NORMA DE METROLOGIE LEGAL NML 034 - 05 "Gazcromatografe i lichidcromatografe"

1. Domeniu de aplicare Prezenta norm de metrologie legal se refer la gazcromatografele (GC) de laborator i lichidcromatografele de nalt performan (HPLC), care se folosesc la msurrile concentraiilor substanelor gazoase, lichide sau solide efectuate n domenii de interes public, conform legislaiei n vigoare. 2. Terminologie n prezenta norm de metrologie legal termenii specifici utilizai au urmtoarele semnificaii: 2.1. cromatografie - tehnic folosit pentru separarea componenilor unei probe, prin care aceti componeni se distribuie ntre dou faze, una staionar i una mobil. Faza staionar poate fi un solid sau un lichid depus pe suport; 2.2. coloan cromatografic - un tub care conine faza staionar prin care trece faza mobil; 2.3. faz mobil - ansamblul format din gazul purttor i poriunea din eantionul introdus n coloan (GC); un lichid (solvent) folosit pentru eluarea componenilor probei prin coloan sau dup coloan. Poate fi monocomponent sau un amestec de solveni (HPLC); 2.4. faza staionar - un lichid relativ nevolatil, absorbant (la temperatura de lucru) sau solid absorbant depus sau nu pe un suport solid care produce separarea constituenilor unei probe datorit diferenelor de solubilitate i respectiv, de adsorbie (GC); material imobil activ existent n coloan, depus pe suportul solid sau fiind nsui suportul solid, care produce o ntrziere n trecerea componenilor probei, ca urmare a proceselor specifice de separare cromatografic (HPLC); 2.5. eluie - extragerea i deplasarea constituenilor unei probe din faza staionar de ctre faza mobil; 2.6. dispozitiv de injecie - mijloc tehnic de introducere a probei n coloana cromatografic; 2.7. detector - dispozitiv care permite conversia concentraiilor componenilor probei n semnal electric proporional; 2.8. cromatogram - un grafic al rspunsului electric al detectorului funcie de timp. Din cromatogram se obin urmtorii parametri de reinere: timpul de reinere (tR), precum i nlimea (h) sau aria (A) picurilor (vrfurilor cromatografice) componenilor separai; pe baza acestor parametri se identific i se determin cantitativ componenii probei; 2.9. analiz calitativ: identificarea unui compus prin cromatografie, cu ajutorul unor etaloane, pe baza parametrilor de reinere (tR); 2.10. analiz cantitativ - calcularea concentraiilor compuilor chimici sau a compoziiei probei din datele picurilor componenilor (arie, nlime) i ale componenilor de referin; 2.11. zgomot de fond - msur a variaiei semnalului de ieire al unui detector n situaia n care nu se nregistreaz prezena unui component al probei; 2.12. limit de detecie - concentraia componentului de interes al probei care d un semnal de ieire al detectorului, egal (de regul) cu de trei ori zgomotul de fond; 2.13. selectivitate - caracteristica unui detector de a reaciona ntr-un grad nalt la anumite categorii de compui fa de altele; 2.14. sensibilitatea unui detector - semnalul produs de unitatea masic a compuilor ntr-un gaz purttor, care se ncadreaz ntr-una din categoriile urmtoare: - pentru un detector dependent de concentraie, ea se exprim n A x ml x g-1 sau V x ml x g prin ecuaia: S = P x F/M unde S Sensibilitatea; P Aria integrat a picului (A x s sau V x s); F Debitul gazului purttor (ml/s); M Masa eantionului n gazul purttor (g) - pentru un detector dependent de debitul masic, sensibilitatea se exprim n A x s x g-1 sau V x s x g-1 prin ecuaia: S = P/M unde simbolurile sunt aceleai ca la definiia de mai sus. 2.15. timp de reinere - intervalul de timp scurs de la injectarea probei pn la nregistrarea valorii maxime a picului componentului din prob; 2.16. domeniu liniar al detectorului - domeniul concentraiilor sau al debitelor masice pentru un component de interes al probei, pentru care sensibilitatea detectorului rmne constant ntr-o plaj de 5 %. Valoarea sa este dat de raportul dintre limita superioar a liniaritii i limita de detecie; 2.17. domeniu dinamic al detectorului - domeniul concentraiilor sau al debitelor masice ale unui component al probei, pentru care o modificare a cantitii de prob produce o modificare msurabil a semnalului de ieire al detectorului; 2.18. repetabilitate - limit de acceptabilitate pentru rezultatele msurrilor succesive efectuate asupra aceluiai msurand, n aceleai condiii de lucru, de ctre acelai operator i n cursul unei perioade relativ scurte de timp. 2.19. Detectori utilizai n GC: 2.19.1. Detector cu ionizare n flacr (FID) - detector care este dependent de debitul masic, neselectiv, larg aplicabil la analiza compuilor organici i anorganici; 2.19.2. Detector cu captur de electroni (ECD) - detector dependent de concentraie, selectiv pentru compuii halogenai; 2.19.3. Detector flam-fotometric (FPD) - detector dependent de debitul masic, selectiv pentru compuii care conin fosfor i sulf; 2.19.4. Detector termoionic (TID) - detector dependent de debitul masic, selectiv pentru compuii care conin fosfor i azot; 2.19.5. Detector cu conductivitate electrolitic (ELCD) - detector dependent de debitul masic, selectiv pentru compuii care conin azot i sulf;
1

