Sunteți pe pagina 1din 11

IMUNOLOGIE CURS I I. INTRODUCERE A. Definiie B. Imunitate nnscut C. Imunitate dobndit II. ORGANELE LIMFATICE A.

Centrale a) Mduva osoas i ficatul b) Timusul B. Periferice a) Ganglionul limfatic b) Splina c) Alte esuturi limfatice (GALT, BALT, SALT) III. CELULELE IMUNE A. Limfocitele a) T b) B c) Celulele killer B. Celule prezentatoare de Ag a) Sistemul mononuclear-fagocitic b) Celulele dendritice, alte celule C. Celule efectoare IV. IMUNOGLOBULINELE V. SISTEMUL COMPLEMENTULUI I. INTRODUCERE

Imunitatea reprezint capacitatea organismului de a se apra n faa agresiunii agenilor externi (termenul i are originea n limba latin, unde immunitas nseamn "ferit de"). Pentru a putea ndeplini aceast proprietate, organismul trebuie s recunoasc structurile proprii, considerate "self" i s le deosebeasc de cele strine, denumite "nonself", reprezentate n principal de microorganisme, macromolecule, dar i de celule tumorale sau esuturi transplantate. Mecanismele de aprare ale organismului pot fi mprite n dou mari categorii: nnscute i dobndite, care interacioneaz ntre ele. Imunitatea nnscut (nespecific) este prezent la toi indivizii normali, fiind prima barier n calea agresiunilor externe. Modul su de aciune este nespecific, acelai indiferent de natura agentului strin. Mecanismele imunitii nnscute se comport identic i n cazul unei reexpuneri, nefiind dotate cu memorie imunologic. n aceast categorie sunt incluse: barierele mecanice (reprezentate de tegumente i mucoase gastrointestinal, a tractului respirator i a celui urogenital), produii de secreie (mucusul, secreia gastric acid, enzimele digestive, lizozimul din lacrimi i mucusul respirator, secreia glandelor sebacee, secreia acid vaginal, ph-ul urinar, etc.), unele proteine din snge (sistemul complementului, reactanii de faz acut, citokinele) i sistemul mononuclear fagocitic (care include neutrofilele i monocitele din snge i macrofagele din esuturi). La acestea se adaug alte mecanisme care contribuie la epurarea agenilor exogeni, cum ar fi: clearence-ul muco-ciliar, tusea, strnutul, vrsturile, peristaltice intestinal. Inflamaia reprezint, de asemenea, un mijloc important de aprare nespecific, macrofagele i limfocitele polimorfonucleare (PMN) fiind atrase la locul infeciei de produii eliberai de organismele infectante i esuturile necrozante. Cnd mijloacele de aprare nespecifice sunt depite, agentul ptrunde i se dezvolt n esuturile gazdei, producnd intrarea n aciune a unui sistem de aprare specific, mult mai eficace. Imunitatea dobndit (specific) se dezvolt pe msur ce organismul interacioneaz cu diferii ageni externi, interaciune ce poart numele de eveniment imunizant. La o nou expunere la agentul respectiv, organismul va reaciona cu mai mult promptitudine, celulele implicate n acest proces fiind dotate cu memorie imunologic. Imunitatea dobndit poate fi natural (ctigat n mod pasiv prin transfer transplacentar, sau n mod activ prin contactul cu antigenul) i artificial (care la rndul ei poate fi obinut pasiv prin seroterapie sau activ prin vaccinare).

Totalitatea organelor, celulelor i moleculelor implicate n apariia imunitii dobndite alctuiesc sistemul imun. II. ORGANELE LIMFATICE A. ORGANELE LIMFATICE PRIMARE sunt organele n care are loc diferenierea i maturarea limfocitelor. Sunt considerate organe limfatice primare mduva osoas i ficatul, responsabile de diferenierea limfocitelor B i timusul, sediul de difereniere al limfocitelor T. 1. Mduva osoas i ficatul: Mduva osoas conine esutul hematopoetic i reprezint locul de origine al tuturor celulelorsanguine la adult. Ea include i precursorii celulelor limfatice, seria limfoid reprezentnd 515%. Diferenierea celulei stem n elemente limfoide se face n trepte succesive, fenomenul fiind independent de existena stimulrii antigenice, mduva osoas neavnd de altfel ci aferente i modaliti de captare i prelucrare a antigenului. Proliferarea i maturarea precursorilor celulari din mduva osoas se face sub influena unor citokine numite factori de stimulare ai coloniilor (colony-stimulating factors). Ei sunt sintetizai de celule medulare stromale i de macrofagele din mduv i creeaz un mediu local favorabil hematopoezei. Mduva osoas mai conine i un procent variabil (ntre 5 i 15%) de plasmocite, formate la nivelul organelor limfatice periferice ca o consecin a stimulrii limfocitelor B de ctre Ag. Mduva osoas reprezint locul unde se desfoar post-natal diferenierea limfocitelor numite B. La om, prenatal, acest proces se desfoar n ficat, n timp ce la psri el are loc ntr-un organ limfoepitelial numit "bursa lui Fabricius". De aici a provenit de altfel iniial i denumirea acestor limfocite -Bbursodependente. Ulterior, cnd s-a vzut c procesul se desfoar la om n mduv "bone marrow", denumirea acestui tip de limfocite s-a consolidat. De menionat c limfocite provenind din mduv populeaz i timusul (mai ales corticala) unde se pot diferenia n limfocite T. Ficatul reprezint doar sediul primar, precoce de hematopoez, fiind locul prenatal de difereniere i maturare a limfocitelor B. La adult, doar n unele circumstane patologice (cum ar fi policitemia vera) ficatul i reia funcia hematoformatoare. 2. Timusul: Timusul este un organ limfoepitelial care apare devreme n embriogenez, crete n perioada intrauterin i atinge o dezvoltare complet la natere, pentru ca dup pubertate s sufere un proces de involuie, probabil indus hormonal prin corticoizi i androgeni. Situat n mediastinul anterior, timusul este format din 2 lobi, acoperii de o capsul fibroas, fiecare lob este organizat n lobuli, separai ntre ei prin trabecule de esut conjunctiv. Lobulii la rndul lor, prezint o zon periferic (corticala) i o zon central (medulara). n cortical se gsesc predominent celule limfocitare mari, imature care i au originea n mduva osoas (n perioada adult), caracterizate printr-o vie activitate de multiplicare. Pe msur ce migreaz spre medular prolifereaz i sufer un proces de maturaie. n medular se gsesc predominent celule epiteliale reticulare ce contin n citoplasm granulaii bogate n hormoni timici, unele celule fiind aglomerate n grupuri constituind corpii Hassall; tot n medular se gsesc limfocite mici, mature, asemntoare celor din sngele periferic. n esen, participare timusului la meninerea homeostaziei imune privete dou aspecte fundamentale: a. realizeaz maturaia precursorilor limfocitari T; b. asigur distribuia limfocitelor T ctre anumite arii ale organelor limfatice periferice, numite zone timodependente. Aceste zone sunt: zonele paracorticale ale ganglionilor limfatici i zonele periarteriolare din pulpa alb a splinei. Acest lucru este realizat graie unor receptori de tip "homing" pe care limfocitele T i achiziioneaz pe tot parcursul lor intratimic. Formarea limfocitelor T mature este rezultatul unui ir complex de etape de proliferare, difereniere i maturare, care implic exprimarea la suprafaa celulelor a unor receptori eseniali n recunoaterea antigenelor (TCR, CD4, CD8), n activarea metabolic limfocitar (CD28, CD45) sau n adeziunea intercelular ca (CD2, LFA1 etc.). Proliferarea este controlat de citokinele eliberate local, iar diferenierea apare n urma contactului limfocitelor cu celulele stromei timusului, contact ce asigur generarea unor celule imunocompetente i departajarea funcional pe liniile helper, citotoxic, supresoare i contrasupresoare. ns, dup ce limfocitele T exprim pe suprafaa lor aceti receptori, marea majoritate mor in situ prin apoptoz = moarte celular programat. Acestea reprezint aa numitul contingent distrus, distrugerea lui mpiedicnd apariia procesului de autoimunitate. Puinele limfocite rmase viabile

