Curs 3,4 Capitolul 2.

FARMACOCINETICA GENERAL Farmacocinetica este acea parte a farmacologiei care studiaza procesele de baza ale cineticii medicamentelor si etapele prin intermediul carora se realizeaza circulatia acestora in organism, respectiv absorbtia, distributia, biotransformarea si eliminarea medicamentelor din organism. 2.1. Procese de baz ale cineticii medicamentelor Procesele de baza ale cineticii medicamentelor, care intervin n diverse etape ale circulaiei acestora n organism sunt: - trecerea prin membrane (taversarea membranelor); - legarea de proteine; - transformarea medicamentelor prin metabolizare; 2.1.1. T r a v e r s a r e a m e m b r a n e l o r Din punct de vedere farmacocinetic organismele superioare sunt vzute ca un sistem multicompartimental n care traseul prin care medicamentul circula, actioneaza si se transforma este separat prin intermediul membranelor biologice. Traversarea membranelor este fenomenul esential al intregului ciclu farmacocinetic. Structura fundamentala membranara a celulelor consta dintr-un strat bimolecular de fosfolipide orientate perpendicular pe planul membranei, cu capatul polar orientat catre cele doua suprafete si cu lanturile hidrocarbonate spre interior. Componena predominant lipidic este hotrtoare pentru proprietile fizico-chimice ale membranelor vii i explic permeabilitatea lor pentru moleculele lipofile. In stratul bimolecular fosfolipidic sunt inglobate macromoleculele proteice globulare si glicoproteine. Acestea formeaza sau marginesc canale apoase, pori, care reprezint adevrate pori de legtur direct ntre mediul extern i cel intern al celulei. Pereii interni ai porilor au sarcini electrice (+) date de grupele aminice i (-) date de grupele carboxilice i hidroxilice ale aminoacizilor din structura proteinelor, ceea ce explic selectivitatea membranelor celulare la trecerea anumitor substane. Dei asemanatoare ca organizare generala, membranele biologice se deosebesc prin grosime, densitate, compozitie, ceea ce explica unele particularitati de absorbtie, difuzie tisulara si eliminare. Propietatile fizico-chimice ale medicamentelor, esentiale pentru procesul de trecere prin membrane sunt: - dimensiunea moleculei, - solubilitatea - coeficientul de partitie - gradul de ionizare. n funcie de proprietile sus-menionate, medicamentele pot traversa membranele biologice prin urmtoarele mecanisme: - filtrare sau penetrare

- difuziune simpl (pasiv) - transport specializat (activ) Filtrarea sau penetrarea implic trecerea medicamentului prin pori sau prin alte discontinuiti ale membranei lipidice umplute cu ap. Prin urmare, prima condiie pentru traversarea membranei prin acest mecanism este ca substana s fie hidrosolubul. Pentru c diametrul porilor membranelor celulare este mic (cca 0,8 nm), prin aceti pori nu pot trece dect moleculele hidrosolubile mici (sub 100A), ceea ce pentru medicamente constituie o situatie de exceptie. Situaia este diferit n cazul majoritii capilarelor, care avnd diametrul mai mare (6-8 nm), pot fi traversate de molecule mari, factorul limitativ n acest caz fiind reprezentat de legarea substanei medicamentoase de proteine, macromolecule care n mod obinuit nu trec prin porii capilari. Difuziunea simpl (pasiv), proporional cu gradientul de concentratie, este mecanismul ce permite traversarea fazei lipidice a membranelor de ctre medicamente. Difuziunea simpl este un proces fizic, pasiv. Prima condiie pentru traversarea membranei celulare prin acest mecanism este ca substana s fie liposolubil, respectiv s aib un coeficient de partiie grasimi-ap mare. Coeficientul de partitie intre grasimi si apa rezulta din solubilitatea relativ a medicamentelor intre doua faze nemiscibile: o grasime nepolara (ulei de msline) sau un solvent organic (heptan, octanol), reprezentand membrana si o solutie apoasa tampon (obisnuit la pH=7,4), reprezentand plasma. Corficientul de partiie poate fi considerat ca masura a afinitatii relative a substantei medicamentoase fata de faza lipidica si faza apoasa. Pentru stabilirea coeficientului de partiie grsimi-ap a fost folosit iniial uleiul de msline, iar n prezent se folosesc solveni organici lipofili ca octanolul (pentru modelarea trecerii prin mucoasa intestinal) sau heptanul, pentru traversarea barierei hematoencefalice. n afar de liposolubilitate, difuziunea simpl este influenat i de polaritatea moleculelor, de gradul lor de ionizare. Majoritatea medicamentelor sunt electrolii slabi. n soluie apoas substanele medicamentoase exist sub forma unui amestec de ioni i molecule neionizate. Ionii au o solubilitate mic n grsimi, deoarece n jurul sarcinii lor electrice se aglomereaz dipoli de ap. Prin urmare, liposolubilitatea medicamentelor, respectiv capacitatea lor de a difuza prin membrane, este determinat de constanta de ionizare pKa- proprie moleculei. Cunoscnd valoarea acestei constante se poate calcula proporia formei ionizate pentru diferite valori ale pH-ului, folosind ecuaia Henderson-Hasselbach.
log (concentraia molar a formei protonate / concentraia molar a formei neprotonate) = pKa pH

