UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA CAMPUS II

PREVALENCIA DE BRUCELOSIS (Brucella abortus) EN BOVINOS DE LA ASOCIACION GANADERA LOCAL GENERAL DEL GRIJALVA COLONIA LUIS ESPINOSA, MUNICIPIO DE TECPATAN, CHIAPAS.

TESIS COMO OPCION AL TITULO DE MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA PRESENTAN: JORGE ALBERTO FELICIANO DE LA CRUZ JORGE AMIN LOPEZ GUTIERREZ DIRECTOR DE TESIS: MVZ. M.P.A. ALFREDO LAU SANCHEZ ASESORES: MVZ. EPAB. ANTONIO MIER PONCE MVZ. MC. REYNALDO I. OREA MARTINEZ

TUXTLA GUTIERREZ, CHIAPAS

NOVIEMBRE DE 2011.

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA CAMPUS II
PREVALENCIA DE BRUCELOSIS (Brucella abortus) EN BOVINOS DE LA ASOCIACION GANADERA LOCAL GENERAL DEL GRIJALVA COLONIA LUIS ESPINOSA, MUNICIPIO DE TECPATAN, CHIAPAS.

TESIS COMO OPCION AL TITULO DE MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA PRESENTAN: JORGE ALBERTO FELICIANO DE LA CRUZ JORGE AMIN LOPEZ GUTIERREZ DIRECTOR DE TESIS: MVZ. M.P.A. ALFREDO LAU SANCHEZ ASESORES: MVZ. EPAB. ANTONIO MIER PONCE MVZ. MC. REYNALDO I. OREA MARTINEZ

TUXTLA GUTIERREZ, CHIAPAS

NOVIEMBRE DE 2011.

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INDICE
I.- INTRODUCCIN. II.- REVISION DE LITERATURA. 2.1. Enfermedades causadas por diversas especies de Brucella. 2.2. Brucella abortus. 2.2.1. Etiologa. 2.2.2. Epidemiologa. 2.2.3. Patogenia. 2.2.4. Signos clnicos. 2.2.5. Patologa clnica. 2.2.6. Hallazgos a la necropsia. 2.2.7. Diagnostico. 2.2.8. Tratamiento. 2.2.9. Control y erradicacin. 2.2.9.1. Control por vacunacin. 2.3. Brucella ovis. 2.3.1. Etiologa. 2.3.2. Epidemiologa. 2.3.3. Patogenia. 2.3.4. Manifestaciones clnicas. 2.3.5. Patologa clnica. 2.3.6. Hallazgos a la necropsia. 2.3.7. Diagnostico. 2.3.8. Tratamiento. 2.3.9. Control. 2.4. Brucella suis. 2.4.1. Etiologa. 2.4.2. Epidemiologa. 2.4.3. Patogenia. 2.4.4. Manifestaciones clnicas. 2.4.5. Patologa clnica. 2.4.6. Hallazgos a la necropsia. 2.4.7. Diagnostico. 2.4.8. Tratamiento. 2.4.9. Control. 2.5. Brucella melitensis. 2.5.1. Epidemiologa. 2.5.2. Patogenia. 2.5.3. Manifestaciones clnicas. 2.5.4. Patologa clnica. 2.5.5. Hallazgos a la necropsia. 2.5.6. Diagnostico. 2.5.7. Tratamiento. 2.5.8. Control. 2.6. Uso e interpretacin de las pruebas diagnosticas: pruebas
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1 2 2 3 3 5 5 6 7 7 7 8 8 9 12 13 13 13 13 14 14 15 15 15 15 15 16 16 16 17 17 17 17 18 18 18 18 18 19 19 19 19 19 20

serolgicas para brucelosis. 2.6.1. Pruebas de tamiz. 2.6.2. Pruebas de vigilancia epizootiologa. 2.6.3. Pruebas complementarias. 2.7. Indicaciones para la realizacin de la prueba. 2.8. Prueba de aglutinacin en tarjeta o prueba de rosa de bengala. 2.8.1. Materiales y reactivos. 2.8.2. Recomendaciones. 2.8.3. Procedimientos. 2.8.4. Lectura de resultados. 2.9. Prueba de rivanol. 2.9.1. Materiales y reactivos. 2.9.2. Procedimiento. 2.9.3. Lectura de resultados e Interpretacin. 2.10. Prueba de anillo en leche. 2.10.1. Materiales y reactivos. 2.10.2. Procedimiento. 2.10.3. Lectura de resultados e Interpretacin. . 2.11. Fijacin de complemento. 2.12. Prevalencia de Brucelosis en Mxico y en Chiapas. III.- MATERIAL Y METODOS. 3.1. Localizacin del rea de estudio. 3.2. Poblacin objetivo. 3.3. Determinacin del tamao de la muestra. 3.4. Diseo metodolgico. 3.5. Recoleccin de las muestras. 3.6. Conservacin y transporte de las muestras. 3.7. Metodologa del laboratorio. 3.7.1. Materiales. 3.7.2. Realizacin de la prueba de tarjeta. 3.7.3. Interpretacin de la prueba de tarjeta. 3.8. Determinacin de la tasa de prevalencia. IV.- RESULTADOS VI.- DISCUSIN VII.- CONCLUSIN VIII.- LITERATURA CITADA

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LISTA DE FIGURAS Fig. 1. Estatus de la brucelosis en Mexico. Fig. 2. Localizacin del municipio de Tecpatn. Fig. 3. Prevalencia de Brucelosis. 31 34 52

LISTA DE CUADROS Cuadro 1. Dosis de vacuna de Cepa RB-51 y Cepa 19. Cuadro 2. Ventajas del uso de la cepa RB-51 contra la cepa 19. Cuadro 3. Bovinos muestreados y resultados a la prueba de tarjeta. Cuadro 4. Resultados de la Prueba de Rivanol. 11 11 41 45

I.- INTRODUCCIN.
La brucelosis es una enfermedad causada por una bacteria del genero Brucella y comprende tres especies que guardan gran similitud en sus caractersticas fisiolgicas y morfolgicas, ests son: Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis. Estos tres tipos de bacterias afectan al hombre y a los animales domsticos (Blood, 1992). Si bien las brcelas poseen un amplio radio de distribucin, se transmiten del husped infectado a otro susceptible, cuando tal cosa ocurre, suelen localizarse en glndula mamaria, sistema retculo endotelial, tero y membranas fetales, Bordetella bronchiseptica se halla con cierta frecuencia en los pulmones de becerros y cerdos con neumonas crnica (Hagan, 1993). La brucelosis se considera como una enfermedad de distribucin mundial, sin embargo algunos pases como Inglaterra, Suecia, Dinamarca y Finlandia han logrado su erradicacin, otros, como Japn, Nueva Zelanda, Alemania y Australia han logrado reducir considerablemente su incidencia. En Amrica, Canad y Belice han erradicado la brucelosis bovina; Chile y los Estados Unidos la caprina; Belice, Chile, Colombia y Honduras la porcina y Las Islas Malvinas la ovina (Meja, 1996). En Mxico, la brucelosis es sin duda una de las enfermedades zoonticas ms importantes, debido a los elevados ndices de prevalencia en las diferentes especies animales y la frecuencia con que estos la transmiten al hombre. (Meja, 1996). El objetivo del presente trabajo es determinar la prevalencia de brucelosis (Brucella abortus) en ganado bovino de la Asociacin Ganadera Local General del Grijalva ubicada en la colonia Luis Espinosa, Municipio de Tecpatn, Chiapas.
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II.- REVISION DE LITERATURA.

2.1. Enfermedades causadas por diversas especies de Brucella. Las enfermedades importantes de los animales producidas por diversas especies de Brucella son causadas por Br. abortus, suis y melitensis, siendo sus huspedes por orden de preferencia bovinos, porcinos, ovinos y caprinos. Si bien las brcelas poseen un amplio radio de distribucin, se transmiten del husped infectado a otro susceptible, cuando tal cosa ocurre, suelen localizarse en glndula mamaria, sistema retculo endotelial, tero y membranas fetales, Bordetella bronchiseptica se halla con cierta frecuencia en los pulmones de becerros y cerdos con neumonas crnica (Hagan, 1993). Los microorganismos de este gnero estn encuadrados

taxonmicamente en: Genero. Familia. Orden. Clase. Brucella Parvobacteriaceas Eubacteriales Esquizomicetos

Brucella es un bacilo corto, o cocobacilo pequeo e inmvil, que mide de 0.5 a 0.7 micras por 0.6 a 1.5. micras, con frecuencia los bacilos son tan cortos que son confundidos fcilmente con cocos, por lo comn se disponen en forma aislada, aunque en los cultivos pueden formar cadenas cortas, algunas cepas presentan gram-negativo de crecimiento pobre en medios ordinarios, requiriendo a veces medios especiales y con limitada accin sobre carbohidratos sin produccin de gas, debido a que es una bacteria intracelular facultativa. Brucella abortus suele descubrirse en racimos en los frotis exudados, es gram negativo y se tie con los colorantes ordinarios, aunque con cierta dificultad (Hagan, 1993).