2.19.6. Detector cu fotoionizare (PID) - detector dependent de concentraie, selectiv n funcie de energia lmpii, cu largi aplicaii la compui organici i anorganici; 2.19.7. Detector cu conductibilitate termic (TCD) - detector dependent de concentraie, cu aplicaii la analiza gazelor organice i anorganice; 2.19.8. Detector selectiv de mas (MS) este parte component a sistemului GC/MS care combin tehnica separrii cromatografice cu detecia printr-un spectrometru de mas. 2.20. Detectori utilizai n HPLC: 2.20.1. Detector UV/vizibil - detector care msoar absorbana luminii prin prob; 2.20.2. Detector cu fluorescen - detector care utilizeaz relaia dintre emisia fluorescent i concentraia compuilor probei care au fost excitai prin absorbia luminii; 2.20.3. Detector electrochimic - detector care poate fi folosit pentru msurarea componenilor probei care se pot oxida sau reduce electrochimic la electrozi; 2.20.4. Detector selectiv de mas (MS) - conform descrierii de la punctul 2.19.8. 3. Cerinele metrologice i tehnice 3.1. Cerine metrologice 3.1.1. Condiii nominale de funcionare Valorile nominale ale condiiilor de funcionare trebuie specificate de productor dup cum urmeaz: 3.1.1.1.Condiiile de mediu climatic, mecanic i electromagnetic sunt condiiile de laborator prevzute la pct 3.1.2.1; 3.1.1.2. Pentru mrimile de influen ale alimentrii cu energie electric: - limitele domeniilor de tensiune i frecven n curent alternativ (220 + 10/-15 %, V; 50 1 %, Hz); - limitele domeniilor de tensiune ale alimentrii n curent continuu (declarate de productor). 3.1.1.3. Pentru presiunea ambiant: valorile minime i maxime ale presiunii ambiante. 3.1.2. Cerinele metrologice pentru GC 3.1.2.1. n timpul evalurilor pentru obinerea aprobrii de model i a verificrilor metrologice, sistemul GC trebuie verificat n condiii de laborator folosind materiale de referin i n condiiile de referin de mai jos: - temperatura ambiant: (23 3) oC, cu o stabilitate de 3 oC n timpul msurrilor; - umiditate relativ: (3080) %; - dispozitivul de injecie, coloana/coloanele, debitul gazului purttor i temperaturile corespund specificaiilor productorului sau utilizrii specifice pentru care este configurat sistemul gaz-cromatografic. Funcie de utilizarea specific preconizat se vor stabili la verificri: - tipul gazului purttor; - tipul de injector; - tipul detectorului; - tipul coloanei/coloanelor. 3.1.2.2. Repetabilitatea, care se determin ca abatere standard pentru fiecare pic cromatografic caracteristic unui amestec etalon de concentraie de gaze sau unei soluii de referin, trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii de performan: - maximum 5 % pentru ariile sau nlimile picurilor, respectiv pentru concentraiile calculate; - maximum 1 % pentru timpul de reinere. 3.1.2.3. Limitele de detecie i domeniul liniar al detectorului/detectorilor folosii n sistemul GC trebuie s satisfac cerinele de performane specificate de productor pentru compuii de ncercare relevani. n cazul n care nu exist aceste specificaii se vor verifica caracteristicile menionate n tabelul 1. Tip detector FID PID TCD ECD FPD TID ELCD Tabelul 1 - Caracteristici metrologice ale detectorilor utilizai de GC Compui de ncercare Domeniu liniar Limita de detecie, pg/s Amestec de alcani lichizi (104107) (110) Toluen 104 (110) Amestec de alcani lichizi (104105) (300104) Lindan (102104) (0,11,0) Malathion (102103) (S) (10100) (103105) (P) (0,55) Malathion (P) i azobenzen (N) 105 (P) 25 104 (N) 50 Tetracloretan (Cl), azobenzen (N) i 104 (S) 2 malathion (S) 104 (N) (24) (105106) (Cl) 0,5

