ORIENTAES RELATIVAS ENSAIOS ECOTOXICOLGICOS COM EFLUENTES INDUSTRIAIS EM ATENDIMENTO A LEGISLAO.

1 INTRODUO Ensaios ecotoxicolgicos com organismos aquticos fazem parte das exigncias da legislao federal e estadual na avaliao da qualidade ambiental visando a preservao da vida aqutica. Estes ensaios tambm so utilizados no controle do lanamento de efluentes industriais e de materiais dragados, tanto em ambientes marinho, estuarino ou de gua doce, para assegurar a manuteno das condies e padres de qualidade previamente estabelecidos para um determinado corpo d'gua Este documento visa esclarecer algumas exigncias referentes aos ensaios ecotoxicolgicos e a apresentao da documentao para atendimento da Resoluo SMA 03/2000 (SO PAULO, 2000) que implementa o controle ecotoxicolgico de efluentes lquidos no Estado de So Paulo.

2 LEGISLAO 2.1 Legislao Federal - Resoluo CONAMA 357/2005 (BRASIL, 2005) Esta Resoluo dispe sobre a classificao dos corpos de gua e diretrizes ambientais para o seu enquadramento, bem como estabelece as condies e padres de lanamento de efluentes. A segunda estabelece as diretrizes gerais e os procedimentos mnimos para a avaliao do material a ser dragado em guas jurisdicionais brasileiras. 2.2 Legislao Estadual - Resoluo SMA 03/2000 - Padres de lanamento de Efluentes A Resoluo CONAMA 357/2005 (BRASIL, 2005), estabelece no pargrafo 1 do artigo 34 que efluentes lquidos no devem causar ou possuir potencial para causar efeitos txicos para organismos aquticos no corpo receptor, de acordo com os critrios estabelecidos pelo rgo ambiental. Para atender a este quesito da legislao federal a CETESB utiliza a Resoluo da SMA 03/2000, que estabelece os critrios para a realizao do controle ecotoxicolgico de efluentes lquidos no Estado de So Paulo. Orientaes mais detalhadas sobre a aplicao dessa resoluo esto em Manual da CETESB (Bertoletti, 2009). Para corpos de gua doce, a CETESB recomenda a realizao simultnea dos ensaios de toxicidade aguda com Daphnia similis e de toxicidade crnica com Ceriodaphnia dubia e no caso de reavaliao do limite de toxicidade, alm dos dois ensaios j citados, o ensaio crnico com uma espcie de peixe. Para efluentes lanados em ambientes marinhos ou estuarinos, a CETESB recomenda a execuo simultnea dos ensaios de ecotoxicidade aguda com misidceos ou Vibrio fisheri e do ensaio de ecotoxicidade crnica com ourio-do-mar. Na reavaliao do limite de toxicidade devem ser apresentados os resultados dos trs ensaios anteriormente citados . 3 QUALIDADE LABORATORIAL (RESOLUO SMA 37/2006) A Resoluo SMA 37/2006 estabelece que os resultados dos ensaios laboratoriais somente sero aceitos quando realizados por laboratrios acreditados, nos parmetros de interesse, segundo a norma ABNT NBR ISO/IEC 17025. Assim, os relatrios de ensaios anexados aos processos entregues a CETESB devem ser originais e possuir o selo do INMETRO (logomarca), atestando a acreditao. Quando no houver laboratrios nestas condies no Brasil, de acordo com o estabelecido na Deciso de Diretoria 211/2009 de 27 de agosto de 2009, sero aceitos resultados analticos desde que o laboratrio apresente Declarao de Responsabilidade especificando que as exigncias estabelecidas esto sendo

atendidas e so verdadeiras. Para verificar se o laboratrio contratado possui acreditao deve-se consultar o site do INMETRO para ensaios ecotoxicolgicos com organismos marinhos e de gua doce (http://www.inmetro.gov.br/laboratorios/rble/). 4 ORIENTAES ADICIONAIS Nos itens a seguir so apresentadas algumas orientaes bsicas a serem seguidas pelos laboratrios:

A CETESB no recomenda o congelamento das amostras.