(contingentul posttimic), trec n circulaie dup un pasaj prin medular. Distrucia celular prin apoptoz i nu prin necroz nu las s ptrund n mediul extracelular diversele debriuri celulare care ar putea declana un rspuns local inflamator, protejnd astfel structura i funcia acestui organ. n plus, celulele apoptotice exprim pe suprafaa lor receptori care permit recunoaterea i ingestia lor de ctre macrofage i epurarea lor rapid. B. ORGANELE LIMFATICE PERIFERICE reprezint sediul unde se iniiaz i se desfoar rspunsul imun. n aceast categorie sunt incluse att organe capsulate ca splina i ganglionii limfatici, ct i esuturile limfoide difuze, asociate tubului digestiv (notat GALT - Gut Associated Lymphoid Tissue), cilor respiratorii (BALT - Branchial Associated Lymphoid Tissue) sau esutului cutanat (SALT - Skin Associated Lymphoid Tissue). 1. Splina este cel mai mare organ limfatic; ea este delimitat la exterior de o capsul ce conine fibre musculare netede, din care se desprind trabecule ce ptrund n parenchim i compartimenteaz organul. n parenchimul splenic se disting dou sectoare, diferite att ca structur ct i ca funcie: -pulpa roie situat la periferia lobulilor, alctuit predominent din macrofage cu rol n fagocitarea hematiilor senescente i care aparine sistemului mononuclear-fagocitic; -pulpa alb situat n jurul arteriolei centrale care conine esut limfoid numit PALS Peiarteriolar Lymphoid Sheath); acesta la rndul ei are 2 zone, una strinc periarteriolar, ce conine n special limfocite T i formeaz (cum spuneam mai devreme) zona timodependent a splinei i alta la periferia PALS ce conine aproape exclusiv limfocite B, organizate sub form de foliculi - zona timoindependent. Aceti foliculi pot fi primari sau secundari, formai din celule B activate antigenic, caz n care poart denumirea de centrii germinativi. ntre pulpa roie i cea alb, la periferia foliculilor limfatici, se gsesc sinusurile marginale, unde exist att limfocite T ct i B, precum i magrofage i celule dendritice, absolut necesare (cum vom vedea n continuare) pentru cooperarea celular din cadrul rspunsului imun. Funcia imunologic a splinei se exprim n special n generarea unor rspunsuri imune fa de Ag aflate n circulaia sistemic. Rolul important pe care l joac splina n aprarea antiinfecioas este demonstrat de faptul c la bolnavii splenectomizai apar infecii severe, mai ales cu germeni incapsulai (ca pneumococii i meningococci). 2. Ganglionul limfatic constituie un adevrat filtru situat pe traiectul cilor limfatice. El este de asemenea delimitat de o capsul fibroas ce trimite spre interior septuri fibroase incomplete. Histologic, la nivelul ganglionului limfatic se disting trei zone: - zona cortical - situat la periferie, alctuit din limfocite B aranjate sub form de foliculi primari sau secundari (centrii germinativi), cu o structur asemntoare omonimilor lor din PALS. Foliculii constituie zona timoindependent sau bursodependent. - zona paracortical - situat sub cea cortical conine predominant limfocite T (din acest motiv purtnd denumirea de zon timodependent), precum i un mare numr de macrofage. - zona medular - situat parahilar i alctuit din vase sanguine, sinusuri limfatice, limfocite B, T, plasmocite macrofage i celule dendritice. Dup stimularea antigenic, limfocitele T i B migreaz unele spre altele, pierzndu-i aceast repartiie anatomic. Limfocitele T activate prsesc ganglionul limfatic i ptrund n circulaia sistemic, iar limfocitele B activate migreaz spre centrii germinativi unde sintetizeaz anticorpi. O atenie special este acordat segmentului vascular denumit venul postcapilar situat paracortical, ale crei celule endoteliale sunt cilindrice i nalte i poart denumirea de High Endothelial Venules - HEV. Aceast zon cu celule cilindrice este locul de trecere al limfocitelor din circulaia sanguin n ganglion. Ele au pe suprafaa lor molecule de adeziune numai pentru limfocite, fiind neutre fa de alte celule circulante. 3. Alte esuturi limfatice Zone de esut limfatic exist n submucoasa unor poriuni din tractul digestiv (GALT) sau respirator (BALT), precum i din tegument (SALT). n unele teritorii aceste colecii sunt suficient de mari pentru a fi individualizate. Astfel, la nivelul tubului digestiv exist n jurul faringelui inelul limfatic al lui Waldayer, compus din amigdalele faringiene, palatine, linguale, iar la nivelul ileonului se gsesc plcile Peyer. Acestor structuri li se asociaz apendicele. Colecii similare de esut limfatic se gsesc i la nivelul arborelui bronic (mai ales la bifurcaia bronhiilor mijloci sau la jonciunea bronho-alveolar) i n tegument. Importana acestui sistem imun rezid nu numai din faptul c el reprezint un mijloc eficient de aprare la nivelul principalelor pori de intrare ale organismului, controlnd contactul cu o multitudine de