Limita de detecie trebuie s nu depeasc cu mai mult de 5 % valoarea specificat de productor sau s se ncadreze n domeniile indicate n tabel. 3.1.3. Cerinele metrologice pentru sistemul GC/MS 3.1.3.1. n timpul evalurilor, sistemul GC/MS trebuie s lucreze n condiiile de referin menionate la punctul 3.1.2.1. Suplimentar, productorul trebuie s specifice tipul sursei de ionizare i timpul de scanare. 3.1.3.2. Trebuie s se efectueze o verificare pentru evaluarea bazei de date privind compuii menionai ca referine n sistemul GC/MS printr-o testare a modelului de fragmentare prin ionizare cu impact electronic, respectiv a spectrului obinut cu compui de referin (se recomand n aceast calitate decafluortrifenilfosfin, DFTPP).
2

3.1.3.3. Rezoluia sistemului GC/MS, calculat ca m/m, pentru baza picului cromatografic fie pentru decafluortrifenilfosfin, fie pentru p-bromfluorbenzen i m , picul la jumtatea nlimii, trebuie s nu depeasc 10 % din valoarea integrat a picului de baz. 3.1.3.4. Repetabilitatea care se determin ca abatere standard pentru fiecare pic caracteristic unei soluii de referin cu cel puin apte componeni, trebuie s fie n limitele 10 %. 3.1.3.5. Limita de detecie, care se determin cu o soluie de referin de metilstearat, trebuie s nu depeasc cu mai mult de 5 % valoarea specificat de productor. 3.1.4. Cerinele metrologice pentru HPLC 3.1.4.1. n timpul evalurilor, sistemul HPLC trebuie s lucreze n condiiile de referin menionate la punctul 3.1.2.1. Suplimentar, productorul trebuie s specifice tipul de pomp/pompe, compoziia fazei mobile, debitul fazei mobile, tipul de detector. 3.1.4.2. Pompa trebuie s asigure o presiune n domeniul (040) MPa. 3.1.4.3. Pompa trebuie s asigure un debit cuprins ntre (0,15,0) ml/min. 3.1.4.4. Pulsaiile pompei trebuie s nu depeasc 2 % vrf la vrf (ca presiune), cnd se monitorizeaz sistemul cu ap, la o presiune de retur de 14 MPa, la un debit de 1 ml/min, pentru o durat de 10 minute. 3.1.4.5. Pentru coloanele dotate cu mijloce de control al temperaturii, temperatura coloanei trebuie s fie fixat n trepte de cte 1 oC i meninut constant n cadrul a 0,1 oC. 3.1.4.6. Limitele de detecie i domeniul liniar al detectorului/detectorilor folosii n sistemul HPLC trebuie s satisfac cerinele de performane specificate de productor pentru produii de ncercare relevani. n cazul n care nu exist aceste specificaii se vor verifica caracteristicile menionate n tabelul 2. Tabelul 2 - Caracteristicile metrologice ale detectorilor utilizai de HPLC Tip detector UV/vizibil Fluorescen Electrochimic Compui de ncercare Antracen Antracen Hidrochinon Domeniu liniar 104 103 3 (10 104) Limita de detecie 3ng 1 ng 50 pg