Embora exista a indicao de congelamento na norma ABNT, 2007 para amostras que no podem ser processadas em at 48h aps a coleta, os manuais USEPA (2002 a,b), no item especifico referente a preservao de amostras de efluente, orientam a realizao do ensaio com amostra fresca em at 36h aps a coleta e que, em nenhum caso, o intervalo entre a coleta e a primeira utilizao da amostra deve ultrapassar 72 horas. Alm disso, dados de literatura mostram que os componentes de resduos slidos (filtrveis e no filtrveis) da amostra se alteram com o congelamento e descongelamento (USEPA, 1982). Desta forma, quando no se conhece a interferncia do congelamento na amostra (efluente ou gua superficial) recomenda-se que seja adotado a refrigerao, considerado o melhor procedimento de preservao, pois pouco altera as caractersticas da amostra.

Orientao para Anlise dos Resultados

Na anlise dos dados, conforme estabelecido pela ABNT, a CETESB recomenda que seja adotado o teste t por bioquivalncia no clculo estatstico, conforme Bertoletti et al (2007) (Tabela 1).
Tabela 1 - Constante de bioequivalncia para ensaios ecotoxicolgicos com espcies de gua doce e marinha.

Tipo de amostra gua efluente gua efluente gua ou sedimento efluente

Espcie Daphnia similis Daphnia similis Ceriodaphnia dubia Ceriodaphnia dubia Lytechinus variegatus Lytechinus variegatus

Tipo de ensaio Agudo Agudo Crnico Crnico Crnico Crnico

Efeito observado Imobilidade Imobilidade Reproduo Reproduo Desenvolvimento embriolarval Desenvolvimento embriolarval

Constante de bioequivalncia 0,86 0,73 0,79 0,72 0,91 0,86

Orientao para apresentao dos Relatrios de Ensaio

Alm de relatrios de ensaios com selo do INMETRO (ou Declarao de Responsabilidade) deve ser anexada a carta controle atualizada da sensibilidade dos organismos-teste, bem como o resultado do teste com substncia de referncia, realizado na poca dos ensaios das respectivas amostras. Devem ainda serem apresentados os dados brutos referentes a cada ensaio, alm dos respectivos dados, iniciais e finais, de pH e oxignio dissolvido.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ABNT. NBR 15469: Ecotoxicologia aqutica - Preservao e preparo de amostras. Rio de Janeiro, 2007.

7 p. BRASIL. CONAMA. Resoluo 357, de 17 de maro de 2005. Dispe sobre a classificao dos corpos de gua e diretrizes ambientais para o seu enquadramento, bem como estabelece as condies e padres de lanamento de efluentes, e d outras providncias. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Ministrio do Meio Ambiente, Brasilia, DF, 17 de maro de 2005, edio n.53, seo 1, p.58-63. BERTOLETTI, E. Controle ecotoxicolgico de efluentes lquidos no Estado de So Paulo. Srie Manuais. So Paulo: CETESB, 2009. 36p. BERTOLETTI, E. ; BURATINI, S.A.; PRSPERI, V.A.; ARJO, R.P.A.; WERNER, L.I. Selection of relevant effects levels for using bioequivalence hypothesis testing. J.Braz. Soc. Ecotoxicolol., v.2, n.2, p.139-145, 2007. CETESB (So Paulo). Deciso de diretoria T/L n.211, de 27 de agosto de 2009. Dispe sobre o estabelecimento de critrios referentes ao Artigo 2, alinea b da resoluo SMA 37 de 30 de agosto de 2006. So Paulo: CETESB, 2009. SO PAUL0 (Estado). Secretaria do Meio Ambiente. Resoluo SMA n.3, de 22 de fevereiro de 2000. Dispes sobre as relaes que fixam a toxicidade permissvel no controle ecotoxicologico de efluentes lquidos no Estado de So Paulo. Dirio Oficial [do] Estado de So Paulo, Poder Executivo, So Paulo, v.110, n.39, 25 de fevereiro de 2000. Seo 1, p.24. U.S.EPA. Handbook for sampling and sample preservation of water and wastewater. Cincinnati, Ohio: U.S.EPA, 402p. (EPA-600/4-82-029). U.S.EPA. Methods for measuring the acute toxicity of effluents and receiving waters to freshwater and marine organisms. 5 ed. Washington, D.C.: U.S.EPA, 2002a.266p. (EPA-821-R-02-012). U.S.EPA. Short-term methods for estimating the chronic toxicity of effluents and receiving waters to freshwater and marine organisms. 4 ed. Washington, D.C.: U.S.EPA, 2002b.335p. (EPA-821R-02-013).