Lei de Beer-Lambert

Origem: Wikipdia, a enciclopdia livre. A lei de Beer-Lambert, tambm conhecida como lei de Beer ou lei de Beer-Lambert-Bouguer uma relao emprica que, na ptica, relaciona a absoro de luz com as propriedades do material atravessado por esta.

ndice
[esconder] 1 Equa es 2 Lei de Beer Lam bert na atmo sfera 3 Refe rnci as 4 Hist ria 5 Liga es exter nas 6 Ver tamb m

[editar] Equaes

Diagrama da absoro de um feixe de luz atravessando uma cuvette de tamanho l. Isto se pode expressar de distintas maneiras:

Onde: A a absorbncia (ou absorvncia) I0 a intensidade da luz incidente I1 a intensidade da luz uma vez tendo atravessado o meio l a distncia que a luz atravessa pelo corpo c a concentrao de sustncia absorvente no meio o coeficiente de absoro ou a absorbtividade molar da substncia o comprimento de onda do feixe de luz k o coeficiente de extino

Em resumo, a lei explica que h uma relao exponencial entre a transmisso de luz atravs de uma substncia e a concentrao da substncia, assim como tambm entre a transmisso e a longitude do corpo que a luz atravessa. Se conhecemos l e , a concentrao da substncia pode ser deduzida a partir da quantidade de luz transmitida. As unidades de c e dependem do modo em que se expreese a concentrao da sustncia absorvente. Se a sustncia lquida, se deve expressar como uma frao molar. As unidades de so o inverso do comprimento (por exemplo cm-1). No caso dos gases, c pode ser expressada como densidade (a longitude ao cubo, por exemplo cm-3), em cujo caso uma seo representativa da

absoro e tem as unidades em comprimento ao quadrado (cm2, por exemplo). Se a concentrao de c est expressa em moles por volume, a absorvncia molar normalmente dada em mol cm-2. No entanto, tambm pode-se tratar de uma suspenso e a a unidade de concentrao expressa em FTU. O valor do coeficiente de absoro varia segundo os materiais absorventes e com o comprimento de onda para cada material em particular. Deve ser determinado experimentalmente. A lei tende a no ser vlida para concentraes muito elevadas, especialmente se o material dispersa muito a luz. A relao da lei entre concentrao e absoro de luz a base do uso de espectroscopia para determinar a concentrao de substncias em qumica analtica.

[editar] Lei de Beer-Lambert na atmosfera

Esta lei tambm se aplica para descrever a atenuao da radiao solar ao passar atravs da atmosfera. Neste caso h disperso da radiao alm da absoro. A lei de Beer-Lambert para a atmosfera expressa por: , onde cada kx um coeficiente de extino cujo sub-ndice identifica a fonte de absoro ou disperso: a faz referncia a aerosis densos (que absorvem e dispersam) g so gases uniformemente misturados (principalmente dixido de carbono (CO2) oxignio molecular (O2) que s absorve) NO2 dixido de nitrognio, devido principalmente contaminao (s absorve) w a absoro produzida pelo vapor de gua O3 oznio (s absoro) r a disperso de Rayleigh para o oxignio molecular (O2) e nitrognio (N2) (responsvel pela cor azul do cu).

[editar] Referncias
Leis dos processos de absoro de radiao - www.chemkeys.com 1. PRINCPIOS ABSORO GERAIS DE ESPECTROFOTOMETRIA DE - Lei de Beer-Lambert - Espectro de absoro (Hemoglobina oxigenada e desoxigenada) - Utilizao do espectrofotmetro 2. ANLISE DO ESPECTRO DE ABSORO DA HEMOGLOBINA REDUZIDA E OXIDADA 1. PRINCPIOS ABSORO

GERAIS DE ESPECTROFOTOMETRIA DE A absoro de luz por uma substncia em soluo pode ser utilizada para determinar a sua concentrao, uma vez que, para solues diludas, existe uma relao linear entre a concentrao da substncia e a quantidade de luz absorvida. Alm disso, cada substncia absorve mais fortemente uns comprimentos de onda do que outros. A absoro de luz caracterstica de cada substncia, que representa o seu Espectro de Absoro, pode ser utilizada para caracterizar e identificar uma ou mais substncias numa mistura. Na Figura 1 exemplificam-se os espectros de absoro da hemoglobina na forma oxigenada (oxihemoglobina) e desoxigenada (desoxihemoglobina). ------ Oxihemoglobina ____ Desoxihemoglobina Coeficiente de extino molar (cm-1M-1) 15 000 532 576 542 10 000 5 000 450 500 550 600 Comprimento de onda (nm) 650 Fig. 1- Espectros de absoro da oxihemoglobina e desoxihemoglobina. O espectro da hemoglobina modifica-se acentuadamente, quando a hemoglobina liga O2, como se observa pelos mximos de absoro caractersticos de cada espectro. 1 Leis da absoro aplicveis determinao da concentrao de substncias em soluo (Lei de Beer-Lambert) Quando um feixe de luz passa atravs de uma soluo, parte da luz absorvida pelos componentes da soluo. A relao matemtica entre a concentrao de uma substncia em soluo e a absoro, dada pela lei de Beer-Lambert. Consideremos um tubo de espessura (l) contendo uma soluo, e um feixe de luz monocromtica (Io) que a atravessa: Io I l A lei de Lambert pode expressar-se por: Io log K1 x l I em que: Io = intensidade original do feixe de luz I = intensidade do feixe de luz depois de atravessar a soluo l = espessura da soluo, expressa em centmetros