No es acido resistente, pero puede resistir la decoloracin con algunos cidos ligeros, esta propiedad sienta las bases para algunos procedimientos de tincin diferencial (Hagan, 1993). 2.2. Brucella abortus. La enfermedad de los bovinos causada por infeccin con Br. abortus se caracteriza por aborto al final de la gestacin y cifras muy elevadas subsiguientes de infertibilidad (Blood, 2002). 2.2.1. Etiologa. Brucella abortus es el microorganismo causal y se le encuentra en varios biotipos (Abecia, 2000). 2.2.2. Epidemiologa. La brucelosis, ampliamente distribuida, posee enorme importancia econmica en casi todo el mundo, sobre todo entre el ganado lechero. La frecuencia vara considerablemente en diversas vacadas, en distintas regiones, y en diferentes pases (Abecia, 2000). Desde el punto de vista de la salud humana la brucelosis es importante por virtud de que el microorganismo causal puede producir fiebre ondulante en el hombre. La posibilidad de que la infeccin ocurra por leche infectada impone la necesidad de la pasteurizacin de este alimento. La mayor parte de casos en el hombre son de tipo ocupacional y se observan en matanceros, veterinarios y carniceros. El microorganismo puede aislarse de muchos rganos, adems de las ubres y tero, siendo grave motivo de exposicin el hecho de manipular cadveres de animales infectados (Valero, 1993).

Las prdidas de productividad causadas por este mal pueden tener gran importancia, primariamente por disminucin de la produccin de leche a causa de los abortos de las vacas (perdida de becerros), cabe mencionar que en empresas dedicadas a la produccin de carne, representa aun mayor importancia, ya que los becerros son la nica fuente de ingreso (SAGARPA, 2010). La infeccin afecta a bovinos de todas las edades, pero persiste con mayor frecuencia en animales sexualmente adultos. La infeccin congnita puede tambin atacar a becerros nacidos de hembras enfermas. La infeccin ocurre en el tero y puede permanecer latente en la ternera durante toda su vida (Blood, 1992). Se observa la concentracin ms elevada de Br. abortus en el contenido del tero gestante, en el feto y membranas fetales, pudiendo ser consideradas estas estructuras como las fuentes ms importantes de infeccin (Abecia, 2000). La enfermedad se trasmite mediante ingestin, penetracin de la conjuntiva y piel indemne, tambin puede diseminarse a partir de una vaca cuya leche contiene el microorganismo si se pone en contacto con una vaca no infectada. El pastoreo en reas infectadas o el consumo de otros materiales alimenticios y agua contaminados con secreciones y membranas fetales de vacas infectados se consideran las formas ms frecuentes de propagacin (Blood, 1992). La infeccin puede darse por medio de moscas, perros, ratas, fauna silvestre y otros objetos inanimados infectados, pero no se considera de mayor importancia en cuanto se refiere a las medidas de control (Blood, 1992). El microorganismo puede sobrevivir en los pastos durante periodos variables segn las condiciones del medio. En climas templados la capacidad infecciosa puede persistir durante 100 das en invierno y 30 en verano. El microorganismo es susceptible al calor, luz solar y desinfectante estndar, pero la refrigeracin permite supervivencia casi indefinida (Valero, 1993).
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Los toros no transmiten la infeccin de una vaca infectada a otra sana mecnicamente. Aquellos que estn infectados y expulsan semen que poseen microorganismos, probablemente no transmitirn la infeccin, pero la probabilidad de infeccin a partir del toro es muy grande si se emplea el semen para inseminacin artificial (Blood, 1992). Algunos toros infectados dan pruebas sanguneas de aglutinacin negativa y solamente pueden descubrirse por aislamiento de los microorganismos en el semen o por pruebas de aglutinacin en el plasma seminal (Blood, 1992). Las vacas que se curan quedan como portadores de infeccin aunque no aborten. La excrecin de microorganismos en la leche suele ser intermitente, y suele durar varios aos, en animales vacunados la excrecin de Br. abortus es menor que en los animales no vacunados. Los becerros procedentes de vacas reactoras positivas a las pruebas, estn inmunizados pasivamente gracias al calostro que ingieren (Valero, 1993). La propagacin de la enfermedad de un hato a otro y de una regin a otra siempre se debe a desplazamientos de animales infectados de un rebao en donde hay infeccin a otro que es susceptible pero que aun no ha sido infectado. Esta es la principal causa de las fallas en el programa de erradicacin de la brucelosis (Valero, 1993). 2.2.3. Patogenia. Br. abortus tiene predileccin decidida por el tero grvido, ubre, testculos y glndulas sexuales masculinas accesorias, ganglios linfticos, capsulas articulares y bolsas. Despus de la invasin inicial, se produce localizacin en principio de los ganglios linfticos que drenan la zona, y despus se propagan a otros tejidos linfoides incluyendo bazo y ganglios linfticos mamarios e iliacos (Meja, 1996).
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En vacas adultas no preadas, suele ocurrir localizacin en la ubre, y el tero, si se hace grvido, se infecta a partir de fases bacterimicas peridicas que se originan en las ubres. Las ubres infectadas son clnicamente normales, pero tienen gran importancia como fuente de reinfeccin del tero, como fuente de infeccin para los becerros o para el hombre que ingiere la leche y por ello son la base de la prueba de aglutinacin en leche y suero (Meja, 1996). La substancia denominada eritritol producida por el feto y que estimula el crecimiento de Br. abortus, ocurre naturalmente en concentraciones muy elevadas en la placenta y lquidos fetales y quiz dependa de ella que se localiza la infeccin en estos tejidos. El aborto suele producirse hacia el quinto mes de la gestacin, siendo el periodo de incubacin inversamente proporcional a la etapa del desarrollo del feto en el momento de la infeccin (Meja, 1996). 2.2.4. Signos clnicos. Los signos clnicos dependen del estado de inmunidad del rebao. En las hembras preadas no vacunadas altamente susceptibles sobreviene como signo cardinal el aborto pasado el quinto mes de la gestacin. Son secuelas frecuentes del aborto la retencin de la placenta y la metritis, seguida en algunas ocasiones por esterilidad (Blood, 1992). En el toro se observan ocasionalmente orquitis y epididimitis. Puede estar afectado uno o ambos sacos escrotales con tumefaccin aguda y dolorosa que aumenta hasta dos veces su tamao normal, si bien los testculos no se encuentran aumentados de volumen. La tumefaccin persiste durante largo tiempo y los testculos experimentan necrosis por licuefaccin quedando finalmente destruidos. Los toros enfermos suelen ser estriles cuando la orquitis es aguda, pero puede recuperarse su fecundidad normal si solamente se haya daado un testculo (Blood, 1992).

2.2.5. Patologa clnica. El principal objetivo del diagnostico de laboratorio de la brucelosis es identificar a los animales infectados, liberadores potenciales del organismo y propagadores de la enfermedad. La mayora de los animales enfermos se identifican usando las pruebas serolgicas estndar, pero puede haber infeccin latente en algunos animales, los cuales dan reacciones negativas (Meja, 1996). Mas aun, los animales vacunados pueden dar reacciones serolgicas positivas y no estar infectados, y pueden encontrarse ttulos transitorios espordicamente en un pequeo porcentaje de animales. Los anlisis de laboratorio utilizados en el diagnostico de brucelosis incluyen aislamiento del microorganismo, y pruebas en busca de la presencia de anticuerpos de Br. abortus en sangre, leche, moco vaginal, suero lcteo y plasma seminal (Meja, 1996). 2.2.6. Hallazgos a la necropsia. Los hallazgos a la necropsia carecen de importancia para el diagnostico; en algunos fetos, se comprueba neumona primaria. La placenta suele estar edematosa, observndose a veces placas coriceas sobre la superficie externa del corion y necrosis de los cotiledones (Abecia, 2000). 2.2.7. Diagnostico. Es difcil precisar el diagnostico de la causa del aborto en un animal aislado o en un grupo de bovinos debido a la multiplicidad de las mismas que lo pueden provocar. Cuando se halla bajo investigacin un problema de aborto se recomienda el siguiente proceso: Asegurar la edad del feto mediante la inspeccin y el registro de cras; tomar muestras de sangre para pruebas serolgicas con relacin a brucelosis, listeriosis y leptospirosis; examinar lquidos uterinos y el
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contenido del abomaso fetal, mtodos de cultivo para identificar Br. abortus, Campylobacter fetus, tricomnadas, listeria y hongos (Abecia, 2000). Los toros infectados pueden ser serolgicamente positivos o negativos, y el cultivo de su semen puede tambin ser positivo o negativo, pero el organismo puede ser aislado en el matadero. El examen clnico suele revelar la presencia de epididimitis, orquitis, vesiculitis seminal y ampulitis. Por tanto, los toros de hatos que se sabe estn infectados deben considerarse sospechosos a pesar de su condicin serolgica y no emplearse para inseminacin artificial (Abecia, 2000). 2.2.8. Tratamiento. En trminos generales no se lleva a cabo teraputica alguna en esta enfermedad. Han fracasado en el sentido de eliminar la infeccin los ensayos llevados a cabo con plasma bovino, sulfas, estreptomicina y cloro tetraciclinas, administradas por va parenteral, y las dos ltimas en infusiones en la ubre (Valero, 1993). 2.2.9. Control y erradicacin. La brucelosis bovina puede controlarse con un programa de vacunacin eficaz o mediante la erradicacin usando un programa de prueba y sacrificio. Aun con el programa de vacunacin amplia, habr focos de infeccin que se perpeten indefinidamente. La vacunacin es una de las alternativas de control, en algunos pases ya se ha alcanzado este estado de la enfermedad y en otros se estn llevando a cabo de programas erradicacin. Adems del problema de la exposicin de los humanos a la infeccin, deben evaluarse el costo y los beneficios econmicos de un programa de erradicacin considerando los costos y beneficios de un programa de control mediante vacunacin (Abecia, 2000).