Ag cu poart de intrare digestiv, respiratorie i cutanat, ci i din faptul c ele sunt organe limfopoetice importante i pot fi, la adult, surse de limfocite B sau T. III. CELULELE SISTEMULUI IMUN Celulele sistemului imun sunt: limfocitele, celulele prezentatoare de Ag (CPA) i celulele efectoare A. LIMFOCITELE Limfocitele reprezint componentul celular major al sistemului imun. Ele constituie o categorie de celule ce grupeaz mai multe populaii celulare similare morfologic, dar diferite din punct de vedere funcional. Limfocitele provin din organele limfatice primare (timus, mduva osoas i, n perioada intrauterin, ficatul). O parte din aceste celule trec n circulaia periferic i migreaz ctre organele limfatice periferice. Restul rmn pentru o perioad n circulaia general ca limfocite circulante unde totalizeaz aproximativ 25% din elementele figurate albe. ntre cele dou sectoare exist o recirculaie permanet, asigurnd o supraveghere imun competent i continu folosind un numr relativ mic de celule. Recirculaia i migraia limfocitelor este reglat de moleculele de adeziune de pe suprafaa lor, ce corespund unor alte molecule de adeziune de pe suprafaa celulelor endoteliale sau matricei extracelulare, precum i de chemokinele secretate de la nivel tisular. Durata de via a limfocitelor n sngele periferic variaz ntre 1 i 300 de zile, existnd i populaii limfocitare care au o durat de via lung, de luni sau chiar ani, ele recirculnd n permanen ntre cele dou sectoare ca celule cu memorie. Limfocitele sunt singurele celule din organism capabile s recunoasc specific diferii determinani antigenici, fiind astfel responsabile de dou dintre proprietile fundamentale ale rspunsului imun, specificitate i memorie. Din punct de vedere morfologic, limfocitele naive, care nu au fost stimulate antigenic, au un diametru cuprins ntre 8 i 10 m, un nucleu mare, cu heterocromatin dens i citoplasm puin, ce conine un numr redus de mitocondrii, lizozomi i ribozomi, aflate n stare de repaus sau n faza G 0 a ciclului celular. Dup contactul cu Ag, celulele intr n faza G1 a ciclului celular i i schimb caracteristicile morfologice (cresc n dimensiune, ajungnd la un diametru de 10 -12 m, citoplasma e mai bine reprezentat i conine mai multe organite celulare). Marea heterogenitate funcional a limfocitelor este legat de expresia anumitor receptori de suprafa. Unii dintre aceti receptori sunt exprimai numai n anumite stadii de difereniere sau activare, pe perioade scurte de timp, pe cnd alii sunt permaneni i caracteristici diverselor linii celulare limfocitare. Dup mai multe denumiri utilizate pentru a desemna aceti receptori, s-a stabilit utilizarea indicativului CD (de la cluster of differentation), n prezent cunoscndu-se aproximativ 250 CD. 1. Limfocitele T La adultul sntos celulele T reprezint 60-80% din totalul limfocitelor, cea mai mare parte avnd o durat de via lung, fiind celule intens recirculate. La microscopia optic diferenierea dintre limfocitele T i B este practic imposibil. Prin prezena pe suprafaa lor a unor receptori caracteristici, este posibil ns identificarea lor. Care sunt acetia? 1. Receptorii limfocitului T, notai TCR (T cell receptor). Acetia au proprietatea fundamental de a recunoate i a lega Ag. Sunt transmembranari i au o structur asemntoare poriunii Fab a moleculei de Ig, fiind alctuii din 2 lanuri diferite de polipeptide, legate ntre ele prin puni disulfidice. Se cunosc 2 tipuri de TCR: TCR1, primul care apare n timpul vieii intrauterine, compus din 2 lanuri i i TCR2 prezent pe suprafaa a 95% din limfocitele T, alctuit din lanuri polipeptidice notate i . Ambele tipuri de receptori au un domeniu variabil, n poriunea NH2-terminal, i unele constante. Aceti receptori sunt legai de membrana limfocitelor T prin intermediul unui alt grup de 5 lanuri polipeptidice notate CD3 i care au rolul de a transmite semnalul activator n interiorul celulei, formndu-se astfel un complex TCR-CD3 care are proprietatea de a se lega att de Ag cu care vine n contact celula, ct i de moleculele Ag de histocompatibilitate. Astfel, limfocitele T nu recunosc Ag native solubile (recunoscute de limfocitele B i Ac) ci numai pe acelea cuplate cu MHC, fiind vorba de o recunoatere asociativ. 2. CD2 - unul dintre primii markeri de suprafa, prin care celula fixeaz n jurul ei un numr de eritrocite de oaie cu formarea unor rozete (metoda este nc folosit pentru pentru identificarea i separarea limfocitelor T). E prezent pe toate tipurile de limfocite T i pe NK. Are rol n aderarea