Limita de detecie trebuie s nu depeasc cu mai mult de 5 % fa de valoarea specificat. 3.1.4.7. Repetabilitatea care se determin ca abatere standard pentru fiecare pic cromatografic caracteristic unui amestec etalon de concentraie de gaze sau unei soluii de referin, trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii de performan: - maximum 5 % pentru ariile sau nlimile picurilor, respectiv pentru concentraiile calculate; - maximum 3 % pentru timpul de reinere. 3.2. Cerine tehnice Mijloacele de msurare trebuie concepute astfel nct s se ndeplineasc cerinele tehnice de mai jos: 3.2.1. Cerine tehnice pentru GC 3.2.1.1. Tipul i puritatea gazului purttor trebuie s corespund tipului de detector i aplicaiei specifice 3.2.1.2. Sistemul GC trebuie s dispun de mijloace pentru controlul i afiarea debitului gazului purttor 3.2.1.3. Sistemul GC trebuie s dispun de mijloace de control al temperaturilor la dispozitivul de injecie, coloan i detector 3.2.1.4. Trebuie specificate domeniile programabile de temperaturi i vitezele de cretere realizate n acele domenii 3.2.1.5. Trebuie specificate tipurile de coloane cromatografice folosite de sistem pentru aplicaiile specifice 3.2.1.6. Sistemul de nregistrare i prelucrare automat a datelor trebuie s ofere o nregistrare exact, memorat i recuperabil asupra rspunsului detectorului, caracteristicilor probei, compoziiei gazului i parametrilor de debit, profilului temperaturii i alte date importante ale analizei 3.2.2. Cerine tehnice pentru sistemul GC/MS 3.2.2.1. Trebuie specificat gazul purttor utilizat. Pe traseele de alimentare cu gaze trebuie s se prevad un mijloc pentru ndeprtarea contaminanilor gazului purttor 3.2.2.2. Cuptorul GC trebuie s fie adaptat att montrii coloanelor cu umplutur, ct i a celor capilare i trebuie s dispun de controlul temperaturilor programate pe parcursul analizei 3.2.2.3. Interfaa dintre GC i MS trebuie construit din material inert i trebuie s dispun de controlul temperaturii 3.2.2.4. Sistemul trebuie s dispun de o surs de ionizare cu impact electronic cu energii cuprinse ntre (6080) eV. O surs de ionizare chimic poate fi util pentru analiza unor compui. 3.2.2.5. Detectorul trebuie s fie capabil s detecteze att ioni pozitivi, ct i ioni negativi. 3.2.2.6. Sistemul de procesare al datelor trebuie s fie capabil s depisteze cel puin 6000 de spectre complete de mas 3.2.2.7. Sistemul de procesare al datelor trebuie s fie capabil s colecteze i s depoziteze date, dup cum urmeaz: - prin scanare automat a ionilor specifici compusului de interes; - prin scanarea spectrului de mase dup raportul m/z de la 40 la 500 n 0,5 s; - detecia pn la 460 de picuri masice la un spectru. 3.2.2.8. Sistemul de procesare al datelor trebuie s poat afia i analiza datele astfel: - s prezinte spectrele de mas sub forma de list sau grafic de bare; - s integreze aria picului pentru a obine intensitatea unui fragment de mas specificat sau suma tuturor fragmentelor de mas; - s calculeze un spectru de mase mediu din toate spectrele msurate; - s identifice fiierele cu datele spectrelor de mas n concordan cu timpul analizei (an, lun, zi, or i minut); i - s identifice orice manipulare post-achiziie a datelor spectrelor de mas obinute.
3

