Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar Facultatea de Agricultur

Lorentz JNTSCHI

Studii Fitosanitare

Lucrare de Master n Agronomie

Refereni tiinifici: Mircea DIUDEA, prof. dr., Univ. B.-B. Cluj-Napoca Facultatea de Chimie Iustin GHIZDAVU, prof. dr., Univ. . A. M. V. Cluj-Napoca Facultatea de Agricultur

Cluj-Napoca 2002

Cuprins

1. Introducere ...............................................................................................................3 2. Aspecte de sntate public ....................................................................................4 3. Agrochimia pesticidelor ..........................................................................................6 4. Chimia Pesticidelor..................................................................................................8 4.1. Insecticidele ........................................................................................................8 4.2. Fungicidele .........................................................................................................9 4.3. Erbicidele..........................................................................................................10 5. Proprietile fizico-chimice ale pesticidelor ........................................................11 6. Activitatea biologic a pesticidelor.......................................................................16 7. Metode moderne n studiul QSAR/QSPR ...........................................................17 8. Utilizarea pesticidelor n cultur exemplu aplicativ........................................23 9. Biotehnologiile i agricultura................................................................................27 9.1. Concepte specifice............................................................................................27 9.2. Gene i interaciunile acestora..........................................................................30 9.3. Informaia genetic ...........................................................................................31 9.4. Mutageneza rezistenei la erbicide i insecte....................................................33 10. Studiu de cultur la cartof ....................................................................................35 10.1. Practici de cultur pentru combaterea apariiei gndacului de Colorado.......35 10.2. Varieti..........................................................................................................36 10.3. Rotaia culturilor, vegetaia i fertilizarea ......................................................40 10.4. Manipularea seminei, nsmnare i spaiere, date de nsmnare.............41 10.5. Cultivarea, movilirea, controlul n vegetaie i nainte de recoltare...............43 10.6. Recoltarea i depozitarea................................................................................43 10.7. Controlul bolilor.............................................................................................44 10.8. Managementul insectelor ...............................................................................47 10.9. Controlul buruienilor......................................................................................49 11. Anexe.......................................................................................................................52 11.1. Diagrame de virui la plante...........................................................................52 11.2. Structurile i proprietile celor 58 de dipeptide luate n studiul corelaional ntre activitatea biologic inhibitoare i structura chimic ...............................54 11.3. Dicionar tehnic englez romn ....................................................................59 Referine .......................................................................................................................60 2

1. Introducere
Caracterul universal al aplicrii pesticidelor adesea fr cunoaterea suficient a aciunii lor i a modului de asigurare mpotriva efectului lor toxic a influenat n mare msur opinia public. ngrijorarea a crescut datorit, mai ales constatrii c aciunea negativ a pesticidelor asupra mediului i omului se manifest timp ndelungat.1 Pierderile provocate agriculturii pe plan mondial de diferitele organisme duntoare se ridic anual la 35% din recolte, ceea ce corespunde cu aproximativ 100 miliarde de dolari. Din aceste pierderi, insectelor le revin 13.8%, ciupercilor 11.6%, buruienilor 9.5% i altor organisme 0.1%. Aceste pierderi variaz n diferite regiuni ale lumii n funcie de condiiile climatice i numeroi ali factori ecologici. Astfel, lucrarea
2

trateaz schimbrile din sol datorit climei n depozitele

glaciale. Aici se remarc c cronofunciile solului sunt adesea cvasiliniare, dar aceste relaii sunt adesea valabile doar grosier, generalizri fortuite care ignor schimbrile n soluri datorate climei i altor cicluri externe, influene care guverneaz formarea i degradarea solului. Lucrarea prezint aspecte legate de aceste influene asupra munilor Rocky (U.S.A.) i aici analiza solului a permis estimarea anilor de sedimentare. ntr-un detaliat studiu al solurilor din Wind River Range i Wind River Basin s-au relevat caracteristici ale straturilor de suprafa care nu urmeaz trendul anual. Oricum, urmrind compoziia n carbonai a straturilor se obin caracteristici corelate anual. n mare msur pierderile reflect i posibilitile de a controla mrimea produciei agricole pe diferite teritorii. Astfel, pierderile provocate de insecte constituie 5% din producia potenial agricol n Europa, 7% n Oceania, 9% n america de Nord i Central, 10% n America de Sud, Rusia i China, 13% n Africa i 21% n restul Asiei. Cele mai evidente i mai palpabile sunt de obicei pierderile n producia de cereale.3 Un important aspect al produciei agricole este pentru sntatea public.4

2. Aspecte de sntate public

Numeroase studii i cercetri, finalizate prin conferine tiinifice i articole se fac relativ la influenele pesticidelor i altor tratamente chimice asupra ecosistemului. Astfel, lucrrile conferinei 5 trateaz aspectele legate de efectele asupra sntii umane n ecosistemele din vecintatea Marilor Lacuri i bazinului St. Louis Lawrence River (U.S.A.). S-a relevat o impresionant cantitate de noi cunotine i instrumente de aplicare a acestor cunotine doar n anii 1994-1996, de cnd o ntlnire similar a avut loc n Detroit (U.S.A.). Pentru o analiz corect, trebuiesc luate n considerare parametrii ca aria de expunere, creterea demografic i n general efectele asupra sntii furnizeaz informaii complexe. Se poate spune c n domeniul expunerii sunt informaii linititoare aa cum o dovedesc studiile nivelelor pentru poluanii toxici persisteni care au deczut dramatic, cu precdere din anii 1970 ctre anii 1980, care arat c trendul n timp al acestor poluani a sczut. Acest declin n nivelele de contaminare n U.S.A. reprezint un succes n prevenirea primar, care se coreleaz ns cu aciunile n parteneriat ale ageniilor de mediu, ageniilor de reglementare, care au fcut ca industria s-i adapteze tehnologiile pentru a reduce emisiile n mediu. S-a artat c datele msurate dovedesc c nu este nici o diferen semnificativ n ceea ce privete concentraia poluanilor n bazinul Marilor Lacuri dect n alt parte. 6 Oricum, interpretarea exclusiv pe baza acestor niveluri de poluare ofer o slab nelegere asupra potenialului de toxicitate al poluanilor. n termeni demografici, sunt populaii care sunt expuse la risc datorit unor anume categorii de poluani care se pot decela n mediu. Se pot produce efecte secundare ale expunerii, cum ar fi sensibilizarea psihologic. De exemplu, creterea ftului este n special sensibil la efectele substanelor toxice persistente i ofer o fereastr ctre studii n ceea ce privete efectele acestora pe termen lung, n generaiile urmtoare (transgeneraional). Sunt necesare astfel studii care s-i deplaseze atenia de la efectele pe termen scurt la efectele pe termen lung. Categorii de populaie consumatoare de pete, de exemplu, pot fi expuse la riscuri suplimentare fa de cele relevate de trenduri. Studii n acest sens arat c aceast categorie, de exemplu, este supus la riscuri de 2-3 ori mai mari dect restul populaiei7 i n acelai sens, copii alptai pot cpta rate de expunere de 40-50 de ori mai mari dect restul populaiei. n termeni de sntate uman, studii arat c funciile neuromotorie i 4

reproductiv sunt cele mai n suferin.8-10 Ceea ce este de remarcat este c aceste deficiene odat aprute, nu mai pot fi reparate, ca un deficit bugetar, de exemplu. Opiniile sunt mprite n ceea ce privete implicaiile studiilor de sntate obinute prin intermediul analizelor epidemiologice. Diferene sunt remarcate n ceea ce privete concepia studiului care conduce la rezultatele care au fost raportate. Oricum, trebuie s recunoatem remarcabila paralel care ceste studii o relev. Fiecare dintre aceste studii, fie c provin din studii epidemiologice, studii de laborator sau din studii de genetic, ele pot fi comparate cu lentilele unui microscop, i, ca i lentilele microscopului, ele variaz n ceea ce privete puterea de rezolvare i calitatea. Un fir logic care trebuie urmrit este situat dincolo de aceste cutri i relev tentativa de a cuprinde implicaiile pentru sntatea public. Lucrarea
11

caracterizeaz foarte bine

acest numitor comun, i anume n ce msur se rspunde la ntrebarea: care este expresia cantitativ a implicaiei n sntatea public?, identificnd foarte bine legtura lips ntre tiin i politica n tiin. Este destul de greu deseori de trecut de la tiin la servicii n termenii practici ai sntii publice. Gilbertson sugereaz
11

c motivul

pentru care avem aceast dificultate este pentru c ncercm s identificm cauzaliti, cauzaliti care sunt foarte dificil de stabilit. O cantitate considerabil de informaie 12-14 refer vecintatea domiciliului persoanelor la care se manifest efecte de malformaii congenitale la natere, ca dovad a legturii ntre cauz i efect. Toate acestea vin s ntreasc importana studiului pesticidelor, sub toate aspectele sale, mai ales sub aspectul sntii publice.

3. Agrochimia pesticidelor
Pesticidele, n accepiunea general se mpart n: chimice care sunt compui chimici cu efecte nefavorabile asupra insectelor, bolilor sau duntorilor plantelor de cultur; fizice, ca de exemplu iradierea ce provoac sterilitatea la insecte; biologice, ca de exemplu preparatele de Bacillus thuringiens; Pesticidele chimice sunt deci un bun exemplu de compui a cror aplicare este riscant. Totui, principalul beneficiar al acestora este agricultura. Aici ele se aplic n scopul proteciei plantelor n timpul vegetaiei dar i n scopul proteciei plantelor dup recoltare n mijloacele de transport i depozite. Pesticidele se caracterizeaz prin lipsa aciunii selective; ele pot s provoace intoxicaii acute oamenilor, mai ales celor care lucreaz la producia i aplicarea lor. De asemenea, sub influena pesticidelor, pe lng insectele care distrug plantele n timpul vegetaiei i dup recoltare, pot s piar sub influena pesticidelor i albinele folositoare, iar la combaterea buruienilor pot s sufere chiar plantele a cror protecie se urmrete. Asemenea situaii sunt agravate de aplicarea incorect a pesticidelor. Termenul de pesticide cuprinde toate substanele sau amestecurile de substane folosite pentru: prevenirea dezvoltrii sau combaterea oricrui organism vegetal sau animal nedorit; reglarea creterii plantelor, defolierea i uscarea lor. Aplicarea pesticidelor n agricultur, medicina veterinar, diferite industrii (textil), gospodrie casnic i ocrotirea sntii populaiei are ca scop mbuntirea cantitativ i calitativ a alimentelor, nutreurilor i produselor industriale, asigurarea lor n timpul pstrrii fa de duntori i boli, ocrotirea animalelor contra paraziilor precum i distrugerea insectelor i altor transmitori de boli la oameni i animale. Lista acestor boli cuprinde: malaria, tifosul exantematic, ciuma, febra galben, filarioza, afeciuni virotice ale creierului, febrele transmise de pduchi i acarieni, febra de tranee, amoebiazele, leischmaniozele, onchocercozisele, trypanosomiosisele, bolile papataci, frambezia, inflamarea conjunctivitelor, boala lui Chagas, rickettsiozele i tularemia. n lupta cu aceste boli rolul cel mai important l-au avut insecticidele organoclorurate, iar dintre acestea DDT, folosite nc n continuare n anumite ri. n funcie de destinaia pesticidelor, acestea pot fi mprite n urmtoarele grupe:

zoocide pentru combaterea duntorilor animali o insecticide: combaterea insectelor; o rodenticide: combaterea roztoarelor; o moluscocide: combaterea molutelor; o nematocide: combaterea nematozilor; o larvicide: combaterea larvelor; o aficide: combaterea afidelor; o acaricide: combaterea acarienilor; o ovicide: distrugerea oulor de insecte i acarieni;

fungicide i fungistatice, bactericide i virocide: combaterea ciupercilor i ciupercostaticelor; erbicidele: combaterea buruienilor; regulatori de cretere: mijloace care inhib sau stimuleaz procese de cretere la plante: o defoliante: mijloace de defoliere a plantelor; o desicante: mijloace de uscare a plantelor nainte de recoltare; o deflorante: mijloace de nlturare a cantitii excesive de flori;

atractante: mijloace de ademenit; repelente: mijloace pentru respingere. Pesticidele sunt aplicate sub diferite forme: prafuri, pulberi, granule, capsule,

soluii, suspensii, aerosoli, spume, gaze, vapori, paste, iar forma de utilizare este dictat de particularitile duntorului combtut, considerentele tehnice i economice ale aplicrii preparatului.

4. Chimia Pesticidelor
Caracteristica toxicologic a pesticidelor difer n funcie de clasa structural i funcional la care aparin. Cteva clase sunt prezentate n continuare: 4.1 Insecticidele Hidrocarburile organoclorurate cuprind compuii ciclodienici: DDT, HCH, lindan, metoxiclor, Keltan, aldrin, dieldrin, clordan, endrin, endosulfan, heptaclor, Kelewan, toxafen. Trstura comun este afinitatea pentru esutul adipos i o mare stabilitate. Ptrund n organismul omului prin piele, tubul digestiv i cile respiratorii. Se acumuleaz n special n esutul adipos, ficat, creier, muchi, rinichi i inim. Aciunea toxic n intoxicaiile acute se manifest printr-o excitare iniial puternic i apoi paralizarea sistemului nervos central. n intoxicaiile subacute apar perturbri ale auzului, dereglarea coordonrii micrilor, atrofia esutului muscular, leziuni ale ficatului i rinichilor. n prezent au fost scoase din uz n multe ri. Compuii organofosforici sunt cel mai frecvent esteri ai acizilor: fosforic, tiono-, tiolo-, tionotiolo-fosforic i pirofosforic. Cea mai larg aplicabilitate o au compuii cu formula general: R O P R O Y R1 unde X, Y = O, S i R, R1 = radical alchilic cnd: X = Y = O : fosfai (clorfenwinfos, diclorfos, dimefox, fosdrin, fosfamidon, monocrotofos, triclorfon); X = O, Y = S : tiofosfai (demeton-S); X = S, Y = O : tionofosfai (bromofos, demeton, etilpirimifos, metilopirimifos, clortion, diazinon, fention, folition, paration, metiloparation, fenclorfos, fenitrotion); X = Y = S : ditiofosfai (formotion, dimetoat, disulfoton, fostion, gution, malation, tiometon, metidation); X = S, Y = R : tionofosfai (EPN). Toxicitatea acut a acestor compui se msoar n uniti per os LD50 care reprezint doza care a provocat moartea a jumtate din animalele din grupa experimental. Toxicitatea depinde pronunat de structura chimic. Astfel, s-a constat experimental c compuii care conin radicalul metilic (R = CH3) au o toxicitate mai mare dect cei care conin radicalul etilic (R = CH2CH3). Derivaii care conin sulf sunt 8 X

mai puin toxici dect cei care conin oxigen. Intoxicaiile sunt foarte periculoase, se caracterizeaz printr-o ngreunare accentuat a vorbirii, pierderea capacitii de a coordona micrile, inhibarea reflexelor i com. Moartea intervine n urma paraliziei muchilor respiratorii i oprirea funcionrii inimii. Majoritatea compuilor sunt supui n organism unei activri n prezena oxidazelor microsomale a NADPH2 (nicotinamid adenin dinucleotid fosfat redus) i a oxigenului molecular. Compuii carbamici sunt esteri N-substituii ai acidului carbamic iar cei folosii frecvent sunt carbarilul, cartapul, pirimicarbul, propoxurul, carbofuranul, Temik-ul. Mecanismul de aciune este acelai ca la organofosforici: inhibarea esterazelor, i n special a esterazei acetilcolinei. Complexul enzimo-carbamat este mai instabil ns i se deblocheaz esteraza acetilcolinei si se revine la funciile normale. Cazurile de intoxicaii acute sunt mai rare i au evoluie mai atenuat. Carbarilul s-a dovedit toxic pentru cobai i hrciogi.15 4.2 Fungicidele Compuii organomercurici cuprind ndeosebi metil mercur cianoguanidina, ptoluensulfonamida etilomercuric i acetatul fenil-mercuric. Ptrund n organism prin tubul digestiv i sistemul respirator, ns n anumite contiii se pot adsoarbe i prin piele. n tubul digestiv metil-mercurul este adsobit n proporie de 95% iar n plmni n proporie de 80%. n intoxicaii, organele critice sunt rinichii i sistemul nervos central i periferic pentru vaporii de mercur i sistemul nervos central pentru metil-mercur. S-a putut constata c 10% din doza de metilmercur se acumuleaz n creier, i dispare din organism extraordinar de ncet: 50% n decurs de 70-90 zile. Ditiocarbamaii sunt derivai ai acidului ditiocarbamic, care nu apare n stare liber i sunt compui ca: Nabam, Maneb, Zineb, Mancozeb, Ziram, Ferbam, Tiram, Polyram. Gruparea activ care condiioneaz aciunea fungicid i toxic este: S N C S

