Combat Support Hospital Microbiologa Clnica, Bagdad, Irak

Urocultivo
1. INTRODUCCIN:

Las infecciones del tracto urinario (ITU) se pueden clasificar como cistitis (infeccin de la vejiga urinaria) o pielonefritis (infeccin de los riones).Los sntomas de la cistitis bacteriana no complicada incluyen frecuencia, urgencia, y el malestar suprapbico. Los sntomas de la pielonefritis pueden incluir los de la cistitis, pero tambin incluyen fiebre y dolor en el costado, leucocitosis, piuria y hematuria son resultados comunes de laboratorio. Ambas condiciones pueden conducir a complicaciones como la bacteriemia. Las mujeres jvenes corren un riesgo mucho mayor para el desarrollo de la cistitis que los hombres jvenes y la mayora de las mujeres sufren al menos un episodio en algn momento de su vida. La incidencia de infeccin urinaria es comparable en hombres y mujeres mayores debido a la ampliacin de la prstata que impide el vaciado total del contenido de la vejiga. Adems del gnero, un factor de riesgo comn para el desarrollo de la ITU es la colocacin de catteres urinarios. La causa bacteriana ms comn de la cistitis y pielonefritis no complicada es la Escherichia coli.Otras causas comunes de la cistitis incluyen Staphylococcus saprophyticus, especies de Klebsiella, Proteus, y especies de Enterococcus. Relacionada con infeccin del tracto urinario por el catter son ms comnmente causadas por E. coli, especies de Enterococcus, Pseudomonas aeruginosa y levaduras. Las muestras de orina se envan a cultivar de pacientes con signos y sntomas de infeccin del tracto urinario.El urocultivo se realiza cuantitativamente paraa distinguir los contaminantes de flora uretral y vaginal de organismos que infectan el tracto urinario. Aunque existen opiniones diversas, el nivel de bacteriuria generalmente se considera indicativa de infeccin es de 10.000 unidades formadoras de colonias por mililitro de orina. 2. MUESTRAS: A. Observaciones generales Las muestras para cultivo se obtienen idealmente de la primer miccin de la maana pues la concentracin de bacterias es la mxima en ese momento Forzar el fluido para obtener la muestra diluye la orina y se cuentan falsamente pocas bacterias Muestras recolectadas antes de 24 horas no son aceptadas para el cultivo B. Recoleccin asptica C. Sondaje orina catter de Foley (alojado) catter Robinson (dentro y fuera) La orina no debe ser recogida de una bolsa de recoleccin de Foley D. Transporte y almacenamiento La orina debe ser transportada al laboratorio a 1 hora de la recoleccin Refrigerar si el proceso de transporte o de laboratorio se retrasa La orina es un buen medio de cultivo por lo que si se deja a temperatura ambiente durante largos periodos de tiempo las bacterias se multiplican dando lugar a: a. Conteo de colonias errneo b. crecimiento excesivo de patgenos por contaminantes flora uretral y vaginal SUMINISTROS Y EQUIPO: A. B. C. D. Agar sangre de cordero o Columbia CNA Agar MacConkey Asa bacteriolgica calibrada a 0.001ml Incubadora a 35-37 C

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3.

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CALIBRACIN: N / A

5. CONTROL DE CALIDAD: el control de calidad de todos los medios de cultivo y asa calibrada se lleva a cabo por el fabricante 6. PROCEDIMIENTO A. Inoculacin del medio e incubacin

1) Hacer girar suavemente el recipiente para mezclar la muestra. 2) Sumerja a un 0.001 ml (1 ul) el asa estril en la muestra hasta que slo entre la parte superior del crculo del asa en la muestra. No sumerja el mango del asa en la orina ya que esto dar lugar a que ms de 1 ul de la muestra se deposite en el agar (ver Figura 1).

3) Depositar la muestra en una sola lnea por el centro de la placa. Rayar en cruz la lnea rayada antes con series de lneas muy cerradas como si se fuera a utilizar toda la superficie de la placa (ver Figura 2).

4) Incubar las placas de 16 a 24 horas a 35-37 C en atmsfera ambiental o incubadora de CO2.

B.

Crecimiento de las colonias

1) No hay crecimiento a. Si no hay crecimiento despus de 16-24 horas de incubacin, desechar y emitir el informe final (vase ms adelante) Si el cultivo se ha incubado menos de 16 horas, incubar 24 horas ms.

b.