n cazul medicamentelor acide: log([AH]/[A-]) = pKa pH sau rearanjnd, [A-]/[[AH] = 10 pH-pKa iar pentru baze: log([BH+]/[B]) = pKa pH sau rearanjnd,

[B]/[[ BH+] = 10 pH-pKa unde: [AH] = concentraia formei neionizate (protonate) pentru substanele acide [A-] = concentraia formei ionizate (neprotonate) pentru substanele acide [BH+] = concentraia formei ionizate (protonate) pentru substanele bazice [B] = concentraia formei neionizate (neprotonate) pentru substanele bazice Cnd pH=pKa, concentraiile celor dou forme sunt egale. Valoarea diferenei pH pKa are semnificaii diferite n funcie de caracterul acid sau bazic al medicamentului. Astfel, pentru medicamentele cu caracter acid valoarea pozitiv a acestei diferene indic o proporie mai mare a formei ionizate, iar pentru medicamentele bazice, o proporie mai mare a formei neionizate i invers pentru valorile negative ale diferenei pH - pKa. La pH-ul obinuit al mediului intern (puin mai mare de 7), pentru medicamentele slab acide cu pH>7 i pentru medicamentele slab bazice cu pH<7, predomin forma neionizat, care poate traversa cu uurin membranele lipidice. Alcalinizarea pH-ului mediului intern mrete proporia formei ionizate a medicamentelor acide i acidularea mediului intern mrete proporia formei ionizate a medicamentelor bazice. Electroliii tari, care disociaz complet n soluie, nu sunt practic liposolubili i nu pot difuza prin membrana lipidic. Aa se explic faptul c medicamentele care sunt acizi tari, ca de exemplu acizii sulfonici, sau baze tari, ca de exemplu bazele cuaternare de amoniu, nu se absorb sau se absorb limitat, nu ptrund sau ptrund puin n mediul intracelular, (acionnd la suprafaa membranelor), nu pot trece sau trec cu greutate n sistemul nervos central. Transportul specializat (activ) este un mecanism n care moleculele incapabile de a traversa membrana prin difuziune simpl sunt transportate prin intervenia unor sisteme transportoare specifice, active. Practic, molecula de medicament devine difuzibil prin complexarea cu astfel de transportori, care preiau molecula de o parte a membranei i o cedeaz de cealalt parte, transportorul circulnd n forma legat ntr-o direcie, i liber, n cealalt, n cadrul unui proces ciclic. n mod obinuit acest sistem activ funcioneaz mpotriva gradientului de concentraie, deci cu consum de energie. Existi situaii cnd transportul se poate face n gradient de concentraie sau de potenial electric, n care caz nu necesit energie i poart numele de difuzie facilitat. Mecanismul transportor se caracterizeaz printr-o nalt specificitate steric, fixnd numai anumite molecule i putnd fi inhibat competitiv de ctre compui analogi cu moleculele transportate n mod obinuit.

Pinocitoza este o alt modalitate de transport activ, rareori ntlnit n cazul medicamentelor, care const n nglobarea de ctre celul a picturii ce conine substana dizolvat. Pictura este nconjurat de o poriune de membran, formnd o vezicul, care apoi se detaeaz de membran, ptrunznd n citoplasm. Sunt transportate astfel lipidele, glicerina, amidonul, vitaminele liposolubile (A, D, E,K), insulina, etc.

