ntruct aceste persoane prezint un risc de 500 ori mai ridicat dect persoanele obinuite de apari ia a cancerului. De asemenea, copiii i adolescen ii sunt mult mai susceptibili la carcinogeneza indus de iradierea UV dect persoanele adulte. Radia iile UVA sunt responsabile de fenomenul de mbtrnire prematur a pielii. Un alt aspect care nu trebuie neglijat se refer la faptul c substan ele cu ac iune de filtre solare din compozi ia lo iunilor cosmetice ofer o protec ie eficient fa de arsurile solare dar nu mpiedic efectul imunosupresor al radia iilor i pn n prezent nu se poate spune cu certitudine dac filtrele solare previn cancerul de piele.

Bibliografie
119

Marina Tamara Nechifor

1. Applegate L.A., Frenk E. (1995) Cellular defense mechanisms of the skin against oxidant stress and in particular UVA radiation. Eur.J.Dermatol. 5: 97-103. 2. Balasubramanian D. (2000) Ultraviolet radiation and cataract. J.Ocul.Pharmacol.Ther. 16: 285-297. 3. Chapple I.L.C. (1997) Reactive oxygen species and antioxidants in inflammatory diseases. J.Clin.Paradontol. 24: 287-296. 4. Cole C. (2001) Sunscreen protection in the ultraviolet A region: how to measure the effectiveness. Photodermatol.Photoimmunol.Photomed. 17: 2-10. 5. Cunningham M.L., Johnson J.S., Giovanazzi S.M., Peak M.J. (1985) Photosenzitized production of superoxide anion by monochromatic (290-405 nm) ultraviolet irradiation of NADH and NADPH coenzyms. Photochem.Photobiol. 42: 125-128. 6. Dean R.T., Fu S., Stocker R., Davies M.J. (1997) Biochemistry and pathology of radical-mediated protein oxidation. Biochem.J. 324: 1-18. 7. de Gruijl F.R. (2000) Photocarcinogenesis: UVA vs UVB. Methods.Enzymol. 319: 35966. 8. Dovrat A., Weinreb O. (1999) Effects of UV-A radiation on lens epithelial NaKATPasa in organ culture. Invest.Ophthalmol.Vis.Sci. 40: 1616-1620. 9. Dudek E.J., Peak J.G., Roth R.M., Peak M.J. (1993) Isolation of V79 fibroblast cell lines containing elevated metallothionein levels that have increased resistance to the cytotoxic effects of ultraviolet-A radiation. Photochem.Photobiol. 58: 836-840. 10. Dumitru I.F., Nechifor M.T. (1994) Decrease in yeast glucose-6-phosphate dehydrogenase activity due to oxygen free radials. Int.J.Biochem. 26: 229-233. 11. Finley E.L., Busman M., Dillon J., Crouch R.K., Schey K.L. (1997) Identification of photooxidation sites in bovine -crystallin. Photochem.Photobiol. 66: 635-641. 12. Forestier S., Mascotto R. (1999) Sun and UVA. S FW-Journal 8: 2-6. 13. Halliday G.M., Bestak R., Yuen K.S., Cavanagh L.L., Barnetson R.S. (1998) UVAinduced immunosuppression. Mutat.Res. 422: 139-45. 14. Hasegawa T., Kaneko F., Niwa Y. (1992) Changes in lipid peroxide levels and activity of reactive oxygen scavenging enzymes in skin, serum and liver following UVB irradiation in mice. Life Sci. 50: 1893-1903. 15. Huda A. (2000) UVA, UVB, and UVC and their possible effects. Health Phys.78 (5 Suppl): S75.
120

