DIAGNOSTICO MOLECULAR

 Las técnicas de diagnostico molecular comprenden técnicas que evidencian o

descubren el material genético específico viral conservado y replicable ya sea
que se encuentre en un fluido, en una célula o tejido, ya sea activo o latente.

 Usarlas en una amplia variedad de enfermedades infecciosas, genéticas,

oncológicas y neurológicas.

 Se clasificar en dos categorías:

1. Ensayos de hibridación.

2. Técnicas para la amplificación del ácido nucleico

1.ENSAYOS DE HIBRIDACIÓN.
Hibridación con sondas.
Sondas de ácidos nucleico, pues esta sonda es una sola hebra de DNA
que contiene secuencias características de un determinado virus.
La sonda de acido nucleico es marcada ya sea con una enzima o con
un isótopo radioactivo.

ADN
Desnaturalización de
blan Hibridización de la sonda con el ADN blanco
ADN
co
2. TÉCNICAS PARA LA AMPLIFICACIÓN DEL ÁCIDO
NUCLEICO.

 REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA. Conocida como PCR

La técnica de PCR requiere:

 Oligonucleotidos iniciadores

 DNA Polimerasa termoestable

Compuesto por 3 pasos fundamentales:

1º Desnaturalización del ADN doble cadena

2º Acoplamiento de los cebadores (primers) sintéticos

2º Elongación del cebador usando una ADN polimerasa.

Método de reacción de polimerasa en cadena (PCR), en que
se muestra progresión de la síntesis de nuevas hebras
VENTAJAS DE LAS TÉCNICAS MOLECULARES.
• Son rápidos para identificar a las partícula viral.

• Permite detectar cantidades muy pequeñas de virus.

• Presenta una sensibilidad y especificidad alta.

• La PCR permite, la amplificación del DNA o RNA del agente

infeccioso y su identificación.

• Es hasta 100 veces mas sensible que otras

• La unión entre ácidos nucleicos es más fuerte que la avidez del anticuerpo
por el antígeno.

• Los agentes infecciosos involucrados en la patogénesis de una enfermedad

pueden ser cuantificados aun cuando estén presentes en cantidades de
subpicogramos o como infecciones latentes.

• Permite diagnosticar al agente causal de la enfermedad en las primeras

etapas de la enfermedad.
DESVENTAJAS DE LAS TÉCNICAS MOLECULARES

• Son caros, tienen un alto costo.

• La necesidad de cebadores específicos para encontrar determinado particula

viral, y por ello hay la posibilidad de falso (+), lo que implica un conocimiento
adecuado de la secuencia de nucleótidos del agente.

• La aplicación de estas técnicas exige una infraestructura y entrenamientos

adecuados.

• La prueba se tiene que efectuar en condiciones adecuadas de astringencia.

GRACIAS