n care azotul aminic este legat cu radicali alifatici iar sulful cu metalul. Ditiocarbamaii pot s acioneze asupra ADN indirect prin transformai metabolic ca Nhidroxicarbamaii.16 Derivaii ditiocarbamici se caracterizeaz prin proprieti puternice de iritare i sensibilizare. Ali compui derivai halogenai ca pentaclorfenolul (PCP), cvintocenul (PcNB), Captanul, Folpetul, Difolatanul influeneaz transportul de electroni n lanul respirator, 9

duce la perturbarea celular a respiraiei. 4.3 Erbicidele Se aplic cu succes peste 500 de diferii compui chimici sau combinaii ale acestora n combaterea buruienilor. Dup modul de aciune erbicidele se clasific n: de contact (distrug plantele n urma contactului direct cu ele); sistemice (se adsorb prin frunze i rdcini i sunt transportate n esuturile ntregii plante). Derivaii carboxilici aromatici au aciune variat n funcie de structura chimic i modul de aplicare. Cele mai importante sunt: derivaii acidului fenoxiacetic (2,4-D, 2,4,5-T, MCPA, diclorprop, mecoprop) i derivaii acidului benzoic (Dikamba, 2,3,6TBA), clase care se denumesc deseori i erbicide auxinice, au efecte secundare de ptrundere n organismul oamenilor i animalelor pe cale digestiv i respiratorie i pot provoca alergii i erupii pe piele i iritarea mucoaselor ochiului. Dioxinele pot lua natere din clorfenoli, materialul iniial n producerea multor pesticide clorurate. Derivaii acizilor alifatici cuprind n principal Dalaponul i acidul tricloracetic. Erbicidele din aceast grup combat buruienile monocotiledonate. Fenolii substituii ca Dinosebul (DNBP), pentaclorfenolul (PCP), DNOC, DNPP acioneaz prin contact asupra buruienilor dicotiledonate i pot fi aplicai ca fungicide sau acaride i insecticide. n afar de PCP toi conin dou grupri nitrice care decid caracterul aciunii toxice. Derivaii azotai heterociclici sunt derivai triazinici i triasolici ca: antrazina, simazina, prometrina, propazina, prometonul, amitrolul i manifest o sfer larg de aciune att n raport cu plantele monocotiledonate ct i dicotiledonate. Toxicitatea acestor compui se manifest n special prin aciunea asupra ficatului. Derivaii azotai alifatici se pot mpri n 3 subgrupe: derivai ai ureei: diuron, linuron, monuron, fluorometuron, clortoluron, cloroxuron; carbamai: IPC, CIPC, barban, diallat; compui amidici: difenamid, cipromid, propanil. Erbicidele pe baz de uree se folosesc la combaterea buruienilor dicotiledonate n plantaiile pomicole i legumicole iar aciunea toxic se manifest prin modificri hematologice. Erbicidele carbamice se aplic pentru distrugerea selectiv a plantelor monocotiledonate din culturile dicotiledonate. Compuii amidici au un caracter mai puin toxic.17 10

5. Proprietile fizico-chimice ale pesticidelor

Proprietile fizico-chimice ca punctul de fierbere, refracia molar, presiunea critic, viscozitatea i retenia cromatografic sunt cele mai simple proprieti fizicochimice experimentale ale compuilor chimici. De cele mai multe ori, aceste valori sunt tabelate i pot fi folosite n proiectarea instalaiilor industriale de producere i separare.18 Sunt ns cazuri n care nu se dispune de date pentru un anumit compus, cazuri n care se apeleaz la studiile de corelaie pentru a regsi valorile dorite.19 Amestecurile complexe de pesticide pot ridica dificulti n separarea cromatografic.20 O soluie este utilizarea de modele matematice capabile s optimizeze faza mobil pentru a asigura o bun separare. 21 Acestea pot da rezultate superioare altor metode atunci cnd se aplic amestecurilor complexe de compui cu structur asemntoare. 22 n cazul cel mai general se consider funcii de optim cumulat provenit din mai multe modele.23 Corelarea proprietilor fizico-chimice cu structura este un instrument puternic, capabil de a furniza soluii atunci cnd ne confruntm cu lipsa de date preliminare,24 de a furniza explicaii de natur structural i chiar de a modela proprietatea pe clase de compui, descompunnd-o pe aceasta n elementele sale intrinseci: tipul interaciei intramoleculare predominante, tipul proprietii atomice responsabile de manifestarea proprietii msurabile i modelul descriptorului de proprietate.25 Iat cteva rezultate de acest tip, pentru modelarea refraciei molare i indicelui de retenie cromatografic la pesticide pe o clas de 10 compui organofosforici, i o clas de 10 erbicide preluate din 24: Gutman a introdus indicele Szeged ca un indice pur topologic pe baza formulelor:26 SZe = e Ni,(i,j)Nj,(i,j), Ni,(i,j) = | { v V(G), D(i,v) < D(j,v) } |, Nj,(i,j) = | { v V(G), D(i,v) > D(j,v) } |, V(G) - lista atomilor, D operatorul de distan topologic; n tabelul urmtor: (1) Rezultatele obinute pentru refracia molar MR i indicele SZe calculat sunt redate

11

Valori SZe i MR pentru clasa de compui organofosforici n studiu Structur Compus Indice Szeged, SZe Refracie molar, MR

O O P O

146

35.808

O O P O

193

40.524

O O P O O P Cl

108

34.911

78 Cl

30.030

O O P F

108

29.222

O O P N

186

43.005

O O P 290 N 52.029

O O P 360 N 49.971

12

Valori SZe i MR pentru clasa de compui organofosforici n studiu - continuare Structur Compus Indice Szeged, SZe Refracie molar, MR P O P O F 88 31.636 360 58.323

Modelul matematic al refraciei molare MR i reprezentarea grafic a dependenei sunt redate n figura: 60 55 50 45 40 35 30 25 20 70 120 170 220 270 320 370

y = 0.089x + 23.479 R = 0.9192

2

Ecuaia de regresie ntre MR i SZe pentru clasa de compui organofosforici n studiu Diudea a nlocuit operatorul de cardinalitate din ecuaiile (1b,c) cu operatori specifici de proprietate atomic (mas i electronegativitate), pe baza formulelor:27 PMi,(i,j) = v M(v), v V(G), D(i,v) < D(j,v),
1 PEi,(i,j) = v v E( v) , v V(G), D(i,v) < D(j,v),

M(v) masa atomului v, E(v) electronegativitatea Sanderson; cnd au rezultat indicii SZeM i SZeE corespunztori.

(2)

Indicii de retenie cromatografic ICHR i Szeged calculai pe electronegativiti Sanderson SZeE sunt redai n tabelul urmtor:

13

Valori ICHR i SZeE pentru clasa de erbicide n studiu Erbicid Structur ICHR18 SZeE COOH Acid 3,5diclorbenzoic Cl COOH Dicamba Cl OCH3 Cl OH Cl Pentaclorofenol Cl Cl Cl Cl Cl 12.4 18.324 9.8 18.614 Cl 7.4 15.956

MCPP (Mecoprop)

H3C O CH COOH

10.3

18.373

CH3 Cl

Diclorprop

Cl O CH COOH

11

19.535

CH3 Cl

MCPA

H3C O CH2COOH

11.5

17.620

14

Valori ICHR i SZeE pentru clasa de erbicide n studiu - continuare Erbicid Structur ICHR18 SZeE Cl

2,4-D Cl O O Bentazon NH Cl Cl 2,4,5-T Cl O 2,4-DB Cl CH2COOH N CH(CH3)2 CH2COOH

11.8

18.810

18.5

24.957

SO2

14.3

20.991

14.6

20.745

Cl O (CH2)3COOH

Modelul matematic al indicelui de retenie cromatografic ICHR i reprezentarea grafic a dependenei sunt redate n figura: 25 y = 0.7472x + 10.307 23 21 19 17 15 7 9 11 13 15 17 19 R = 0.8814
2

Ecuaia de regresie ntre ICHR i SZeE pentru clasa de erbicide n studiu 15

6. Activitatea biologic a pesticidelor

n literatura de specialitate este greu de gsit valoarea activitii biologice a unei anumite pesticide pentru un anumit proces biologic. Din acest motiv sunt foarte utile relaiile structur proprietate i activitate proprietate pe clase de compui.28 Un exemplu de aplicare cu succes a descriptorilor de substituent n predicia activitii erbicide a triazinelor unei clase de 30 de derivai ai 2-difluorometiltio-4,6bis(monoalchilamino)-1,3,5-triazine cu formula general: SCHF2 N A N N B

unde A i B sunt substituenii: NH2, NHCH3, NH-i-C3H7, NHC2H5, NHC4H9, NH-iC4H9, NH-s-C4H9, NH-t-C4H9, NH-C5H11, NH-C6H13, NHC7H15, NH-C8H17 este prezentat n lucrarea 29, unde s-au folosit descriptori de substituent ca XLDS (indicele de centrocomplexitate) WS (indice de drumuri calculat pe matricea L3W), volume fragmentale V i numr de atomi N pentru a prezice activitatea erbicid exprimat prin pI50, logaritmul cu semn schimbat al concentraiei necesare pentru inhibiia n procent de 50% a reaciei Hill. Modelarea matematic s-a fcut innd seama de simetria substituenilor i s-au mediat valorile obinute pentru descriptorii de substituent folosind media aritmetic (A), geometric (G) i armonic (H). Cea mai bun ecuaie de regresie n 3 variabile descriptoare pentru modelarea activitii biologice s-a obinut pentru un coeficient de corelaie ntre valoarea calculat i valoarea estimat de r = 0.9807: pI50 = 10.202 119.5(1/V(H)) 0.097X(H) 0.047W(H) medierea armonic (H) dnd cele mai bune rezultate n corelaie. (3)

16

7. Metode moderne n studiul QSAR/QSPR

n ultima perioad de timp, indicii structurali utilizai studii QSPR/QSAR (quantitative structure-property/activity relationship) sunt tot mai frecvent calculai din considerente sterice (geometrice) i/sau electrostatice (sarcini pariale)30-32 n comparaie cu vechile consideraii topologice.33 Sunt preferate calculele structurale semi-empirice i cuantice efectuate de programe ca: Hondo95, Gaussian94, Gamess, Icon08, Tx90, Polyrate, Unichem/Dgauss, Allingers MM3, Mopac93, Mozyme, HyperChem.34 n analiza de regresie proprietate/indice structural sunt folosite metode clasice de regresie liniar, regresie liniar multipl, regresie neliniar, sau, n cazul bazelor de date mari, sistemele expert sau reelele neuronale.35,36 Ca metod preliminar analizei, unii autori aliniaz setul de molecule.37 Mai mult, metoda CoMFA38 introduce un algoritm n 6 pai pentru analiza QSAR:39 (A) contruiete setul de molecule cu activitate cunoscut i genereaz structura 3D a moleculelor (eventual cu unul din programele: Mopac, Sybyl,40,41 HyperChem,42,43 Alchemy2000,40 MolConn40,44); (B) alege o mettod de suprapunere (suprapunere de fragmente alese din molecule40,45,46 sau suprapunere grupri farmacofore47) i suprapune virtual coordonatele spaiale; (C) construiete o reea de puncte ce nconjoar moleculele suprapuse la (B) n mod standard (grid38) sau n form modificat (curbiliniu48) i alege un atom de prob pentru interacia cu punctele reelei49,50. (D) folosete o metod empiric (Hint51), un model specific (suprapunere farmacofor52), energia potenial clasic (Lennard-Jones, Coulomb38), potenialul legturilor de hidrogen53, cmpuri generate de orbitalii moleculari54,55 sau orice alt cmp definit de utilizatorul modelului 49 i calculeaz valorile de interacie ale cmpului indus n reeaua (C) de cmpul de interacie ales cu un atomul de prob (C) plasat n punctele reelei; (E) folosete valorile calculate ale interaciei (D) ntre punctele reelei i atomul de prob i efectueaz predicia QSAR a activitii cunoscute; (F) folosete parametrii QSAR obinui (E) i efectueaz predicia activitii la molecule care se preteaz la acelai tip de suprapunere cu cele ale setului coal (A). Metoda CoMFA este un instrument bun n predicia unui variat tip de activiti biologice cum sunt: citotoxicitate56, inhibiie50,54, proprieti de formare57,58. De

17

asemenea, metoda se folosete n modelarea compuilor cu efect farmaceutic47,59 i analiza inhibitorilor HIV60. O important problem n modelarea QSAR este cutarea n moleculele active biologic a substructurilor active care dau cea mai mare parte a rspunsului biologic msurat61. Cutarea invarianilor moleculari este deosebit de util n studiul de caz. Metoda WHIM (Weighted Holistic Invariant Molecular) calculeaz n acest sens un set de indici statistici derivai din proprieti sterice i electrostatice ale moleculelor62,63,64. Metoda original a fost modificat i i s-a atribuit numele MS-WIHM (Molecular Surface Weighted Holistic Invariant Molecular) i a fost aplicat cu succes n analiza suprafeei moleculare65. MS-WHIM este o colecie de 36 de indici statistici derivai din proprieti sterice i electrostatice i orientai ctre parametrizarea suprafeei moleculare66. Jntschi i Diudea propun un nou model structur proprietate bazat pe topologia molecular obinut din formula structural i topografia molecular obinut din calcule cuantice.21,25 Pentru modelarea molecular este folosit o nou clas de indici: FPIF (fragmental property index family) ce conine un numr de 61440 indici membrii calculai pe baza a: 8 metode de fragmentare topologic denumite MI, MA, SzDi, SzDe, CfDi, CfDe, CjDi, CjDe; 4 modele de interaciune fizic denumite RG, DG, RT, DT; 8 descriptori de proprietate p n funcie de distana d: p, d, 1/p, 1/d, pd, p/d, p/d2, p2/d2; 5 modele de suprapunere a interaciilor fragmentale: S, P, A, G, H; 4 tipuri de indici sumativi pe matricile cu proprieti fragmentale rezultate: P_, P2, E_, E2; 3 operatori de scalare a indicilor: id, 1/, ln; 4 proprieti p implicite: C, M, E, Q

i se genereaz ntregul set de 61440 indici pentru o molecul dat pe baza structurii topologice (atomi i legturi) i topografice (coordonate spaiale i sarcini pariale). Nu toi indicii obinui sunt distinci n general. Degenerri apar din degenerarea valorilor proprietilor atomice i ale descriptorilor alei. n urma eliminrii identitilor din ntregul set rmn aproximativ 15000 de indici distinci. Rezultate deosebite se obin la recunoaterea modelelor de proprietate. Construcia indicilor permite n urma seleciei fcute n corelaie s se identifice cauza structural a proprietii macroscopice msurate sau calculate. Un exemplu este analiza 18

QSAR i QSPR a unui set de 17 compui de substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin5-onei cu activitate inhibitoare asupra Lepidium sativum L. (Creson), rezultate superioare celor obinute n lucrarea 67. Setul de inhibitori este:

HO H N N O

O O

O H N N N O O

O O

HO N N N O O

O O

H N N

HO

H N N

HO O O N N

O O N O O N O

O N N

O O O O N N O O HO N N

7 19

HO H N N O

O O

O H N N N O O

O O

HO

N N

O N O

O O

10

11

12

H HO N N

HO N N

HO

N N

O N O

O O

13

14

15

O N N O

O O

HO N N N O O N O

16

17

Setul de 17 compui de substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin-5-onei Cei 17 compui de substituie ai 3-(ftalimidoalchil)-pirazolin-5-onei cu activitate inhibitoare n soluie de 0.05 g/l asupra Lepidium sativum L. (Creson) au proprietile: 20

Sum of One-Electron Energy Calculated at Single Point Semi-Empirical ExtendedHuckel and the Inhibitory Activity on Lepidium sativum L. (Cresson) Molecula nr. Energia (kcal/mol) Inhibiia (%) 1 50978.19 28.4 2 51000.36 28 3 53441.43 30.4 4 53416.95 27.7 5 38604.68 14.3 6 62330.33 68.3 7 64752.65 49.4 8 64751.09 65.2 9 50012.42 46.9 10 53424.19 29.3 11 55729.99 28.9 12 55832.12 32.6 13 41020.54 12.2 14 43473.37 18.2 15 64701.39 71.7 16 67104.64 50.6 17 41057.46 15.1 Indicii de structur au fost generai i sortai dup scorul n corelaia monovariat, dup care li s-a aplicat regresia bivariat. Cele mai bune rezultatele sunt prezentate n tabelul urmtor: Nr. indice 1 492 1737 1 4304 7649 Scoruri n corelaia structur - proprietate Proprietate Nume indice R Intercepia energie lnDGjDeE_p/d2PE_ 0.99973 5370 energie idRTjDeM_p/d2SP_ 0.99998 56222 (2 variat) 1/RTsDeM_p/d2AP2 inhibiie lnDGsDeC_1/p_SE_ 0.95389 -336.76 inhibiie idDTsDiM_p*d_HP_ 0.99268 -26.846 (2 variat) idDGjDeE_p/d2SE2 Pante 3760 47.864 -711240 96.378 1.5619 -1.7043

Concluziile pentru clasa de compui analizat sunt: Cel mai bun indice n regresia monovariat (lnDGsDeC_1/p_SE_ pe inhibiie) nu furnizeaz cea mai bun corelaie n regresia bivariat; Cea mai bun pereche de indici n corelaia bivariat nu se obine din ortogonalizare aa cum reclam metoda PCA68,69 sau DCA70,71 ci se obine prin traversarea ntregii familii i efectuarea de perechi; Suma energiilor de un electron este modelat cel mai bine de perechea de indici (idRTjDeM_p/d2SP_, 1/RTsDeM_p/d2AP2) cu un scor r = 0.99998; aceasta justific dependena Sum of One-Electron Energy, Extended Hckel Model, Single Point Calculation de topologia molecular cum era de ateptat pentru o mrime

21

calculat; n plus, masa se identific n expresia indicilor, cum era de ateptat; superpozarea se face sumativ aa cum se ntmpl de altfel i n calculul energiei; Inhibiia activitii mitodepresive pe soluia de Lepidium sativum 0.05 mg/ml este prezis cel mai bine de perechea (idDTsDiM_p*d_HP_, idDGjDeE_p/d2SE2) cu un scor r = 0.99; prezena electronegativitii E i masei M sugereaz interaciunile de natur electric i impedimentele sterice de mas i volum care au loc la inhibiie; modelul de descriptor de interaciune este p/d2, specific unui cmp electric; prezena descriptorului de interaciune p*d la mas sugereaz forele elastice care apar la oscilaiile armonice n jurul poziiilor de echilibru ale atomilor n structur; Analiza de corelaie Energie Inhibiie demonstreaz c cele dou mrimi sunt slab corelate (r = 0.78) ceea ce demonstreaz c modelul a fost capabil s explice dou mrimi care nu sunt intercorelate. Ulterior, lucrrile72,73 a fost testat puterea de predicie a FPIF pe un set de 58 de dipeptide cu activitate inhibitoare a ACE, exprimat n logIC50 (vezi anexa 2), caz n care s-a dovedit nc o dat puterea de discriminare (idDTsDeEp2/d2SP2, idDGjDiPp/dGP_) i corelare (r = 0.89). De asemenea, n lucrarea 74 mai multe seturi de molecule cu activitate biologic inhibitoare au fost considerate. Astfel, 10 derivai de diclorofenil metan inhibitori ai aromatazei (aromatizarea enzimatic a androgenilor este implicat n biosinteza estrogenilor i n bolile cauzate de dependena de estrogen), 90 de compui cu azot, 25 de nitrofenoli cu activitate erbicid. De fiecare dat FPIF a dovedit o abilitate superioar de predicie fa de modelele raportate n literatura de specialitate pe seturile considerate. Astfel, de exemplu pentru cei 10 inhibitori ai aromatazei, lucrarea 75 raporteaz o corelaie de R2 = 0.89 n timp ce membrii clasei FPIF genereaz un model al proprietii care se coreleaz cu mrimea observat cu scorul R2 = 0.9716.

22

8. Utilizarea pesticidelor n cultur exemplu aplicativ

Urmtorul tabel clasific pesticidele prin aciunea lor asupra insectelor duntoare culturii de cartof aprobate pentru folosin n S.U.A. i folosite n cultur n statul Ohio:76
Clasa

Pesticide i aciunea lor biologic asupra duntorilor n regiunea statului Ohio Duntor viermi viermi gndac gndac purici sfredelit. Pesticid diazinon (D-Z-N) dimetoat (Cygon) disulfoton (Di-Syston) fonofos (Dyfonate) azinfosmetil Organofosfai (Guthion) fosmet (Imidan) malation (Cythion) etoprop (Mocap) metamidofos (Monitor) metil paration (Penncap-M) forat (Thimet)
srm tietori Colorado purice frunze afide cereale

? ? B ?

? B S -

? ? B/S * B/S * NS NS S

B ? B B B B NS B

? B ? ? S S B B B

S B B S B S NS

? B ? ?

23

Pesticide i aciunea lor biologic asupra duntorilor n regiunea statului Ohio - continuare carbofuran NS B ? ? (Furadan) ** metomil Carbamai (Lannate) carbaril (Sevin) oxamil (Vydate) metoxiclor Organoclorine (Marlate) diclorpropen (Teleone) endosulfan (Thiodan, Phaser) permetrin (Ambrush, Pounce) Piretroizi esfenvalerat (Asana) ciflutrin (Baythorid) imidacloprid (Admire) abamectin Alte otrvuri nervoase (Agri-Mek) pimetrozin (Fulfill) imidacloprid (Provado) piretrine (Pyrenone) spinosad (Spin Tor) ? B S B B S/NS ** ? NS B/S * B/S * B/S * B/S * B B B ? B B B ? ? ? B B B B S S B B B ? S ? S B B B S NS ? B ? B S S B FB B ? ? ? ? ? ? ? ?

24

Pesticide i aciunea lor biologic asupra duntorilor n regiunea statului Ohio - continuare bacillus thuringensis caterpillar strains (DiPel) bacillus thuringensis coleoptera strains Necunoscut (M-Trak) criolit (Krydocine) azadiractin (Neem, Azatin) rotenon (Rotenox, Rotacide) soap (M-Pede) Pesticid Clasa Tip tratament ocaocaocazional S S ocaoca? B B ? ? S B B S ? B S ?

zional zional

anual

anual

zional zional

Legend: FB: B: S: NS: ?: -: *: **:

aciune biologic de combatere foarte bun; aciune biologic de combatere bun; aciune biologic de combatere satisfctoare; aciune biologic de combatere nesatisfctoare; aciune biologic de combatere necunoscut; fr aciune biologic de combatere; cteva populaii sunt ns rezistente; majoritatea populaiilor sunt ns rezistente.

n protecia plantelor mpotriva bolilor, duntorilor i buruienilor se practic din ce n ce mai mult administrarea pesticidelor n amestec din urmtoarele motive: pentru a se combate concomitent mai muli parazii, duntori sau specii de buruieni, cnd se lrgete spectrul de aciune biologic al tratamentului; pentru a se combate simultan bolile i/sau duntorii i/sau buruienile;

25

pentru a se proteja cultura i n acelai timp administra ngrminte foliare i/sau regulatori de cretere; pentru a se preveni formarea de rase rezistente la pesticide. Pentru ca dou sau mai multe pesticide s fie aplicate n amestec acestea trebuie

s fie compatibile fizic, chimic i biologic, adic: fizic: n amestec nu produc precipitate, aglomerri de particule, spum persistent, separare de faze, depuneri; chimic: nu reacioneaz ntre ele, adic nu pun n libertate compui de degradare ai substanelor active i variaia n timp a pH-ului este nensemnat; biologic: i pstreaz eficacitatea iniial, nu produc efecte secundare (arsuri sau alte fenomene de fitotoxicitate). Compatibilitatea pesticidelor este prezentat de regul n tabele. Cel mai simplu caz este al amestecurilor binare. Un exemplu de compatibilitate fizic i biologic a unor pesticide (insecticide cu erbicide) n amestec binar experimentate n protecia grului este:77 Exemplu de interaciune ntre insecticide i erbicide Erbicide 2,4-D Icedin forte 33 Insecticide (sare DMA 50 LS) Carbetox 37 CE Sinoratox 35 CE + + Onefon 80 PS + + Clorofos + + De cele mai multe ori pentru a referi un pesticid nu se folosete denumirea tiinific ci cea uzual sau comercial. n acest caz sunt utile cataloagele de pesticide ce cuprind informaii complete despre acestea, aa cum este cazul 1022 de pesticide din care am extras cteva pesticide: Extras de catalog pentru cteva pesticide
Denumire (2-naphthyloxy)acetic acid Utilizare Toleran Formul Cod molecular LMS C12H10O3 334 9CI ISO Other BNOA 9CI ISO Other Trade 9CI ISO Trade 9CI ISO Other Trade Alte denumiri (2-naphthalenyloxy)acetic acid (2-naphthyloxy)acetic acid 2-naphthoxyacetic acid naphthoxyacetic acid, beta 2,3,6-trichlorobenzoic acid 2,3,6-TBA trichlorobenzyl chloride metabolite Benzac, Trysben , Zobar (2,4,5-trichlorophenoxy)acetic acid 2,4,5-T Weedone (2,4-dichlorophenoxy)acetic acid 2,4-D 2,4-DB metabolite Weed B Gon
78

care conine peste

regulator de revocat, cretere utilizare extern

2,3,6-TBA

erbicid

utilizare extern

C7H3Cl3O2

319

2,4,5-T

erbicid

utilizare extern

C8H5Cl3O3

312

2,4-D

erbicid, 180.142, regulator de utilizare extern cretere

C8H6Cl2O3

026

26

9. Biotehnologiile i Agricultura
9.1 Concepte specifice Biotehnologiile constau n utilizarea bacteriilor, levuriloi celulelor animale i vegetale de cultur al cror metabolism i capacitate de biosintez sunt orientate ctre fabricarea substanelor specifice. Aplicate pe scar larg, biotehnologiile cuprind activiti industriale n cadrul crora biotehnologiile pot nlocui tehnologiile folosite n mod curent i activitile industriale n care biotehnologiile au un rol promotor esenial. Utilizeaz biotehnologii industria chimic, sinteza substanelor aromatice i de stimulare a gustului, producia maselor plastice i a produselor pentru industria textil. Sunt implementate biotehnologii n domeniul energiei la producia de etanol, metanol, biogaz i hidrogen, n domeniul biometalurgiei la extracia anumitor metale. n industria alimentar regsim biotehnologii la producia masiv de levuri, alge i bacterii n vederea furnizrii proteinelor, aminoacizilor, vitaminelor i utilizarea enzimelor, iar n domeniul creterii productivittii agricole biotehnologii servesc la clonaj i selecie varietal pornind de la culturi de celule i esuturi, fabricarea de bioinsecticide. Industria farmaceutic utilizeaz biotehnologii la prepararea de vaccinuri, sinteza hormonilor, interferonilor i antibioticelor. Nici protecia mediului nu las biotehnologiile n afara domeniului de preocupare. Astfel, ele se aplic la tratarea apelor uzate i transformarea resturilor menajere, compostarea i fabricarea compuilor biodegradabili. n 1953, structura complet a unei proteine, insulina, era stabilit de Sanger, n timp ce Crick i Watson artau c acidul dezoxiribonucleic (ADN) are o structur dublu elicoidal. n 1963, Niremberg a descifrat codul genetic al crui caracter general se aplic de la bacterie pn la om. Deveneau astfel accesibile mesajul ereditar i semnificaia sa, i anume relaia ntre codul genetic i structura proteinelor. O a doua etap a fost parcurs de-a lungul anilor 60 atunci cnd se determina n mod automat structura proteinelor, ca urmare a ameliorrii tehnicilor de analiz ale lui Sanger i a metodelor de degradare ale lui Edman i Begg (1967). Au fost apoi comercializate aparate capabile s determine secvena aminoacizilor proteinelor. n 1978 secvenele (structura primar) a peste 500 de proteine

27

au fost n felul acesta stabilite i stocate pe ordinator sub forma unui atlas de proteine (Dayhoff i Erk, 1978). Dup proteine, a venit rndul acizilor nucleici iar n 1976, Gilbert i Maxam de la Universitatea Harvard i Sanger au pus la punct o metod rapid de analiz chimic a ADN. Se puteau astfel determina secvene de 1000 de nucleotide pe sptmn cu ajutorul unui manipulator (Gilbert, 1981). Au fost deci puse bazele lansrii pe pia, ntre 1982 i 1985 a unei maini automate de analiz a acizilor nucleici i a genelor. Ca urmare a analizei ADN se putea deduce graie codului genetic secvena proteinelor a cror sintez este guvernat de gene. Perfecionrile aduse analizei proteinelor, datorate punerii la punct a microanalizatorului lui Hood i Hunkapiller, de la Institutul de Tehnologie din California, n 1980 permiteau stabilirea secvenei de 100 pn la 200 de aminoacizi pe zi, pornind de la numai 10 ng de proteine. Dup analiz, a treia etap este sinteza. Studiile lui Merrifield (1963) au fcut posibil construirea i comercializarea primelor maini automate pentru sintetizarea polipeptidelor. Acestea sunt utilizate n laboratoarele de cercetare i n industria farmaceutic. Dup ce determinase secvena i structura ARN-ului de transfer (ARNt) al fenilalaninei, Khorana a reuit s sintetizeze ntre 1970 i 1972 ADN-ul (adic gena) corespunztoare acestui ARNt.79 S-au fcut apoi progrese n sintetizarea genei precursorului ARNt-ului tirozinei de Esterichia coli.80 Itakura (City of Hope National Medical Center, Duarte, California) a reuit n 1977 i 1979 s sintetizeze genele somatostatinei i insulinei umane. Aceste gene au fost introduse n celulele de Esterichia coli prin tehnici de recombinare genetic puse la punct de Boyer (Genentech). Aceasta reprezint prima expresie a genelor umane n celule bacteriene. n 1980, Itakura pune la punct primul asamblor de gene iar societatea Bio-Logicals din Toronto pune n vnzare o main capabil s sintetizeze n 6 ore un dodecanucleotid cu ordinea dorit a nucleotidelor. Sinteza de acizi nucleici s-a ameliorat rapid. Dac n 1979 era nevoie de 2 ani pentru sintetizarea unei gene de 120 de nucleotide, n 1981 erau suficiente 3 zile. Dayhoff de la National Biomedical Research Foundation din Washington a realizat un atlas al secvenelor de proteine pe ordinator, care n anul 1980 coninea peste 350000 de secvene de gene (virusuri, bacterii, om) preluate din revistele tiinifice internaionale.

