BIOSENALIZACION 12.1. Mecanismos moleculares de transduccién de sefial 422 12.2 Canales iénicos de compuerta regulada 425 12.3 Enzimas receptores 429 12.4 Receptores acoplados a proteina G y segundos mensajeros 435 12.5 Proteinas de armazén polivalentes ybalsas de membrana 448 12.6 Sefalizacién en microorganismos y plantas 452 12.7 Transduccién sensorial en la vista, el olfato y el gusto 456 12.8 Regulacién de la transcripcién por hormonas esteroideas 465 12.9 Regulacién del ciclo celular por proteinas quinasa 466 12.10 Oncogenes, genes supresores de tumores y muerte celular programada 471 Cuando abordé por primera vez el estudio de la accién, hormonal, hace unos 25 aftos, habia un amplio ‘sentimiento entre los bi6logos de que la accién hormonal No se podia estudiar de una manera significativa en ‘usencia de una estructura celular organizada. Sin ‘embargo, a rflexionar sobre la historia de la bioquimica, ‘me pareci6 que existia una posibilidad real de que las hhormonas pudieran actuar a nive! molecular. Ear W. Sutherland, Canterencia Nobel, 1971 Licazite eas ces para reir yactar en res- puesta a sefiaes que provienen de mas alld de la membrana plasmdtica es fundamental para la vida Las céluls bacterianas reelben informacién constante de los receptores de membrana ‘que analizan del medio que les rodea el pH, la fuerua vsndtica, Ja disponibilidad de alimento, oxigeno y lz y la presencia de Capitulo sustancias nocivas, depredadores o competidores para el all- mento, Estas sefales provocan respuestas apropiadas, tales ‘como el movimiento hacia una fuente de alimento o el ale- amiento de sustancins txicas la formacion de esporas ltentes ‘en un medio carente de nutrientes, En organismos pluricelula- 1s, células con diferentes funciones intercambian una amplia variedad de sefiales. Las células Vegetales responden a hormo- ras de crecimiento ¥ a variaciones de la luz solar. Las cétulas ‘animales intereambian informacion sobre su localizacién co- ‘recta en un emibrién en desarrollo as concentraciones de io- nes y glucosa en los Muidos extracelulares ¥ las actividades ‘metabjlicasinterdependientes que tienen lugar en diferentes teidos. En todos estos casos, la seal representa informacin ‘que es detectada por un receptor especifico y se convierte en. luna respuesta celular en la que siempre interviene un proceso ‘quimico, Esta conwversin de informacién en cambio quitico, llamada transduceién de sefial, es una propiedad universal de las elas A pesar de que el miimero de sefales biol6gicas es grande: (Tabia 12-1), como lo es la variedad de respuestas biolégicas a dichas sefales, los organistos usan solo unos pocas mecants- mos conservados evolutivamente para detectar la sefales ex- tracelulares y transducérias en cambios intracelulares. En este capitulo examinamos algunos ejemplos de las principales clases de mecanismos de sefalizacién y veremos edo son in-422, Capitulo 12 Blosealizacién tegrados en funciones bioldgicas especificas tales como la transmision de seftaes nerviosas; respuestas a hormonas ¥ factores de crecimiento; fos sentidos de a vista, ollato y gusto y-el control del cielo celular. A menudo, el resultado fsa de ‘una via de sefalizacin es la fosforitacién de uns pocas protet- nas diana especificas, lo que modifica sus actividades y, por tanto, las actividades de la célula. A lo largo de muestra expo- sicién pondremos énfasis en la conservacién de mecanismos fundamentales para la transduccién de seftales biokigicas y la adaplacidn de estos mecanismos bsicos a una gran variedad de vias de sefalizacion, 12.1 Mecanismos moleculares de transduccién de sefial 1s transtducclones de sefal son extraordinariamente especifi- casy primorosamente sensibes. La especifieidad se consigue por complementariedad molecular