O serie de medicamente pot traversa membranele prin mai multe mecanisme: vitamina B12 (transport facilitat, difuziune pasiva), glicozidele tonicardiace (partial transport activ, partial difuziune pasiva), medicamentele cu molecule mici (difuziune si filtrare) 2.1.2. L e g a r e a de p r o t e i n e l e p l a s m a t i c e Medicamentele se pot lega de diferite macromolecule din componena materiei vii. Din punct de vedere farmacocinetic, este foarte important legarea de proteinele plasmatice si anume legarea de albumin, care reprezint jumtate din proteinele plasmatice. Alte proteine, mai puin importante cantitativ, beta-globulina i alfa 1glicoproteina pot forma i ele complexe, dar cu mult mai puine substane, cu caracter bazic n special. Anumite globuline leaga specific hormoni (tiroxina, hormoni steroizi), vitamine (cianocabalamina, vitamine liposolubile), metale (Zn2+, Zn2+, Fe2+) Albumina are o greutate molecular de 66400 i poate lega o serie de medicamente cu caracter acid precum i unele (mai puine) cu caracter bazic. Legarea moleculelor medicamentoase se face in principiu la nivelul grupelor polare de pe suprafata proteinei (-NH3+ a lizinei, -NH+ a histinei, -S- a cisteinei) prin forte electrostatice. La fixarea medicamentelor mai pot interveni si punti de hidrogen, legaturi hidrofobe, forte van der Waals. Legarea covalenta este o situatie de exceptie. Fixarea moleculelor este influenat de conformaia macromoleculei proteice, care determin disponibilizarea grupelor reactive i recunoaterea moleculei de medicament datorit unor complementaritti infrastrcturale. In mod obisnuit, fixarea are un caracter reversibil si dinamic, conformandu-se legii actiunii maselor: M+P
K1 K2

MP

Unde: M = molecula de medicament, P = molecula de proteina, MP = complexul medicament proteina, k1 si k2 constantele vitezelor de asociere si disociere ale complexului medicamentproteina Fixarea reversibila se caracterizeaza prin 2 parametrii: - afinitatea, exprimata prin constanta de afinitate Ka, care rezult din raportul: Ka = k1/k2 - procentul de fixare, care rezulta din raportul dintre fractia legat si cantitatea totala de medicament din plasma. Msura n care medicamentele se leag de proteinele plasmatice depinde de urmtorii factori: concentraia medicamentului, concentraia proteinei, afinitatea pentru locurile de legare. Fixarea moleculelor de medicament este posibil atta timp ct exist sedii de legare disponibile (neocupate). Cum concentraia normal de albumin este de 0,6 mM i fiecare molecul cuprinde dou sedii de legare, capacitatea maxim de legare este de 1,2 mM. Deoarece majoritatea medicamentelor administrate n dozele uzuale, realizeaz concentraii plasmatice mult mai mici de 1,2 mM, numrul de sedii de legare nu reprezint un factor limitativ pentru fixarea moleculelor de medicament, care practic este proporional cu concentraia moleculelor libere de medicament. Procentul de fixare poate fi influenat de scderea concentraiei proteinelor plasmatice ca i de intervenia competitiv a unor metabolii sau a altor medicamente.