28

Progresele spectaculoase ale biologiei aa cum se exprim ele n realizrile ingineriei genetice sunt strns legate de perfecionarea tehnicilor analitice ca ultracentrifugarea, marcarea moleculelor cu izotopi radioactivi, electroforeza, cromatografia de afinitate (de exemplu a tehnicii separrii moleculelor complexe cu ajutorul anticorpilor monoclonali corespunztori), electrofocalizarea bidimensional (ce permite analiza a peste 50000 de proteine a unei celule), microanaliza. S-au obinut succese notabile prin recombinare genetic, folosirea enzimelor, celulelor i organismelor imobilizate. ADN recombinat sunt molecule de ADN sintetizate n afara celulelor vii prin legarea unor segmente de ADN natural sau sintetic cu molecule care pot s se replice ntr-o celul vie. Principiul const n a reuni un ADN nativ cu un ADN strin ntr-un vector care este un plasmid bacterian sau genom viral i a-l introduce apoi ntr-o celul gazd, unde se va putea nmuli. Rezultatul este un clon de celule transformate. Unul dintre obiectivele bioindustriei este de a avea la dispoziie celule transformate n stare s exprime mesajul genetic strin pe care ele l-au integrat i deci apte s produc molecule proteice specifice n cantitate mare.81 Pentru descoperirea enzimelor de restricie n 1972 de ctrea Arber, Smith i Nathans se acord Premiul Nobel n 1978, marcnd astfel importana acestora n dezvoltarea biotehnologiilor. Aceste enzime secioneaz acidul dezoxiribonucleic (ADN) n situsuri specifice i ca urmare a caracterizrii ligazelor care leag fragmentele de ADN i transcriptazei inverse care sintetizeaz ADN-ul pornind de la acidul ribonucleic (ARN) mesager. Enzimele sau endonucleazele de restricie precum i ligazele sunt indispensabile operaiei de inserie a uneia sau mai multor gene n ADN-ul vector care la rndul su servete la introducerea acestei gene n genomul unui microorganism: ADN endonucleaz de restricie gen genom microorganism Ilustrarea mecanismului inseriei de gene n microorganisme Tehnica enzimelor imobilizate (vezi figura) este folosit cu succes n producia penicilinelor semisintetice, a fructozei plecnd de la amidonul de porumb i n testele 29

biochimice simple. Celulele sau organitele celulare imobilizate au avantajul c ele conin secvene complete de enzime indispensabile sintezei compuilor compleci.82 La controlul genetic sunt implicate toate tipurile de determinani genetici din genotip i toate tipurile de interaciuni aleice i genice.83 Astfel, sunt implicate gene majore, gene minore i gene citoplasmatice. 9.2 Gene i interaciunile acestora Genele majore (mendeliene) controleaz caracteristici calitative, practic neinfluenate de condiiile de mediul de cretere al plantei. n controlul caracteristicilor calitative, genele majore pot manifesta: aciune monogenic, univoc (monotrop) sau pleiotrop iar relaiile intragenice heterozigote pot fi de: 1. dominan recesivitate; 2. semidominan; 3. codominan; 4. supradominan. interaciuni genice, digenice sau multigenice cnd se formeaz sisteme seriale de gene, independente sau legate i controleaz etapele succesive dintr-o secven metabolic pentru a produce o caracteristic particular; relaiile intergenice pot fi: 1. reciproce: complementaritatea, epistasia, genele duplicate, triplicate; 2. inhibitoare: gene inhibitoare i gene supresori; 3. modificatoare: gene intensificatori (plus modificatori), gene reductori (minus modificatori). Genele minore controleaz caracteristici cantitative: productivitate, reproductibilitate, adaptabilitate (rata creterii, mrimea i greutatea, capacitatea de a produce o anumit cantitate de semine, fructe, mas vegetativ, substane utile, densitatea pigmentaiei. Aciunea genelor minore este mult influenat de condiiile de mediu. Controlul caracteristicilor cantitative este realizat de 2 sau mai multe gene minore nealele care acioneaz n cadrul unor sisteme de gene numite gene multiple. Un sistem de gene multiple acioneaz asupra dezvoltrii unei singure caracteristici ereditare, cnd efectele locilor minori individuali asupra fenotipului pot fi: aditive, cnd efectele asupra fenotipului sunt: 1. echivalente sau egale; 2. isomerice sau polimerice; 3. anisomerice (neechivalente sau neegale); 30

antagonice (opoziionale) cnd unele gene individuale din sistemul de gene multiple au o aciune n opoziie negativ, scztoare comparativ cu alte gene din sistem care au o aciune aditiv;

multiplicative cnd aciunile genelor individuale din sistemul de gene se combin intensificndu-i sau diminundu-i reciproc activitatea; Membrii sau locii sistemelor de gene multiple sunt independeni, fiind situai n

cromozomi nehomologi. Ca urmare, aceste gene se comport independent n segregare. Dovada transgresiv. Genele citoplasmatice (plasmidele) sunt secvene de ADN din plastide (plastogene) i din mitocondrii (mitogene). Ele controleaz procesele biochimice implicate n realizarea unei ci metabolice din dezvoltarea componentelor morfofiziologice ale produciei sau nsuirilor de adaptare. Aciunea plasmagenelor poate fi: autonom n realizarea funciilor proprii ale organitelor, pe baza aciunii plasmaalelelor84 i a interaciunii unor plasmagene care concur sau interfer la formarea unei caracteristici citoplasmatice; corelat, n sisteme de gene nucleare i gene citoplasmatice care determin interaciuni nucleo citoplasmatice (genice plasmagenice). 9.3 Informaia genetic Molecula care stocheaz informaia genetic este acidul dezoxiribonucleic (ADN) iar subunitile sunt nucleotidele care l compun.85 Acestea sunt de 4 tipuri i conin bazele azotate adenin (A), guanin (G), citozin (C) i timin (T) i ntr-o exprimare plastic sunt literele alfabetului cu care este scris informaia genetic: independenei genelor minore este fenomenul de segregare

ADN i informaia genetic Dintre cei 64 de codoni care constituie codul genetic, 61 codific cei 20 de aminoacizi ai moleculelor proteice, iar 3 sunt semnale stop, care marcheaz sfritul unei informaii. Codul genetic este universal, sistemul de codificare a informaiei genetice fiind acelai la toate vieuitoarele. Dar este ns i degenerat, pentru c exist 61 de codoni i numai 20 de aminoacizi, adic mai muli codoni codific acelai aminoacid. 31

Codul genetic al ARNm Legend: Fen fenilamin; Leu leucin; Ser serin; Cis cistein; Tir tirozin; Trp triptifan; Pro prolin; His histidin; Gli glicin; Arg arginin; Ile izoleucin; Met metionin; Trn treonin; Glu glutamin; Liz lizin; Val valin; Ala alanin; Asp acid ADN este singura molecul autoreplicativ cunoscut. Ea este format din 2 catene (lanuri) polinucleotidice asociate conform principiului complementaritii, secvena nucleotidelor dintr-o caten dictnd secvena nucleotidelor n cealalt caten. Astfel, adenina se leag totdeauna cu timina iar citozina cu guanina. ADN este o molecul informaional, complementaritatea fcnd posibil conservarea, copierea i transmiterea informaiei la celulele fiice rezultate din diviziunea celular. Cnd ADN se replic, cele dou catene ale sale se separ i servesc ca matrie pentru sintetizarea unor catene complementare. Rezultatul const n formarea a dou molecule noi alctuite fiecare din cte o caten veche (matria) i o alta nou sintetizat. Moleculele noi care vor conine aceeai informaie deoarece succesiunea identic a bazelor (literelor) va forma ntotdeauna aceeai codoni (cuvinte) care vor constitui aceeai gen (propoziie) aa cum se exemplific n figura urmtoare:

Replicarea codului ADN 32

9.4 Mutageneza rezistenei la erbicide i insecte Principalul obiectiv al agricultorilor este obinerea de producii mari i de calitate, prin valorificarea deplin a potenialului plantelor cultivate i a resurselor pedoclimatice.86 Aceasta presupune, nu n ultimul rnd eliminarea concurenei buruienilor. n consecin, erbicidarea a devenit o practic curent n agricultura convenional. Tolerana speciilor cultivate la erbicide nu este un caracter nou, marea majoritate a erbicidelor fiind concepute astfel nct s distrug numai anumite plante. Astfel, exist erbicide care se folosesc n culturile de cereale i acestea distrug buruienile dicotiledonate. Alte erbicide sunt aplicate n cultura speciilor cu frunza lat, cnd distrug buruienile monocotiledonate. Cazuri de toleran a unor specii cultivate sau slbatice la erbicide au aprut uneori n mod spontan, sub presiunea tratamentelor, caz n care s-a efectuat o selecie natural. Amelioratorii uneori obin soiuri de plante tolerante la anumite principii active erbicide prin metode care nu implic manipularea genetic. Logic, nu este nici un motiv s se cread c tolerana la erbicide ar avea un impact mai mic asupra mediului dac este aprut n mod spontan sau dac este obinut prin metode de ameliorare dect atunci cnd este rezultatul unor manipulri genetice. Plantele de interes economic tolerante la erbicide sunt aflate deja n culturi comerciale ce se ntind pe milioane de hectare, n diverse ri. n Romnia sunt nregistrate la Institutul de Stat pentru Testare i nregistrarea Soiurilor: soia Round Ready, produs de compania Monsanto; hibrizii de porumb Liberty Link, produi de compania Pioneer. Varieti transgenice de porumb, cartof i bumbac rezistente la atacurile unor duntori ocup deja suprafee foarte mai de teren n culturi comerciale. Rezistena la atacurile insectelor fitofage este obinut prin intermediul unor gene obinute de la Bacillus thrrigensis (Bt).87 Construciile genetice sunt mrci nregistrate (). Compania Monsanto comercializeaz porumb Bt sub denumirea YieldGard, cartof Bt sub denumirea NewLeaf i bumbac Bt sub denumirea BollGard, n timp ce compania Pioneer comercializeaz porumb Bt sub denumirea MaisGard iar compania Novartis comercializeaz linii de porumb sub denumirea de KnockOut i YieldGard. Companiile urmresc o valorificare ct mai larg a construciilor genetice pe care le posed prin realizarea de varieti transgenice la ct mai multe specii n cadrul

33

firmelor productoare de semine pe care le controleaz sau prin concesionarea licenelor de utilizare unor tere firme din ct mai multe ri. Principalul avantaj al cultivrii plantelor rezistente la atacul unor duntori const n reducerea consumului de insecticide, benefic pentru calitatea produciei agricole, mediu i conservarea biodiversitii. Absolut specifice endotoxinele Bt nu ar trebui s aib nici un efect asupra polenizatorilor (bondari, albine) sau altor insecte nevizate (prdtori i parazii ai duntorilor) care ajung n culturile plantelor transgenice.88 Evident ns c acest risc trebuie practic evaluat de la caz la caz.89 n Romnia sunt nregistrate la ISTIS i au primit aprobarea pentru introducerea deliberat n mediu cartoful NewLeaf, rezistent la atacul gndacului de Colorado i liniile de hibrizi de porumb MaisGard i YieldGard rezistente la sfredelitorul porumbului.

34

10. Studiu de cultur la cartof

n aceast seciune prezint date recomandate de Buletinul de producie vegetal al statului Ohio n ceea ce privete cultura cartofului.90 Pentru conversia unitilor de msur americane la unitile de msur europene am folosit lucrarea 91. Cartoful este o important plant de cultur n Ohio i este comercializat pe piaa liber, standurile legumicole i ctre procesare. Cantitatea produs pe hectar variaz n funcie de varietate, data de nsmnare, condiiile meteorologice, tehnologiile aplicate i data de recoltare de la 25 t/ha pn la peste 50 t/ha. Costurile de producie pot depi 2500 $/ha. Noi productori trebuie s studieze cu atenie solul, sursele de ap pentru irigare, varietile alese pentru producere i punctele de vnzare pentru produse. Dac producia este destinat procesrii, este necesar stabilirea de relaii cu partenerii de resort sau alte persoane familiarizate cu domeniul industrial pentru sugestii specifice n ceea ce privete alegerea cultivarelor sau altor practici de cultur, n special n legtur cu tratamentele pe baz de pesticide. Productorii din Ohio sunt ntr-o zon strategic pentru producia cartofului pentru o pia n extindere. Dar, pentru a avea succes ntr-o astfel de regiune unde temperatura pe timpul sezonului de cretere este poate nu tocmai satisfctoare pentru cartofi, productorii trebuie s urmreasc practici de cultur bune, incluznd selecia cmpului i a cultivarului pentru un sol specific i de asemenea s in seama de condiiile climatice i piaa de desfacere. Cartofii necesit un teren bine drenat, fertil, sol nisipos argilos pn la noroios argilos. Solurile grele necesit integrarea n rotaie cu legume, cultivarea acoperit i practici speciale de mecanizare. O rotaie la 2 sau 3 ani cu culturi ca porumbul sau legumele ajut de asemenea. 10.1 Practici de cultur pentru combaterea apariiei gndacului de Colorado Urmtoarele practici de cultur pot ajuta prevenirea problemelor cu gndacul de Colorado. Aceste practici sunt importante deoarece apar probleme de rezisten la insecticide dac chimicalele sunt utilizate singure pentru combaterea proliferrii gndacului: promoveaz ncolirea i creterea rapid a cartofilor prin selectarea celui mai bine adaptat cultivar pentru areal, deoarece plantele mari sunt mai rezistente la defoliere fa de plantele mici;