Hay ciertas consideraciones bsicas que deben tomarse en cuenta en todos los programas encaminados a erradicacin de brucelosis (Abecia, 2000). a) Los programas de control inherentes a un rea determinada deben

recibir reconocimiento primario, y todo plan o planes debern ser adaptados a esa rea. b) Es necesaria la cooperacin absoluta a todos los niveles, tanto en lo regional como en lo nacional para que el programa tenga xito. La cooperacin se logra nicamente con un programa intensivo de educacin. El propietario de un hato infectado debe reconocer el problema de la brucelosis y expresar su voluntad de cooperar. c) d) Contar con un mtodo de diagnostico uniforme disponible para todo Si se descubre la enfermedad en un hato, deber contarse con el programa. procedimientos establecidos para manejar la enfermedad. Ya sea inmunizacin, eliminacin de animales infectados (investigar posibilidades de indemnizacin), para erradicar la enfermedad se necesita eliminar a los animales infectados.
e)

Por ltimo, y ms importante, el desplazamiento de animales de una

regin a otra debe ser controlada a un alto nivel. 2.2.9.1. Control por vacunacin. Todas las vacunas utilizadas para el control de Brucella sern constatadas y autorizadas por la Secretara, debiendo probarse cada lote producido conforme a las disposiciones de la misma. En la campaa se deben utilizar vacunas vivas, atenuadas y liofilizadas, para prevenir la brucelosis en bovinos, caprinos y ovinos (NOM-041-ZOO-1995). Todas las vacunas deben aplicarse por va subcutnea. La vacunacin para bovinos se ajustar a lo siguiente: Las vacunas utilizadas para la
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inmunizacin deben estar elaboradas con la cepa 19 de Brucella abortus u otra que autorice la Secretara como la cepa RB-51. (NOM-041-ZOO-1995). La vacunacin con la vacuna RB51, al igual que con la vacuna Cepa 19, tiene un doble beneficio: disminuye la susceptibilidad a la infeccin al conferir proteccin inmunitaria y reduce el nivel de exposicin a la infeccin al disminuir el nmero de animales excretores de Brucella abortus y reducir substancialmente el nmero de abortos en los rodeos infectados. La vacunacin no puede erradicar la brucelosis, pero puede sentar las bases para lograr ulteriormente la erradicacin (Casas, 2003). Tanto la vacuna RB51 como la Cepa 19 son estables y no se propagan de un animal a otro y su virulencia no aumenta por pasajes seriados en animales. La proteccin conferida por ambas vacunas es mediada por clulas. La Cepa 19 posee cierta patogenicidad para los humanos y debe usarse con precaucin para evitar la infeccin del operador. Tambin han ocurrido infecciones accidentales con la cepa RB51 pero no hay conocimiento de signos adversos causados por la infeccin. La patogenicidad de la cepa RB51 para los humanos est an pendiente de determinacin. Ambas vacunas deben ser administradas bajo la responsabilidad de un veterinario. La ventaja de la RB51 comparada con la cepa 19 es que no induce la formacin de anticuerpos los cuales son detectados por las pruebas estndar de diagnstico de brucelosis. Por lo tanto, los animales infectados pueden ser ms fcilmente identificados. La vacuna RB51 ha sido aprobada recientemente como vacuna oficial para el bovino por el Servicio de Inspeccin de la salud de los animales y las plantas: Departamento de Agricultura de Estados Unidos (APHIS/USDA) (Casas, 2003). La vacunacin comprende la aplicacin de dos tipos de vacunas.- una considerada como vacuna en dosis clsica para prevenir la enfermedad en becerras de 3 a 6 meses de edad, y otra para hembras mayores de 6 meses, incluso gestantes, denominada vacuna de dosis reducida. Esta ltima puede
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aplicarse en hembras a partir de los 18 meses en el caso de que hayan sido vacunadas con la dosis clsica a la edad de 3 a 6 meses. Tambin puede aplicarse en hembras mayores de 6 meses que no recibieron la vacuna con dosis clsica (NOM-041-ZOO-1995). Cuadro 1. Dosis de vacuna de Cepa RB-51 y Cepa 19.
Bovinos jvenes (Dosis Clsica) 3-6 Meses de Edad
Vacuna Cepa RB51 Vacuna Cepa 19 (dosis reducida usada desde 1980)

Bovinos adultos (Dosis Reducida) Mayores a 6 meses 1-3.4x109 UFC* 3-10x108UFC*

1-3.4 x1010 UFC* 3-10 x109 UFC*

*UFC: Unidades Formadoras de Colonia. Cuadro 2. Ventajas del uso de la cepa RB-51 contra la cepa 19. CEPA RB-51
Cepa rugosa, que impide la aparicin de serologa positiva al vacunar o revacunar. No induce serologa que interfiera con el diagnstico. Ms atenuada que Cepa 19 (al vacunar animales preados causa menos abortos). Ms segura para el vacunador. Permite la revacunacin de los animales a cualquier edad y mltiples veces. Induce niveles de proteccin similares a Cepa 19 al aplicarla una vez.

CEPA 19
Aparicin de serologa positiva al vacunar o revacunar. Ttulos serolgicos que interfieren en el diagnostico. Menos atenuada que la CepaRB-51, al vacunar animales preados produce ms abortos. Posee cierta patogenicidad para los humanos La revacunacin aumenta la frecuencia de reacciones de aglutinacin positivas posvacunal. Proteccin completa contra la infeccin en 6575% de los animales vacunados y en el 2535% restante una proteccin relativa. La vacunacin mltiple o tarda no ejerce ventaja apreciable.

La revacunacin aumenta la inmunidad del animal individual.

En Mxico el productor decide si utiliza Cepa 19 o Cepa RB-51, sin embargo, no se recomienda el uso de ambas cepas, la tendencia es utilizar RB-51
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para no tener problemas de interferencia con los diagnsticos y si es necesario poder revacunar las hembras. Las ventas de Cepa 19 han decado considerablemente al punto que los productores nacionales ms importantes de esta variedad, estn considerando no fabricarla ms. Esta situacin indicara que el productor est reconociendo las ventajas de un programa de vacunacin con Cepa RB-51 (Casas, 2003). Los animales que estn incubando la enfermedad (y no muestran serologa positiva en esos momentos) cuando es vacunado con cepa RB-51 se tornar positivo en algn momento post-vacunacin. Esto no es a causa de la vacunacin con RB-51 sino que los animales ya estaban infectados previamente, Debemos dejar bien claro que la vacuna, no cura la enfermedad, animales positivos al ser vacunados con Cepa RB-51 no se tornarn negativos (Casas, 2003). Medidas higinicas incluyen el aislamiento o desecho de animales infectados, de abortos, de secreciones de placenta y uterinas y la desinfeccin de las reas contaminadas. Es de particular importancia que se aisl a las vacas en el momento del parto. Todos los bovinos, caballos y cerdos llevados a la granja debern ser sometidos a prueba, aislados durante 30 das y vueltos a probar. Las vacas recin introducidas que se encuentren en preez avanzada debern mantenerse aisladas hasta despus del parto, ya que en algunas vacas infectadas pueden no tener reacciones serolgicas positivas sino hasta despus del parto o del aborto (NOM-041-ZOO-1995). 2.3. Brucella ovis. La enfermedad producida por la infeccin de los ovinos con Br. ovis se caracteriza por infertilidad en animales como consecuencia de epididimitis. Se cree que el aborto y la mortalidad neonatal se deben tambin a esta infeccin (Abecia, 2000). 2.3.1. Etiologa.

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Se ha designado al microorganismo causal como Br. ovis (Abecia, 2000). 2.3.2. Epidemiologa. En la naturaleza, solo ovinos padecen esta enfermedad. El

microorganismo puede sobrevivir en el pasto durante varios meses. Las ovejas en etapas inciales de gestacin, pueden infectarse por va oral o intravenosa. La infeccin de las ovejas dura poco y solo persiste en algunos animales, pero el microorganismo est presente en placenta, secreciones vaginales y leche despus del parto (Blood, 2002). 2.3.3. Patogenia. La primera anormalidad observable es la presencia de clulas

inflamatorias en el semen, que aparecen entre las 2 y 8 primeras semanas. Las lesiones testiculares y del epiddimo se pueden palpar a unas 9 semanas despus de la infeccin. La gravedad de las lesiones vara segn el estado inmunolgico del animal, apareciendo mayormente las lesiones en animales vacunados y aquellos que son serolgicamente positivos. Se considera que Br. ovis posee muy baja patogenicidad para la ovejas, el efecto primario de la infeccin es una placentitis que obstaculiza la nutricin del feto, a veces hasta el punto de causar su muerte, pero lo ms frecuente es que provoque el nacimiento de corderos con poco pelo (Blood, 1992). 2.3.4. Manifestaciones clnicas. La primera reaccin en animales enfermos es el descenso notable de la calidad del semen, presencia de leucocitos y brcelas en el mismo. Sigue edema e inflamacin del escroto. A la reaccin local acompaa reaccin general, incluyendo fiebre, depresin y amento de la frecuencia respiratoria. El aborto en ovejas es una caracterstica importante de la enfermedad (Blood, 1992).
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2.3.5. Patologa clnica. Examen cuidadoso del semen en busca de clulas inflamatorias y cultivo para identificar el microorganismo. En animales afectados entre los hallazgos se incluye el aislamiento de Br. ovis en el semen, y una reduccin en la calidad general del semen, una reduccin total de esperma, escasa motilidad y una gran proporcin de espermatozoides con formas anormales (Abecia, 2000). 2.3.6. Hallazgos a la necropsia. En la etapa aguda se observa edema inflamatorio de la fascia escrotal, exudado en la tnica vaginal y formacin temprana de tejido granuloso. En la etapa crnica, las tnicas de los testculos se engruesan, adquieren aspecto fibroso y se forma adherencia entre las mismas (Abecia, 2000). Se aprecian induraciones circunscritas en el epiddimo y puede haber granulaciones en el testculo. El aborto se caracteriza por engrosamiento y edema, restringido, a veces, a una parte de la placenta, placas firmes elevadas de color amarillento en los espacios intercotiledonarios y grados variables de anormalidades de los cotiledones, que en la etapa aguda son mucho ms grande, firmes y de color blanco amarillento (Abecia, 2000).

