Sunteți pe pagina 1din 18

ACIZII NUCLEICI

Structura chimic a acizilor nucleici ACIZII NUCLEICI = substane chimice organice macromoleculare (cei mai lungi polimeri din lume) Unitile structurale ale acizilor nucleici monomerii = nucleotide Acizii nucleici = substane chimice macromoleculare cu masa molecular de peste 10 000 daltoni (alctuii din 5 elemente: C, O, H, P i N) Acizii nucleici = polinucleotide NUCLEOTIDA conine 3 tipuri de substane chimice: 1) o baz azotat 2) un zahr (o pentoz = monoglucid cu 5 atomi de carbon) 3) un radical acid fosforic (P) (radical fosfat) Exist 2 categorii de acizi nucleici: - ADN acidul dezoxiribonucleic = macromolecul ce prezint 2 catene (lanuri) polinucleotidice / pentoza e reprezentat de dezoxiriboz - ARN acidul ribonucleic = molecul ce prezint de obicei o singur caten polinucleotidic / pentoza e reprezentat de riboz n molecula de pentoz, atomii de carbon se noteaz cu specificarea prim, respectiv C1,- C5, ! din cele 3 componente ale nucleotidelor, doar bazele azotate confer specificitate n cadrul fenomenului ereditar, deoarece pentozele i radicalul fosforic sunt comune tuturor macromoleculelor de ADN din lumea vie. Bazele azotate sunt de 2 tipuri: - purinice - pirimidinice 1) bazele azotate purinice au dimensiuni mai mari = 2 cicluri (inele) condensate = nucleul purinic = 5 atomi de C + 4 atomi de N: - adenina A - guanina G 2) bazele azotate pirimidinice au dimensiuni mai mici = 1 ciclu (inel) = nucleul pirimidinic = 4 atomi de C + 2 atomi de N: - timina T - citozina C - uracil U - Prin legarea unei molecule de baz azotat cu o molecul de pentoz, cu eliminarea unei molecule de ap, va rezulta o molecul de nucleozid. - Prin ataarea unui radical acid fosforic la atomul C3, sau C5, al pentozei, cu eliminarea unei alte molecule de ap, se va forma o molecul de nucleotid. Deoarece n fiecare tip de acid nucleic exist 4 tipuri de baze azotate, rezult c fiecare tip de acid nucleic conine 4 tipuri de nucleotide. ntre nucleotide se stabilesc legturi intracatenare i intercatenare: a) legturile intracatenare = legturi dintre nucleotide n cadrul monocatenei sau lanului polinucleotidic, sunt: - legturi covalente - legturi fosfodiesterice - legturi pe care le realizeaz radicalul fosfat (P) cu pentozele ntre: - al treilea carbon (C3) al pentozei unui nucleotid i al cincilea carbon (C5) al pentozei nucleotidului urmtor. b) legturile intercatenare = legturi dintre nucleotide aparinnd celor 2 catene polinucleotidice, se realizeaz ntre: bazele azotate purinice i cele pirimidinice, sunt: - legturi de hidrogen, de slab energie, de 2 feluri: 1. duble ntre adenin i timin A=T T=A 2. triple ntre guanin i citozin GC CG