35

nsmneaz cartofii n prima parte a lui aprilie ca s permii plantelor s treac de perioada de nflorire nainte ca gndacii s vin n for; plantnd cartofii la nceputul sau mijlocul lui Iunie permite gndacului de Colorado s prseasc arealul nainte ca plantele s devin atacabile; varietile cu maturizare rapid trebuie s fie plantate sau foarte devreme sau foarte trziu pentru a evita stricciunile produse de gndac; prin folosirea cultivarelor cu maturizare rapid i recoltarea imediat dup ajungerea la maturitate vei reduce sursa de hran pentru gndaci mai trziu n sezon, ceea ce va slbi gndacii la intrarea n faza de hibernare;

minimizeaz cartofii voluntari prin evitarea arturii de toamn sau prin artura de toamn urmat de o cultur de ser legumicol care va scoate din competiie cartofii sau prin folosirea postrecoltare a unui inhibitor de cretere pentru cartofi;

gndacii aduli pot fi concentrai n timpul toamnei prin nerecoltarea a 2-4 rnduri de cartofi la fiecare 100 de rnduri n cmp. Gndacii vor converge ctre acestea i atunci se pot omor cu un insecticid care ns nu se va folosi i n anul urmtor. 10.2 Varieti Cultivarele crescute n Ohio vor fi descrise n continuare. De notat c unele

dintre aceste varieti (marcate cu *) sunt acum disponibile ca soiuri transgenice de cartof. Soiurile transgenice sunt la fel cu celelalte varieti dar cu un atribut suplimentar: nalta rezisten la gndacul de Colorado. Acestea sunt descrise ntr-o alt seciune (9.4). Exist ns un pericol: n 4 locaii n statul Ohio n 1996 a fost plantat soiul transgenic Superior ns calitatea obinut pe pia nu a fost acceptat. Dac productorii doresc s ncerce cultivarele transgenice, ei i asum acest risc. Mai multe studii sunt necesare pentru a evalua calitatea comercial. Varieti cu maturizare timpurie Irish Cobbler este o varietate cu maturizare rapid cu o excelent calitate la gtit dar cu slab trecere pe pia datorit formei foarte neconvenabile. El este produs pentru vnzarea la pia i pentru consum propriu. Jemseg este din Canada. El este caracterizat printr-o cretere rapid a tulpinii i mrirea tubercului. Este recomandat pentru vnzarea pe piaa liber, dar este dificil de crescut. Alegerea terenului poate fi dificil. Fertilizatorii cu azot trebuie redui cu aproximativ 25% fa de doza normal. El trebuie plantat devreme potrivit pentru soluri 36

nisipoase pietroase. Poate fi utilizat pentru grdinile de lng cas, piee sau pentru folosin comercial. Norland este o varietate cu coaja roie, dar este fosrte sensibil la poluarea aerului, n special cu ozon. Este crescut pentru vnzarea pe pia. Noile subvarieti de Norland cu o mai bun coloraie roie sunt acum disponibile. Superior* se potrivete cel mai bine pe solurile bine drenate, nisipoase argiloase pn la soluri pietroase argiloase. Este crescut att pentru pia ct i pentru fabricarea chips-urilor. Conestoga este o varietate timpurie din Canada. Este raportat c are o anumit rezisten la rsucirea frunzelor i scabie. Tuberculii sunt rotunzi, albi i au tendina de se zdrobi uor. n testele efectuate n Ohio, densitatea a fost gsit identic cu a soiului Norchip, dar n alte state se nregistreaz o densitate mare. Plantarea timpurie este esenial. Varietatea pare c d maximum de productivitate n soluri uoare i n regim de irigaie. Blocarea creterii i crparea pot fi serioase dac varietatea este crescut pe soluri grele sau lipsa de ap apare n timpul creterii tuberculului. Este recomandat pentru comercializare direct, grdinrit i comercializare pe pia. Varieti cu maturizare la mijloc de sezon Monona este o varietate precoce de mijloc de sezon crescut n special pentru industria chips-urilor. Este n decdere n industria chips-urilor datorit densitii reduse i formei proaste a tuberculului n unele condiii de cretere. Este nlocuit de alte cultivare. Shurchip, realizat n Nebraska, este o varietate medie timpurie. Tuberculul este rotund i uor rocat. Este purttor de toleran la scabie i se adapteaz slab texturate. Ofer o mare eficacitate sub irigaie. Este produs n principal pentru comercializarea imediat. Tuberculii pot avea o form proast dac a suferit temperaturi nalte sau lips de umiditate. Norchip este o varietate medie timpurie cu tuberculi rotunzi care se pot crpa sub condiii de lips de ap. Este purttor de rezisten la scabie. Este crescut n special pentru comercializarea sub form de chips-uri i pentru stocarea pentru aceast destinaie. Atlantic* este un cartof de mare productivitate i densitate, dar este predispus la decolorarea intern i gurirea mijlocului. Aceast varietate este recomandat pentru condiiile din Ohio doar dac productorul are un contract cu o companie de chips-uri. Nu este considerat o varietate care s fie stocat sub condiiile din Ohio. Decolorarea 37

intern este o serioas problem sub condiii de stres. Gurirea mijlocului de asemenea. Nu ar trebui s fie crescut pentru comercializarea direct pe pia. Varieti de sezon mediu pn la trziu Katahdin este introdus de Departamentul de Agricultur al S.U.A. i este o varietate folosit n special pentru stocarea n vederea consumului de mas dar este folosit uneori i pentru chips-uri. Tuberculii rotunzi, netezi i albi sunt atractivi. Gaura n mijloc poate fi o problem i este uor susceptibil la scabie. Plantarea pe rnduri apropiate ajut la controlul mrimii tuberculului. Movilirea este esenial n controlul nverzirii. Este nlocuit treptat cu noi varieti cu o calitate comercial superioar i productivitate mrit. Kennebec este o varietate nalt productiv cu o excelent calitate la gtit. Este ns susceptibil la boli variate, incluznd vetejirea verticillium i putrezirea datorat bacteriilor uoare la depozitare. Este susceptibil la nverzire. Datorit acestor probleme, nu este potrivit pentru producerea pentru comercializare. Continu s fie popular pentru vnzrile la marginea oselei i pentru plantarea n grdin. Este n declin ca varietate comercial datorit dezavantajelor menionate. Russet Norkotah este o varietate promitoare n condiiile de mediu din Ohio. Tuberculii au o tendin de uniformitate i form atractiv. Necesit irigare i nalt grad de fertilizare. Are maximum de eficien pe soluri slab texturate i nalt grad de fertilizare, n special azot. Are slab eficien pe soluri grele. Red Pontiac este o varietate cu coaj roie i maturizare trzie folosit n grdin sau pentru vnzarea la osea. Este o varietate cu nalt productivitate, dar tuberculul poate crpa i forma are probleme. Tabelul de mai jos conine durata pn la maturizare a varietilor descrise. Precocitatea la varietile de cartof semnate n Ohio Cultivar Durat aproximativ pn la maturizare (zile) Jemseg 75-85 Norland 80-90 Conestoga 90-100 Superior 90-100 Monona 100-120 Shurchip 110-120 Norchip 100-110 Atlantic 100-115 Katahdin 120-150 Kennebec 130-135 38

Varieti pentru plantarea n regim de testare Multe noi cultivare sunt scoase pe pia, dar ele trebuie testate pentru cel puin 2 ani pe ferme individuale nainte ca ele s fie plantate pe suprafee extinse. n timpul ultimilor ani, mai mult de 200 de cultivare au fost evaluate anual n Ohio n regim de testare la Ohio Agricultural Research, Development Center i n fermele individuale n Ohio. Dintre cultivarele cu rezultate promitoare menionm: Norwis (FL 657) a fost inclus n testri din 1990. Tuberculii sunty rotunzi la uor ovali cu o culoare crem deschis. Aspectul este bun i varietatea este potrivit pentru comercializarea pe pia. Teste limitate arat o mare capacitate productiv, dar trebuie crescut pe soluri uor texturate. Dac este crescut pe soluri argiloase capt o form neregulat. Decojirea suprafeei poate fi o problem. Tuberculii cresc rapid i ofer posibilitatea comercializrii timpurii pe pia. Se dezvolt pe soluri uor texturate (nisipoase i pietroase); Snowden este realizat la Universitatea Wisconsin i a fost evaluat la condiiile din Ohio. Tuberculii sunt rotunzi cu o culoare cafenie pn la cafeniu deschis i ochiurile n suprafa sunt adnci. Are tendina de a forma tuberculi mici i are o capacitate productiv mare dac mrimea tuberculului poate fi mrit. Rdcinile au tendina de a fi adnci. Distana de semnare de 30 cm poate ajuta mrirea tuberculului. Ceva probleme interne au fost observate. Recomandat la pieele de prelucrare; Langlade a fost creat de amelioratorii de la Universitatea Wisconsin. Tuberculii sunt rotunzi la oval cu o uoar coloraie maroniu deschis. Are o mare capacitate productiv dar are tendina de a forma tuberculi mari. Spaierea la 20 cm sau mai aproape poate controla mrimea tuberculului i gaura din mijloc. Aceast varietate pare a se adapta bine pe o larg gam de texturi la sol. Potribit pentru grdinrit i comercializare. Cartofi transgenici Cteva varieti transgenice sunt acum disponibile sub numele generic New Leaf. Acestea sunt identice cu varietile normale dar cu o calitate suplimentar: rezistena la gndacul de Colorado. Rezistena a fost obinut cu ajutorul adiiei de gene care produc toxina B.t. B.t. este abrevierea pentru o bacterie numit Bacillus thuringiensis care produce o toxin proteic care omoar cea mai mare parte a insectelor dac acestea se hrnesc cu esut de plant tratat cu B.t. B.t. este disponibil ca spray de mult vreme. 39

Plantnd varietile New Leaf este mult mai eficient dect spray-ind B.t. deoarece concentraia de protein toxic este mult mai mare i este rspndit n toat planta, n special n terminaii i persist toat perioada sezonului de cretere. n contrast, spray-ul B.t. se degradeaz la lumina solar dup ploaie. Un avantaj al controlului cu B.t. este c el nu este toxic pentru inamicii naturali ai afidelor i altor duntori ai cartofului, aa nct utilizarea B.t. ncurajeaz controlul biologic natural. Managementul rezistenei: cercettorii din domeniul cartofului au studiat posibilitatea ca gndacul de Colorado s devin rezistent la B.t. i au elaborat o serie de recomandri n ceea ce privete utilizarea cartofilor din varietile New Leaf care minimizeaz capacitatea de dobndire a rezistenei. Astfel: nu mai mult de 50% din fermele productoare de cartofi ar trebui s fie plantate cu varieti New Leaf; nu mai mult de 80% din fiecare cmp individual ar trebui s fie plantate cu varieti New Leaf; Motivul pentru care se las cel puin 20% din fiecare cmp susceptibil la gndaci este de a lsa civa gndaci susceptibili la B.t. s supravieuiasc pentru ca acetia s se ncrucieze cu orice gndaci rezisteni la B.t. i astfel s pstreze gena de sensibilitate la B.t. n populaie. Cea mai bun cale este de a planta n suprafaa de 20% rmas aceeai varietate de cartof, ns fr rezistena la gndacul de Colorado indus de B.t. n aceast suprafa sunt ns necesare tratamente cu pesticide mpotriva gndacului, tratamente care nu sunt ns necesare pe restul suprafeei. Cel mai bine este ca s nu se foloseasc tratamentul preventiv cu insecticidul Admire n aceast situaie pentru c el va duce la dispariia gnacilor sensibili la B.t. 10.3 Rotaia culturilor, vegetaia i fertilizarea Rotaia culturilor este una dintre cele mai importante metode de a evita i reduce problemele cu gndacul de Colorado. Rotaia cartofului cu plante altele dect cartofi, roii, ardei, vinete poate ntrzia i chiar reduce infestarea prin pui de gndaci. Noile cmpuri trebuie ct este posibil s fie mai departe de cmpurile din anul anterior, ideal la cel puin 400 m. Altfel gndacii vor zbura ctre aceste cmpuri i metode suplimentare de control al infestaiei sunt necesare i este deci mai simplu ca alegerea terenului s se fac ct mai departe de terenul semnat cu cartofi n anul anterior. Deoarece scabia poate fi o problem, menine pH-ul solului la 5.4 sau uor mai acid. Varietile rezistente la scabie, ca Superior, pot tolera soluri mai alcaline (pH mai mare). Ct timp pH-ul este sub 5, nu aplica ngramnt imediat dup plantare; aplic 40

dup recoltare. ngrmntul dolomitic este utilizat dac nivelul magneziului este mic, n special n estul statului Ohio. n aceste zone, utilizeaz o surs de magneziu, cum ar fi sulfatul de magneziu n fertilizarea aplicat la plantare. Unde magneziu este necesar, aplic 30-45 kg MgO pe hectar. O rotaie la 3 ani va ajuta i va reduce scabia. O rotaie de 3 ani fr cartofi ajut la minimizarea problemelor cu scabia dup o moderat fertilizare cu ngrminte. Cmpurile cu antecedente de scabie trebuie s fie evitate. La soluri minerale aplic 110-160 kg/ha N pentru solurile argiloase i 190-200 kg/ha N pentru solurile cu textur dur (nisipoase, pietroase, etc.). Fosforul i potasiul de fertilizare este exprimat cel mai bine de testele efectuate asupra solului. Un insuficient tratament cu azot va reduce producia, n timp ce un exces de azot va reduce calitatea tuberculilor, parametrii de conservare i potenialul de vnzare. Ratele de azot depind de varietate. Ratele de azot tabelate trebuiesc ajustate n funcie de experiena anterioar. Aplic 2/3 din fertilizator n artur la plantare. Artura trebuie s aib 5-8 cm de la suprafa i sub suprafaa solului. O fertilizare adiional de 30-45 kg N este necesar pentru consolidarea texturii solului dup ce plantele au 10-15 cm nlime. La solurile cu blegar aplic 80-110 kg/ha N, 110-170 kg P2O5 i 110-170 kg/ha K2O. Utilizeaz teste de sol pentru a afla exact ct fosfor i potasiu este necesar. Cteva valori de fertilizare cu N sunt redate n tabelul urmtor: Valori de fertilizare cu N la cteva varieti cultivate n Ohio pentru consum pentru chips-uri Varietatea kg/ha N kg/ha N Katahdin 170-190 Kennebec 120-135 Superior 180-210 Norland 180-200 Jemseg 100-110 Norchip 180-200 Monona 120-150 Atlantic 170-200

10.4 Manipularea seminei, nsmnare i spaiere, date de nsmnare Multe schimbri pot apare n variatele regiuni n care smna certificat este produs. n funcie de regiune, pot fi mai mult de 5 sau 7 generaii de smn de la laborator la cmp. Productorii trebuie s trateze cu furnizorii astfel nct s cumpere smna n funcie de informaiile publicate de ageniile de certificare cu privire la 41

valoarea cultural a seminei. Succesul producerii de cartofi depinde de buna i certificata smn i manipularea corect a acesteia n fermele individuale. Urmtorul tabel conine valori specifice pentru tehnologia de nsmnare: Spaierea ntre cuiburi n rnd (cm) 20 25 30 38 Necesarul de smn la hectar Rnduri la 85 cm Rnduri la 90 cm Greutatea tuberculilor de smn (g) 43 50 57 43 50 57 necesar (kg/ha) 1118 1270 1473 1016 1219 1372 864 1016 1168 813 965 1118 711 864 965 711 813 914 559 711 813 559 660 711

Experiena anterioar poate fi un foarte bun ghid pentru spaierea ntre cuiburi. Spaiile mici sunt benefice cnd se folosesc varieti cu tendine ca gurirea mijlocului, mrirea excesiv a tuberculului, sau cnd se folosesc tuberculi ce au tendina de a lua o form neconvenabil. Una dintre deciziile majore care le ia productorul este distana ntre cuiburi. Muli comerciani penalizeaz productorii dac tuberculii au dimensiuni mai mari de 8 cm. Urmtorul tabel poate fi un ghid pentru distane de spaiere: Distane de spaiere ntre cuiburi pentru principalele varieti cultivate n Ohio Distana (cm) Varietate 23-25 Jemseg Superior Norland Shurchip Monona Atlantic Katahdin Kennebec Norchip Langlade 23-30 25-30 23-30 20-23 20-25 20-23 20-23 25-30 15-20

Datele de nsmnare variaz de la sezon la sezon i n funcie de compoziia solului i varietatea cultivat. nsmnarea trebuie s se ncheie ct mai curnd posibil, ct timp condiiile solului permit. Urmtoarele valori sunt specifice pentru Ohio: Sudul statului Ohio: de la sfritul lui Martie pn la sfritul lui Aprilie; Centrul statului Ohio: de la nceputul lui Aprilie pn la mijlocul lui Mai; Nordul statului Ohio: de la sfritul lui Aprilie pn la mijlocul lui Iunie. 42

