Les anaérobies

Aspect microscopique
Bacill es Gram +
pré sen tan t un e s pore
À l’E F : mo biles le
plu s s ouvent par
cilia tur e p ér itr ich e

Sp ore tr ès ré sis tan te, n on

dé tru ite à 100° C p en da nt
3 à 5 heure s.
 Classification
Elle se fait selon leur habitat, leurs caractères morphologiques et culturaux et
leur pouvoir pathogène. On distingue:

•la flor e tell urique : bactéries saprophytes du sol et commensales des

cavités naturelles de l'homme et des animaux.
Exemple : le genre Clostridium.
Règle appliquée pour les conserves industrielles : 10 min à 120°C.

•la flor e d e Vei ll on : bactéries commensales des voies respiratoires,

digestives et génitales de l'homme et des animaux et qui ne peuvent
survivre dans le sol, non sporulées.
Exemples : nombreux genres comme Bacteroides, Peptococcus,
Mobiluncus, Fusobacterium.
Pouvoir pathogène
Cl ostridium tetan i

Forme v égétativ e : bacil le s à bo uts car rés

en ch aîn ette s plus o u mo in s longu es Gr am
+

Forme de r és istance : spore dan s u n

enviro nn ement f av orable p ermet le
dé ve loppemen t d’un n ouve au Cl ostr idium
tetani .
Prés ent dan s le so l et les p oussière s 
tétanos
• Le tétanos est secondaire à l'introduction dans l'organisme de spores
de Clostridium tetani consécutive à un traumatisme.

• Si l'anaérobiose est suffisante (plaies profondes, multiplication de

bactéries aérobies associées), les formes végétatives apparaissent par
germination des spores.

• Cependant, la multiplication bactérienne reste localisée à la porte

d'entrée, la maladie est uniquement due à la toxine.

• La toxine, libérée au cours de la multiplication entre par endocytose

par les terminaisons nerveuses du site infecté.

• Elle empêche la libération d'inhibiteurs du motoneurone (glycine,

GABA) et provoque une paralysie spastique. (muscle restant en
contraction)
Clostridium botulinum
Ob se rv atio n mi cr osco piq ue

Gran d bacille ( 5 µm de lo ng, 1 µm

de large ),
Gram +,
Fo rman t un e s pore o valaire
ter min al e défo rman te .

Ca ractèr es bio chimi ques :

ANS, gluc ose + , mo bile.

Clostridium botulinum est l'agent d'une intoxication alimentaire, le botulisme.

La maladie n’est pas due à la bactérie mais à l’ingestion de sa toxine présent
dans un aliment mal stérilisé.
C’est une toxine thermolabile (sensible à la chaleur), il y a risque de
contamination uniquement lors de l’ingestion d’aliments non chauffés.
L'intoxication se traduira par une paralysie des muscles lisses essentiellement.
Clostridium perfringens
Obs erv atio n a u ME B

Gran d bacille ( 5 µm de lo ng, 1 µm

de large ),
Gram +,
Fo rman t un e s pore o valaire
ter min al e défo rman te .

Responsable de gangrènes gazeuses post-traumatiques, de toxi-infections

alimentaires et d'entérites nécrosantes.
C'est l'anaérobie le plus répandu dans l'environnement (sol, eau, air,
poussières).
C'est aussi un commensal des flores de l'intestin, du vagin ou des voies
aériennes supérieures de l'Homme et des animaux.
Sa présence dans les eaux est un critère de contamination fécale.
Angine fuso-spirochétienne de Vincent
• Angine ulcéro-nécrotique accompagnée d'une fièvre élevée et d'une
réaction ganglionnaire de voisinage.

• Le diagnostic est bactérioscopique avec la présence d'une

bactérie de type Fusobacterium et d'une bactérie de type spirochète.

• Le traitement de cette angine est simple à base de pénicilline G.