2.3.7. Diagnostico.

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El diagnostico se basa en tres exmenes fundamentales: prueba de fijacin del complemento en suero, palpacin del contenido del escroto y examen de cultivo de semen o de material abortado (Valero, 1993).

2.3.8. Tratamiento. Se logra eliminar en animales infectados experimentalmente por administracin combinada de clortetraciclina (800 mg va intravenosa) y estreptomicina (1 g va subcutnea), inyectados diariamente durante 21 das (Blood, 1992). 2.3.9. Control. Vacunacin.- La ms comn consiste en la inyeccin nica de una combinacin de cepas de Br. ovis muertas. En todos los programas de vacunacin debe de haber un plan conveniente de eliminacin de los animales clnicamente anormales descubiertos por palpacin de contenido escrotal (Abecia, 2000). 2.4. Brucella suis. La brucelosis causada por Br. suis es una enfermedad crnica de los porcinos que se manifiesta por esterilidad y aborto en las cerdas, gran mortalidad en los lechones y orquitis en varracos (Blood, 2002). 2.4.1. Etiologa. La enfermedad es causada por Br. suis (Blood, 2002). 2.4.2. Epidemiologa.

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Sobrevive en heces, orina y agua, durante 4 a 6 semanas. El microorganismo solo es patgeno para porcinos y para el hombre, aunque pueden infectarse otras especies, entre ellas bovinos y equinos, especialmente si conviven con jabales. Entre los porcinos, la susceptibilidad vara con la edad, y es mayor la frecuencia de infeccin en adultos que en lechones. Si bien es rara la infeccin antes del destete, las cras que se amamantan de cerdas infectadas pueden contraer la enfermedad, presentando ttulos mximos de aglutinamiento a la edad de entre 8 y 12 semanas, que desaparecen a las 16 semanas. La susceptibilidad es mucho mayor despus del destete e idntica en ambos sexos (Abecia, 2000). Si bien la ingestin del alimento contaminado por semen y orina infectados, y por secreciones procedentes de cerdas enfermas es quizs el medio ms frecuente de propagacin, la localizacin del proceso infeccioso en los genitales del macho hace de la transmisin venrea una forma importante de propagacin de este padecimiento (Abecia, 2000). 2.4.3. Patogenia. Las manifestaciones ms frecuentes son aborto y esterilidad como consecuencia de las fijacin del proceso infeccioso en el tero, linfadenitis (sobre todo de los ganglios linfticos cervicales), artritis y claudicaciones (por la localizacin de huesos y articulaciones), y parlisis posterior (debida a osteomielitis) (Blood, 2002). 2.4.4. Manifestaciones clnicas. Los signos ms destacados son aquellos en los que se encuentran involucrados el aparato genital. En las cerdas se observa infertilidad (que puede ser pasajera), estro irregular, camadas pequeas y aborto. La frecuencia del aborto vara mucho entre las distintas piaras, pero suele ser baja. Las cerdas

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abortan solo una vez, como norma general, y aunque el aborto es ms frecuente durante el tercer mes, puede ocurrir antes (Blood, 1992).

2.4.5. Patologa clnica. Debe intentarse el aislamiento del microorganismo siempre que se disponga de material adecuado. La ayuda diagnostica ms sencilla consiste en la realizacin de una prueba de aglutinacin en el suero, pero en esta enfermedad tiene grandes limitaciones (Blood, 1992). 2.4.6. Hallazgos a la necropsia. Pueden hallarse afectados muchos rganos, y son evidentes, sobre todo, los cambios crnicos. Es caracterstica la metritis crnica, caracterizada por inflamacin nodular, engrosamiento y formacin de abscesos en la pared uterina (Abecia, 2000). 2.4.7. Diagnostico. En porcinos incluyendo hipovitaminosis A, carencia de factores de complejo vitamnico B, y fractura de vrtebras lumbares en la osteomalacia. Entre otras anomalas pueden producir parlisis posterior y muchas intoxicaciones (Valero, 1993). 2.4.8. Tratamiento. Los tratamientos para esta enfermedad no ayudan mucho, y casi por lo regular no existe (Abecia, 2000). 2.4.9. Control.
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El control debe, por tanto, basarse en la prctica de ensayo y sacrificio. La otra posibilidad consiste en iniciar un programa de separacin en dos grupos, y se recomienda en piaras de raza pura que proporcionan animales con fines reproductivos (Blood, 1992). 2.5. Brucella melitensis. Br. melitensis produce brucelosis en caprinos y la fiebre de maltas o mediterrneo en el hombre (Abecia, 2000). 2.5.1. Epidemiologa. Es fcil la transmisin entre especies, que probablemente ocurre por ingestin, como en otra formas de brucelosis las hembras infectadas, tanto si paren normalmente como si abortan, eliminan gran numero de brucellas en las secreciones uterinas (Blood, 1992). 2.5.2. Patogenia. Como en otras formas de brucelosis, la patogenia depende de la localizacin en ganglios linfticos, ubre y tero despus de una bacteriemia inicial (Abecia, 2000). 2.5.3. Manifestaciones clnicas. El aborto final de la gestacin es el signo ms evidente, como en otras especies, puede registrarse una de tormenta de abortos cuando se inicia la enfermedad, seguida de un periodo de resistencia del rebao durante el cual no ocurren abortos (Blood, 1992). 2.5.4. Patologa clnica.
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Los mtodos de laboratorio empleados con ms frecuencia son el hemocultivo positivo, poco despus de que ocurre la infeccin y el aislamiento del microorganismo en fetos abortados, moco vaginal o leche (Abecia, 2000). La bacteriemia persiste durante un mes despus de la infeccin, y la infeccin de la glndula mamaria puede persistir durante aos (Abecia, 2000). 2.5.5. Hallazgos a la necropsia. No existen lesiones caractersticas en esta forma de brucelosis. El microorganismo causal puede aislarse con frecuencia de todos los tejidos, pero el bazo es el sitio ms frecuente de infeccin (Abecia, 2000). 2.5.6. Diagnostico. En muchos casos se formula el diagnostico de infeccin por Br. melitensis en animales por el hecho de haber identificado la infeccin en contactos humanos, lo que provoca un estudio y exploracin de la poblacin animal local. La manifestacin de la enfermedad varan, y solo es posible hacer un diagnostico positivo por aislamiento del microorganismo (Valero, 1993). 2.5.7. Tratamiento. No es posible practicar un tratamiento en animales (Blood, 2002). 2.5.8. Control. La medidas de control incluyen higiene durante el parto y eliminacin de los animales reactores o infectados. Se recomienda que haya lugares separados

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para las hembras que estn criando, la pronta separacin de la cra de su madre y de su ambiente, as como tambin la vacunacin (Blood, 2002). 2.6. Uso e interpretacin de las pruebas diagnosticas: pruebas serolgicas para brucelosis. Las pruebas serolgicas se usan ampliamente en el diagnostico de la brucelosis humana y animal. Si bien se tienen muchas pruebas para detectar anticuerpos especficos contra Brucella en suero, plasma sanguneo y otros lquidos orgnicos como leche, plasma seminal y moco vaginal, no existe ninguna prueba que aplicada aisladamente permita descubrir la totalidad de los casos de brucelosis. De aqu que los programas de erradicacin se basen en el criterio de diagnostico del hato (Meja, 1996). La eleccin de los mtodos de diagnostico para un programa de control y/o erradicacin depender de la especie animal, la poblacin bajo vigilancia, la tasa de prevalencia en las diferentes regiones, y los programas de vacunacin en curso (Meja, 1996). Para fines prcticos, las pruebas diagnosticas pueden dividirse en: a) Prueba tamiz o de screening. b) Pruebas de vigilancia epidemiolgica. c) Pruebas complementarias. 2.6.1. Pruebas de tamiz Este tipo de pruebas se caracterizan porque poseen una alta sensibilidad, lo que significa que pocos o ningn animal falso negativo resulta de su realizacin. Adems suelen ser pruebas sencillas, econmicas y practicas. Dentro de este grupo se incluye la prueba de tarjeta o rosa de bengala, la cual se puede realizar
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en el total de los animales de un hato; todos los sueros de los animales que resulten positivos, deben pasar a una prueba complementaria (Meja, 1996). 2.6.2. Pruebas de vigilancia epizootiologa En este grupo se incluye la prueba de anillo en leche, la cual se recomienda en reas controladas y libres de infeccin para descubrir hatos presuntamente infectados (Meja, 1996). 2.6.3. Pruebas complementarias Estas sirven para resolver problemas como: eliminacin o disminucin de las reacciones heteroespecficas; deteccin de anticuerpos incompletos; diagnostico correcto del mayor nmero de casos, especialmente los crnicos. Que suelen permanecer con diagnostico incierto; diferenciacin de ttulos residuales debidos a vacunacin o a infeccin. Estas pruebas se aplican en hatos problema, donde la infeccin persiste pese a la aplicacin de exmenes serolgicos y a una eliminacin rigurosa de reactores. Entre estas pruebas se incluyen la prueba de rivanol y la prueba de fijacin de complemento (Meja, 1996). La diferenciacin de los ttulos residuales de vacunacin de los de infeccin es difcil e incierta (en ambas condiciones estn presentes los mismos tipos de anticuerpos), pues existen diferencias en la proporcin relativa y en la persistencia de cada tipo de anticuerpo, que dependern de la edad al momento de la vacunacin, el tiempo transcurrido desde entonces, la exposicin a cepas de campo, la respuesta individual de los animales y la evolucin de la enfermedad. En estados crnicos de la enfermedad los ttulos de anticuerpos son frecuentemente irregulares, caen a niveles bajos y fluctan durante periodos indefinidos (Meja, 1996).