limfocitelor T la APC sau celulele int (prin legarea de contraligandul su LFA3) i rol accesor n activarea celular. 3. CD4 glicoprotein de suprafa situat predominent pe suprafaa celulelor Thelper (definitorie pentru aceast clas de celule). CD4 reprezint receptorul T pentru moleculele MHC de tip II. Stabilirea legturii ntre limfocitul T CD4+ i APC prin intermediul moleculei de MHC II contribuie esenial la recunoaterea Ag. 4. CD8 tot de natur glicoproteic, distribuit pe membrana limfocitelor T supresoare, contrasupresoare i citotoxice. CD8 interacioneaz cu moleculele MHC I. 5. CD5 se gsesc pe toate limfocitele T i pe un subset de limfocite B. 6. CD28 prezent pe 95% dintre limfocitele T CD4+ i 50% din cele CD8+ are rol n activarea celular, precum i rol de molecul de adeziune. 7. MHC I i II 8. Receptori limfocitari T cu funcie n adeziunea celular Indiferent de particulariti, funciile efectorii ale diverselor celule imune implic n mod obligatoriu adeziunea intercelular, proces cruia i se acord n ultima vreme o atenie tot mai mare. Adeziunea celular este implicat att n funciile efectorii imune ct i n repartiia specific a diverselor tipuri de limfocite n anumite arii ale sistemului imun. Principalii receptori limfocitari implicai n aderarea intercelular LFA (Ag asociat funciei limfocitare), VLA , CD2 i CD4 pentru limfocitele Th i CD8 pentru limfocilele Tc. Astfel, moleculele de adeziune au rol n: -respingerea forelor electrostatice de respingere dintre 2 celule -realizarea unui contact prelungit ntre celulele care urmeaz s coopereze -favorizarea recunoaterii Ag -rol accesor n activarea celular. Clasificarea limfocitelor T se face dup funcia pe care o ndeplinesc, precum i dup tipul markerilor de suprafa. Se deosebesc aslfel mai multe tipuri de celule T, cele mai importante fiind: a. Limfocitele T ajuttoare sau helper - sunt CD4+ i recunosc Ag specifice asociate cu Ag HLA II. - unele limfocite Th colaboreaz cu limfocitele B i macrofagele n inducerea rspunsului imun umoral, iar altele colaboreaz cu alte celule T la producerea limfocitelor Tc intervenind n rspunsul imun celular. - exist 5 subtipuri, 2 fiind mai bine cunoscute: Th1 care intervin n rspunsul imun celular prin stimularea dezvoltrii limfocitelor Tc, creterea activitii macrofagice. Limfocitele Th2 care intervin n procesele atopice, coordonnd secreia de IgE, IgA i IgG1, induc proliferarea eozinofilelor i a mastocitelor. Ele i exercit aciune prin sinteza unor proteine numite citokine. Astfel, diferenierea lor nu se face pe criterii fenotipice ci n funcie de setul de IL pe care l elaboreaz. De ex. LTh1 elaboreaz: IL-2, IL-3, IFN-, limfotoxin, TNF- i . LTh2 sintetizeaz: IL-4, IL-5, IL-6. ntre cele 2 subtipuri exist inter-relaii stimulatoare i inhibitoare. IFN- (secretat de Th1) deprim maturarea Th2 cu consecine funcionale. Th2 (prin IL-10) suprim producia de Th1 acionnd ca o celul supresoare. b. Limfocite T supresoare - sunt limfocite reglatoare care diminu att rspunsul imun umoral ct i pe cel celular - majoritatea sunt celule CD8+ - formarea lor din din precursori este urmarea contactului cu Ag, fr implicarea MHC. - recunosc determinanii Ag, elaboreaz factori supresori solubili cu funcie de contrareceptori blocani - la rndul lor sunt supuse controlului inhibitor al limfocitelor T contrasupresoare. - prin stimulare Ts de ctre Ag proprii (self) este prevenit procesul de autoimunitate. c. Limfocitele T citotoxice - sunt responsabile de citotoxicitatea mediat celular; ea este implicat n aprarea antiviral, antitumoral i respingerea grefelor. - provoac liza celulelor care poart pe suprafaa lor Ag - au determinani antigenici de tip CD8+ i mai puin CD4+ - pentru ca Ag s fie recunoscut de ctre limfocitele Tc, el trebuie s fie asociat cu Ag MHC I, similar celui al limfocitelor Tc. Acest fenomen poart numele de restricie HLA. d. Limfocite T inductoare - sunt CD4+, i recunosc Ag asociat cu MHC II - stimuleaz activitatea altor limfocite T (helper, suppresor, citotoxice) e. Limfocitele T cu memorie - sunt formate n timpul rspunsului imun primar, sunt CD4+