10.5 Cultivarea, movilirea, controlul n vegetaie i nainte de recoltare Prin utilizarea erbicidelor recomandate, intrarea n cultur poate fi ntrziat pn cnd plantele s-au instalat pe sol. Se pot aplica tratamente de rupere a crustei solului i mbuntire a aerrii. Operaia de movilire trebuie s se ncheie nainte ca plantele s nceap tuberculizarea. O movilire bun ajut n controlul buruienilor, a tierilor ulterioare i previne nverzirea. Movilirea pare c este util pentru majoritatea varietilor n condiiile din Ohio, dar este n special benefic pentru Katahdin, Shurchip, Norchip i Kennebec. Hidrazina maleic (Royal MH-30 sau Super Sprout-Stop) este acceptat pentru utilizarea n cmp n controlul vegetaiei. A se aplica acolo unde cei mai muli tuberculi au cel puin 5 cm n diametru sau 1-2 sptmni dup oprirea nfloririi. Tulpinile trebuie s fie verzi i n cretere. Se aplic dac nu se face irigaie sau nu se ateapt ploi n urmtoarele 24 de ore. S se consulte reeta produsului nainte de folosire. Retezarea tulpinii este un element esenial n producerea de cartofi. Pe lng efectele benefice asupra calitii la depozitare, retezarea tulpinii uureaz recoltarea i previne posibilele boli. Decolorarea interioar a tuberculilor poate apare dac tierea se face prematur, n special cnd temperatura este mare i solul este uor noroios. Pentru a minimiza decolorarea, folosete cantiti mici de chimicale sau dac se taie, s se fac pe vreme cald i uscat. Folosete cantiti mai mari pe vreme mai rece. Dintre chimicalele folosite n procesul de nlturare a tulpinii, Diquat a dat rezultate bune n Ohio. Se aplic cu cel puin 7 zile nainte de recoltare. Pentru cartofii cu cretere rapid a tulpinii, poate fi un avantaj utilizarea unui chimical ca endotal (Desicate II). 10.6 Recoltarea i depozitarea Productorii din Ohio au o substanial experien a pierderilor de recolt n timpul recoltrii mecanizate, ngherii cmpului sau putrezirii n silozuri. O mare parte a acestor pierderi poate fi pus pe seama lipsei de atenie la detalii n recoltare i manipulare. Cteva sugestii: tuberculii trebuie s fie maturi i tulpinile s fie moarte la uscare; prea mult azot poate ntrzia maturizarea; ncearc a evita recoltarea ct timp temperatura solului este sub 10 C; dac apare ngheul n cmp i timpul permite, las cteva zile tuberculii ngheai s-i manifeste simptoamele astfel nct s poi s vezi dac se pot depozita sau nltura; 43

menine o pern de sol ct mai sus fa de primul lan de spare, ct timp nc mai este o bun separare; aceasta implic reducerea sau mrirea vitezei mainii de recoltat sau reducerea turaiei n soluri nisipoase sau uscate; opereaz maina de recoltat la capacitate tot timpul;

nainte de a pune cartofii n siloz, cur silozul n ntregime; pornete sistemul de ventilare timp de 2-3 cicluri de ventilare recirculare uscare aa nct s te asiguri c toate controalele funcioneaz corespunztor nainte ca primul transport de cartofi s vin pentru depozitare; dezinfecteaz silozul dac o boal semnificativ a aprut n anul precedent;

trateaz ambele categorii de cartofi: pentru consum i pentru chips-uri la 13-16 C i umiditate relativ ridicat (90-95 %) pentru 10 zile dup recoltare pentru a favoriza nsntoirea tieturilor i rnilor; circulaia corespunztoare a aerului este esenial pe parcursul acestei perioade; dup aceea, rcete treptat silozul pn la 3-4 C i menine umiditatea ridicat (90-95%); pstreaz cartofii pentru prelucrare n chipsuri la 13-16 C, dac experiena cu varietatea dat nu menioneaz c o temperatur mai sczut trebuie meninut;

cartofii cu severe afeciuni de tiere sau nghe sunt dificil de pstrat cu succes i trebuie separai de rest i stocai ntr-o alt cldire; acetia trebuie comercializai ct mai curnd posibil; tuberculii trebuie rcii la 3-4 C prin circulaia aerului (5 l/mint) prin siloz; umiditatea relativ trebuie redus dac se dorete uscarea cartofilor mai rapid. 10.7 Controlul bolilor Putrezirea Utilizeaz smn certificat liber de boli. Cnd tai cartofii de smn, cuitul

trebuie periodic curat i dezinfectat. Sub nici o form nu trebuie ca la schimbarea unui lot de smn cuitul s nu fie curat i dezinfectat. Putrezirea este cauzat de o bacterie care este foarte contagioas. Oricum, bacteria nu va supravieui n sol mai mult de 1 an n sol i perpetuarea poate fi mpiedicat prin rotaia culturilor. O ferm care a fost infestat trebuie s suporte o procedur de curire nainte ca s se fac nsmnarea n noul an de cultur. Organismul bacteriei poate supravieui uor iernii n soluri umede noroioase sau n solurile din vecintatea silozurilor, echipamentelor de lucru sau a recipientelor de transport i depozitare. Dac smna neinfestat intr n contact cu aceste surse de contaminare, pot s reapar problemele. 44

Primul pas este curirea tuturor suprafeelor contaminate cu ap cald cu spun pentru a ndeprta toate urmele de sol i impuriti. Utilizeaz jet sau ap sub presiune. Oricum, acestea singure nu pot s elimine bacteria. Suprafeele trebuie apoi tratate cu un dezinfectant. Muli dezinfectani sunt disponibili pe pia. Tabelul urmtor cuprinde civa dintre acetia, la care ratele recomandate au fost testate. Dezinfectanii trebuie s fie lsai s stea la suprafaa aplicat timp de 15-20 minute sau mai mult i apoi ndeprtai cu ap curat. Eficacitatea dezinfectanilor dup 15-20 min. la eradicarea bacteriei putregaiului Dezinfectant Betadine (utilizat n spitale) Chlorine bleach (10%) Coal Tar DeBac (pe ba de NH4+) Ethyl alcohol (95%) Formaldehyde (1%) Formaldehyde (2%) Formaldehyde (4%) Vesphene (utilizat n spitale) Zephiran (pe ba de NH4+) Lysol concentrate Lysol spray Phenol (5%) Water Soapy water Metal foarte bun bun foarte bun foarte bun bun bun foarte bun foarte bun ineficient foarte bun excelent bun bun ineficient ineficient Lemn foarte bun bun foarte bun foarte bun foarte bun foarte bun foarte bun foarte bun ineficient foarte bun excelent foarte bun bun ineficient ineficient Mase plastice foarte bun foarte bun foarte bun foarte bun foarte bun bun foarte bun foarte bun bun foarte bun bun bun bun ineficient ineficient

Scderea germinaiei, mbtrnirea i putrezirea cartofilor de smn Muli cultivatori au avut succes dac au tratat cartofii de smn cu fungicide. Trateaz cartofii de smn cu unul dintre: Maneb 8% n cantitate de 9 kg/t; Tops 2.5% n cantitate de 9 kg/t. Tietoarea precoce (Alternaria) i tietoarea ntrziat (Phytophthora) ncepnd cu plantele care au peste 20-25 cm aplic una dintre urmtoarele fungicide la interval de o sptmn. Pe vreme rece i umed este necesar aplicarea la fiecare 5 zile. Urmrete instruciunile din reet, inclusiv restriciile de rotaie: Bravo 720 (6F) 1.2-1.7 l/ha; Bravo 500 (4.17F) 1.7-2.4 l/ha; Bravo (90 DG) 0.8-1.25 kg/ha; Mancozeb (80W) 1.7-2.2 kg/ha;

45

Mancozeb (4F) 2.8-3.7 l/ha; Utilizarea sezonal a Dithane M-45 a fost redus la 15.7 kg/ha; Rovral (4F) 1.1-2.2 l/ha; Maximum 4 aplicri. Putregaiul tulpinii (Botrytis) Aceast boal apare n general n culturile sub irigaie. Dac apare o infestare

semnificativ aplic: Bravo 500 (4.17 F) 1.7-2.4 l/ha; Bravo 720 (6 F) 1.2-1.7 l/ha; Bravo (90 DG) 0.9-1.4 kg/ha. Scabia Menine pH-ul solului sub 5.5 i nu aplica ngrmnt natural. Varietile difer semnificativ n susceptibilitatea la scabie. Cunoate varietatea i istoria terenului nainte de plantare. Dac irigaia este posibil, aplic o soluie adecvat pe timpul formrii tuberculilor. Putregaiul umed al tuberculilor n siloz (fusarium) Evit lovirea i excesul de sol pe tuberculi. Cnd pui producia n siloz, aplic Mertect 340-F ca pulbere fin pe cartofi cnd acetia trec prin ncrctor sau transportor. Urmrete instruciunile de pe etichete. Evit tierea, lovirea i excesul de sol pe tuberculi i n siloz. Menine un mediu propice de conservare n siloz. Mozaic, rsucirea frunzelor, purple top i alte boli virotice Folosete doar smn certificat. Controleaz afidele i puricii de frunze. Nematode Arderea solului nainte de nsmnare poate fi util n unele situaii. Urmtoarele pot fi aplicate la nsmnare: Vydate L 9-19 l n 190 l ap/ha; Mocap 10G 34 kg/ha; Mocap EC 2 5.6 l/ha.

46

10.8 Managementul insectelor Controlul biologic Inamicii naturali pot furniza un control biologic adecvat al afidelor dac insecticidele cu spectru larg nu sunt folosite, mai ales dup mijlocul lui Iulie. Inamicii naturali comuni n Ohio sunt lady beetle adults, lady beetle larvae, lacewing larvae, hover fly larvae, damsel bugs, minute pirate bugs, i parasitic wasps. Civa inamici naturali ai gndacului de Colorado pot diminua populaia, dar nici unul nu a fost descoperit nc care singur s fac un control adecvat asupra populaiei acestui duntor. O specie de lady beetle se hrnete cu oule gndacului i civa parazii zburtori i un fungus poate ataca populaia. Aceti inamici naturali pot fi conservai prin plantarea cartofilor din varietatea New Leaf sau de insecticide microbiene ca B.t. care sunt toxice pentru gndacul de Colorado dar nu i pentru insectele benefice. Cercetri sunt n desfurare pentru a vedea avantajul folosirii paraziilor exotici care pot fi crescui n laborator i apoi eliberai n cmpuri experimentale de cartofi, dar nc nici unul nu a fost gsit a fi suficient de efectiv pentru a fi produs pentru folosin comercial. Controlul mecanic Aspiratoare de volum foarte mare pot fi folosite pentru a absoarbe larvele i adulii gndacului de pe plante. n forma lor comercial, aceste aspiratoare special construite pulverizeaz gndacii nainte de ieirea din camera depresurizat. Arztoarele cu propan pot fi folosite pentru a ucide gndacii aduli de pe plantele mici pe perioada primverii i de pe tulpinile supraterane pe perioada toamnei. Temperatura flcrii de peste 100 C cauzeaz uciderea a peste 80% din gndaci la un cost redus de propan la hectar. Arztoarele cu propan sunt oricum, utile doar dup ce plantele au aproximativ 20 cm nlime i la momentul distrugerii tulpinilor. Gndacii sunt ndeosebi concentrai la marginea unui nou cmp pe perioada primverii dac nsmnarea a fost fcut relativ timpuriu i aproape de cmpul folosit n anul precedent. Cnd sunt concentrai, gndacii aduli pot fi ari sau aspirai eficient. Gndacii se concentreaz ctre orice plant verde dup ce n cmp a fost aplicat distrugerea tulpinilor i pot fi mult mai eficient ari sau aspirai atunci.

47

Insecticide Rotaia insecticidelor previne ca gndacul de Colorado s devin rezistent la insecticide. n zonele de producie intensiv a cartofului, unde insecticidele sunt utilizate n cantiti mari, populaiile de gndaci sunt rezistente la aproape toate insecticidele. Rezistena la un anume compus chimic este deseori nsoit de rezistena la compuii chimici nrudii. Pentru a evita sau ntrzia apariia rezistenei n populaiile de gndaci de Colorado, clasele de insecticide trebuie rotite ntre generaiile de gndaci. Pentru aceasta este necesar cunoaterea compoziiei pesticidelor (descrise n capitolul 8). Cteva reete pentru insecticide tipice pentru cultura cartofului sunt descrise n continuare: Doze la insecticide pe hectar Tratamentul nainte de plantare Insecticid Diazinon Diclorpropen Disulfoton Ethoprop Fonofos Arie de aplicare viemi tietori, srmoi Doza Doza Unitatea minim maxim de msur Diazinon AG500 (4EC) 2.2 4.5 kg/ha D-Z-N AG600 36 72 l/ha Diazinon 50WP 4.5 9 kg/ha Diazinon 14G 16 31 kg/ha Telone (94% a.i.) 168 337 l/ha Vorlex (40% a.i.) symph. 94 140 l/ha Vorlex (40% a.i.) wiref. 234 561 l/ha Di-Syston 15G 22 30 kg/ha Di-Syston 8EC 3.5 4.5 l/ha (doar afide) Mocap 6EC 6 9 l/ha Mocap 10G 45 67 kg/ha Dyfonate 4EC 6 9 l/ha Dyfonate II 15G 15 15 kg/ha Dyfonate II 15G 30 30 kg/ha Denumire comercial 37 l/ha

Oxamyl

Carbaryl Metaldehyde

viermi srmoi, symphylan-ul de grdin afide, gndacul purice, puricii de frunze viermi srmoi, symphylan viermi srmoi, symphylan-ul de grdin gndacul purice, afide, gndacul de Vydate 2SL 19 Colorado, puricii de frunze Tratamente ademenitoare pentru duntori Sevin 5B 22 viermi tietori, Prozap Sevin armyworms 11 10% Bait Granules Deadline MP (4B) 22 limaxuri Prozap Snail and Slug 27 AG (3.5B)

45 22 45 45

kg/ha kg/ha kg/ha kg/ha

48

Doze la insecticide pe hectar - continuare Pentru tratamentul la nsmnare afide, gndacul Di-Syston 15G 1.4 Disulfoton purice, Colorado, Di-Syston 8EC 0.2 puricii de frunze viermi srmoi, Mocap 6EC 0.4 Ethoprop symphylan Mocap 10G 3.1 Imidacloprid Colorado, afide, puricii de frunze, gndacul purice Admire 2F 0.8

2.1 0.3 0.4 3.1 1.2

kg/km kg/km kg/km kg/km l/km

gndacul purice, Oxamyl Colorado, puricii de frunze, afide larvele gndacului purice, Colorado, Phorate puricii de frunze, viermi srmoi Abamectin Azadirachtin (neem) Colorado larvele gndacului de Colorado, leafhopper nymphs

Vydate 2SL

19 3 2.1 1.6 1.6 22 19 1.15 15 1.7 1.7 1.7 3.5 3.5 7 9 9 2.2 4.6 1.7 1.1 9 2.2

l/ha kg/km kg/km kg/km kg/km l/ha l/ha l/ha l/ha kg/ha kg/ha kg/ha l/ha l/ha l/ha l/ha l/ha kg/ha l/ha kg/ha kg/ha l/ha kg/ha

gndacul purice, Colorado, purici de Azinphosfrunze, sfredelitorii methyl porumbului European B.t. Colorado

B.t.

noduli, armyworms, viermi tietori, ali caterpilari

Rampart 10G 2 Thimet 15G 1.3 Thimet 20G 1 Phorate 20G 1 Tratamente foliare Agri-Mek 0.15EC 5.6 Neemix 0.25% a.i. 5 Neemix 4.5 (4.5% a.i.) 0.15 Azatin EC 7 (0.265 lb a.i./gal) Guthion 50WP 1.1 Sniper 50W 1.1 Gowan Azinphos-M 50W 1.1 Guthion 2S 1.7 Sniper 2E 1.7 Raven (10% a.i.) 1.2 M-Trak 3.5 (10% a.i., encapsulated) Novodor FC (3% a.i.) 2.3 Agree WG (3.8% a.i.) 1.1 Biobit XL FC (2.1% a.i.) 1.7 CryMax WDG (15% a.i.) 0.5 DiPel DF (10.3% a.i.) 0.3 MVP 2 (10% a.i., encapsulated) XenTari WDG 0.6 (10.3% a.i.)