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La Norma Oficial Mexicana de la Campaa Nacional contra la Brucelosis en los animales (NOM) establece a las siguientes cuatro pruebas inmunolgicas como pruebas oficiales: prueba de tarjeta, Rivanol, fijacin de complemento y prueba de anillos en leche (Meja, 1996). 2.7. Indicaciones para la realizacin de la prueba En animales vacunados, las pruebas diagnosticas deben realizarse cierto tiempo despus de la vacunacin. En el caso de los bovinos, en las hembras mayores de 22 meses que hayan recibido la dosis clsica de vacuna cepa 19 de los 3 a 6 meses de edad, o bien en los que hayan recibido una dosis reducida, las pruebas debern realizarse 10 meses despus de la vacunacin. En el caso de los animales nunca antes vacunados, se realiza a partir de los 6 meses de edad (Meja, 1996). 2.8. Prueba de aglutinacin en tarjeta o prueba de rosa de bengala Con esta prueba se detecta la presencia de anticuerpos circulantes IgG e IgM, ya sean de origen vacunal, por infeccin natural o por antgenos naturales (reacciones cruzadas con otros microorganismos como Salmonella urbana, Escherichia coli, Pseudomonas spp., Yersinia enterocolitica, Pasteurella multocida, Bordetella bronchiseptica, Staphylococcus aureus) (Meja, 1996). 2.8.1. Materiales y reactivos
a) Antgeno

autorizado de Brucella abortus cepa 1119-3 al 8% de

concentracin celular para bovinos y al 3% para caprinos y ovinos, teido con rosa de bengala en acido lctico. El antgeno debe tener un pH de 3.65 (+/- 0.05). b) Sueros de bovino o caprino sospechosos no hemolizados.

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c) Micropipeta de 20 a 200 microlitros con sus respectivas puntillas, o bien pipetas de 0.1 ml. d) Placa de vidrio o acrlico transparente, con cuadricula de 3 x 3 cm. Cada cuadrado se utiliza para un solo suero. La placa mide 48 x 33 cm. e) Sueros control positivo y negativo. f) Palillos de madera. g) Aglutinoscopio, el cual es una caja de lectura con fondo negro mate con iluminacin interior a base de focos, del tamao de las placas: 48 x 33 x 12 cm). h) Cronometro. 2.8.2. Recomendaciones El antgeno y los sueros deben mantenerse en refrigeracin (4 C), pero al momento de comenzar a trabajar, tanto los antgenos como los sueros deben estar a temperatura ambiente, por lo que debern sacarse del refrigerados aproximadamente 30 a 60 minutos previos a la realizacin de la prueba. El antgeno no debe congelarse nunca (Meja, 1996). 2.8.3. Procedimientos i. ii. iii.
iv.

Tenga los sueros y el antgeno a temperatura ambiente; preferentemente debe utilizarse solo la cantidad de antgeno que se va a utilizar en el da. Coloque 30 microlitros ( 0.03 ml de la pipeta) de cada muestra de suero en cada uno de los cuadrados. Agite el antgeno y agregue 30 microlitros (0.03 ml) del antgeno junto a cada gota de suero. Inmediatamente despus de que se agrego la ltima gota de antgeno, mezcle el suero y el antgeno por rotacin con un palillo, de modo que se obtenga una mezcla homognea. Mezcle por rotacin manual de la placa

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por 4 minutos y proceda a realizar la lectura en el Aglutinoscopio iluminado. 2.8.4. Lectura de resultados Negativo.- Se aprecia un color rosado uniforme sin aglutinacin ni formacin de grnulos (Meja, 1996). Positivo.- Se consideraran positivos, todos aquellos sueros que presenten aglutinacin, desde muy ligera hasta la formacin de grnulos grandes. La aglutinacin perceptible se considera positiva. Los grnulos se aprecian teidos y el lquido deber quedar semitransparente. A veces pueden formarse algunas partculas de diferente tamao que forman parte del suero (glbulos de grasa o fibrina), pero que no tienen que ver con la aglutinacin. Debe tenerse cuidado de no confundir esta reaccin. Los sueros que pasan de los 4 minutos se resecan y pueden aparentar unos pequeos grumos en la orilla (Meja, 1996). Todos los sueros con resultados positivos debern pasar a una segunda prueba confirmatoria. En el caso de los bovinos, la prueba confirmatoria es el rivanol o la fijacin de complemento; en el caso de las cabras y los ovinos, solo se acepta la prueba de fijacin de complemento (Meja, 1996). 2.9. Prueba de Rivanol Cuando se tienen sueros positivos a la prueba de rosa de bengala, la prueba de rivanol puede diferenciar entre animales vacunados o animales infectados naturalmente (Meja, 1996). La solucin de rivanol precipita selectivamente la IgM y las

macroglobulinas del

suero de bovinos, los cuales son separados por

centrifugacin quedando nicamente IgG: la prueba de aglutinacin en placa se

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efecta con el sobrenadante. Como el rivanol es un derivado de la acridina, debe conservarse en refrigeracin y protegido contra la luz, en frascos mbar y/o cubiertos con aluminio. Como en la prueba de tarjeta, tanto el antgeno como los sueros y el rivanol deben estar a temperatura ambiente al momento de realizar la prueba (sacar de refrigeracin 1 hora antes) (Meja, 1996). 2.9.1. Materiales y reactivos
a) Antgeno autorizado de Brucella abortus cepa 19, teido con una mezcla de

verde brillante y cristal violeta, con pH 5.8 a 6.2, y 4% de concentracin celular. b) Solucin de rivanol al 1%. El rivanol es el lactato de 2-etoxi-6.9- diamino acridina. Debe mantenerse a 4C y en la oscuridad cuando no se utilice. c) Pipetas de 0.2 ml graduadas en 0.01 a 0.001 ul, o bien pipetas de Bang, o micropipetas con la graduacin anterior.
d) Gotero metlico calibrado a 0.03 ml (30 microlitros) para el antgeno.

e) Placas de vidrio o de acrlico transparente de 48 x 33 cm, con cuadrados de 3 x 3 cm. f) Palillos de madera. g) Aglutinoscopio, el cual es una caja de lectura con fondo negro mate con iluminacin interior a base de focos, del tamao de las placas: 48 x 33 x 12 cm). h) Centrifuga. i) Tubos de 13 x 100. 2.9.2. Procedimiento i.
ii.

Marque cada unos de los tubos para cada muestra a probar y agregue 0.4 ml de la solucin de rivanol al 1% a cada tubo. En cada tubo con solucin de rivanol depositar 0.4 ml del suero problema y agitar el tubo mezclando bien y dejar reposar de 20 a 30 minutos.
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iii.

Centrifugar las muestras a 1,000 xg (aproximadamente 2,000 rpm en un cabezal de 23 cm de radio total, hasta el extremo del portatubo), durante 5 a 10 minutos.

iv.

Con pipeta serolgica de Bang o de 0.2 ml, aspirar el liquido sobrenadante y hacer una prueba de aglutinacin (similar al mtodo de Huddleson) En una placa de vidrio clara y limpia, depositar las siguientes cantidades de suero: 0.08, 0.04, 0.02, 0.01 y 0.005 ml.

v.

Agregar una gota (0.03 ml) de antgeno a cada volumen de liquido en la placa, mezclar con palillos o agitador mltiple, comenzando con la cantidad mas pequea (0.01 ml). Cada solucin debe extenderse de forma que cubra la superficie del cuadrado.

vi. vii. viii. ix.

