MTODOS BIOFSICOS DE ESTUDO

So mtodos utilizados com base no conhecimento fsico que se aplica na biologia, com o objetivo de obter mtodos diagnsticos e de tratamento para o auxlio da Medicina e outras reas de Sade. Existem trs tipos de mtodo de estudo para diagnstico: Mtodos in vivo: usam o prprio paciente. Exemplos: fotografia, endoscopia (usa-se um endoscpio, que atua como uma fonte de luz para observar partes internas atravs de uma micro-cmera), densitometria ssea (analisa a densidade mineral ssea e pode usar tanto raios-X quanto raios e ultra-som no d informaes sobre a forma, e sim sobre o funcionamento), radiografia, tomografia computadorizada (TC), ultrassonografia, cintilografia e RMN (ressonncia magntica nuclear). Numa radiografia, a imagem est em tamanho real, e na ultrassonografia a imagem menor e em forma de leque. A ultrassonografia analisa regies no protegidas por osso (como o crebro) e cheias de ar (como o estmago). A radiografia pode analisar qualquer estrutura do corpo, densa ou no. Caso no se defina a imagem, pode-se usar contraste. As substncias de contraste, tanto na radiografia quanto na TC e na cintilografia, so: os radio-opacos (sais de brio), que deixam a imagem cinzaescura, e os radio-transpararentes (compostos de iodo), que deixam a imagem cinza-clara. Na RMN, a substncia de contraste tem como funo facilitar a propagao de ondas magnticas aplicadas, visando aumentar o campo magntico da estrutura. A ecografia utiliza o ultra-som para analisar a imagem. Mtodos in vitro: usam uma mostra do paciente (sangue, fezes, urina, bipsia...). Exemplos: espectofotometria, centrifugao (separa molculas com base na densidade necessrio criar um campo gravitacional), eletroforese (separa molculas com base na diferena de potencial eltrico necessria a presena de carga eltrica resultante), microscopia (anlise com o uso de microscpios para produzir laudos), imunofluorescncia (microscpios de fluorescncia ou espectofotmetros detectam a presena de substncias fluorescentes), radioimunoensaio (reao antgeno-anticorpo para dosagem, junto com um antgeno radioativo em um tubo de ensaio quanto maior a fluorescncia, menos antgeno haver no paciente), dilise (purificao para o tratamento com membrana semipermevel para passagem de protenas de acordo com o tamanho a hemodilise um mtodo in vivo!), pHmetria e cromatografia (separao, identificao e quantificao). Mtodos de eletrodiagnstico: usam-se os sinais eltricos vindos de algum local do paciente para fazer um grfico. Exemplos: ECG, EEG, Holter, teste ergomtrico, mapeamento cerebral e eletroneuromiografia.

TOMOGRAFIA COMPUTADORIZADA (TC)

Produz imagens radiogrficas do corpo que se assemelham a cortes anatmicos transversais. Nessa tcnica, um feixe de raios-X atravessa o corpo enquanto o tubo de raios-X e o detector giram em torno do eixo. Assim, executa-se uma varredura linear durante a qual se fazem medidas de radiao transmitida atravs do corpo do paciente. Os dados coletados so armazenados num computador que efetua a anlise para reconstituir uma imagem das estruturas anatmicas de uma seco transversal de uma das partes do corpo. A imagem que reflete as propriedades de absoro , ento, apresentada num anteparo de um tubo de raios catdicos. As imagens de TC so sempre exibidas como se o observador estivesse aos ps do paciente em decbito dorsal, isto , uma visa inferior.

ULTRASSONOGRAFIA
Tcnica que permite ver estruturas superficiais ou profundas do corpo mediante registro de pulso de ondas ultrassnicas refletidas pelos tecidos. Um transdutor entra em contato com a pele e gera ondas sonoras de alta frequncia que atravessam o corpo e so refletidas pelas interfaces de tecidos de diferentes caractersticas, como os tecidos moles e o osso. Os ecos so refletidos pelo corpo chegam ao transdutor e so convertidos em energia eltrica. Os sinais eltricos so registrados e exibidos em monitor como uma imagem seccional, que pode ser vista em tempo real e registrada como uma nica imagem, ou em fita de vdeo. Vantagens: mais barata que a TC e a RMN; porttil, podendo ser feita at beira no leito ou na mesa de cirurgia; produo de imagens em tempo real; no usa radiao; no invasiva e mostra o movimento de estruturas e o fluxo nos vasos sanguneos.

RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR (RMN)

O organismo deve ser posto em um campo magntico esttico. Isso vai induzir um direcionamento de prtons que esto presentes no hidrognio em molculas de gua. Aqueles prtons que possuem baixo nvel de energia ficam paralelos ao campo e os que tm alto nvel de energia ficam antiparalelos ao campo. Ento, aplicado um pulso de radiofreqncia. As imagens permitem melhor diferenciao tecidual, sendo muito semelhantes a cortes anatmicos, sobretudo no encfalo.