K1 = constante de proporcionalidade que depende das caractersticas de absoro da substncia, da temperatura e do comprimento de onda utilizado A lei de Beer pode expressar-se por: Io log K2 x C I em que: Io e I tm o mesmo significado. C = concentrao da substncia em soluo, expressa em moles por litro (ou molar) K2 = constante de proporcionalidade 2 Combinando as duas expresses obtm-se a equao fundamental da absoro da luz, conhecida como lei de Beer-Lambert: Io 1og =kxlxC I em que: k = coeficiente de extino molar, normalmente referido por Io e log = Abs (absorvncia) I Assim, a expresso da lei de Beer-Lambert pode tomar a seguinte forma: Abs = x l x C Chama-se coeficiente de extino molar de uma substncia, , ao valor da absorvncia de uma substncia de concentrao 1 M, medida num tubo com uma espessura de 1cm. O coeficiente de extino molar especfico da substncia, para um dado comprimento de onda, e tem normalmente um valor grande quando a luz de um dado comprimento de onda absorvida eficientemente pela substncia. A lei de Beer-Lambert pode, portanto, ser utilizada para determinar o coeficiente de extino molar de substncias em soluo e para determinar a concentrao de uma ou mais substncias em soluo. Deve notar-se que as leis da absoro indicadas s se aplicam luz monocromtica (de um comprimento de onda particular) e no podem ser aplicadas a bandas, ainda que estreitas, de diferentes comprimentos de onda. A lei de Beer-Lambert vlida somente para solues relativamente diludas, uma vez que acima de certas concentraes a relao entre a absorvncia e a concentrao deixa de ser linear, como se exemplifica na Figura 2. Para que seja possvel utilizar a relao entre a densidade ptica de solues de concentrao conhecida e a concentrao (curva padro) para extrapolar concentraes de amostras de concentrao desconhecida a partir da sua absorvncia, necessrio que o meio usado na preparao dos padres seja o mesmo usado na preparao das amostras e que se desconte sempre a leitura da absorvncia do solvente sem substncia adicionada, a todas as leituras das amostras. 3 Abs 0,6 0,5 Lei de Beer-Lambert no aplicvel

0,4 0,3 Lei de Beer-Lambert aplicvel 0,2 0,1 0 2,5 5,0 7,5 10,0 Concentrao (mg/ml) Fig. 2- Relao entre a absorvncia e a concentrao de uma substncia em soluo. Esta curva padro s deve ser utilizada para calcular a concentrao de uma dada soluo a partir da absorvncia medida na regio linear (linha a tracejado). No exemplo indicado, a uma absorvncia de 0,2, corresponde uma concentrao de 2,5 mg/ml. Funcionamento de um espectrofotmetro H diversos tipos de espectrofotmetro. Consistem essencialmente num prisma de difraco, que funciona como monocromador e de um sistema elctrico de deteco, amplificao e medio. Assim, a luz, proveniente de uma lmpada, passa atravs de um monocromador que a separa nos vrios comprimentos de onda (); apenas um feixe de luz (de um especfico) atravessa uma pequena fenda e incide na amostra. Esta absorve uma parte da luz e a que no absorvida transmitida atravs da amostra e vai ser detectada por um detector; o sinal elctrico gerado amplificado no amplificador e enviado para o voltmetro (calibrado em unidades de absorvncia) que l a quantidade de luz que passou atravs da amostra. O voltmetro pode ligar-se a um registador, onde se pode obter um registo permanente da absorvncia da amostra em funo do tempo. O aparelho que vamos utilizar tem a capacidade de medir valores de absorvncia numa gama de comprimentos de onda determinados (por exemplo, de 400 a 500 nm, dando-nos os valores de absorvncia de 1 em 1 nm) e inclui um registador. Antes de medir a absorvncia a cada comprimento de onda acerta-se o zero do aparelho (Abs=0), com uma clula contendo gua ou o solvente do ensaio em causa A lei de Lambert & Beer possvel, por simples comparao visual, determinar a concentrao aproximada de uma soluo colorida comparando-a com solues do mesmo soluto que tenham concentraes conhecidas. Quando dispomos de aparelhos capazes de medir a intensidade da luz transmitida pelas solues (fotocolormetros ou espectrofotmetros) podemos determinar a concentrao da soluo desconhecida pela aplicao da lei de Lambert & Beer que correlaciona a intensidade da luz transmitida com a concentrao do soluto corado. Lei de Lambert Quando a concentrao da substncia constante, a absoro depende do comprimento do trajeto ptico. Lei de Beer Quando o trajeto ptico constante, a absoro depende da concentrao. Combinando as duas leis, Absoro proporcional ao trajeto ptico e concentrao. I = I 0 e k .c.l I = Intensidade da luz emergente I0 = Intensidade da luz incidente e = Base do sistema de logartimos neperianos (2,718228) 13 k = absortividade (constante caracterstica do soluto) O termo e-k.c.l representa o fator de proporcionalidade entre I e I0. Como o segundo