 Les milieux de culture des Clostridium
Milieu de SCHAEDLER
Bouillon trypticase soja 10 g
Polytone Sg glucose 5g Source N et de C, de vitamines
Extrait de levure 5g
Tris-hydroxyméthylaminométhane Tampon (maintien du pH constant)
3g Facteur de croissance (synthèse
Hémine 0,01 g des cytochromes)
L-cystéine 0,40 g
ED pH = 7,6 qsp 1 L Acide aminé, réducteur

Ce milieu peut-être :
• enrichi par addition de vitamine K3.
• sélectif par addition d'inhibiteurs .
• solide par addition d'agar : gélose Schaedler.
Utilisation:
Bouillon ou gélose Schaedler simple: bactéries non exigeantes du genre Clostridium .
Bouillon ou gélose enrichi(e): bactéries exigeantes de la flore de Veillon.
Milieu de culture utilisé pour les bactéries anaérobies exigeantes : gélose Schaedler +
vitamine K3 + sang frais à une concentration de 5%.
Milieu de Rosenow cystéine
Composition
Peptone trypsique 10 g
Source N et de C
Extrait de viande de bœuf 3g
Chlorure de sodium 2g Sources minérales
Chlorhydrate de Cystéine 0,3 g Acide aminé, réducteur
Glucose 2g Source énergétique carbonée
Indicateur d’Andrade 10 mL Indicateur d’oxydo réduction
(fushine acide dans de l’ED)
ED qsp 1 L
pH = 7,2
Ajouter dans le tube:
Un morceau de marbre
Un morceau de cervelle de boeuf

Ensemencement
Régénér er le milieu 20 mi n au BM à 10 0°C p our ass ure r
l’an aé ro bie
La p ré sen ce d’u n réd ucteur ren fo rce l’an aéro bie
Ensemen ce r en p rofo nde ur l e tube en év itan t les bu lle s d’air
Recouv rir de pa raf fin e fo ndue
Incuber 24 he ure s à 37° C.
 Milieu MRS
Composition
Peptone trypsique de caséine 15 g
Source N et de C, vitamines et
Macération de viande 500 mL minéraux, d’acides aminés
Extrait de levure 5g
Acétate de sodium 5g Inhjbiteurs (concentrations )
Citrate d’ammonium 2g
Phosphate bipotassique 2,4 g Source minérale
Tween 80 1 mL Apport d’acides gras
Sulfate de magnésium 0,2 g
Sulfate de manganèse 0,05 g Sources minérales
Glucose 20 g
Agar 12 g Source énergétique de C
ED qsp 1 L
pH = 6,5 inhibiteur

C’es t u n milieu d’is oleme nt s électif e t enrichi

de s Lacto b acill us u tilis é p our l’is olement e t l e
dé nombre men t de ces bactérie s da ns le s
pro duits laitier s.
Ensemencement
Iso leme nt p ar la techni que de s quadr ants et incu batio n s ous atmo sp hèr e
à C O2 .
 Lecture des milieux
Milieu de Rosenow Cystéine

Colo ratio n ro se à ro uge ca rmin au

niv eau de la cerv elle 
ferme ntation du glu co se

Pas de co loration r os e  glu co se -

Déco lorati on du mili eu v oir vir ag e

au vert  les ba ctéries s ont
ré ductrices

Appar itio n de bulles , déco llemen t

de la p araffi ne  pro du ctio n de gaz
par les bacté ries
Type respiratoire Gélose de Schaedler en anaérobios

Cu lture s ur l a hau te ur du tube,

à l’exce ptio n de la surface en
co ntact av ec l’O 2 de l’ai r 
bacté ries A NS.
Colo nies blan ch es con to urs
ré gu lier s, bo mbé es ,typ e S 
cul tur e s ur milieu riche en
an aé ro bio se

n° impa ir:
Bac il le s Gra m - 
cult ure sur mi lieu
riche , bac té rie s
exige ant es faisa nt
pa rtie de l a f lo re de
ve ill on
 Colo nies blan ch es co nto urs
ré gu lier s, bo mbée s, type S 
cul ture s ur milieu riche e n
an aé ro bio se

n° pa ir:
Bac illes Gra m +
sp orogè ne  bact éries
faisant part ie de l a
flore telluri que .
Gélose MRS

Petites co lonies bla nche s 

carac téris tiq ues de s Lacto bacillu s

Cul ture s ur le s boî te s m ise s en anaé robio se et sous

at mos phè re à CO 2  bac té ries cu lt iv ant en abse nc e
d’ O 2 né ce ss aire à l a fe rme nt at ion d u lact ose du l ait 
product io n d’aci des re spons able s de l’ app ari tion du
ca illé.
Frottis du yaourt

Coq ues en ch aî nette Gr am + 

Bacilles Gram +  caractér istiq ues carac téris tiq ues de s Lacto co ccu s
de s Lacto bacill us
La f er mentati on du yao urt est due à de ux typ es de bactér ie p ro voquan t le caillé
du l ait p ar p rod uctio n d’acide s lo rs de l’util is atio n du lacto se.