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Contrle de qualit et sources d'erreurs en antibiogramme par diffusion _______________________

H Faye-Kett Professeur de Microbiologie, PHD Responsable du Dpartement Suivi Evaluation

Contrle de qualit interne Phase pr analytique

Evaluer les lots de milieux prpars

______________________ Contrle de qualit : Phase pr analytique

A chaque nouveau lot pH : Doit tre de 7,2 7,4. pH- mtre pH : affecte lactivit des aminosides, des macrolides et des phnicols NB : Attention llectrode Concentration en thymidine ou thymine : Concentration trop leve en tymidine (Rduction des diamtres dinhibition autour des disques de sulfamides et trimthoprime) Dtection : souche de rfrence E faecalis ATCC 29212 et E. Trimethoprime/sulfamethoxazole (Diamtre dinhibition 20mm). Concentration en cations divalents : Une concentration trop leve en ions divalents (principalement : Ca2+ et Mg2+) ,Rduction autour des zones dinhibition pour les aminosides (tests pour P. aeruginosa), alors que de faibles concentrations donnent des zones dinhibition trop grandes. Les ions Zn 2+ influencent lactivit des carbapnmes. Souche de rfrence P. aeruginosa ATCC 27853

Contrle de qualit (EESQ)

Evaluer les antibiotiques utiliss

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Disques dantibiotiques :

Elements essentiels du systme qualit EESQ Documents et enregistrements Organisation Personnel Equipement Achats et Approvisionnements Control des Processus Information et Management Gestion des dysfonctionnements Evaluations : Amlioration des Processus Satisfaction des clients Bioscurit

Chemistry

Hematology

Les applicateurs, munis de cartouches dantibiotiques sont conservs +4C.

Avant dutiliser toute cartouche dantibiotique Vrifier la date de premption, surtout pour les Beta-lactamines, ainsi que la charge des disques (Souches de rfrences). Le stock de cartouches dantibiotiques doit tre d antibiotiques conserv, 20C, les cartouches dans leurs tuis correctement rebouchs. Tout disque mouill, ou ayant t directement au contact de la glace, ou bien encore conserv temprature ambiante ne devrait pas tre utilis. Les cartouches doivent tre retires du conglateur 1 2 heures avant leur utilisation.

gy Microbiolog

Contrle Qualit Interne S. aureus ATCC 25923


La charge Du disque S.aureus (ATCC 25923) 20 26 27 35 26 37 29 37 25 31 19 26 22 30 24 30 24 32 22 30 19 27 18 22 17 28 18 24 19 28 19 29 Amikacine Ampicilline Benzylpnicilline Cfalotine Cfotaxime Chloramphnicol Ciprofloxacine Clindamycine Cotrimoxazol Erythromycine Gentamycine Acide nalidixique Nitrofurantoine Norfloxacine Oxacilline Ttracycline Tobramycine 30 g 10 g 10 g 30 g 30 g 30 g 5 g 2 g 25 g 15 g 10 g 30 g 300 g 10 g 1 g 30 g 10 g

Contrle de qualit interne: Phase y q analytique

Contrle de qualit (EESQ)


Antibiotique

Contrle Qualit Interne E.coli ( ATCC 25922)


La charge Du disque E.coli ( ATCC 25922)

Elements essentiels du systme qualit EESQ Documents et enregistrements Organisation Personnel Equipement Achats et Approvisionnements Control des Processus Information et Management Gestion des dysfonctionnements Evaluations : Amlioration des Processus Satisfaction des clients Bioscurit

Amikacine Ampicilline Benzylpnicilline Cfalotine Cfotaxime Chloramphnicol Ciprofloxacine Clindamycine Cotrimoxazol Erythromycine Gentamycine Acide nalidixique Nitrofurantoine Norfloxacine Oxacilline Ttracycline Tobramycine

30 g 10 g 10 g 30 g 30 g 30 g 5 g 2 g 25 g 15 g 10 g 30 g 300 g 10 g 1g 30 g 10 g

19 26 16 22 15 21 29 35 21 27 30 40 24 32 19 26 22 28 20 25 28 35 18 25 18 25

Evaluer les souches utilises ______________________


Contrle de linoculum:
Prparer ltalon 0,5 Mc Farland, Inoculum et talon doivent avoir la mme turbidit lorsquils sont examins sur un fond ray. Privilgier lutilisation des densitomtres

Chemistry

Hematology

gy Microbiolog

Contrle de qualit : Phase post analytique

Contrle de qualit (EESQ)


BLSE

Klebsiella oxytoca

Elements essentiels du systme qualit EESQ Documents et enregistrements Organisation Personnel Equipement Achats et Approvisionnements Control des Processus Information et Management Gestion des dysfonctionnements Evaluations : Amlioration des Processus Satisfaction des clients Bioscurit

Chemistry

Hematology

gy Microbiolog

Conclusion _____________________ Contrle de qualit : Phase post analytique

La bonne mthode est celle que lon connat et que lon pratique rgulirement avec des contrles rguliers et une participation des rseaux.. Se tenir au courant http://www.invs.sante.fr

Contrle de qualit interne ______________________


Pour toutes les bactries
Appliquer les recommandations Encore j toujours Savoir Chercher : on ne trouve que ce que lon cherche

Sources derreurs

Pour certaines bactries

Causes derreur _______________________


Phases pr analytique
Milieu de Mueller Hinton
Dfaut de prparation Lot dfectueux Coulage non horizontal Epaisseur infrieur la norme: 4mm Dessication excessive au cours de la conservation

Phases pr analytique Disques dantibiotiques


Causes Elments du SMQ Mesures prventives proposes

Perte dactivit par d activit mauvaise conservation

Perte dactivit par premption

Phases pr analytique Milieu de Mueller Hinton


Causes Mesures prventives proposes Elments du SMQ

Causes derreur _______________________


Phases pr analytique Souche bactrienne
Mauvaise identification
Genre sans nommer lespce Approximation (milieux chromognes)

Dfaut de prparation Lot dfectueux Coulage non horizontal Epaisseur infrieur la norme: 4mm Dessication excessive au cours de la conservation

Causes derreur _______________________


Phases pr analytique Disques dantibiotiques Perte dactivit par p Mauvaise conservation Premption

Phases pr analytique Souches bactriennes


Causes Elments du SMQ Mesures prventives proposes

Mauvaise identification Genre sans nommer lespce Mauvaise identification approximation (milieux chromognes)

Causes derreur ______________________


Phases analytique
Inoculum trop lourd ou pas assez Mauvaise application des disques la surface du milieu Conditions dincubation
Dure trop longue ou trop courte Temprature trop basse par suite douverture frquente ou prolonge de ltuve

Phases post analytique Mode de lecture des zones dinhibition


Causes Elments du SMQ Mesures prventives proposes

Erreur de mesure des zones dinhibition Erreur de transcription des rsultats Contamination Drive gntique des souches de rfrences

Phases analytique
Causes Mesures prventives proposes Elments du SMQ Inoculum trop lourd ou pas assez Mauvaise application des disques la surface du milieu Conditions dincubation Dure trop longue ou trop courte Temprature trop basse par suite douverture frquente ou prolonge de ltuve

Causes derreur _______________________


Phases post analytique
Mode de lecture des zones dinhibition Erreur de mesure des zones dinhibition Erreur de transcription des rsultats Contamination Drive gntique des souches de rfrences