10.9 Controlul buruienilor Preplant incorporated Aceast categorie grupeaz erbicidele pe baz de EPTC. Acestea acioneaz asupra ierburilor anuale, anumitor buruieni cu frunz mare i suprim quackgrass i 49

yellow nutsedge. Dou dintre formele sale comerciale sunt Eptam 7 E i Genep 7 E la care doza de administrare este de 5.2-7.9 l/ha. Utilizeaz o doz de 7.9 l/ha doar dac nutsedge este o problem. Preemergente Linuron inhib plantele tinere cu frunz mare i ierboasele. Trebuie aplicat ca preemergent la cultura cartofului chiar nainte de nsmnare. Nu rscoli solul pn cnd nu rsar buruieni. Variante comerciale ale acestui erbicid sunt Drexel Linuron 4L, Linex 4L (1.7-4.6 l/ha) i Drexel Linuron DF, Linex 50DF, Lorox DF (1.7-4.5 kg/ha). Dual magnum inhib germinaia ierboaselor anuale, anumitor buruieni cu frunza mare i suprim yellow nutsedge. Se aplic n doz de 1.7-2.3 l/ha. Este bine dac ulterior aplicrii tratamentului cu Dual Magnum se aplic un tratament de preemergen ntrziat a linuronului sau metribuzinului. Metribuzin controleaz buruienile mici tinere mai nalte de 3 cm. Biotipuri cu rezisten la triazine (lambsquarters, pigweed) au aprut n Ohio i nu pot fi controlate. Nu recolta cartofii mai repede de 60 de zile de la nsmnare sau de 40 de zile de la aplicarea ultimului tratament i nu utiliza erbicidul pe soluri nisipoase sau noroioase. Aplicarea sa la Atlantic, Shepody, Chip Bell, Bell Chip, i varietilor de Centennial poate afecta producia. Variantele comerciale sunt Sencor 75DF i Lexone 75DF (0.71.1 kg/ha). Turbo 8 EC este un amestec de erbicide (metolaclor + metribuzin) care se administreaz cu aceleai precauii n doz de 2.3-4 l/ha. Matrix 25DF este folosit pentru inhibiia ierboaselor anuale i buruienilor cu frunza lat i se aplic dup movilire n doz de 0.07-0.1 kg/ha. Activarea sa necesit ns ploaie sau irigaie n 3 zile de la aplicare. El poate fi amestecat nainte de mprtiere n cmp cu Lexone, Eptam, Prowl, Lorox, sau Dual pentru a mri spectrul de aciune asupra buruienilor. Dual Magnum n doz de 1.1-2.3 l/ha mpreun cu 1.1-2.8 kg/ha de Lorox 50 DF, chiar nainte de emergena cartofilor este eficient n inhibiia buruienilor anuale, ca i amestecul Dual Magnum (1.1-2.3 l/ha) i Sencor 75DF sau Lexone DF 75 (0.7-1.1 kg/ha). Postemergente Aplic postemergena dup curirea mecanic sau n timpul acesteia. Aplic-o prin pulverizare direct. Cartofii trebuie s fie de 30-46 cm mrime cnd aceast procedur este efectuat. Nu aplica mai mult de 7 kg a.i./ha n nici un sezon de cultur. 50

Variantele comerciale sunt Eptam 7 E i Genep 7 E iar doza recomandat este de 5.2 l/ha. Metribuzinul n postemergen controleaz ierboasele anuale i anumite ierboase perene. Aplic tratamentul cnd plantele sunt mai mari de 3 cm. Un erbicid din clas structural chimic diferit trebuie utilizat pentru a inhiba biotipurile rezistente la triazin. Nu aplica tratamentul dup 3 zile reci i ploioase consecutive i ateapt pn cnd plantele ating 30-38 cm pentru a evita stricciunile. Produsele comerciale sunt Sencor 4 (1.2-2.3 l/ha), Sencor 75DF, Lexone 75DF, Solupak DF (0.7-1.5 kg/ha). Matrix 25DF singur aplicat inhib anumite ierboase anuale i buruieni cu frunza lat i elimin quackgrass, Canada thistle, i yellow nutsedge. Aplic Matrix n doz de 0.07-0.1 kg/ha asupra buruienilor n cretere mai mici de 3 cm nlime. Include un surfactant neionic n doz de 1.2-2.5 l/m3 de ap. Buruienile perene necesit o a doua aplicare la 28 de zile de la prima aplicare pentru a inhiba rsririle ntrziate. Nu utiliza mai mult de 0.18 kg/ha de Matrix pe sezon. Ploaia sau irigaia n interval de 5 zile de la aplicare este necesar pentru a obine instalarea inhibiiei la buruienile anuale. Aplicarea postemergent a lui Matrix poate fi fcut n amestec cu anumite fungicide i cu Lexon sau Eptam. nglbenirea temporar a plantelor poate apare cnd planta este supus la condiii de mediu vitrege imediat dup aplicare. Poast inhib ierboasele anuale perene emergente i cele perene. Doza de aplicare este de 1.1-1.7 l/ha. Adaug 2.3 l/ha de concentrat de ulei nefitotoxic. Doza exact este dependent de specia de ierboas i stadiul de dezvoltare. Se mai poate adug UAN sau sulfat de amoniu pentru a crete inhibiia quackgrass i a altor buruieni. Timpul n care inhibiia se instaleaz este de 30 de zile. Distrugerea tulpinilor cartofilor nainte de recoltare Se poate aplica Diquat n doz de 1.1 l/ha la tulpinile mature. F o a doua aplicare n interval de 5 zile dac tulpinile sunt nc n vigoare. Pentru Russet Burbanks utilizeaz 2.2 l/ha n prima aplicare i 1.1 l/ha n a doua aplicare. Introdu un surfactant neionic n doz de 2.5 l/m3 de ap. Timpul n care uscarea se produce este de 7 de zile. Desicate II se folosete n doz de 3.5-4.5 l/ha n 20-80 l de ap. Utilizeaz doze mai mari pentru tulpini verzi i puternice. Efectul se manifest n 10 zile. Gramoxone Extra se aplic n doz de 0.9-1.7 l/ha n cel puin 80 l ap pentru tulpini mature. Utilizeaz 1.7 l/ha pentru o rapid distrugere. F dou aplicri la 5 zile distan pentru tulpini viguroase. Nu folosi pentru cartofii de nsilozat. Efect n 3 zile. 51

11. Anexe
Anexa 1. Diagrame de virui la plante Urmtoarele diagrame conin reprezentri pentru civa membrii ai familiilor de virui. Toate diagramele au fost reprezentate ntr-o manier similar. Sunt linii care separ taxa viruilor ce conin ir dublu (ds) i ir simplu (ss) de genomi i linia orizontal gri separ taxa viruilor avnd genom DNA de cei avnd genomi RNA. Taxele coninnd transcriere invers (RT) i genomii pozitivi (+) i negativi () ssRNA sunt de asemenea indicate. Dac nici un virus nu a fost identificat ntr-o anumit categorie, atunci boxa corespunztoare este goal.

Familii de virui care infecteaz alge, fungi, drojdii i protozoare 52

Toate diagramele au fost trasate la aproximativ aceeai scal pentru a indica mrimea relativ a viruilor. Cteva observaii sunt necesare n considerarea diagramelor: virui diferii dintr-o familie sau gen pot varia ntructva n mrime i form; n general mrimea i forma a fost luat din tipul speciei din taxon; dimensiunile ctorva virui nu au fost determinate precis; unii virui, n particular cei puternic ncolcii sunt pleomorfici.

Familii de virui ce infecteaz plante

53

Familii de virui ce infecteaz bacterii Anexa 2. Structurile i proprietile celor 58 de dipeptide luate n studiul corelaional ntre activitatea biologic inhibitoare i structura chimic Structura GA O N C C O N QG O N C C O C C C O C C O C N C GD O O O C N C N C C RA C C N C N C O N C GF O C O N C C O C RF

O N

C C

O N C C

O C C

O N C N

O C N C C

O C C

O N C N

C C N C

O C

54

GL O O O C C N C C N C C C N C

GK O O C O C C N C N C GG C C N C

O C

GS O N AA O

C C

O C O

GY O N C C O N AG O N C C O C O N C O N O N

O C C N C C O GE O C C C O O N C C GT C C N C O C O N O N C C

O N

C C

O C

O N C C C

C C

O C

C C

O C

C C

AF O C

O N C C

O N

GV C C

O C C C N C

GI O C

O N

C C

O C C

O N

C C

O C C O

GQ O O O C N C C N C C C C N GP O N O O C N C C ON C C

O C

AP O N

C C

O C N C C

O C

O N

C C

AY O C

C C GW O C

PG N N C C O C

O N C C

C C

O N

O N

C C

C C

C C IG O N C C C C C O N C C C O O O C N C C C EA O C O N C C O C N C C

C C DA O C C O N N C C C O O

55

O N C C C C C

VF O N

C C

O C N C C C

O C C

VP O N

C C

O N C C C C

O C C

O N

C C

O C

VW N

C C EG

IY O N C C C C C O N C HL O N C C O C O O C O O C

O N C IP O N C C C

O N

C C

HG O N C C N N C N C C O O

O N C C N C

C C

C C C N C C C

O C C C O N

C C

O O C N C C C C C O N C C C

IW O C N

C C

RP O O O C N C C C C N C N C N C C N C C C C N

O C N C

RW O C C C

N N C C

YA O O O C C N C C

C C N

N VY O N C IF C C C C KA O C N C C 56 O C C O N C C C C O N C C O C

O O

MG O O O C N C C C C N S C C N O C C

SG O O O C C N C

DG O N C C C C O N N C C O O N C C C O C C

O N C

C C

O C N

FG O N C C C N C C O YG O N C C O KG O O O C N C C C C N C C C N N C C C C O N C C O O N C C C O N C C O N O C

AW O N O C N C N C C WG O C C N N C C O C

LA O C

O N

C C

O C

C C

C C

FR O N O C N C C N C N

C C

TG O O O C C O N C N C C C

VG O O O C C C N C

O N C C

O N

C C

O C

GH N N N C

GR N N O O O C C C C N C C C N

GM N O N C C O N C C O C S C C C C C

LG O C C C

O N

C C

57

Proprietile Suma one-electron energy calculat pe single point semi-empirical extended-huckel i activitatea inhibitoare -logIC50 pe ACE92 pentru cele 58 dipeptide Nr Den Inh Energie Nr Den Inh Energie 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 vw iw iy aw rw vy gw vf ay ip rp af gy ap rf vp gp gf if vg ig gi gm ga yg gl ag gh gr 5.80 5.70 5.43 5.00 4.80 4.66 4.52 4.28 4.06 3.89 3.74 3.72 3.68 3.64 3.64 3.38 3.35 3.20 3.03 2.96 2.92 2.92 2.85 2.70 2.70 2.60 2.60 2.51 2.49 -50006 -52444 -49430 -45132 -59054 -46992 -42690 -44096 -42118 -39104 -46190 -39223 -39676 -31497 -53621 -36710 -29442 -36781 -46534 -30312 -32750 -32751 -32539 -25435 -39677 -32750 -25437 -35554 -39835 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 kg fg gs gv mg gk ge gt wg hg gq gg qg sg lg gd tg eg dg pg la ka ra ya aa fr hl da ea 2.49 2.43 2.42 2.34 2.32 2.27 2.27 2.24 2.23 2.20 2.15 2.14 2.13 2.07 2.06 2.04 2.00 2.00 1.85 1.77 3.51 3.42 3.34 3.34 3.21 3.04 2.49 2.42 2.00 -35370 -36780 -28336 -30311 -32540 -35368 -35330 -30778 -42691 -35548 -35062 -22925 -35332 -28338 -32752 -32590 -30776 -35332 -32593 -29485 -35192 -37810 -42276 -42117 -27878 -53620 -45310 -35033 -37772

58

Anexa 3. Dicionar de termeni tehnici englez romn Cuvintele prezentate n aceast seciune au fost folosite pentru a exprima termenii tehnici din engleza american n romn pe parcursul studiului bibliografic care a fcut obiectul prezentei lucrri. Sunt prezentai termenii cu semnificaii variate n dicionarele uzuale i a cror conotaie contextual a fcut atribuirile de fa. De asemenea, o serie de termeni nu sunt prezeni n dicionarele englez romn uzuale i a fost necesar folosirea de surse alternative, cum ar fi baza de date de sinonime a programului Microsoft Word XP (Microsoft ), dicionarul de neologisme al limbii romne i diferite alte surse de termeni tehnici. Dicionar de termeni tehnici englez (american) romn handling manipulare afide ademenitor suprateran gndac ncrctor tiere nflorire frunz mare lovirea mase plastice nglbenire transportor recolt mbtrnire umed oprirea arztor purice nghe ardere nverzire harvesting hilling injury leafhopper mist moisture reared residual rot seed seedling shout slime slug sprout vacuum vine weed recoltare movilire stricciune purici de frunze pulbere noroios crescut instalare putrezire smn puiet rsrire noroi limax vegetaie aspirator tulpin buruian

aphids bait bare beetle bin loader blight blossom broadleaf bruising burlap chlorosis conveyor crop decay dried drop flamer flea frost fumigation greening

broad-spectrum spectru larg

59

Referine

Maksym Nikonorow, Pesticidele n lumina toxicologiei mediului, Praca zbiorowa, Varovia, Robert D. Hall, Effects of Climate Change on Soils in Glacial Deposits, Wind River Basin, H. H. Cramer, Plant protection and world crop production, Pflanzenschutz-Nahr., Berlin, 1, 1, Barry L. Johnson and Christopher T. De Rosa, Public Health Implications, Environmental Z. A. Rosemond, C. T. De Rosa, W. Cibulas, and H. E. Hicks, Proceedings of the Great Lakes M. J. DeVito, L. S. Birnbaum, W. H. Farland, and T. A. Gaslewicz, Comparisons of estimated

1979.
2

Wyoming, Quaternary Research, Vol. 51, No. 3, p. 248-261, May 1999.

3

1967.
4

Research Section A, 80, S246S248, 1999.

5

Human Health Effects Research Symposium, Toxicol. Ind. Health, 12(3/4), 814-823, 1996.
6

human body burdens of dioxin-like chemicals and TCDD body burdens in experimentally exposed animals, Environ. Health Perspect, 103(9), 820831, 1995.
7

S. L. Schantz, A. M. Sweeney, J. C. Gardiner, Neuropsychological assessment of an aging T. Darvill, E. Lonky, J. Reihman, and P. Stewart, Effect of recency of maternal consumption of

population of Great Lakes fisheaters, Toxicol. Ind. Health, 12(3/4), 403417, 1996.
8

Lake Ontario sport fish on neonatal coping behavior and infant temperament, Environ. Res., 81(3), S316-326, 1999.
9

J. A. Dellinger, S. L. Gerstenberger, L. K. Hansen, and L. L. Malek, Ojibwa health study:

Assessing the health risks from consuming contaminated Great Lakes fish, Environ. Res., 83(5), S514-S520, 1999.
10

J. E. Vena, G. M. Buck, P. Kostyniak, The New York Angler Cohort Study: Exposure

characterization and reproductive and developmental health, Toxicol. Ind. Health, 12(3/4), 327334, 1996.
11 12

M. Gilbertson, Guest commentary. Great Lakes Res. Rev., 1(2), 34, 1995. M. Berry, and F. Bove, Birth weight reduction associated with residence near a hazardous L. A. Croen, G. M. Shaw, L. Sanbonmatsu, S. Selvin, P. A. Buffler, Maternal residential

waste landfill, Environ. Health Perspect., 105(8), 856861, 1997.

13

proximity to hazardous waste sites and risk for elected congenital malformations, Epidemiology, 8(4), 347354, 1997.
14

B. L. Johnson, Hazardous waste: Human health effects, J. Clean Tech. Environ. Tox. J. F. Robens, Teratologic Studies of Carbaryl, Diazinon, Norea, Disulfiram and Thiram in

Occupat. Med., 7, 351375, 1998.

15

Small Laboratory Animals, Toxicol. Appl. Pharmacol., 15, 152-156, 1970.

60

16

***, Report of the secretarys commission on pesticides and their relationship to G. T. Brooks, T. R. Roberts, Pesticide Chemistry and BioScience: The Food-Environment

environmental health, U. S. Dept. of Health Education and Welfare, 1969.