Forma legata a medicamentelor este inactiv biologic, deoarece complexul macromolecular protein-medicament nu poate trece in tesuturi. n functie de tria i stabilitatea legaturii, fixarea de proteinele plasmatice poate fi o simpla modalitate de transport, poate determina retinerea in sange sau poate controla distributia ctre esuturi. Combinarea cu o protein circulant reprezint un factor de modulare a concentraiei formei libere, respectiv a difuzrii tisulare i a activitii farmacologice. 2.1.3. T r a n s f o r m a r e a b i o c h i m i c a a m e d i c a m e n t e l o r. Multe medicamente se metabolizeaz, adic sufera in organism transformari chimice, care le modifica proprietile fizico-chimice si biologice. Sunt metabolizati mai ales compusii liposolubili. Metabolitii rezultati rezultati sunt mai polari i au in consecinta o solubilitate mai scazuta in grasimi. Reactiile chimice prin care are loc metabolizarea medicamentelor sunt catalizate enzimatic si sunt de mai multe tipuri: oxidari, reduceri, hidrolize i conjugri (cuplri), Majoritatea proceselor de biotransformare a medicamentelor are loc in ficat, sub aciunea enzimelor microzomale si nemicrozomale. Enzimele microzomale sunt enzime localizate n reticulul endoplasmatic neted, care este cuprins n fraciunea microzomal a omogenatelor de organ. Enzime microzomale metabolizante ale medicamentelor se mai gsesc i n rinichi, mucoasa intestinal, glanda corticosuprarenal. Enzimele microzomale catalizeaz reaciile de oxidare, reducere i gluconoconjugare a multor medicamente i ale ctorva substane fiziologice endogene (acizi grai, hormoni steroidici, bilirubin). n reaciile de oxidare a medicamentelor care conduc la formarea unor derivai hidroxilici, un rol deosebit de important revine sistemului enzimatic microzomal, cunoscut sub denumirea de monooxigenaz, oxidaz mixt sau hidroxilaz. Acest sistem este lipsit de specificitate i cuprinde NADPH citocrom P 450 reductaza i citocromul P 450, care realizeaz transferul de electroni. NADPH este sursa de electroni, iar NADPH citocrom P 450 reductaza este o flavoprotein care reduce citocromul P 450. Acesta este o hemoprotein, care formeaz un complex ternar cu medicamentul (substrat) i cu oxigenul, rezultnd n final substratul hidroxilat, citocrom P 450 oxidat i ap. Dintre cele 12 familii de citocrom P 450 identificate la om, primele 3 intervin n majoritatea biotransformrilor medicamentelor. n multe cazuri, asupra unei substane medicamentoase acioneaz mai muli citocromi P 450. Reaciile de oxidare produse sub aciunea enzimelor microzomale din ficat sunt: dezalchilri oxidative, oxidri ale catenelor alifatice, oxidri ale compuilor aromatici, epoxidri, N-oxidri, sulfoxidri, dezaminri, desulfurri, S-demetilri. Tot sub aciunea unor enzime microzomale din ficat se produc i reaciile de glucuronoconjugare (cu acidul uridin-difosfat glucuronic) la nivelul grupelor amino, carboxil, sulfhidril i oxidril. Sub aciunea unor enzime microzomale extrahepatice se produc reacii de azo i nitroreducere. O serie de enzime nemicrozomale (libere, solubile) din ficat, plasm i alte esuturi catalizeaz alte biotransformri i anume: reacii de oxidare a unor alcooli, aldehide, amine, baze purinice, reacii de hidroliz a unor esteri, amine, peptide, reacii de transsulfurare, reacii de conjugare cu acid acetic, metil-derivai, sulfai, glicin, gflutation, inclusiv formarea de ribonucleotide i nucleozide. Tipul de reacie prin care se realizeaz metabolizarea unui medicament depinde de grupele funcionale prezente n molecul, dup cum urmeaz:

grupele hidroxil alcoolice sunt oxidate sau glucuronoconjugate; grupele hidroxil aromatice sunt glicino- sau glucuronoconjugate; grupele aminoalifatice sunt eliminate (dezaminare) sau glucuronoconjugate; grupele aminoaromatice sunt acetilate, glucuronoconjugate sau metilate nucleele aromatice sunt hidroxilate. n ceea ce privete viteza reaciilor de metabolizare, aceasta poate fi: dependent de cantitatea de medicament i deci corespunztoare unei cinetici de ordinul 1, care se ntlnete la cele mai multe dintre reaciile de biotransformare, n care cantitatea de medicament reprezentat de dozele uzuale este mult inferioar celei necesare pentru saturarea enzimelor metabolizante. independent de cantitatea de medicament, ceea ce corespunde unei cinetici de ordinul 0, ntlnit destul de rar, ca de exemplu n cazul alcoolul etilic, care este metabolizat cu ritm constant, indiferent de cantitatea de introdus n organism. o vitez care se modific n funcie de cantitatea de medicament astfel: dup o cinetic de ordinul 1 pentru doze relativ mici i dup o cinetic de ordinul 0, corespunzoare unei viteze sczute, pentru cantitile care depesc acste doze, saturnd enzimele metabolizante.