-au o via lung, de peste 40 ani, dar perioada lor activ este de numai 10-15 ani. Se poate astfel observa c limfocitele T joac un rol esenial n reglarea rspunsului imun, justificnd afirmaia potrivit creia "Limfocitul T este dirijorul orchestrei imunologice" 2. Limfocitele B Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor circulante; au o durat de via scurt (cteva zile). Ele sunt precursorii celulelor care sintetizeaz Ac, plasmocitele. n diferenierea lor se disting 2 etape: -una independent de Ag, care se desfoar la om, cum am vzut, prenatal n ficat i apoi n MO (trecnd prin mai multe etape celule pre-B, caracterizate prin prezena n citoplasm a lanurilor , celule B imature ce prezint pe suprafa molecule de IgM). Pn la contactul cu Ag, limfocitele B sunt considerate inocente, virgine. Contactul cu Ag schimb tipul receptorilor. -etap dependent de Ag, cnd n urma ntlnirii cu acesta sufer un proces de transformare i proliferare, amplificat i de IL secretate de limfocitele Th, i devin plasmocite, capabile s sintetizeze Ac. Pe suprafaa limfocitelor B se gsesc mai multe tipuri de receptori: 1. receptori specifici pentru Ag, cu structur Ig, fixai de membrana limfocitar prin captul Fc i lsnd liber extremitatea de cuplare cu Ag, Fab. Se mai numesc BCR (B cell receptor). Pot funciona ca receptori IgM, IgD i mai puin celelalte clase de Ig. Aceti receptori sunt distribuii neomogen, dar datorit proprietilor fluide ale membranei celulare ei sufer o rearanjare i redistribuie permanet. 2. receptori pentru complement 3. Ag MHC I i II 4. CD5 (limfocitele BCD5+ se caracterizeazprintr-o mare capacitate de a produce IL-10), CD10 sunt prezeni numai pe celulele B imature i pe celulele maligne ale bolnavilor cu LLA, cnd poart denumirea de de Ag cALLA) 5. receptori cu rol n adeziunea celular (LFA1) i alii. 3. Celule natural killer (NK) Celulele NK reprezint un subset de limfocite care au capacitatea de a omor celule infectate i celule care i-au pierdut moleculele MHC I. De asemenea, celulele NK stimuleaz macrofagele s distrug microbii fagocitai. Termenul de natural killer provine de la faptul c aceste celule i exercit funcia citotoxic fr a necesita o activarea prealabil. De asemenea, spre deosebire de limfocitele Tc, celulele NK nu i recunosc specific inta, similitudinea ntre Ag MHC de pe cele 2 tipuri de celule nefiind necesar. Activitate lor nu este deci supus fenomenului de restriciei HLA. D.p.d.v. morfologic, aceste celule aparin unei clase de limfocite numite limfocite mari granulare, deoarece au numeroase granule citoplasmatice. Ele sunt limfocite care nu prezint markeri celulari caracteristici limfocitelor T sau B. Au ns markeri de suprafa care le contureaz identitatea, cum ar fi CD56, cu rol de molecul de adeziune. Sunt prezente de la natere, nefiind induse de agresiuni imune. Se formeaz din precursori medulari i se gsesc n sngele periferic i splin, i n numr mic, n interstiiul pulmonar, mucoasa intestinal i ficat. Ganglionul limfatic, plcile Peyer, amigdalele i timusul nu au astfel de celule. De asemenea sunt lipsite de receptori convenionali pentru Ag (TCR, BCR). Recunoaterea se realizeaz prin intermediul NK-R (receptorul celulei NK) care are dou componente: un receptor activator care se leag de un ligand (NK-L) prezent pe suprafaa tuturor celulelor nucleate din organism i un receptor inhibitor care se leag de moleculele MHC I, care sunt de asemenea exprimate pe majoritatea celulelor normale ale organismului. Cnd ambele tipuri de receptori sunt angajai, influena receptorilor inhibitori este dominant i celulele NK nu sunt activate, fiind inpiedicat astfel distrugerea celulelor normale. n condiii patologice, are loc o scdere a expresiei moleculelor MHC I de pe membran (m.a. n cancer, celule infectate viral), astfel nct receptorul inhibitor nu mai este angajat. Astfel, celulele NK trec din starea normal de inhibiie ntr-o stare activat i omoar celulele int. Efectul lor citolitic este determinat de un bogat arsenal litic coninut n granulele lor citoplasmatice, ca i n cazul limfocitelor T citotoxice. O astfel se molecul este perforina, care este eliberat de celulele NK dup contactul cu celula int. Ea se ataeaz de membrana celular i formeaz canale transmembranare prin care ptrund enzime numite granzime care induc apoptoza celulei int. Complementul nu intervine n liza celular determinat de acest tip de celule. Merit ns menionat similitudinea structural i funcional care exist ntre perforin i componentul 9 al sistemului complementului. Celulele NK au pe suprafaa lor i receptori pentru poriunea Fc a IgG (FcRIII-CD16). Acest lucru explic proprietatea lor fundamental de citotoxicitate fa de celule care au fixat pe suprafaa lor

Ac specifici i de care se leag prin intermediul acestor receptori. Acest fenomen poart denumirea de citotoxicitate mediat de Ac, la realizarea lui nefiind necesar participarea complementului. Activitatea celulelor NK este stimulat de citokine ca: IL-15, IL-12, IFN. B. CELULE PREZENTATOARE DE AG Celulele prezentatoare de Ag (CPA) sunt celule specializate n capturarea Ag, prezentarea lui limfocitelor i declanarea unor semnale care favorizeaz activarea limfocitelor. Exist 2 categorii de CPA: a. "profesionale": macrofagele, celulele dendritice i LB b. "ocazionale": PMN (m.a. neutrofilele), celulele endoteliale. 1. Macrofagele Sistemul mononuclear fagocitic sau sistemul monocit/macrofag sau reticulo-endotelial reunete celule (monocitul i macrofagul) care au origine medular comun, precum i caractere histologice (sunt celule mononucleare) funcionale (capacitate de fagocitoz) similare. Rolul lor fundamental este aprarea mpotriva bacteriilor intracelulare i a fungilor. Au origine n seria monocitar a sistemului hematopoetic; precursorii lor sunt monoblastul-promonocitul-monocitul, Monocitele reprezint 1-8% din leucocite, au un T1/2 de 8-72 ore, dup care prsesc torentul circulator i migreaz tisular, difereniindu-se n macrofage. Ele au un diametru de 10 15 m, un nucleu mare i o citoplasm bogat n lizozomi, vacuole i filamente de citoschelet. Procesul de difereniere presupune: creterea dimensiunilor celulare, amplificarea aparatului mitocondrial i lizozomal, dezvoltarea proprietilor de fagocitoz i sintez, apariia unor receptori pe suprafaa celulei. Macrofagele tisulare sunt heterogene, avnd morfologie, funcii i capacitti metabolice diferite, n funcie de esutul cruia i aparin. Macrofagul este o celul cu diametru de 10-25, cu nucleu mare, cu multe granule lizozomale i vacuole n citoplasm. Ele au cptat denumiri specifice, n funcie de locul de reziden: Mf din esutul conjunctiv se numesc histiocite, cele din ficat - celule Kupffer, cele din esutul nervos - celule microgliale, cele din plmn - macrofage alveolare, cele din os - osteoclaste, cele din articulaii - sinoviocite A, etc. Activarea macrofagelor nu este un proces specific, ca n cazul limfocitelor. El poate fi realizat sub influena multor stimuli nespecifici: citokine (IFN- este cel mai puternic activator al macrofagului), contactul cu Ag, substane mitogene, etc. Durata de via a macrofagului este de cteva luni. Celulele sistemului monocit-macrofagic sunt implicate att n aprarea nespecific ct i n cea specific. n imunitatea nespecific aceste celule fagociteaz unele Ag i sintetizeaz unele citokine care stimuleaz alte celule. n rspunsul imun, celule monocit-macrofagice au un rol deosebit de important i complex, att n etapa iniial a rspunsului imun cnd au funcia de CPA ct i etapa final, ca celule efectorii. Ele au pe suprafaa lor numeroi receptori, dintre care cei mai importani sunt: receptori imuni: 1.- receptorii pentru fragmentul Fc al moleculele de Ig 2.- receptori pentru complement 3. receptori de adeziune celulara (LFA- antigenul asociat funciei leucocitare) receptori neimuni: (ei au rol n recunoaterea celulelor senescente, eritrocitelor heterologe, bacteriilor, fungilor, paraziilor) 1.- pentru glicoproteine din structura peretelui bacterian, 2.- pentru proteine denaturate 3.- pentru hidrocarburi i glicoproteine care se termin n fructoz i manoz 4.- pentru fibronectin 5.- pt. unii hormoni, 6.- pt. Ag tumorale. De asemenea, macrofagul are o capacitate secretorie mare, aceast celul putnd elabora peste 50-100 de produi, dintre care menionm: enzime litice (elastaze, colagenaze, etc.), componente ale complementului (C1-C5, properdina), pirogeni endogeni, factori care influeneaz diferenierea celular (de ex. colony-stimulating factor, factori de angiogenez), factori citotoxici, citokine (IFN, IL, TNF-), unii factori de coagulare (V,VII, IX, X, protrombina, tromboplastina), radicali activi ai oxigenului. 2. Celulele dendritice Celulele dendritice reprezint o populaie leucocitar particular, caracterizat morfologic de prezena unor prelungiri citoplasmatice, iar funcional prin capacitatea de a prezenta antigenul (sunt