17

Challenge, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, U.K., 438 p., 1999, ISBN 0-85404709-3.
18 19

***, 1995/1996 HP Environmental Solutions Catalog. Costel Srbu, Lorentz Jntschi, Validarea i Evaluarea Statistic a Metodelor Analitice prin

Studii Comparative. I. Validarea Metodelor Analitice folosind Analiza de Regresie, Revista de Chimie, Bucureti, p. 19-24, 49(1), 1998.
20

A. Garrido Frenich, J. L. Martnez Vidal, and M. Martnez Galera, Use of the Cross-Section

Technique Linked with Multivariate Calibration Methods To Resolve Complex Pesticide Mixtures, Anal. Chem., 71, p. 4844-4850, 1999.
21

Lorentz Jntschi, Predicia proprietilor fizico-chimice i biologice cu ajutorul Claudia Cimpoiu, Lorentz Jntschi, Teodor Hodian, A New Method for Mobile Phase

descriptorilor matematici, Tez de doctorat, Univ. Babe-Bolyai Cluj-Napoca, 2000.

22

Optimization in High-Performance Thin-Layer Chromatography (HPTLC), Journal of Planar Chromatography, 11(May/June), p. 191-194, 1998.
23

Claudia Cimpoiu, Lorentz Jntschi, Teodor Hodian, A New Mathematical Model for the

Optimization of the Mobile Phase Composition in HPTLC and the Comparision with Other Models, J. Liq. Chrom. & Rel. Technol., 22(10), p. 1429-1441, 1999.
24

Lorentz Jntschi, Simona Murean, Mircea Diudea, Modeling molar refraction and

chromatographic retention by Szeged indices, Studia Universitatis Babe-Bolyai, Chemia, XLV, 1-2, 313-319, 2000.
25

Diudea Mircea, Gutman Ivan, Jntschi Lorentz, Molecular Topology, Nova Science,

Huntington, New York, 332 p., 2001, ISBN 1-56072-957-0, http://www.nexusworld.com/ nova/1271.htm.
26

Ivan Gutman, A Formula for the Wiener Number of Trees and Its Extension to Graphs Mircea Diudea, Bazil Prv, Mihai Topan, Derived Szeged and Cluj Indices, J. Serb. Chem. Diudea Mircea (Ed.), QSAR/QSPR Studies by Molecular Descriptors, Nova Science, Mircea Diudea, Lorentz Jntschi, Ovidiu Ivanciuc, L. Pejov, D. Plavic, D. Viki-Topi, M. Filizola, G. Rosell, A. Guerrero, J. J. Prez, Conformational Requirements for Inhibition

Containing Cycles, Graph Theory Notes of New York, 27, p. 9-15, 1994.
27

Soc., 62, 235-239, 1997.

28

Huntington, New York, 438 p., 2001.

29

Topological Substituent Descriptors, Croat. Chem. Acta., submitted, 2001.

30

of the Pheromone Catabolism in Spodoptera Littoralis, QSAR, 17(3), 205-210, 1998.

61

31

E. Lozoya, M. Berges, J. Rodrguez, F. Sanz, M. I. Loza, V. M. Moldes, C. F. Masauer,

Comparison of Electrostatic Similarity Approaches Applied to a Series of Kentaserin Analogues with 5-HT2A Antagonistic Activity, QSAR, 17(3), 199-204, 1998.
32

D. A. Winkler, F. R. Burden, Holographic QSAR of Benzodiazepines, QSAR, 17(3), 224-231, D. A. Wikler, F. R. Burden, A. J. R. Watkins, Atomistic Topological Indices Applied to Jackson State University, Sixth Conference on Current Trends On Computational Chemistry, J. H. Wikel, E. R. Dow, M. Heathman, Interpretative Neural Networks for QSAR, Network Valery Golender, Boris Vesterman, Erich Vorpagel; APEX-3D Expert System for Drug P. Zbinden, M. Dobler, G. Folkers, A. Vedani, PrGen: Pseudoreceptor Modeling Using

1998.
33

Benzodiazepines using Various Regression Methods, QSAR, 17(1), 14-19, 1998.

34

Vicksburg, Mississippi, Nov 7-8, 2-178, 1997.

35

Science, 1996, Jan, http://www.netsci.org/Science/Combichem/feature02.html.

36

Design, Network Science, http:\\www.netsci.org/Science/Compchem/feature09.html.

37

Receptor-mediated Ligand Alignment and Pharmacophore Equilibration, QSAR, 17(2), 122130, 1998.
38

R. D. Cramer III, D. E. Patterson, J. D. Bunce, Comparative Molecular Field Analysis

(COMFA). 1. Effect of Shape on Binding of Steroids to Carrier Proteins, J. Am. Chem. Soc., 110(18), 5959-67, 1988.
39

Simon Seamus, CoMFA: A Field of Dreams?, Nova Science, Jan, http://www.netsci.org/ ***, Unity Program for SIMCA (Soft Independent Modeling Class Analogy), Tripos Alfred Merz, Didier Rognan, Gerd Folkers, 3D QSAR Study of N2-phenylguanines as

Science/Compchem/feature11.html, 1996.
40

Associates, St. Louis, MO.

41

Inhibitors of Herpes Simplex Virus Thymide Kinase, Antiviral and Antitumor Research, http:\\www.pharma.ethz.ch /text/research/tk/qsar.html.
42

P. E. Gurba, M. E. Parham, J. R. Voltano, Comparison of QSAR Models Developed for Acute

Oral Toxicity (LD50) by Regression and Neural Network Techniques, Conference on Computational Methods in Toxicology April, 1998, Holiday Inn/I-675, Dayton, Ohio, USA, abstract available at http://www.ccl.net /ccl/toxicology/abstracts/abs9.html.
43 44 45

***, HyperChem, Molecular Modelling System, Hypercube Inc. ***, Molconn-Z, http://www.eslc.vabiotech.com/molconn. C. L. Waller, S. D. Wyrick, H. M. Park, W. E. Kemp, F. T. Smith, Conformational Analysis,

Molecular Modeling, and Quantitative Structure-Activity Relationship Studies of Agents for the Inhibition of Astrocytic Chloride Transport, Pharm. Res., 11(1), 47-53, 1994.
46

J. P. Horwitz, I. Massova, T. Wiese, J. Wozniak, T. H. Corbett, J. S. Sebolt-Leopold, D. B.

Capps, W. R. Leopold, Comparative Molecular Field Analysis of in Vitro Growth Inhibition of L1210 and HCT-8 Cells by Some Pyrazoloacridines, J. Med. Chem., 36(23), 3511-3516, 1993.

62

47

G. B. McGaughey, R. E. MewShaw, Molecular Modeling and the Design of Dopamine D2

Partial Agonists, (presented at the Charleston Conference; march; 1998), sumitted may 1998, Network Science, http://www.netsci.org/Science/Compchem/feature20.html.
48

H. Chuman, M. Karasawa, T. Fujita, A Novel Three-Dimensional QSAR Procedure: Voronoi C. L. Walter, G. E. Kellogg, Adding Chemical Information of CoMFA Models with

Field Analysis, QSAR, 17(4), 313-326, 1998.

49

Alternative 3D QSAR Fields, Network Science, http://www.netsci.org/Science/Compchem/ feature10.htm, Jan, 1996.

50

A. Merz, D. Rognan, G. Folkers, 3D QSAR Study of N2-phenylguanines as Inhibitors of Simplex Virus Thymide Kinase, Antiviral and Antitumoral Research,

Herpes
51

http://www.pharma.ethz.ch /text/research/tk/qsar.html. G. E. Kellogg, S. F. Semus, D. J. Abraham, HINT: a new method of empirical hydrophobic A. M. Myers, P. S. Charifson, C. E. Owens, N. S. Kula, A. T. McPhail, R. J. Baldessarini, R. field calculation for CoMFA, J. Comput.-Aided Mol. Des., 5(6), 545-552, 1991.
52

G. Booth, S. D. Wyrick, Conformational Analysis, Pharmacophore Identification, and Comparative Molecular Field Analysis of Ligands for the Neuromodulatory .sigma.3 Receptor, J. Med. Chem., 37(24), 4109-4117, 1994.
53

K. H. Kim, Use of the hydrogen-bond potential function in comparative molecular field G. L. Durst, Comparative Molecular Field Analysis (CoMFA) of Herbicidal

analysis (CoMFA): An extension of CoMFA, Quant. Struct. Act. Relat., 12, 232-238, 1993.
54

Protoporphyrinogen Oxidase Inhibitors using Standard Steric and Electrostatic Fields and an Alternative LUMO Field, Quant. Struct. Act. Relat., 17, 419-426, 1998.
55

C.L. Waller, G. R. Marshall, Three-Dimensional Quantitative Structure-Activity Relationship

of Angiotensin-Converting Enzyme and Thermolysin Inhibitors. II. A Comparision of CoMFA Models Incorporating Molecular Orbital Fields and Desolvation Free Energy Based on ActiveAnalog and Complementary-Receptor-Field Alignment Rules, J. Med. Chem., 36, 2390-2403, 1993.
56

M. Wiese, I. L. Pajeva, A Comparative Molecular Field Analysis of Propafenone-type G. Klebe; U. Abraham, On the Prediction of Binding Properties of Drug Molecules by K.-H. A. Czaplinski, G. L. Grunewald, A Comparative Molecular Field Analysis Derived

Modulators of Cancer Multidrug Resistance, Quant. Struct.-Act. Relat., 17(4), 301-312, 1998.
57

Comparative Molecular Field Analysis, J. Med. Chem., 36(1), 70-80, 1993.

58

Model of Binding of Taxol Analogs to Microtubes, Bioorg. Med. Chem. Lett., 4(18), 2211-2216, 1994.
59

T. Akagi, Exhaustive Conformational Searches for Superimposition and Three-Dimensional

Drug Design of Pyrethroids, QSAR, 17(6), 565-570, 1998.

63

60

C. L. Waller, T. I. Oprea, A. Giolitti, G. R. Marshall; Three-Dimensional QSAR of Human

Immunodeficiency Virus. (I) Protease Inhibitors. 1. A determined Alignment Rules, J. Med. Chem., 36(26), 4152-4160, 1993.
61

E. Thompson, The Use of Substructure Search and Relational Databases for Examining the

Carcinogenic Potential of Chemicals, Conference on Computational Methods in Toxicology April, 1998, Holiday Inn/I-675, Dayton, Ohio, USA, abstract available at http://www.ccl.net /ccl/toxicology/abstracts/tabs6.html.
62

R. Todeschini, M. Lasagni, E. Marengo, New Molecular Descriptors for 2D and 3D R. Todeschini, P. Gramatica, R. Provenzani, E. Marengo, Weighted Holistic Invariant

Structures. Theory, J. Chemometrics, 8, 263-272, 1994.

63

Molecular (WHIM) descriptors. Part2. There Development and Application on Modeling Physico-chemical Properties of Polyaromatic Hydrocarbons; Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems, 27, 221-229, 1995.
64

R. Todeschini, M. Vighi, R. Provenzani, A. Finizio, P. Gramatica, Modeling and Prediction

by Using WHIM Descriptors in QSAR Studies: Toxicity of Heterogeneous Chemicals on Daphnia Magna, Chemosphere, 8; 1527-1533, 1996.
65

A. Zaliani, E. Gancia, MS-WHIM Scores for Amino Acids: A New 3D-Description for Peptide G. Bravi, E. Gancia, P. Mascagni, M. Pegna, R. Todeschini, A. Zaliani, MS-WHIM. New 3D

QSAR and QSPR Studies, J. Chem. Inf. Comput. Sci., 39(3), 525-533, 1999.
66

Theoretical Descriptors Derived from Molecular Surface Properties: A Comparative 3D QSAR Study in a Series of Steroids, J. Comput.-Aided Mol. Des., 11, 79-92, 1997.
67

Sonia Nikoli, M. Medi-Sari, J. Matijevi-Sosa, A QSAR Study of 3-(Phtalimidoalkyl)L. L. Thurstone, Multiple Factor Analysis, Psychological Review, 38, 406-427, 1931. L. L. Thurstone, Multiple Factor Analysis, University Chicago Press, Chicago, 1947. Milan Randi, Search for Optimal Molecular Descriptors, Croat. Chem. Acta, 64, 43-54, Milan Randi, Resolution of Ambiguities in Structure Property Studies by Use of Orthogonal Lorentz Jntschi, Romeo Chira, Chimia i Biochimia Poluanilor. Lucrri practice, U. T. Dorina Opris, Mircea Diudea, Peptide Property Modeling by Cluj Indices, SAR/QSAR Lorentz Jntschi, Gabriel Katona, Diudea Mircea, Modeling Molecular Properties by Cluj

pyrazolyn-5-ones, Croat. Chem. Acta, 66, 151-160, 1993.

68 69 70

1991.
71

Descriptors, J. Chem. Inf. Comput. Sci., 31, 311-320, 1991.

72

Pres, 2000, ISBN 973-9471-46-3.

73

Environ. Res., 12, 159-179, 2001.

74

Indices, Comun. Math. Comp. Chem., 41, 151-188, 2000, ISSN 0340-6253, Bayreuth, Germany.

64

75

P.I. Nagy, J. Tokarski, A. J. Hopfinger, Molecular shape and QSAR analysis of a family of

substituted dichlorodiphenyl aromatase inhibitors, J. Chem. Inf. Comput. Chem., 1994, 34, 1190-1197.
76 77

***, Date obinute prin amabilitatea Ministerului Agriculturii din Canada, PDF, http source. A. Pucau, M. Baltac, Al. Al. Alexandri, T. Baicu, I. Miric, M. Costache, Compatibilitatea Bernadette McMahon, Ann Marie Poulsen, John J. Jennings, Jr., Carolyn Makov, Glosary of

Pesticidelor, Ministerul Agriculturii, Bucureti, 1987.

78

Pesticide Chemicals, FDA Division of Pesticides and Industrial Chemicals, HFS-337, 200 C Street SW, Washington, U.S.A., PDF http source, Creator: Adobe for Macintosh, Version: October 2001.
79 80 81 82

H. G. Khorana, Total synthesis of a gene, Science, Washington, 203, 4381, 614-625, 1979. R. Toule, Les gnes artificiels, La recherch, Paris, 13, 131, 340-347, 1982. J. Abelson, E. Butz, Recombinant DNA, Science, Washington, 209, 4463, 1317-1438, 1980. A. Sasson, Biotehnologiile: sfidare i promisiuni, Ed. Tehnic, Bucureti, 1988, dup Les

biotechnologies: Dfis et promosses, Presses Universitaires de France, Vendme, UNESCO, 1983.

83 84

T. Crciun, Geniul Genetic i Ameliorarea Plantelor, Ed. Ceres, Craiova, 1987. T. Crciun, M. Ptracu, Perspective de utilizare a culturilor de celule i a protoplatilor, V. Diaconu, Plante transgenice, Raport al Comisiei Naionale Pentru Securitate Biologic, H. G. Baker, The evolution of weeds, Ann. Rev. of Ecol. and System, 5, 1-24, 1974. J. L. Dunwell, Transgenic crops: the next generation, or an example of 2020 vision, Ann. of J. L. Tynan, M. K. Williams, A. J. Conner, Low frequency of pollen dispersal from a field of P. J. Dale, The release of transgenic plants into agriculture, J. of Agric. Sci., 120, 1-5, 1993. ***, Ohio Vegetable Production Guide, Bulletin 672-01, Bulletin Extension, Ohio State Mircea Bejan, n lumea unitilor de msur, Ed. Agir, Bucureti, 2000, ISBN 973-8130-01M. Cocchi, E. Johansson, Amino Acids Characterization by Grid and Multivariate Data

Lucrile celui de-al doilea Simpozion de Genetic, Piatra Neam, 1979.

85

Bucureti, 2000.
86 87

Bot., 84, 269-277, 1999.

88

transgenic potatoes, J. of Genet. and Breed., 44, 303-306, 1990.

89 90

University, 2001.
91

8.
92

Analysis, Quant. Struct. Act. Relat., 12, 1-8, 1993.

65