Incline la placa imprimindole un movimiento circular, hacindola girar 4 veces. Coloque la placa sobre la caja de lectura o Aglutinoscopio (con la luz apagada) e incube por 6 minutos (mrquelos en el reloj). Transcurrido el tiempo, mueva la placa nuevamente 4 veces con movimientos circulares, e incube 6 minutos ms. A los 12 minutos vuelva a inclinar la placa con movimientos circulares 4 veces y realice la lectura en la caja, o con una fuente de luz indirecta y fondo oscuro. 2.9.3. Lectura de resultados e Interpretacin Para facilitar las lecturas y la comparacin con los resultados en otras

pruebas, se acepta denominar a las diluciones obtenidas como 1:25, 1:50, 1:100, 1:200 y 1:400 respectivamente. El resultado se expresa con la dilucin ms alta en la que se observa aglutinacin (Meja, 1996). Positivos.- Cualquier aglutinacin de la mezcla suero/antgeno es significativa, incluso en las diluciones mas bajas, por que la prueba detecta anticuerpos del grupo IgG (Meja, 1996).
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Negativos.- No hay evidencia de aglutinacin. Reporte de los resultados positivos en la dilucin ms alta, ejemplo: reaccin en 1:100, se reporta como 1:100 (Meja, 1996). Volumen 0.08 ml 0.04 ml 0.02 ml 0.01 ml 0.005 ml Valor de dilucin 1:25 1:50 1:100 1:200 1:400

En animales no vacunados, cualquier aglutinacin, se considera positiva; en ganado vacunado, la aglutinacin en la dilucin mayor o igual a 1:50 ser una prueba positiva (Meja, 1996). 2.10. Prueba de anillo en leche Con esta prueba se detecta la presencia de anticuerpos IgA, IgG e IgM contra Brucella abortus en muestras de leche. No se recomienda su realizacin en leche de caprinos, ni en la leche homogenizada. Esta prueba se realiza como prueba de vigilancia epidemiolgica solo en leche de vacas; los resultados deben confirmarse con pruebas serolgicas. La prueba esta indicada para muestras de hatos (tanques mezcladores, botes de recoleccin, etc.) (Meja, 1996). La prueba se practicara en muestras de leche en entera, crema, queso u otro subproducto lcteo, con antgeno autorizado. La leche para este anlisis debe estar colectada 24 horas antes de realizar la prueba y puede almacenarse en mximo de 3 das. Las muestras de leche en mal estado no se deben analizar porque dan resultados falsos (Meja, 1996).

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2.10.1. Materiales y reactivos

a) Antgeno de Brucella abortus cepa 1119-3 teido con hematoxilina, con pH

de 4.0 a 4.3 y una concentracin celular de 4%.

b) Tubos de 13 x 100 y Gradilla

c) Micropipeta o gotero calibrado d) Estufa bacteriolgica o bao mara. 2.10.2. Procedimiento i. ii. iii. iv. v.
vi.

La muestra de leche y el antgeno debern mantenerse a temperatura ambiente (no debe agitarse ni calentarse la leche). De preferencia identificar 2 tubos por cada muestra de leche problema. Depositar 1 ml de la leche problema en cada tubo. Agregar una gota del antgeno (0.03 ml) con Micropipeta o gotero calibrado. Mezcle suavemente el contenido de cada tubo, tapndolo con el dedo ndice. Incubar a 37C por una hora, ya sea en estufa bacteriolgica o en bao mara. Al trmino, procede a realizar la lectura. 2.10.3. Lectura de resultados e Interpretacin Positivo.- El antgeno aglutinado sube a la superficie y forma un anillo

azul en la parte superior de la leche (Meja, 1996). Negativo.- No se observa cambio. El tubo de leche se observa uniformemente coloreado (Meja, 1996). Los resultados positivos deben notificarse a los propietarios del hato, y debe procederse a realizar las pruebas serolgicas individuales (Meja, 1996).

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2.11. Fijacin de complemento Esta prueba se realiza en muchos pases para el diagnostico confirmatorio de Brucella spp. En la brucelosis bovina, aunque tanto los anticuerpos IgG como IgM fijan el complemento, el isotopo IgG, es mucho ms efectivo que la IgM en la fijacin de complemento. La prueba detecta anticuerpos producidos por la vacuna cepa 19 de Brucella abortus hasta los 6 meses de edad. La IgG no fija el complemento por otras inmunoglobulinas, produciendo un fenmeno de positividad prozona (en las primeras diluciones, la prueba aparece negativa y en las ms altas se observa positividad) (Meja, 1996). La prueba consiste en 2 etapas. En la fase invisible se mezclan el antgeno y los anticuerpos con una cantidad exacta de complemento. En la segunda fase (visible), despus del periodo de incubacin para que se fije el complemento libre a la unin se debe agregar un indicador adecuado, el cual consiste en glbulos rojos de borrego previamente sensibilizados, es decir con una hemolisina especifica (anticuerpos antieritrocitos) (Meja, 1996). Si el complemento quedo fijo en la reaccin primaria, ya no queda complemento disponible para lisar los eritrocitos sensibilizados del sistema indicador; no se produce hemolisis, representando esto un resultado positivo (presencia de anticuerpos antibrucela en el suero). Si el complemento no se fija en la reaccin primaria, queda disponible para reaccionar con los glbulos rojos sensibilizados y se produce hemolisis, lo que significa un resultado negativo (Meja, 1996). En la prueba se utiliza complemento de cobayo, la hemolisina es un suero hiperinmune de conejo, anti-glbulos rojos de carnero. Este se consigue comercialmente, diluido al 50% con glicerol (Meja, 1996).

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Aunque los resultados de la prueba de fijacin de complemento son muy fiables, ya que es sumamente sensible y especifica, el inconveniente de ser sumamente laboriosa; adems participan muchas variables que afectan su uniformidad y algunos de sus ingredientes pierden actividad rpidamente, por lo que es esencial aplicar controles para cada una de las partes (Meja, 1996). Esta prueba se ha utilizado en los pases nrdicos (Dinamarca, Finlandia, Noruega, y Suecia), donde la brucelosis a ha sido erradicada y en pases como Australia, Cuba, EUA, Nueva Zelanda, etc., donde ya hay erradicacin y/o control de la enfermedad (Meja, 1996). 2.12. Prevalencia de Brucelosis en Mxico y en Chiapas En Mxico, la brucelosis es sin duda una de las enfermedades zoonticas ms importantes, debido a los elevados ndices de prevalencia en las diferentes especies animales y la frecuencia con que estos la transmiten al hombre. La mayora de los casos de brucelosis en humanos es producida por Brucella melitensis. Sin embargo es frecuente la infeccin con Brucella abortus y en menos proporcin con Brucella suis (SAGARPA, 2010). En Mxico, segn la Secretaria de Salud, se registran anualmente un promedio de 6,500 casos de Brucelosis humana. Esta cifra representa solo los casos registrados de paciente que demandan atencin mdica, por lo que se considera que solo representa al 30% de la poblacin afectada (SENASICA, 2008). Las prdidas econmicas, de acuerdo a trabajos realizados en Mxico, se calculan que ascienden en ganado de carne a N$ 5,911,070.5 y en ganado de leche a N$ 7,492,584. Los datos estadsticos considerados referentes a la eficiencia reproductiva son del 65% para ganado de carne y para ganado de leche son del 70%. En este contexto las prdidas se han estimado en N$ 16,255,433
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para ganado de carne y para ganado de leche en N$ 22,477,752 considerando que el hato de carne se constituye de 95% de hembras y en ganado de leche el 98%. El valor de reposicin en nuestro pas en ganado de carne N$ 1,456,000 y en ganado de leche N$ 1,942,000,000. Se ha demostrado que en vacas con Brucelosis disminuyen su produccin lctea en un 20%, estimndose que los litros perdidos promedio por vaca son 217 litros por ao; en total las prdidas son de N$ 59, 994,008 (SAGARPA, 2010). En casi toda la repblica Mexicana existe una prevalencia superior al 5% en casi todos los estados, con excepcin de las regiones del norte en las que la infeccin por Brucella abortus ocurre en menos frecuencia, siendo mayor en los estados con climas tropicales como Veracruz, Tabasco y Chiapas (SAGARPA, 2011). A nivel nacional, Mxico tiene el 8% en su territorio libre de brucelosis, 11.2% est en proceso de erradicacin y el 80.8% en control (CONASA, 2011). Fig. 1. Estatus de la brucelosis en Mexico.

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La brucelosis en la repblica mexicana oscila un 3% en animales de desechos provenientes de hatos contaminados hasta un 70% para animales estabulados (CONASA, 2011). En el estado de Chiapas se han realizado estudios espordicos o regionales (tesis recepcionales), muestreo por partes de los ganaderos a sus hatos, anlisis y pruebas de laboratorio oficiales sin que estos hayan sido glosados y/o sistematizados as encontramos una prevalencia de brucelosis en bovinos del municipio de Tapachula de 10.81 % (Camilo, 1988); 0.15 % para animales del municipio de Tuxtla Gutirrez (Mundo, 1989); 3 % del municipio de ciudad Hidalgo (Maldonado 1992); el 2.14 % en Pijijiapan (Aranda, 1988); en Berriozbal 0.04 % (Rodrguez, 1987); Tonal 5.74 % (Meda, 1973); Chiln 2.34 % (Robles, 1994). Estudios ms recientes realizados por SAGARPA, en el periodo enero junio del ao 2011, indicaron que Chiapas tuvo una frecuencia de brucelosis en ganado bovino de 0.54%, esta frecuencia es baja comparada con lo que se obtuvo de Michoacn que fue de 10.07%. Estudios en el 2011, realizados por el CFPP y SAGARPA, ubican a Chiapas en un estado zoosanitario de Control con respecto a la brucelosis en ganado bovino. De acuerdo a los datos obtenidos en el ao 2005, en el Campo Experimental Pichucalco, Chiapas, bajo la supervisin del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrcolas y Pecuarias, se determino la prevalencia de brucelosis en las diferentes Regiones de Chiapas: Centro 0.4%, Altos 5.5%, Fronteriza 3.4%, Frailesca 0.4%, Norte 3.8%, Selva 5.6%, Sierra 1.7%, Costa 4.5%, Soconusco 6.1%,

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III.- MATERIAL Y METODOS

3.1. Localizacin del rea de estudio Chiapas es un estado situado en el sureste de Mxico dentro de la regin Pacfico Sur. Limita por el norte con el estado de Tabasco, por el este con Guatemala, por el sur y sureste con el Golfo de Tehuantepec del Ocano Pacfico, y por el oeste con los estados de Veracruz y Oaxaca. Ocupa el 8 lugar en el conjunto del pas en cuanto a extensin territorial.