precisa entre las molécras sefial y receptor (Pig. 12-1a), en la que intervienen ef mismo tipo de fuerzas débiles (no covalentes) que tienen lugar en las Iinteracciones encima-sustrato y antigeno-anticuerpo. Los or- sgandemos multicehulares tienen ur nivel de especificdad adi- ional ya que los receptores para una sefial determinada, 0 las danas intracelulares de una determinada via de seal, s6lo es- tin presentes en ciertos tipos de células. Asi, a hormona hibe- radora de tirotropina desenisadena respuestas en ls células de 1a hipdfisis anterior pezo no en los hepatocitos, que carecen de receptores para esta hormmona. La adrenalina altera el me- {ubolismo del glucdgeno en hepatocitos perv no en eritrocitas; cmeste caso ambos tipos eclulres tienen receptores para esta Ihormona, pero mientras que los hepstoritos poseen ghuctigeno ‘yel encima metabolizador de glucdgeno que se estinwula por ‘adrenalin, los eritrocitos no conticnen mi el uno ni e otro (a) Bepecificidad ‘La moléeula seta se acopla ‘ao sitio de union en su x z receptor complementario: ‘otras sefialen no se acoplan. a as | a bhhbAtdh ‘Tres nctores explica la extraordinaria sensibilidad de los transductores de seftal: la elevada afinidad de los receptores por las moléculas sefal, la cooperatividad (a menudo pero no siempre) en la interaccion entre el ligando y el receptor y la amplificacin de la seal por cascadas enaiméticas, La afinidad ‘entre la seal (igando) y el receptor puede expresarse como la constante de disociacion Ky, a merado 10~"" so menos, Jo que ‘quiere decir que el receptor puede detectar concentraciones p- comolares de una molécula sefa. Las interacciones entre ell gando y el receptor pueden ser cuantificadas por el andlisis de ‘Seatchard, el cual proporciona una medida cuantitativa dela ‘afinidad (K,) y el nimero de sitios de unién a ligando en una muestra de receptor (Recundro 12-1). La cooperatividad en lus interacciones entre el ligando y ‘elreceptor acarrea grandes cambios en la activacion del recep tor con pequefas cambios en la concentracién de ligando (re- ceuérdese el efecto de la cooperatividad en la unién de oxigen ala hemoglobina; véase Fig, 5-12). La amplifieacién por eas- ‘cadas enzimatieas tiene lugar cuando tin enzima asociado ‘con un receptor de seal se activa y, a su vez, catliza la activa- cin de muchas moléeulas de un segundo encima, cada una de Jas etules activa muchas moléculas de un tercer enim, y ast ssucesivamente (Fig, 12-1b), Estas cascadas dan Ingar 3 arpli- Sieaciones de varios érdenes de magnitud en milisegundos, ‘La sensibilidad de los sistemas receplores esta sujeta a smodificaciGn, Cuando una sefal esta presente continuamente, se produce una desenstbilizacion del sistema receptor (Fig. 12-1¢); cuando el estima dismvinuye por debajo de un deter~ rminado umbral, ! sistema se vuelve sensible de mucvo. Piense elector en lo que sucede a su sistema de transduccién visual ‘cuando pasa desde un sitio ihuminado con luz del sol fuerte a luna habitaciin escura o de la oscuridadt ala hus. Un tltimo rasgo notable de los sistemas de transduecin do seftal esl imtegraetén (Fig. 12-Id), lt capacidad del sisterna (d) Integracion Cound do eileen Seal Seal toc openioeenu : racer sae al como eoncetrecin de un _-- Sagas mensaje Xa Petes e erent Vy Tpsttadoregelaor provione Sein intrmechen tered 1 iy Sante erp, TWIe ve Kem Rta Va i Respuesta FIGURA 12-1. Cuatro caractersticas de los sistemas de tramsduccin de seal.