2) Crecimiento a. Cuenta el nmero de colonias de cada morfotipo presente.Comparar el crecimiento en el agar sangre y agar MacConkey Cada colonia contada representa 1,000 ufc (unidad formadora de colonias) en la muestra original Continuar con los procedimientos de prueba de identificacin y susceptibilidad de acuerdo a las siguientes pautas: UNO O DOS PATGENOS PROBABLES, POR CADA 10.000 UFC / ML: Reportar definitiva identificacin y pruebas de sensibilidad UN PATGENO PROBABLE 10.000 UFC / ML Y <10.000 UFC / ML CONTAMINANTES: Realizar definitiva identificacin y pruebas de susceptibilidad del patgeno probable. Reportar identificacin limitada y conteo de colonias en el posible contaminante, es decir menos de 10.000 ufc ml/gram-positivas. Si ms de un contaminante urogenital est presente, combine el recuento de colonias por ejemplo, <10.000 ufc / ml flora urogenital mixta. UNO O DOS TIPOS DE COLONIAS, UFC CADA <10,000 / ML: Realizar identificacin limitada sin pruebas de sensibilidad. Informar caractersticas en tincin Gram, por ejemplo, <10.000 UFC /ml cocos gram-positivos. Nota: Siempre identificar y reportar la presencia de estreptococos del grupo B, aun en cultivo mixto, en muestra de orina de mujeres. TRES O MS TIPOS DE COLONIAS 10.000 UFC/ML, UN PATGENO PROBABLE PREDOMINANTE: Efectuar identificacin definitiva y pruebas de susceptibilidad del patgeno probable predominante. Combinar el recuento de colonias de los contaminantes, por ejemplo, 30.000 ufc / ml flora urogenital mixta. Nota: Siempre identificar y reportar la presencia de estreptococos del grupo B, aun en cultivo mixto, a partir de muestra de orina de mujeres. TRES O MS TIPOS DE COLONIAS 10.000 UFC/ML, NO PATGENO PROBABLE O NINGUNO PREDOMINANTE: Combine el recuento de colonias de los contaminantes por ejemplo, 30.000 ufc / ml flora urogenital mixta.

b. c.

7.

CLCULOS: N / A INTERPRETACIN:

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A. Estafilococos coagulasa-negativos 1) Con la excepcin de S. saprophyticus, estafilococos coagulasa-negativos rara vez causan infeccin del tracto urinario 2) Si una cantidad significativa de especies de Staphylococcus coagulasa-negativo (catalasa +,cocos gram-positivos agrupados, Staphaurex negativo) es aislada, establecer un pnel MicroScan de gram-positivos para descartar S. saprophyticus B. Hay poca evidencia de que las especies de Lactobacillus, Streptococcus viridans no hemolticas, estreptococos, difteroides (excepto Corynebacterium ureolyticum), o especies no patgenas de Neisseria causen infeccin del tracto urinario y por lo tanto se debe considerarflora normal urogenital. 9. REPORTE DE RESULTADOS: A. Los cultivos negativos 1) No hay crecimiento despus de 16-24 horas: reportar "No hay crecimiento despus de 24 horas" 2) No hay crecimiento despus de 48 horas: reportar "No hay crecimiento despus de 48 horas"

3) Un solo tipo de flora normal urogenital aislado: reportar la cantidad e identificacin limitada Ejemplo 1: <10.000 ufc / ml cocos gram-positivos Ejemplo 2: 20.000 ufc / ml difteroides 4) Dos o ms tipos de flora normal urogenitale aislados: reportar "X cantidad de flora urogenital mixta" Ejemplo 1: <10.000 ufc / ml flora urogenital mixta Ejemplo 2: 35.000 ufc / ml flora urogenital mixta B. Cultivos positivos 1) Informe preliminar a. Informe la cantidad de crecimiento y cualquier otra informacin descriptiva disponible b. Ejemplo: 50 000 ufc / ml bacilos sin fermentacin de lactora 2) Informe final a. Reportar la cantidad de crecimiento, el nombre completo del organismo y los resultados de la prueba de susceptibilidad b. No abrevie los nombres del organismo c. Staphylococcus sp. Coagulasa-negativos distintas a S. saprophyticus: reportar "X cantidad de especies de Staphylococcus coagulasa-negativos - no S. saprophyticus " 3) Ejemplo: 60 000 ufc/ml coagulasa-negativo Staphylococcus sp.- no S. saprophyticus a. Levaduras: reportar "X cantidad de levaduras" Ejemplo: 25 000 ufc / ml de levadura b. Si los contaminantes estn presentes, enlistar cantidad e identificacin limitada (vase el Procedimiento seccin anterior) 10. NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO: A. No cultivar: puntas de catter de Foley sedimento de orina muestra anulada u orina cateterizada anaerbicamente La orina de una bolsa de recoleccin de Foley B. La mayora de los casos de cistitis no complicada son tratados empricamente y no requieren de cultivo. LIMITACIONES: A. sexual B. La piuria estril puede deberse a causas no infecciosas, el tratamiento de los pacientes antes de la recogida de muestras, orina demasiado diluida, uretritis en lugar de la cistitis o infeccin por organismos no detectables por los mtodos habituales (por ejemplo, especies de Mycobacterium) C. Cultivos falsos positivos pueden ocurrir cuando la orina no se recoge, transporta o almacena correctamente y organismos originalmente presentes en pequeas cantidades se multiplican hasta niveles de recuento considerables. 12. REFERENCIAS: A. Forbes, BA, Sahm DF, COMO Weissfeld, eds. 2002. Infecciones del Tracto Urinario en Bailey y de Diagnstico Scott Microbiologa, 11 ed. P.927-938. B. Isada, CM, et al, eds. 2003. Enfermedades y Sndromes Organismos de Compensacin de la enfermedad infecciosa Lexi Manual, 5 ed. P.329-331. C. https://docs.google.com/viewer?a=v&pid=explorer&chrome=true&srcid=1J5VfvxDuliDhDKgwYbzx8F9NS xqw3gb8LNw0l5MXuZx_RaLx68UxTppXRuBc&hl=en Los sntomas de la infeccin del tracto urinario pueden coincidir con los de enfermedades de transmisin

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