El estado de Chiapas se divide poltica y administrativamente en 118 municipios con un total de 19.455 localidades. Superficie, 73.887 km2; poblacin del estado, 4.796.580 habitantes. Nuestro estado es considerado como el granero del sureste del pas; sus cultivos principales son: maz, sanda, caf, mango, pltano, aguacate, cacao, algodn, caa de azcar y frjol, entre otros. Muchos de estos productos son de exportacin. La ganadera es importante: esta es destinada a la produccin de carne y de leche esta es la de mayor peso, incluso a nivel nacional.
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El Municipio de Tecpatn es uno de los 118 municipios del estado mexicano de Chiapas, se encuentra en el noroeste del estado y gran parte de su territorio se encuentra ocupado por el embalse de la Presa "Netzahualcyotl", mejor conocida como Presa Malpaso. Su cabecera es el pueblo de Tecpatn. Tecpatn est localizada en las coordenadas: Latitud 16 59- 1724 y longitud 93 14' - 93 53' y a una altitud de 320 metros sobre el nivel del mar y a las orillas del ro Totopac, un afluente del Ro Grijalva, que actualmente se une a l en el embalse de la Presa Malpaso, se encuentra a unos 80 kilmetros al norte de la capital del estado, la ciudad de Tuxtla Gutirrez con la que se comunica mediante una carretera asfaltada que la une adems con las poblaciones de Copainal, Chicoasn y San Fernando, esta misma carretera la une hacia el oeste con Raudales Malpaso, la mayor poblacin del municipio y desde donde se puede comunicar con los estados de Veracruz de Ignacio de la Llave y Tabasco.

Fig. 2. Localizacin del municipio de Tecpatn. El municipio de Tecpatn se encuentra en la zona noroeste del estado de Chiapas, sus lmites son al norte con el Municipio de Ostuacn, al noreste con el de Francisco Len, al este con los de Ocotepec y Copainal, al sur con los de

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Cintalapa y Ocozocoautla de Espinosa y al noroeste con el estado de Veracruz de Ignacio de la Llave, particularmente con el municipio de Las Choapas. Su extensin territorial es de 37,543 km, uno de los ms extensos del estado de Chiapas, y representa el 6.09% del territorio del estado. Tecpatn se encuentra en la mayor regin hidrolgica de Mxico, la Regin Grijalva-Usumacinta, y a las cuencas Ro Grijalva - Villahermosa al norte y a la Ro Grijalva - Tuxtla Gutirrez. La zona norte del municipio registra un clima clasificado como Clido hmedo con lluvias todo el ao y el sector sur tiene clima Clido hmedo con abundantes lluvias en verano, todo el territorio tiene una temperatura media anual que va de 24 a 26C, y la precipitacin media anual en la mayor parte del territorio va de 3,000 a 2,000 mm, a excepcin de la zona sur donde es 2,000 a 1,000 mm, y en la zona de los lmites con Veracruz donde es de 4,000 a 3,000 mm. La vegetacin del municipio se divide en selva alta, localizada principalmente al sur de la presa Malpaso y en sectores del norte del municipio, y en pastizales que se ubican en la zona central del territorio. En el territorio del municipio hay un total de 360 localidades 3.2. Poblacin objetivo El presente estudio se llevo a cabo en bovinos de la Asociacin Ganadera Local General del Grijalva ubicada en la colonia Luis Espinosa, Municipio de Tecpatn, Chiapas, cabe mencionar que estos bovinos, estn bajo el sistema de produccin lechera en pastoreo y para la seleccin de los animales que muestrearon, no se tomo en cuenta sexo, raza (biotipo), edad y estado fsico.

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3.3. Determinacin del tamao de la muestra Para determinar el tamao de la muestra se utilizo la frmula propuesta por Yamane (1989), que consiste en obtener una muestra aleatoria al azar con un nivel de confianza del 5%, determinando as, la cantidad de animales a los que se les realizaron las pruebas.

no= Numero de bovinos a muestrear z= Estimador de confianza (2) = Intervalo de confianza (0.5) e= Error mximo permisible (0.05) N= Poblacin estimada de ganado bovino (2,634) 1= Constante no= Poblacin estimada a analizar = 347 (tamao de la muestra).

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3.4. Diseo metodolgico Una vez obtenido el tamao de la muestra, se llevo a cabo un muestreo aleatorio sin reemplazo, el modelo de muestreo aleatorio sin reemplazo, es el ms usado cuando se tiene un marco de muestreo que especifica la manera de identificar cada unidad en la poblacin. Cada unidad se extrae con igual probabilidad, por etapa y sin reemplaz, hasta tener las unidades de la muestra (Camarillo, 1991). Diremos que un muestreo es aleatorio sin reemplazo cuando, el proceso de seleccin de la muestra garantice que todas las muestras posibles que se pueden obtener de la poblacin tienen la misma probabilidad de ser elegidas, es decir, todos los elementos de la poblacin tienen la misma posibilidad de ser seleccionados para formar parte de la muestra (Lagares, 2001). Para seleccionar a los 347 animales a muestrear, lo ms sencillo fue hacer un sorteo para elegir a estos animales, es decir, escogerlos al azar, as todos tienen las mismas probabilidades de estar en la muestra. 3.5. Recoleccin de las muestras La posicin adecuada y sujecin efectiva del animal son esenciales para un muestreo con xito (Valero, 1993). La prctica apacible y suave deber minimizar la necesidad de

manejo fsico humano. No solo deben ser minimizados los trastornos fsicos y psquicos sobre bases humanitarias, sino tambin porque la sangre tomada de un animal asustado, adrenalizado, puede originar resultados equivocados en varios anlisis, por ejemplo, la glucosa y los cidos grasos no esterificados (Valero, 1993).

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El sitio de puncin debe estar limpio y libre de patgenos La sangre venosa es la muestra ms comn obtenida de los animales. Las tcnicas varan de una especie a otra, segn la localizacin de los vasos sanguneos convenientes y el espesor, dureza y capa de la piel. La sangre es obtenida de las venas yugular, mamaria (abdominal subcutnea) y caudales y de las arterias cartida, caudal y braquiales (Valero, 1993). Una vez que se obtiene la muestra de sangre (en tubos sin anticoagulante), conservar a temperatura ambiente y cuidarlo de los rayos directos del sol, se espera a la separacin de las partes solidas de las mismas para as obtener el suero sanguneo, el cual se utiliza en las pruebas de aglutinacin. Nunca congelar los sueros con cogulo. Se puede congelar el suero limpio tras retirar el cogulo. Proteger los tubos frente a los golpes (Valero, 1993). 3.6. Conservacin y transporte de las muestras El medio ideal para la conservacin es el hielo natural, hielo seco, o gel refrigerante en fundas hermticas. Se recomienda la utilizacin de neveras, para su facilidad en el transporte. Las muestras deben ir identificadas, colocndolas sobre un material o recipiente que amortige los golpes. Siempre que sea posible, sean transportadas directamente al laboratorio por personal competente (Valero, 1993). Deben entregarse al laboratorio lo antes posible, para que esta sea analizada lo ms pronto posible. La transferencia de muestras de una persona a otra o de un lugar a otro no debe hacerse descuidadamente, la obtencin, transporte y anlisis de una muestra de sangre debe hacerse lo ms cuidadosamente posible (Valero, 1993).

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3.7. Metodologa del laboratorio Se llevara a cabo la prueba de tarjeta ya que es un mtodo rpido y sensible para la deteccin de Brucella y como prueba confirmatoria la Prueba de Rivanol en Placa. 3.7.1. Materiales
Aba test tarjeta al 8%. Antgeno Brucella abortus (Prueba de tarjeta) Aba test Rivanol. Antgeno Brucella abortus (Prueba Rivanol en placa)

Aglutinoscopio
Micropipeta y Micropipeta graduada

Vaso precipitado Puntillas Placa acrlica Gradilla Cronometro Palillos de madera y papel sanita 3.7.2. Realizacin de la prueba de tarjeta El suero se coloca en sendos campos de una placa de vidrio dividida en cuadros e iluminada, mezclndolo, en cada uno de estos campos, con una gota de antgeno. En caso de infeccin, aparece en el plazo de cuatro minutos una aglutinacin de las bacterias teidas. 3.7.3. Interpretacin de la prueba de tarjeta Sern positivos todos los que presenten aglutinacin del suero, todos los sueros con resultados positivos debern pasar a una segunda prueba confirmatoria. En el caso de los bovinos, la prueba confirmatoria es la de Rivanol.
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3.8. Determinacin de la tasa de prevalencia Los resultados obtenidos son analizados mediante la frmula descrita por San Martn (1977), la cual indica que la tasa de prevalencia se obtiene de la divisin del total de los casos positivos, sobre la poblacin total muestreada, multiplicada por 100. N total de casos positivos Prevalencia Total (PT)= -------------------------------------------------------- X100 N total de la poblacin muestreada

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IV.- RESULTADOS.