Efectele biologice i mecanismele moleculare de ac iune ale radia iilor UV

16. Kielbassa C., Roza L., Epe B. (1997) Wavelength dependence of oxidative DNA damage induced by UV and visible light. Carcinogenesis 18: 811-816. 17. Kohen E., Santus R., Hirschberg J.G. (1995) Biological effects of solar ultraviolet radiation. In: Photobiology, Academic Press, pp.275-302. 18. Kuluncsics Z., Perdiz D., Brulay E., Muel B., Sage E. (1999) Wavelength dependence of ultraviolet-induced DNA damage distribution: involvement of direct or indirect mechanisms and possible artefacts. J.Photochem.Photobiol. 49: 71-80. 19. Kuusilehto A. (2000) Transmission of UVA radiation through epithelium of oral mucosa and skin in rat and man. Photodermatol.Photoimmunol.Photomed.16: 189-191. 20. Leszczynski D., Fagerholm S., Leszczynski K. (1996) The effects of the broadband UVA radiation on myeloid leukemia cells: The possible role of protein kinase C in mediation of UVA-induced effects. Photochem.Photobiol. 64: 936-942. 21. Maines M.D., Traskshel G.M., Kutty R.K. (1986) Characterization of two constitutive forms of rat liver microsomal heme oxigenase. Only one molecular species of the enzyme is inducible. J.Biol.Chem. 261: 411-419. 22. Morel Y., Barouki R. (1999) Repression of gene expression by oxidative stress. Biochem.J. 342: 481-496. 23. Morliere P., Moysan A., Tirache I. (1995) Action spectrum for UV-induced lipid peroxidation in cultured human skin fibroblasts. Free Rad.Biol.Med. 19: 365-371. 24. Nechifor M.T., Neagu M., Manda G., Gaghe M. (1999) Changes in albumin fraction after in vitro UVA irradiation of human plasma. J.Med.Biochem. 3: 283-287. 25. Peak M.J., Peak J.G., Carnes B.A. (1987) Induction of direct and indirect single-strand breaks in human cell DNA by far- and near-ultraviolet radiations: Action spectrum and mechanisms. Photochem.Photobiol. 45: 381-387. 26. Peak J.G., Pilas B., Dudek E.J., Peak M.J. (1991) DNA breaks caused bz monochromatic 365 nm utraviolet-A-radiation and their repair in human epithelioid and xeroderma pigmentosum cell. Photochem.Photobiol. 54: 197-203. 27. Robert M., Bissonauth V., Ross G., Rouabhia M. (1999) Harmful effects of UVA on the structure and barrier function of engineered human cutaneous tissues. Int.J.Radiat.Biol. 75: 317-26. 28. Shore R.E. (2001) Radiation-induced skin cancer in humans. Med.Pediatr.Oncol. 36: 549-554.
121

Marina Tamara Nechifor

29. Sies H. (1991) Oxidative stress: Introduction. In: Oxidative Stress: Oxidants and Antioxidants, Academic Press, San Diego, pp.XV-XXII. 30. Somosy Z. (2000) Radiation response of cell organelles. Micron 31: 165-181. 31. Stary A., Robert C., Sarasin A. (1997) Deleterious effects of ultraviolet A radiation in human cells. Mutation Res. 383: 1-8. 32. Stoker R. (1990) Induction of heme oxygenase as a defence against oxidative stress. Free Rad.Res.Comms. 9: 101-112. 33. Stoker R., Lai A., Peterhans E., Ames B.N. (1989) Antioxidant activities of bilirubin and biliverdin. In: Medical, Biochemical, and Chemical Aspects of Free Radicals, Elsevier, Amsterdam, pp.465-468. 34. Tyrrell R. (1996) Activation of mammalian gene expression by the UV component of sunlight from models to reality. BioEssays 18: 139-148. 35. Tyrrell R. (1999) Redox regulation and oxidant activation of heme oxygenase-1. Free Rad.Res. 31: 335-40. 36. van der Leun J.C. (1996) UV radiation from sunlight: summary, conclusions and recommendations. Photochem.Photobiol. 35: 237-244. 37. Wang S.Q., Setlow R., Berwick M., Polsky D., Marghoob A.A., Kopf A.W., Bart R.S. (2001) Ultraviolet A and melanoma: a review. J.Am.Acad.Dermatol. 44: 837-846. 38. Zigman S., McDaniel T., Schultz J.B., Reddan J., Meydani M. (1995) Damage to cultured lens epithelial cells of squirrels and rabbit by UV-A (99.9%) plus UV-B (0.1%) radiation and alpha tocopherol protection. Mol.Cell Biochem.143: 35-46. 39. Zigman S. (2000) Lens UVA photobiology. J.Ocul.Pharmacol.Ther. 16: 161-165.

122