membro da equao possui apenas um fator podemos concluir que os valores absolutos das intensidades no so importantes e sim a relao entre eles. Em termos prticos, podemos concluir que o fato de iluminarmos uma soluo com luz de uma intensidade maior ou menor no afeta o resultado da medida de sua concentrao. O expoente de e est afetado de sinal negativo, o que significa que, quanto maior for a concentrao do soluto, ou a espessura da soluo atravessada pela luz, tanto menor ser o valor da intensidade da luz emergente para uma determinada intensidade incidente. Como a varivel independente que desejamos medir (no caso, a concentrao) se encontra no expoente, a curva que reflete a relao entre ela e a intensidade apresenta o formato exponencial e no uma reta (ver Figura 6). Figura 6 Curva de calibrao ou curva padro: Obtida com a leitura da absoro de padres de vrias concentraes. Modificaes na lei de Lamber & Beer Considerando que o objetivo da espectrofotometria a determinao de concentraes desconhecidas de solues de um mesmo soluto, uma tarefa repetitiva, torna-se necessrio dispor de um mtodo que permita fazer os clculos com pequeno esforo. Chamamos de interpolao a operao matemtica que permite, a partir de uma curva e do valor de uma das coordenadas de um ponto, obter a outra coordenada pela determinao do ponto onde a coordenada conhecida intercepta a curva. Algumas operaes podem ser feitas com o objetivo de simplificar o trabalho. Vejamos: 1. J que os valores absolutos das intensidades no so importantes podemos tomar a relao entre elas que expressamos na escala percentual. A funo assim definida denominada Transmitncia e expresso pela letra T. T I = 100 I 0 2. O uso do expoente de base e complicado. A melhor soluo utilizar a base 10. Esta operao se constitui numa mudana da base do sistema de logaritmos que pode ser obtida multiplicando-se o expoente p 0,4342. e k .c.l = 10 0, 4342.k .c.l O produto 0,4342.k um produto de duas constantes e pode ser representado por uma s letra. Escolhemos a letra a (inicial de absortividade) para representar a medida tomada em escala decimal. A equao de Lambert & Beer pode, portanto, ser reescrita, na forma: 14 T = 10 a.c.l 100 O fato de a correlao entre concentrao e transmitncia ser expressa por uma exponencial determina que a interpolao seja uma operao complicada porque

envolve o uso de logaritmos diretamente expresso como segue: ( T a .c .l log = log 10 100 log T 2 = a.c.l ) 2 log T = a.c.l A nova funo, gerada na transformao: 2 logT recebe o nome de Absorvncia e costuma ser representada pela letra A ou por Abs. Dessa forma a equao pode ser reescrita como: A = a.c.l O que demonstra que a Absorvncia de uma soluo proporcional (relao linear) concentrao do soluto corado. Traado da curva padro os ensaios da colorimetria A correlao entre a concentrao de um soluto e a sua absorvncia expressa em grfico por uma curva padro (ver figura 6). Traamos a curva padro tomando vrios ensaios cujas concentraes so conhecidas com preciso (denominados ensaio padro) e um ensaio no qual no existe a substncia a ser dosada (ensaio em branco). O ensaio em branco, testemunha do mtodo colorimtrico, serve para que possamos descontar, na medida da intensidade da luz emergente, a quantidade de luz que absorvida por outras substncias que no sejam o soluto cuja concentrao desejamos medir: o vidro do frasco no qual vamos colocar a soluo (cubeta), o solvente, os restos de reagentes necessrios para o desenvolvimento da cor. Na gria laboratorial dizemos que o ensaio em branco serve pra zerar o espectrofotmetro porque quando o colocamos no aparelho de medida, ajustamos os controles para que o ponteiro indique zero da escala de absorvncia ou 100% de transmitncia. A curva obtida pela ligao dos pontos por meio de uma reta. importante observarmos que a reta traada no vai passar obrigatoriamente sobre os pontos representativos dos ensaios padro mas deve representar a tendncia mdia dos mesmos. De posse da curva padro e da medida de absorvncia de um ensaio de concentrao desconhecida podemos, por interpolao na reta determinar a concentrao do desconhecido. Uma alternativa o clculo analtico, sem o auxlio do grfico. Ele obtido pela comparao das relaes: Ap = a.Cp.l Ad = a.Cd .l Onde Ap e Ad representam, respectivamente as absorvncias do padro e do desconhecido. A combinao das duas equaes permite chegar relao que ser usada mais freqentemente: 15 Ap/ Ad = Cp /Cd