CINTILOGRAFIA OU CINTIGRAFIA
Usa-se no paciente uma substncia chamada traador, que possui afinidade com o rgo de interesse. Essa substncia constituda por materiais radioativos, que vo ficar na superfcie da clula ou em estruturas no interior delas. Iro emitir radiao para o estudo das partes desejadas. A cintilografia usada na Medicina Nuclear. Aplicaes: a) Mapeamento da tireoide, atravs da captao de iodo. b) Funo pulmonar, atravs gases inspirados (como istopos de carbono, nitrognio, oxignio e xennio) ou injetados intravenosamente (xennio e nitrognio). c) Fisiologia cardaca, atravs da injeo intravenosa de albumina ou hemcias marcadas com um istopo do tecncio ou o partectenato de sdio radioativo. d) Doenas metablicas, com o uso de radioistopos de carbono, hidrognio, oxignio, fsforo, ferro, enxofre etc.

RAIOS-X
Descoberta: Rtgen recobriu a ampola de Crooks com papel preto. Com o uso do PtBa(CN)4 como sensor de radiaes ionizantes e aplicando uma alta diferena de potencial, viu que o papel ficou transparente. Rtgen aprimorou a ampola, usando a platina no lugar do alumnio e, posteriormente o tungstnio (que possui maior PE) Efeito termoinico: o aquecimento de um gs faz com que este se ionize, liberando eltrons e formando uma nuvem negativa. Quando aplica-se uma diferena de potencial, os eltrons se deslocam at o nodo positivo e interagem com os tomos do metal e deslocam os eltrons orbitais, fazendo estes passarem para um meio externo (ao ganhar energia) e outros retornarem para orbitais internos (com perda de energia). A isso, denomina-se conveco eletrnica. Bremsstrahlung: pequeno desvio que os eltrons com muita energia cintica sofrem ao se aproximarem do ncleo. Eles perdem sua energia e liberam-na na forma de ftons de raios-X. 99% da energia cintica dos eltrons convertida em calor e apenas 1% vira raios-X. O Bremsstrahlung depende da distncia do eltron ao ncleo, da energia cintica do eltron e da carga do ncleo. Os raios-X produzidos por Bremsstrahlung constituem um espectro contnuo com comprimento de onda entre 0,1 e 0,5 Angstroms. A quantidade de raios-X gerada depende do fluxo de eltrons que colide com o nodo. Mesmo o tungstnio sendo o mais resistente ao calor, ele no bom fornecedor de raios catdicos.

nodos giratrios: extensa superfcie de cobre para o bombardeamento de eltrons Os raios-X podem ser duros (baixa energia e alto comprimento de onda) ou moles (alta energia e baixo comprimento de onda). Assim, preciso e uso de filtros para reter as radiaes fracas e deixar passar apenas as de alto poder de penetrao. Fatores que controlam a intensidade e a qualidade dos raios-X: diferena de potencial aplicada, aquecimento do filamento, material que constitui o nodo (quanto maior o nmero atmico, melhor ser) e filtros acoplados. Componentes do gerador de raios-X: transformador (armadura aterrada para prevenir choques eltricos), painel de comando, ampola e mesa para o paciente. At alcanar a pelcula radiogrfica, os raios-X passam por: filtrao na parede da ampola de raios-X, filtros metlicos colocados nos trajetos dos raios, as estruturas biolgicas do paciente e as crans reforadoras (evitam grandes exposies dos pacientes, e converte os ftons visveis para impressionar a pelcula, j que sua sensibilidade ao direta baixa) Diafragmas (chumbo, barato, muita penumbra), filtros e colimadores (chumbo, pouca penumbra): evitam grandes disperses dos feixes de raios-X. A decodificao da imagem feia pela mudana do comprimento de onda dos ftons que emergem do paciente examinado. A qualidade da imagem depende especialmente da espessura, do tamanho e da densidade dos gros fotossensveis. Quanto menores forem, maior ser a resoluo (poder de distinguir dois pontos prximos) apresentada pela imagem. Camada fotossensvel: emulso AgBr (90 a 99%) e AgI (1 a 10%) Gelatina: cobre a camada fotossensvel cristais de haleto de prata A revelao das imagens feita com substncias redutoras, como a hidroquinona. Quando esta interage com os ons de prata, ela os neutraliza e produz Ago em meio alcalino pH alcalino. A prata no reduzida pelo revelador removida pelo fixador: AgBr + Na2SO4 complexo tio-sulfato-prata + NaBr

