Cariotipul uman

Termeni si notiuni uzuale: Cromozomi = elemente esentiale ale nucleului celular, suportul genelor. Numarul lor intr-un nucleu este fix pentru fiecare specie. - Cromozomi omologi = cei doi cromozomi ce formeaza o pereche si care provin de la cei doi genitori. - Autozomi = cromozomii proveniti de la cei doi genitori ce formeaza perechi cu exceptia celor doi cromozomi sexuali. Sunt identici din punct de vedere structural. - Heterozomi = cromozomii sexuali (X,Y) O singura pereche de cromozomi ce pot fi identici structural in cazul sexului feminin (XX) sau diferiti in cazul sexului masculin (XY)

Elementele morfologice si functionale comune tuturor cromozomilor: cromatidele, centromerul si telomerele.

Elementele comune unor cromozomi : constrictiile secundare si satelitii. Elementele specifice fiecarui cromozom: benzile cromozomice.
Satelit CONSTRICTIE SECUNDARA

CENTROMER

q
TELOMER

Parts of Chromosomes

Telomeres

Telomeres

p arm

Centromeres

q arm

Telomeres

Criterii de identificare, numerotare si clasificare a cromozomilor.

Talia cromozomilor (1,5-10 microni) Pozitia centromerului si lungimea bratelor. Prezenta constrictiilor secundare si a satelitilor.

TIPURI DE CROMOZOMI (dupa raportul lungimii bratelor)

cromozomi metacentrici q/p = 1- 1,7 cromozomi submetacentrici q/p = 1,7 3 cromozomi acrocentrici q/p = 7- n

q= (lungimea) bratul(ui) lung al cromozomului p= (lungimea) bratul(ui) scurt al cromozomului

Cariotip = prezentarea ordonata a cromozomilor unei celule diploide, pe perechi si pe grupe alcatuite dupa marime, forma, pozitia centromerului si alte trasaturi reprezentative; Pentru analiza cromozomilor si intocmirea cariotipului este necesara stimularea diviziunii celulelor prin cultura celulara in vitro. Tehnica intocmirii cariotipului se face, in general, pornind de la limfocite stimulate cu phytohemaglutinina, diviziunea e blocata in matafaza cu ajutorul colchicinei ( inhibitorul fusului de diviziune), celulele sunt supuse apoi hipotonizarii ( clorura de potasiu) in vederea eliberarii nucleilor si dispersarii cromozomilor si in final sunt fixate cu solutie de alcool-acid acetic glacial, etalate pe lama si colorate.

se alcatuieste cu cromozomi metafazici bandati;

Cariotiparea (alcatuirea cariotipului) respecta urmatoarele reguli:

cromozomii sunt asezati in ordinea descrescatoare a marimii; cromozomii omologi formeaza perechi; perechile sunt grupate dupa morfologie.

Cu ocazia conferintei de citogenetica umana de la Denver-California din anul 1960 s-a stabilit un sistem unic de clasificare a cromozomilor omului, numit sistemul Denver. In conformitate cu acest sistem, cei 46 de cromozomi sunt impartiti in sapte grupe, fiecare dintre ele cuprinzand un numar variabil de cromozomi. Criteriile de grupare au fost lungimea bratelor, pozitia centromerului si raportul dintre brate. Dupa descoperirea cariotipului uman, cercetarile de citogenetica umana au luat un mare avant, reusind sa stabileasca nu numai aspectele normale ale cariotipului ci si o serie de aberatii cromozomale in cazul unor maladii ereditare, ale tumorilor maligne etc.

GRUPELE DE CROMOZOMI LA OM

Grupa A (mari) = per 1+ per 2+ per 3 per 1 si 3 - metacentrici per 2 submetacentrici Grupa B (submetacentricii mari) = per 4 + per 5 Grupa C (mijlocii) = per 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 + + cromozomul/cromozomii X, metacentric(i) per 6- metacentrici per 7, 8, 9, 10, 11,12 - submetacentrici Grupa D (acrocentricii mijlocii, cu sateliti) = per 13, 14, 15 Grupa E (mici) = per 16, 17, 18 per 16 - metacentrici per 17, 18 - submetacentrici Grupa F (metacentricii mici) = per 19, 20 Grupa G (acrocentricii mici, cu sateliti) = per 21, 22 + + cromozomul Y, acrocentric, dar lipsit de satelit

CARIOTIPUL UMAN NORMAL

22 de perechi + XY/XX 7 grupe (AG) + X, Y/X, X

Chromosomes and Inheritance

A normal human male karyotype.

Human Genome Sequencing

31/10/00

BANDAREA CROMOZOMILOR

Dupa 1970 s-au dezvoltat tehnici moderne de citogenetica care permit prin metode de bandare identificarea precisa a fiecarui cromozom. bandarea evidentiaza, la nivelul cromozomilor, cu ajutorul anumitor compusi chimici, niste modele caracteristice;

modelele constau intr-o succesiune de benzi a caror configuratie depinde de compozitia in baze azotate a diferitelor regiuni ale cromozomului, precum si de tehnica de bandare folosita; la cromozomii apartinand aceleiasi perechi, pe langa dimensiunile si forma similare se observa si un model de benzi similar, ceea ce inlesneste recunoasterea perechilor in vederea alcaturii cariotipului

Tehnicile de bandare au ca principiu afinitatea pe care o manifesta unii coloranti sau agenti fluorescenti fata de AND. Astfel clorhidratul de quinacrina manifesta afinitate fata de AND bogat in A-T care maresc intensitatea fluorescentei in timp ce G-C o reduc. S-a observat ca si gradul de condensare al cromatinei influenteaza intensitate coloratiei benzilor.

Bandarea Q: - benzile Q se obtin prin colorare cu quinacrina si apar in zone bogate in AND repetitiv - prezinta polimorfism ( variatii individuale ca marime si fluorescenta a benzilor) Bandarea G: - a devenit cea mai uzuala tehnica pentru cromozomii umani - Apar in zone cu AND bogat in A-T - benzile G se obtin prin digestie enzimatica controlata cu tripsina urmata de colorarea Giemsa

Bandarea R:
se obtine prin denaturare termica controlata ( 85) a preparatelor intr-o solutie salina inaintea colorarii cu acridin oranje apar in zone de AND repetitiv bogat in G-C benzile G negative devin prin aceasta tehnica benzi R pozitive si invers

Bandarea T:
utilizeaza

evidentiaza telomerele

Bandarea C:
Evidentiaza centromerii cu exceptia cromozomului Y, la care banda intens colorata e localizata in regiunea distala a bratului q