Sunteți pe pagina 1din 55

Cromatografa lquida

Clasificacin
Cromatografa lquida convencional
Adsorcin Reparto Cambio inico Exclusin Afinidad

HPLC (CLAR) Cromatografa lquida plana


Capa fina Papel

Cromatografa lquida convencional


eluyente capa protectora
(arena, papel de filtro)

relleno
disco de vidrio sinterizado

vaco

a)

b)

Cromatografa lquida
ADSORCION (CLS) Adsorbentes: gel de slice (SiO2.xH2O) (activacin) almina (Al2O3.xH2O) Disolventes: serie eluotrpica (ordenacin segn la capacidad relativa para desplazar solutos de un adsorbente dado. Ej (gel de slice) agua>metanol>acetona>ac. etilo>cloroformo>benceno>tolueno> etc REPARTO (CLL) Normal: fase estacionaria polar; Inversa: fase estacionaria no polar Soportes slidos: gel de slice, tierra de diatomeas, celulosa, almidn, microbolas de vidrio Fase estacionaria: agua (para muchos compuestos orgnicos) Eluyentes: cloroformo, Cl4C, hidrocarburos, etc.

Cromatografa de cambio inico

R-H+ + M+ <--> R-M+ + H+

Kd = [M+]R [H+] / [M+] [H+]R

Resinas de cambio inico

Resinas cidas y bsicas

Exclusin molecular

Exclusin molecular

Exclusin molecular

Separacin de protenas

Geles
O CH2=CHCONH 2

Acrilamida
.

(CH2=CHCNH) CH2 2

NN'-metilenbisacrilamida
CONH2 CONH

CH2CHCH2CHCH2CHCH2CH
CONH CH2 CONH CONH2
CONH CH2

CONH
CH2 CONH CONH2

CH2CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CH

CONH2 CONH
CONH

CONH2
CONH

CHCH2CHCH2CHCH2CHCH2CH

Cromatografa de afinidad

C de A: fundamento

Equipo HPCL

Cromatgrafo HPLC

Bomba recproca

Bomba recproca

Bomba de desplazamiento
Vlvula de entrada Eluyente Vlvula de salida Columna

Cmara conteniend eluyente

Detector de ndice de refraccin

Detector electroqumico

Detector de fluorescencia

Derivatizacin

Columna

Bucle Detector Bao de agua .

Bomba

Reactivo

Cromatografa plana

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en papel

Cromatografa en papel

Cromatografa de fluidos supercrticos


80 70

Zona supercrtica

P, atms.
60

Punto crtico (31.3C, 72.9 atms.)

Lquido
50

Slido
40 30

Gas
20 10

Punto triple (56.4 C, 5.11 atms.)


80 60 40 20 0 20 40

t, C