A IMAGEM RADIOGRFICA
Contraste (C): C = Io/Is, onde Io a a intensidade de radiao que atravessa reas vizinhas e Is a intensidade de radiao que atravessa o objeto. A qualidade da radiografia depende da corrente aplicada para o aquecimento, da tenso, do tempo de exposio e da distncia entre a ampola e o objeto examinado. Os raios-X com alta frequncia (raios duros) tm grande poder de

penetrao e no servem para rgos como msculos e o tecido mamrio, mas j em rgos intra-abdominais, eles so necessrios. Efeitos a curto prazo da radiao: altas doses de radiao (acima de um Sv) recebidas por uma grande rea do corpo por muito tempo. Seus efeitos so: nusea, vmitos, prostrao, perda de apetite e peso, febre, hemorragias dispersas, queda de cabelo e forte diarreia (sndrome aguda da radiao). Afeta os sistemas hematopoitico (abaixo de 5 Sv), gastrointestinal (entre 5 e 20 Sv) e nervoso (acima de 20 Sv). Efeitos a longo prazo da radiao: altas doses num curto intervalo de tempo ou pequenas doses por um longo intervalo de tempo. Seus efeitos so genticos (afetam as clulas reprodutoras, acometendo as geraes futuras) e somticos (aumentando a incidncia de cncer, anormalidade no desenvolvimento do embrio, induo de catarata e reduo na vida mdia). Umbra: regio em que no h iluminao Penumbra: regio que pouco iluminada

ESPECTROFOTOMETRIA
Consiste em usar o espectro radiante para inspecionar sistemas biolgicos, especialmente solues. Um feixe de energia atravessa a soluo, e sua absoro oferece informaes sobre a qualidade e quantidade dos compostos do sistema. Espectrofotometria de absoro: um espectrofotmetro produz luz monocromtica e mede a luz absorvida pelas solues. A fonte de luz tem seu feixe focalizado pelo colimador sobre um prisma de quartzo. A luz decomposta em ultravioleta, violeta, azul, verde, amarelo, laranja, vermelho e infravermelho. Uma fenda seletora escolhe uma fina poro desse espectro como luz monocromtica. Essa luz passa atravs da cubeta que contem a soluo, e parte absorvida, parte transmitida. Uma fotoclula acoplada a um galvanmetro mede a luz transmitida. O galvanmetro tem uma escala especial de 0 a 2. Que indica leituras lineares, aritmeticamente proporcionais absoro da luz. As fontes de luz ultravioleta so geralmente lmpadas de hidrognio, ou de deutrio. Para o visvel e o infravermelho, as lmpadas de tungstnio e irradiadores de cermica so usados. A decomposio da luz feita, alm de prismas, por grades de difrao. Um mtodo simples de obter luz monocromtica usar filtros, que so pedaos de vidro colorido especiais, que deixam passar luz da sua cor. A luz monocromtica dos filtros de qualidade inferior dos primas e grades. Esses filtros de absoro podem ser combinados a camadas de interferncia, que melhoras. sua seletividade. Para o infravermelho longo, usam-se cristais de NaCl como monocromadores. As

cubetas so de vrios formatos, mas a cubeta padro tem trajeto ptico de 1cm. usada para determinar quais os comprimentos onda absorvidos pelas substncias (obtm-se a Curva de Absoro Espectral) e a concentrao das substncias (obtm-se uma relao entre a concentrao e a absoro luminosa). A Curva de Absoro Espectral permite identificar substncias (funcionando como uma espcie de impresso digital das substncias e caracterizando a presena desses compostos), identificar grupamentos qumicos (como carboxila e amina, que apresentam curvas espectrais caractersticas, principalmente na faixa do infravermelho), indicar a pureza das substncias (quando a curva se afasta do esperado, impurezas podem ser suspeitas na soluo) e indicar os comprimentos de onda para dosagem de substncia (para isso, tem-se que escolher um comprimento de onda que seja absorvido especificamente). As substncias possuem cores diferentes daquelas que absorvem. Costuma-se chamar de par complementar essas coisas absorvidas x exibidas. Por exemplo, verde-vermelho, azul-amarelo. Espectrofotometria de chama: o sistema biolgico excitado emite luz, que a caracterstica da substncia emissora. Usada exclusivamente para ctions que quando so aquecidos emitem luz caracterstica. A soluo a ser analisada gotejada ou vaporizada no queimador, em alta temperatura. O s ctions emitem luz: amarela (Na+), vermelha (K+), avermelhada (Ca2+). Um filtro seleciona o comprimento de onda (cor) do metal que se quer dosar. A luz especfica, que proporcional concentrao do emissor, estimula a fotoclula, que aciona o galvanmetro.