celule prezentatoare de antigen profesioniste) i o extraordinar capacitate de a stimula limfocitele T native i de a iniia un rspuns imun. Celulele dendritice au origine i pot ndeplini rolul de CPA, datorit prezenei pe suprafa a moleculelor MHC II i a receptorilor pentru Ag. Ele au capacitatea de a capta Ag i de a-l transporta la nivelul organelor limfatice periferice. Dup sediul lor pot fi mprite astfel: a. cele din organele nelimfatice: -celulele Langerhans care se gsesc n special n tegument (formeaz o reea n stratul bazal i n epiteliul scuamos), dar i la nivelul mucoasei bucale, faringe, col uterin. Pe suprafaa lor au molecule HLA II, receptori pentru complement i pentru Fc. Ele pot fixa astfel complexele imune. Sunt implicate mai ales n hipersensibilitatea cutanat de contact. -celule interstiiale situate n plmn, tractul digestiv, cord, ficat, rinichi b. cele din organele limfatice: -celulele interdigitale - se gsesc n zonele limfatice bogate n limfocite T, cu care coopereaz (zonele paracorticale ale ggl. limfatic, pulpa alb a splinei). -celulele foliculare - se gsesc n foliculii limfatici din corticala ganglionilor limfatici i pulpa alb a splinei, adic zone bogate n limfocite B. Multitudinea de arborizaii le permite un contact intim cu limfocitele B, ele prezentnd acestora Ag ca atare, nedegradat sau n complexe imune, ntr-un proces independent de MHC. C. CELULELE EFECTOARE Limfocitele stimulate antigenic se transform n celule efectoare, al cror rol esenial este acela de a elimina Ag. n aceast categorie sunt incluse: limfocitele T helper, limfocitele T citotoxice i plasmocitele. Limfocitele T helper activate exprim receptori de suprafa i secret numeroi produi care le permit s interacioneze cu alte celule. Limfocitele T citotoxice activate dezvolt granule care conin proteine capabile s omoare celulele infectate viral sau celulele tumorale. Limfocitele B stimulate antigenic se transform n celule capabile s sintetizeze imunoglobuline, numite plasmocite. Morfologia acestora este diferit: nuclei deni, citoplasm abundent, cu reticul endoplamatic bine reprezentat (acesta fiind sediul de sintez al imunoglobulinelor) i complex Golgi perinuclear cu rolul de a converti imunoglubulinele n forma final sub care sunt sintetizate. IV. IMUNOGLOBULINELE sau ANTICORPII Imunoglobulinele (Ig) reprezint o familie de glicoproteine care au proprietatea de a reaciona n mod specific cu Ag a crui recunoatere de ctre sistemul imun a condus la sinteza lor, motiv pentru care li s-a conferit denumirea de Ac. Ele sunt sintetizate de limfocitele B fie asociate membranei celulare unde joac rolul de receptori, fie sub form seric. Ig reprezint aprox. 20% din proteinele plasmatice i migraz n cea mai mare parte n zona electroforetic gamma. n afar de ser, o cantitate variabil de Ig se gsesc n lichidele extravasculare, secreiile exocrine i esutul limfatic, dar nu depesc bariera hemato-encefalic. Structura general a unei Ig n alctuirea Ig, proporia glucidic reprezint doar 4-18%, restul fiind polipeptide. Fiecare molecul de Ig este alctuit din cel puin o unitate monomeric de baz. O asemenea unitate monomeric conine 4 lanuri polipeptidice, a cror coeziune este realizat prin puni disulfidice. Aceste puni sunt dispuse att ntre lanuri (intercatenare) ct i n interiorul aceluiai lan polipeptidic (intracatenare) i sunt eseniale pentru configuraia tridimensional a moleculei. Forma este cea a unui Y. Cele 4 lanuri sunt reprezentate de 2 lanuri grele notate cu H (de la heavy=greu) cu o greutate molecular de 55 75 kD i 2 lanuri uoare notate L (de la light=uor) a cror greutate molecular este de aproximativ 24 kD. Aezarea lor este simetric. fiecare lan polipeptidic are o extremitate aminoterminal, denumit poriune variabil (V) i un capt carboxi-terminal denumit poriune constatnt. Prin apropierea regiunilor variabile se realizeaz o structur tridimensional numit situs combinativ sau paratop, care interacioneaz cu epitopul Ag specific. n afara acestora se mai descriu i nite regiuni numite hipervariabile sau CDR (complementarity Determining Region), caracterizate printr-o compoziie foarte variabil de amino-acizi, situate att pe lanutile H ct i pe cele L. Numrul situsurilor combinative determin valena anticorpilor. de ex. el este 2 pentru IgG i 10 pentru IgM. Att lanurile H ct i cele L nu sunt liniare, ci au o dispoziie buclat, ca urmare a legturilor disulfidice intracatenare. Regiunile buclate astfel create poart denumirea de domenii. Lanurile L au 2

