PvnIII PvntcIn HuLtcvI PcndctnLsIIILusI

MctIImcvLuvI McnggunuLun
IcLtvnInvcsIs GcI NutIvc
HcInmpnL : 9
1. HumuIIyuL (1o9975oB1)
2. SctyunI T. (117795497)
3. SLIntunI MuyusuvI (1o7795o1B)
8CC8AM ASCASA8!AnA
8CC8AM S1uul LnululkAn SAlnS
1APun 2011
1. 1. Tt1tAN Tt1tAN
1) Untuk mengetahui profil protein spesifik yang diduga
mempunyai aktivitas dalam mendetoksifikasi
metilmerkuri
2) Untuk menentukan kondisi pemisahan protein
menggunakan elektroforesis Gel Native.
2. 2. ALAT AN HAHAN ALAT AN HAHAN
1. Strain SDM 41,(7evundimonas dimunata),
2. Strain SDM 78 (acillus ce7eus),
3. Strain SDM 81 (Empedobacte7 b7evis),
4. Strain SDPM 8a (Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae)
5. Strain SDPM 8b (Pseudomonas ae7ogenosa) dan
6. Strain SDPM 24 (Spingomonas aucimobilis) serta
7. bakteri kontrol positif (Pseudomonas putida IFO 14796).
2. 2. ALAT AN HAHAN ( ALAT AN HAHAN (Iun]utun Iun]utun..) ..)
ahan Untuk analisis metilmerkuri dengan GLC :
tolune, aceton, isopropanol, Na2SO4., HCl, gas Argon.
ahan kimia untuk deteksi protein dengan elektroforsesi :
c7lamide, bisac7lamide (N,N-methlenebisac7lamide),
T7is (2-hd7oximethl-2-methl-1,3-p7opanediol), SDS
(sodium dodecl sulfate atau sodium lau7l sulfate),
TEMED (N,N,N,N-Tet7amethleneethlenediamine),
amonium persulfat , 2-me7captoethanol, glycerol,
b7omophenol blue, glcine, asam klorida, dithioth7eitol.
Marker protein :
phospo7lase (97.400 Da), ovine serum albumin
(66.000 Da), Lglutamic dehd7ogenase (55.000 Da),
ovalbumin (42.700 Da), ldolase (40.000 Da), Ca7bonic
anhd7ase (31.000 Da) dan Sobean t7psin inhibito7
(21.500 Da).
2. 2. ALAT AN HAHAN ( ALAT AN HAHAN (Iun]utun Iun]utun..) ..)
Peralatan utama :
GLC merk Shimadzu model 14, Elektorforesis Kit,
Sentrifus, Shake7 Incubato7, Ultrasonikator dan
sperangkat alat gelas.
3. MTO 3. MTO
Elekt7ofo7esis Gel NTIVE
4. CAHA HH1A 4. CAHA HH1A
1 1 Pembuatan inokulum
2. nokulasi kultur ke dalam medium pertumbuhan
3. Elektroforesis Gel NATVE.
5. HAStL
4. HAStL 4. HAStL (Lun]utun) (Lun]utun)
4. 4. HAStL HAStL (Lun]utun) (Lun]utun)
No 8tra|n erat Ho|eku|
1 A (|orlro)
2 8 (lso|al 30V 11)
3 C (30V Z8) 59,22 dar 21,59 |0a
1 0 (30V 81) 55,9Z dar 22,2 |0a
5 E (30PV 8a) 59,22 dar 18, 15 |0a
F (30PV 8o) 3, 13 dar 19,Z |0a
Z 0 (30PV 21) 55,9Z dar 21, 2Z |0a
Enzim merkurireduktase (EC 1.16.1.1) yaitu 56 65 kDa dan
Enzim organomerkuriliase (EC 4.99.1.2) yaitu 19 27 kDa.
4. 4. HAStL HAStL (Lun]utun) (Lun]utun)
55. . HStMPtLAN HStMPtLAN
Protein-protein isolat bakteri pendetoksifikasi metilmerkuri
dapat terpisah dengan baik dengan Elektroforesis 10% Gel
Native. Protein spesifik yang divisualisasikan melalui
Elektroforesis Gel Native diduga merupakan protein enzim
yang berperan dalam detoksifikasi metilmerkuri.