Los resultados obtenidos en la presente investigacin, demuestran la presencia de Brucella abortus en ganado bovino perteneciente a la Asociacin Ganadera Local General del Grijalva.
El siguiente cuadro es de los bovinos que fueron sometidas a la prueba de tarjeta,

se consideraran positivos, todos aquellos sueros que presenten

aglutinacin, desde muy ligera hasta la formacin de grnulos grandes. Cuadro 3. Bovinos muestreados y resultados a la prueba de tarjeta.
NUMERO DE ARETE 3175 6068 6062 6089 6074 0846 0859 6105 8149 2570105 0847 0830 2570196 3222 0853 3168 6079 6096 2204020 0834 6006 1785119 3493 6003 3488 3485 1785085 4430167 6043 POSITIVO NEGATIVO X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 41 NUMERO DE ARETE 2204593 0851 3490 3487 0854 3491 6008 0835 6000 H.PIATA 5833 0849 0852 3492 0842 3178 6082 6095 6097 8016 0868 0839 6099 3169 0840 6070 6014 4281 3486 POSITIVO NEGATIVO X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29

59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107

NUMERO DE ARETE 0832 0843 0858 9330 3489 0869 0871 0870 6078 5038 3177 6020 2665269 0848 6081 0863 0877 0841 0856 0836 4084585 3181 3639086 04806047 26493 4441603 09209782 1186667 09190950 09190937 09190952 09194294 09190938 2631042 26482 09190957 1773815 LA VENADA 2535759 09190935 CANARIO LA MOTA LA CHUI CHAPARRA LA CANELA EL CARETO CUERVO CHINO SOLO VINO

POSITIVO NEGATIVO X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

108 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156

NUMERO DE POSITIVO NEGATIVO ARETE GORDO X SIMARRON X 2216447 X 2631036 X 2216252 X 3639089 X 08486450 X 3639151 X CARETA X 09283329 X 26473 X LA GUAYABA X 09283327 X 09283328 X 3639091 X BARCINA X LA TIGRA X 08486449 X MOTILONA X 4441606 X LA MUECA X LA PEA X 09190954 X 2631043 X 09190951 X CAPRICHOSA X AGUILA X 09190943 X INDIO X CAPRICHOSO X 4086185 X 2221051 X 2519297 X 8045 X 8041 X 2489636 X 6037 X 3599006 X 8042 X 8035 X SHAKIRA X 80002 X 8026 X 1785201 X 4086181 X CHABELA X 4430160 X 1240964 NUMERO DE POSITIVO NEGATIVO

157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204

ARETE 2489728 4086179 8056 2579471 4086188 4086172 8010 2579480 08558 4086190 LUCERO II 4430170 4086182 4086170 8004 8034 4530171 3599002 4430164 8029 8052 6039 3599018 4430168 8057 4087178 4086189 4086187 070998 3191 3198 3202 8304 3012 3201 8332 3015 3018 8334 8346 149606 8348 3016 8342 8330 1748115 3185 8333 NUMERO DE ARETE

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X POSITIVO NEGATIVO

205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252

253

3013 8361 3207 8359 8351 8360 0875 8343 4436321 4436320 RAYERA 5166 8989 0918 2227541 5157 9316 8986 8987 PINTA 0919 0920 5165 1478 7991 8988 8090 5167 18992 0001 0002 0003 0004 0005 0006 0007 0008 0009 0010 0011 0012 0013 0014 0015 0016 0017 0018 0019 NUMERO DE ARETE 0020

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X POSITIVO NEGATIVO X

254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299

0021 0022 0023 0024 0025 0026 0027 0028 0029 0030 0031 0032 0033 0034 0035 0036 0037 0038 0039 0040 0041 0042 0043 0044 0045 0046 0047 0048 0049 0050 0051 0052 0053 0054 0055 0056 0057 0058 0059 0060 0061 0062 0063 0064 0065 0066 NUMERO DE ARETE 0067 0068

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X POSITIVO NEGATIVO X X

300 301

302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324

0069 0070 0071 0072 0073 0074 0075 0076 0077 0078 0079 0080 0081 0082 0083 0084 0085 0086 0087 0088 0089 0090 0091

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343 344 345 346 347

0092 0093 0094 0094 0095 0096 0097 0098 0099 0100 0101 0102 0103 0104 0105 0106 0107 0108 0109 0110 0111 0112 0113

X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

Despus de analizar 347 muestras, se obtuvo un resultado de 18 animales positivos a la Prueba de Tarjeta, cuando un animal resulta positivo a esta prueba es necesario llevar a cabo una prueba confirmatoria de estos animales, esto siempre se lleva acabo en pruebas de campo, en ganado bovino la prueba confirmatoria es la de Rivanol en placa. Cuadro 4. Resultados de la Prueba de Rivanol.
Identificacin de los animales (aretes, 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 nombres). La Chaparra 4430167 8987 9316 3207 3191 0920 0937 0100 4086185 8042 Resultado a la Prueba de Rivanol en Placa N* N POSITIVA N N N POSITIVA POSITIVA N N N 1/400 1/400 1/400 DILUCIN

12 13 14 15 16 17 18
N*= NEGATIVA

0007 3815 0039 0019 TORCAZA PELUZA 0088

N POSITIVA N POSITIVA N N POSITIVA

1/400 1/400 1/400

Una vez realizada la prueba confirmatoria a las 18 muestras, el resultado fue de 6 muestras positivas a la Prueba de Rivanol en Dilucin 1/400. Con los resultados obtenidos podemos determinar que de un total de 347 animales muestreados, 6 resultaron positivas a Brucella abortus, lo que equivale a una prevalencia de 1.73% de la poblacin muestreada. Figura 3. Prevalencia de Brucelosis.

V.- DISCUSIN.
La prevalencia encontrada en la Asociacin Ganadera Local General del Grijalva es de 1.73%, esta prevalencia es baja, comparada con lo que reporta SAGARPA en Chiapas que es de 0.54% (2011). La prevalencia que ms se asemeja a la obtenida en este trabajo es de Mundo (1989), en un estudio que realizo en la ciudad de Tuxtla, Gutirrez, obtuvo una prevalencia baja de 0.15%. En Tapachula se encontr una prevalencia de 10.81% (Camilo, 1988), comparada con este estudio, la prevalencia es alta. Otros estudios de hace tiempo, demuestran que existe un 3 % de prevalencia en el municipio de ciudad Hidalgo (Maldonado 1992), un 2.14 % en Pijijiapan (Aranda, 1988), en Berriozbal 0.04 % (Rodrguez, 1987), Tonal de 5.74 % (Meda, 1973) y Chiln con un 2.34 % (Robles, 1994). Debemos tener en cuenta que desde hace tiempo y hasta el da de hoy la prevalencia sigue siendo baja, pudiendo haberse erradicado hoy en da, la falta de presupuesto y de informacin y confianza por parte de los productores, detiene el proceso de erradicacin de la brucelosis en ganado bovino. La informacin dada por el Comit de Fomento y Proteccin Pecuaria y Secretaria de agricultura, ganadera, desarrollo rural, pesca y alimentacin, en Octubre del ao 2011, ubican a Chiapas en un estado zoosanitario de Control

con respecto a la brucelosis en ganado bovino, esto es cierto ya que en este estudio, se encontr una prevalencia baja de 1.73%. La prevalencia reportada en este trabajo, concuerda con la baja prevalencia encontrada por los anteriores estudios.

VI.- CONCLUSIN.
Una de las causas por las que se encuentran prevalencias altas y bajas, es debido a las condiciones climatolgicas y topogrficas del lugar, debemos recordar que el microorganismo causal de Brucella abortus puede sobrevivir en los pastos durante periodos variables segn las condiciones del medio. En climas templados la capacidad infecciosa puede persistir durante 100 das en invierno y 30 en verano. El microorganismo es susceptible al calor, luz solar y desinfectante estndar, pero la refrigeracin permite supervivencia casi indefinida. Otras de las causas son, las deficientes condiciones de manejo, sobre todo sanitarias que ofrecen los productores a sus animales. Aunque no se encuentre un alto ndice del nmero de animales con brucelosis, es necesario tomar medidas sanitarias para evitar que esta enfermedad se propague sobre todo en aquellos animales que son destinados a la produccin de leche o produccin de carne. Llevar a cabo una vacunacin de los hatos, donde se encuentren animales infectados con Brucella abortus es lo ms adecuado, para as evitar la posible infeccin con la bacteria, debemos recordar que la vacuna, no cura la enfermedad, animales positivos al ser vacunados, no se tornarn negativos. Las pruebas diagnosticas de laboratorio de deteccin de brcela deben llevarse a cabo cada vez que se puedan, si as se pudiera cada 6 meses y si no

cada ao, para as tener un hato libre de brucelosis. Debemos tener en cuenta que el mtodo empleado en el diagnostico est sujeto a ciertos mrgenes de error. Porque la prueba de Tarjeta y Rivanol, se basa en la deteccin de IgG e IgM. Estas IgG e IgM, pueden variar sus ttulos siendo escasos, durante el periodo de incubacin de la enfermedad y en los estadios crnicos. Se considera pertinente realizar ms estudio de este padecimiento, y tomar las medidas necesarias para evitar la propagacin de la enfermedad.

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