domenii (unul n zona variabil i unul n cea constant). Lanurile H au un domeniu n zona variabil i 4-5 n cea constant. Poriunea dintre primele 2 domenii ale regiunii constante ale lanurilor H poart denumirea de zona balamalei (hinge region) datorit frexibilitii moleculei la acest nivel, ceea ce i confer un rol important n angajarrea legturii dintre Ag i Ac. Molecula de Ig se poate cliva sub aciunea unor enzime proteolitice n mai multe fragmente. Astfel, papaina cliveaz monomerul n 3 poriuni aproximativ egale: - 2 fragmente identice Fab (de la Ag binding) care conine lanul L n intregime i jumtatea amino-terminal a lanului H. Domeniul variabil al lanului H i primul su domeniu constant formeaz fragmentul Fd. Funcia fragmenului Fab este de a recunoate i de a se lega cu Ag. - 1 fragment Fc (de la c=cristalizabil) care este alctuit n exclusivitate din jumtatea carboxiterminal a lanului greu. Acest fragment are cteva roluri importante: se leag de componentul C1q al sistemului complementului i declaneaz calea clasic de activare a acestuia i interacioneaz cu receptorul Fc de pe suprafaa mai multor celule (PMN, macrofage, limfocite), influenndu-le metabolismul. Ac care se fot fixa pe aceti receptori fr ca n prealabil s fie cuplai cu Ag se numesc citofili (exemplu calsic este dat de IgE care se fixeaz pe suprafaa mastocitelor sau bazofilelor prin extremitatea lor Fc, lsnd libere capetele Fab pentru a se lega cu Ag). Aceti receptori sunt denumii dup tipul lanului greu al moleculei de Ig de care se leag. De ex. receptorul Fc pentru IgG se numete FcR (receptor). Exist 3 tipuri de FcR: I, II, III: -FcRI are o mare afinitate pentru IgG, mai ales IgG1 i 3. Prezena lui pe membrana monocitelor, macrofagelor i neutrofilelor mediaz fagocitarea Ag particulare, proces reprezentativ pentru ceea ce reprezint citotoxicitatea intracelular. Sunt implicai n declanarea RI i n reacia inflamatorie. -FcRII fixeaz toate tipurile de IgG, dar mai ales CI. Are o mare rspndire i joac rol n epurarea CI. -FcRIII au afinitate mic pentru IgG. Se gsesc pe macrofage, PMN dar i pe celulele NK, fiind importani n citotoxicitatea extracelular. Pepsina descompune molecula de Ig ntr-un fragment mare denumit F(ab)2 care conine cele 2 fragmente Fab i regiunea balamalei i cteva peptide scurte. Spre deosebire de Fab, acesta conine 2 situsuri de legare cu Ag i poate produce aglutinarea Ag. Lanurile grele sunt de 5 tipuri, notate cu , , , i , n funcie de compoziia amino-acizilor din poriunea carboxi-terminal, tipul de lan greu stnd la baza clasificrii celor 5 tipuri de Ig. Lanurile uoare se clasific n dou tipuri notate cu i , diferite ntre ele prin structura poriunii carboxi-terminale. O molecul de Ig nu poate conine dect un singur tip de lan uor. n afara lanurilor H i L se mai descriu i lanurile J, care sunt glicoproteine scurte ce leag ntre ele mai multe uniti monomerice, formnd astfel structuri polimerice de Ig (cum sunt IgA sau IgM). Ele se leag de poriunea carboxi-terminal a lanurilor H. Componenta glucidic a Ig se fixeaz pe regiunea constant a lanului H. Ea este necesar pstrrii configuraiei funcionale a regiunii Fc. Tipurile de Ig Dup tipul de lan H, Ig se clasific n 5 tipuri, cu structuri i proprieti diferite, pe care, foarte pe scurt, le vom trece n revist n continuare: 1. IgG - reprezint clasa dominant din serul uman, adic 75% din totalul Ig - au cea mai mare durat de via (3 sptmni). - d.p.d.v. structural IgG este un monomer, alctuit din 2 lanuri H de tip i 2 lanuri uoare care pot fi de tip sau . Lanurile H sunt mprite n 4 subtipuri notate 1, 2 , 3 i 4, care definesc cele 4 subtipuri de IgG: IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4. - d.p.d.v. funcional IgG au o importan deosebit, Ac rspunsului imun secundar aparinnd n cea mai mare parte acestei clase. - au o distribuie egal n sectorul intra- i extravascular - IgG este singura Ig care poate traversa placenta, asigurnd protecia n primele luni dup natere - IgG1 i IgG3 se pot lega de componentul C1q al sistemului complementului, determinnd iniierea activrii acestuia pe calea clasic. Activarea complementului de ctre IgG impune participarea a minimum 2 molecule de Ac. - IgG au de asemenea funcii antitoxice i de opsonizare 2. IgA

sau .