= EYL ere ey El andlisis de Scatchard cuantifica la interaccién receptor-ligando Las accionescelulares de una hormona empiezan cuando la hhormena (igando, L) se une espectic receptor proteico (R) en su eélla diana. La unin esta pro lucia por interncciones no cavalentes (puertes de bir eno, interacciones hidrofsbcas yelectrostaticas) entre las superficies complemeniarias del ligand y del receptor. La feraeciin receptor.igando produce un cambio de confor én que altera la actividad bikigica del recep Puede ser un encima, un encima regulador, un canal nico 0 ‘un regular de la expresin génica 1a unida receptor ligand est descrta por la ecuactin Rey D. RL aceplor Ligands Campane ipno y fuertemente a su Esta uni6n, como lade un eniima a su sustrato, depende de las concentraciones de los componentes que interaccionan y puede ser descrita por una constante de equilibria: R +1 RL Receptor” Ligands Ey Compe eeptergnnds hes fa Et = Ure donde K, es la constante de asociacién y de disociacin, Como en el easo de la unidn enimna-sustrato, la unig, receptor-ligando es saturable, Cuanto mds ligando se aiade una cantidad fja de receptor, una fraccion creciente de rmoléculas de receptor es ocupada por ligand (Fig. 1a). Una medida aproximada de la afinidad receptor ligando viene dada por la concentracién de ligando necesaria para obtener la mitad de saturacién del receptor. El andlisis de Seat: ‘chard ce la union receptorligando permite el edleulo tanto de la constante de disoeiaciéin X como del nimero de sitios de unisn al receptor en una preparacién dada. Cuando ta unin ha aleanzado e! equilibrio, el nimero total de sitios de lunion postbles, Baa, €8 igual al riimero de sitios no ocupa: dos, representado por [R, mas el mimero de sitios acupadtos ‘ unidas a ligando, IRL}. Bs decir, Bras = 8] + (RL. EL.nd mero de sitios no ligados puede expresarse en funcidn del ‘mdimero total de sitios mers ls sitios ocupados:[R] = By = [RL]. La expresin de equilibeio puede escribirse ahora eS Bins — RED Reordeniindola para obtener la proporcién entre ligando ‘unido a receptor y ligando Wee (no unido), tenemos [Wnidol _ {RL ibrel KByoig~ (RL) 1 1 (Bras ~ (RLY) Esta forma de interseccidn-pendiente de la ecuacién muestra ue una grafic de (igando unio Migando libre frente a ‘gando unido} deberia dar ure nea recta con una pendiente de ~K, (0 ~V/K,) y una interseccién con ta abseisa de Bs el mimero total dle sitios de unin (Fig. 1b) Las interac nes hormon-ligando tienen tipieamente valores de Ky entre 10~y 10, lo que corresponde una unis muy fuerte Bl andlisis de Scatchard es seguro para casos simples, ‘pero al igual que la grea ce Lineweaver-Burk para enzimas, tum el receptor et una poten buts, a ren rusia dervaones dela realidad 3 lac total { isan Seats i E z Fiala tapectca Hormona total atadia, 1) + RL) Oo) Hormona ligada, [RL FIGURA 1. Anilisis de Scatchard de una interacciin receptor anda, Concerraciones diferentes de un ligand ) marcado rac tivamente, una hormona, por ejemplo, se aaden a una cantidad fija de receptor (Ry se determin la raccidn de hormona fads al receptor separando el complejo receptor hormona (RL) de la hor mona libee. (a) Una grifica de [RL| frente ala hormana total aia ida, 1) + IRL, es hperbstica, aumentando hacia un maximo de IRL] a medida que se saturan los sits de receptor, Pra coniolar la presencia de sitios no saturables inespeciticos (por ejemplo, las hormonas icosanoides se unen de maners inespeciica ala bicapa lipitical, en una serie separada de experimentos de fijaciin se aftade un gran exceso de hormona no marcads jurto con la s0- lucién eiluida de la hoemona marcads, Las moéculas sin marear ‘compen com las marcas para unise especticamente asi s¥- turable del receptor, pero no par la fijacién inespecifica. Se ob tiene el verdadero valor dela faci espectficarestando la fijacin inespecifica de la fijacion toa. (B) Una grfica lineal de RLV) frente a IRL da Ka y Pa del complejo receptorhormana. Comps tense estas grificas con las de Vo frente a [Sy WV frente a 1S} de tun complejo enzimastatrato vfanve Fig. 612, Recuadro 6-1) ee _____