3.2.3. Cerine tehnice pentru HPLC 3.2.3.1. Faza mobil trebuie s conin reactivi chimici puri. nainte de utilizare, faza mobil trebuie filtrat i degazat, atunci cnd se impune prevenirea formrii bulelor de aer n sistem. 3.2.3.2. ntre pomp i coloan, sistemul HPLG trebuie s dispun de un monitor de presiune i de un releu limitator de presiune. 3.2.3.3. Trebuie s se asigure filtrarea fazei mobile n circuitele sistemului HPLC pentru ndeprtarea impuritilor mecanice (particule, praf etc). 3.2.3.4. Coloanele trebuie s fie tubulare i cu umplutur. Materialul de construcie trebuie s fie metalic, din sticl sau material plastic i s reziste la presiunea generat de pomp. 3.2.3.5. Sistemul HPLC trebuie s realizeze nregistrri exacte i fiabile ale rspunsului detectorului, funcie de timp. Trebuie s se ia n considerare sistemele de prelucrare automat a datelor cu ajutorul crora se pot efectua analize complete, att calitative, ct i cantitative, respectiv de integrare sau calculatoare care achiziioneaz i prelucreaz automat datele sub form digital, livrnd rezultatele analizei. Sistemul HPLC trebuie s corespund n ceea ce privete aptitudinile de reglare, calibrare, afiare, nregistrare i prelucrare a informaiilor, conform instruciunilor din cartea tehnic. 4. Atestarea legalitii 4.1. Modalitile de control metrologic legal aplicabile gazcromatografelor i lichidcromatografelor sunt cele prevzute n Lista oficial a mijloacelor de msurare supuse controlului metrologic legal, n vigoare. 4.2. Atestarea legalitii unui gazcromatograf sau lichidcromatograf se realizeaz numai dup demonstrarea conformitii acestuia cu cerinele metrologice i tehnice aplicabile pevzute n tabelele 3, 4 i 5 pentru fiecare modalitate de control specific introducerii pe pia, punerii n funciune sau utilizrii. 4.3. Atestarea legalitii se realizeaz prin aplicarea marcajelor i eliberarea unor documente specifice, n conformitate cu prevederile instruciunilor de metrologie legal n vigoare. Tabelul 3 - Cerine metrologice i tehnice aplicabile modalitilor de control metrologic legal al GC Nr. Cerine Modaliti de control crt. metrologice Aprobare Verificare metrologic i tehnice de model iniial periodic 1 3.1.1 x x x 2 3.1.2.1 x x x 3 3.1.2.2 x 4 3.1.2.3 x 5 3.2.1.1 x x x 6 3.2.1.2 x x x 7 3.2.1.3 x x x 8 3.2.1.4 x 9 3.2.1.5 x x x 10 3.2.1.6 x x x Tabelul 4 - Cerine metrologice i tehnice aplicabile modalitilor de control metrologic legal al GS/MS Nr. Cerine metrologice Modaliti de control crt. i tehnice Aprobare Verificare metrologic de model iniial Periodic 1 3.1.3.1 x x X 2 3.1.3.2 x 3 3.1.3.3 x 4 3.1.3.4 x x X 5 3.1.3.5 x 6 3.2.2.1 x x X 7 3.2.2.2 x x X 8 3.2.2.3 x 9 3.2.2.4 x 10 3.2.2.5 x 11 3.2.2.6 x 12 3.2.2.7 x 13 3.2.2.8 x x X Tabelul 5 - Cerine metrologice i tehnice aplicabile modalitilor de control metrologic legal al HPLC Nr. Cerine metrologice Modaliti de control crt. i tehnice Aprobare Verificare metrologic de model iniial periodic 1 3.1.4.1 x x X 2 3.1.4.2 x x X
4

Nr. crt. 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Cerine metrologice i tehnice 3.1.4.3 3.1.4.4 3.1.4.5 3.1.4.6 3.1.4.7 3.2.3.1 3.2.3.2 3.2.3.3 3.2.3.4 3.2.3.5

Aprobare de model x x x x x x x x x x

Modaliti de control Verificare metrologic iniial periodic x x x x x x