- structural se aseamn cu molecula de IgG, coninnd 2 lanuri grele, dar de tip , i 2 lanuri L

- se cunosc 2 tipuri de IgA: IgA1 (majoritar) i IgA2. - spre deosebire de cellalte tipuri de IgG, IgA sunt prezente att n ser ct i n diferite secreii. - din acest p.d.v se descriu: IgA serice cu o structur monomeric, (doar < de 10% fiind formate din asamblarea a 2, 3 sau 4 monomeri), predominant de tip IgA1 i IgA secretorie care este de tip IgA2. Acest tip se gsete n secreiile digestive, saliv, secreiile lacrimale, bronice, colostru, laptele matern. IgAs se prezint n general sub forma unui dimer, reunit cu ajutorul unui lan polipeptidic J i un nou polipeptid, numit component secretorie, ce se ataeaz de lanul H . Componenta secretorie este sintetizat de celulele epiteliale. Rolul su este acela de a conferi IgA rezisten fa de aciunea enzimelor proteolitice din secreii. Limitnd ptrunderea Ag n submucoase, IgA au rol n imunitatea local. 3. IgM - este cea mai mare Ig, fiind alctuit din 5 monomeri identici unii ntre ei prin lanuri J i legturi disulfidice la nivelul fragmentelor Fc. - lanul H este de tip , iar cele L sunt fie fie - este principala Ig a rspunsului imun primar - are cea mai puternic aciune de activare a cii clasice a complementului, o singur molecul de Ig M fiind suficeint pentru a fixa C1q. -se poate sintetiza i local, forma secretorie posednd ca i IgA o component suplimentar. 4. IgD - reprezint < de 1% din Ig serice - este un monomer, n care lanul H este de tip - semnificaia lor fiziologic nu este deplin elucidat, dar s-a dovedit c IgD, ca i IgM au rolul de receptor pnetu Ag la suprafaa membranei limfocitului B. 4. IgE - se mai numesc i reagine - au cel mai scrut timp de mjumtire (2-3 zile) - sunt monomeri, lanul H este de tip - se fixeaz prin fragmentul lor Fc de receptorii specifici de pe membrana bazofilelor circulante i mastocitelor tisulare, putnd declana astfel un rspuns de tip reaginic - concentraia lor plasmatic crete n caz de infecii parazitare, fungice, virale. SISTEMUL COMPLEMENTULUI Sistemul complementului reprezint un complex de proteine serice ce conine 25-30 de componente (aflate n mod normal n stare inactiv) care ndeplinesc un rol important n aprarea organismului i n procesul inflamator. El face parte din mijloacele de aprare nespecific ale organismului. Activarea componentelor sale se face succesiv, "n cascad". n urma activrii rezult o ntreag gam compui biologic activi, care au capacitatea de a activa celule cu rol efector att n imunitate ct i n inflamaie. Principalele funcii ale complementului sunt: Inflamatoare: Activare PMN, Mf Marginatia si diapedeza PMN Chemotaxie Degranularea mastocitelor Cresterea permeabilitatii vasculare Contractia mm. neted Eliminarea CI Funcia citotoxic - n stadiile finale ale activrii sale celulele int sunt lizate. El este implicat n liza multor celule cum ar fi: hematii, limfocite, bacterii, virusuri cu capside lipoproteice. Neutralizare virala Opsonizare - complementul activat se leag de Ag sau complexe imune, favorizndu-le aderena i fagocitoza. Privind aceste funcii ne putem da seama c acest sistem particip att n aprarea specific ct i n cea nespecific, rolul lui fundamental fiind acela de a corobora cele dou tipuri de mecanisme, crescnd eficiena intrinsec a fiecruia dintre ele.

10

Ficatul este principalul sediu al sintezei proteinelor ce alctuiesc acest sistem, dei macrofagele tisulare i fibroblatii pot sintetiza i ei unele componente. Activarea componentelor complementului se face pe trei ci: calea clasic, calea altern i calea lectinelor. Calea clasic Elementul iniial este complexul imun Ag-Ac sau un Ag situat pe membrana celular. Activarea se realizeaz prin legarea componentului C1 de fragmentul Fc al moleculei de Ig. Calea clasic mai poate fi activat direct de unele virusuri i endotoxine. C1 este un complex trimolecular ale crui componente sunt notate C1q, C1r i C1s, a cror activare se face n aceast ordine. C1s activeaz C4, o molecul de C1s putnd cliva mai multe molecule de C4, ceea ce duce la amplificarea procesului. C4 este descompus n 2 componente: C4a i C4b. C4a este o substan numit anafilatoxin care are urmtoarele proprieti: stimuleaz degranularea mastocitelor, elibereaz aminelor vasoactive din mastocit i bazofil, produce contracia muchiului neted, crete permeabilitatea vascular, elibereaz amine vasoactive din granulocite. C4b se leag de urmtorul component ce ntr n joc, C2. C2 este clivat sub aciune C1s n 2 componente: C2a (o proteaz) i C2b. C2b rmne legat de C4b formnd un complex enzimatic numit C3-convertaza, care determin clivarea componentului C3. C3 este clivat astfel n C3a (i ea o anafilatoxin) i C3b, un component major al sistemului complementului. El se leag de C4bC2b formnd un complex trimolecular numit C5-convertaza. Tot C3b are capacitatea de a declana calea altern de activare. n plus, C3b i C4b favorizeaz aderena imun i fagocitoza, pentru c pe suprafaa unor celule ca limfocitele, hematiile, celule fagocitare exist receptori specifici pentru aceste componente ale complementului. Calea altern sau properdinic Aceast cale poate fi declanat att imunologic (IgA, IgG) ct i neimunologic (componente bacteriene, parazitare, unele enzime). n acest proces intervin mai muli factori, cu origini variate notai B, D, H, I. C3b protejat de Ag declanant se leag de factorul B, care, sub aciunea factorului D este clivat n 2 componente: Ba (cu efect chemotactic pentru neutrofiele) i Bb care rmne legat de C3b, formnd complexul C3bBb, care reprezint pt. calea altern C3-convertaza. El are deci capacitatea de a cliva C3, genernd o cantitate sporit de C3b. Astfe, de o singur molecula de Bb se leag mai multe molecule de C3b, formnd un nou complex numit C5-convertaza cii alterne. Ultimele secvene de activare sunt comune pentru ambele ci. C5-convertaza cliveaz C5 n C5a (anafilatoxin, elibereaz SRS-A din mastocite i factor chemotactic) i C5b. C5b se leag succesiv de C6, C7, C8 i C9, formnd complexul C5b6789 numit complexul de atac al membranei (MAC). El are asemnri structurale cu perforina (molecul eliberat de celulele NK), avnd ca i aceasta, proprietatea de a leza membranele celulare, inducnd astfel liza celulei. Activitatea biologic a complementului este controlat de mai multe elemente: viaa efemer a unor componente activate, proteine serice cu rol de a modula i limita activarea unor componente.

11