A fost stabilit astfel legea complementaritii bazelor azotate care evidenieaz c ntr-o molecul de ADN bicatenar (format din 2 catene) bazele azotate se mperecheaz specific. Acelai lucru i n cazul n care ARN-ul este bicatenar cu o singur excepie: timina este nlocuit cu uracilul: A=U U=A GC CG Rolul acizilor nucleici 1. Acizii nucleici reprezint substratul ereditii. 2. Acizii nucleici asigur totdeauna transmiterea informaiei genetice de la o generaie la alta. Transmiterea informaiei ereditare, de la celula mam la celulele fiice se realizeaz n cursul procesului de diviziune celular. ADN spirala vieii = substan macromolecular bicatenar alctuit din 2 catene polinucleotidice, rsucite helicoidal, n jurul unui ax comun, catene ce sunt legate ntre ele prin legturi slabe de hidrogen realizate ntotdeauna ntre o baz azotat purinic i una pirimidinic. n macromolecula de ADN exist 2 structuri: primar i secundar. I. Structura primar monocatenar - caracteristica unei structuri primare monocatenare este dat de secvena (ordinea) de nucleotide dintr-o caten Structura primar este caracteristic pentru: - acizii ribonucleici ARN - moleculele de ADN de la unele virusuri (bacteriofagul x 174) ! n molecula de ARN pot exista regiuni bicatenare, prin rsucirea macromoleculei, pe mici poriuni, n jurul propriei axe i formarea de puni de hidrogen de tipul A= U, respectiv C G . II. Structura secundar - a fost stabilit n 1953 de J.D.Watson, F.H.C. Crick i M.H.F. Wilkins (Premiul Nobel - 1962) - conform acestui model, molecula de ADN este alctuit din 2 catene macromoleculare, antiparalele, cu direcie diferit de naintare (antiparalele), rsucite n jurul unui ax comun avnd forma unei scri n spiral - structura bicatenar dubl helicat. - corespunde tipului B de ADN, prezent n regiunile cu eucromatin, care conin gene active metabolic Diametrul dublului helix este de 2 nm (30 ) avnd un pas (spir) de 3,4 nm (34 ). Fiecare spir a dublului helix ADN cuprinde 10 nucleotide. Cele 2 lanuri polinucleotidice sunt antiparalele: - la un lan legturile fosfodiesterice se realizeaz ntre C3 al dezoxiribozei unei nucleotide i C5 al nucleotidei urmtoare - la cellalt lan, legturile fosfodiesterice se realizeaz invers: C5 C3 mperecherea ntre bazele azotate are la baz pricipiul complementaritii: A T T A G C C G (pe acest motiv se numesc baze azotate complementare) astfel, rezult c: ntr-o molecul bicatenar de ADN, suma nucleotidelor A + C este egal cu suma nucleotidelor T + G, deci A + C = T + G Succesiunea bazelor dintr-o caten determin succesiunea bazelor din catena antiparalel. Astfel, dac pe o caten exist o regiune cu secvena TACAATG, n dreptul ei pe catena opus se va afla secvena ATGTTAC. Legturile de hidrogen se formeaz i se dezorganizeaz cu uurin fr s necesite surse energetice speciale. Acest fapt explic: modul n care se desfoar replicarea ADN transcrierea informaieie din ADN repararea ADN Structura bicatenar de ADN prezint o mare stabilitate fizic, asigurat de: a. pe vertical, de punile fosfodiesterice intracatenare b. pe orizontal, de punile de hidrogen intercatenare

Molecula de ADN este obligat s se rsuceasc, s se spiralizeze, rezultnd o structur spiralat dublu helix, n care fiecare pereche succesiv de baze azotate se ntoarce cu 360 n direcia acelor de ceas (rsucire dextrogir) Datorit structurii bicatenare, macromolecula de ADN poate suferi fenomene de: denaturare - renaturare replicare (autocopiere) Denaturarea renaturarea ADN Legturile de hidrogen dintre cele 2 catene complementare se pot rupe prin: nclzirea unei soluii n care se afl ADN la o temperatur de 850C 950 C meninere la o concentraie ridicat de sruri Cele 2 catene complementare se despart i ADN- ul devine monocatenar: 1) dac soluia este rcit brusc, ADN-ul rmne monocatenar = ADN denaturat Temperatura de denaturare (punctul de topire al ADN) difer de o specie la alta fiind: - dependent de procentul de legturi triple de hidrogen (G C) - proporional cu procentul acestora n molecula de ADN 2) dac soluia este rcit treptat, cele 2 catene se atrag datorit complementaritii bazelor azotate i ADN-ul i reface structura bicatenar = ADN renaturat Procesul de renaturare se produce n 2 etape: - n prima etap o caten de ADN din soluie se mperecheaz cu alt caten la ntmplare formndu-se scurte regiuni bicatenare - n a doua etap regiunea de baze mperecheate se extinde de-a lugul moleculei, ntreaga molecul devenind bicatenar Hibridizarea = refacerea unui dublu helix, pornind de la: - catene de ADN de origine diferit - sau de la o caten ADN i o caten ARN Amestecnd monocatene de ADN de la specii diferite se formeaz prin renaturare parial hibrizi moleculari. Importana hibridizrii: 1) Procedeul este folosit n studiul relaiilor filogenetice (de nrudire) dintre specii. Speciile nrudite au temperaturi apropiate de denaturare a ADN i realizeaz o renaturare rapid i de mari proporii cnd li se amestec monocatenele deoarece, secvenele polinucleotidice sunt identice pe mari poriuni. De exemplu, procentul de renaturare ntre monocatenele ADN de la om i de la maimue este de 75%, pe cnd ntre monocatenele ADN de om i oarece este de numai 25%. 2) Este o metod de lucru utilizat n tehnologia ADN- recombinat. TIPURI DE ARN Structur i funcii Tipuri de ARN - substane macromoleculare = o singur caten polinucleotidic (o structur primar monocatenar), care n anumite regiuni poate prezenta o structur bicatenar datorit rsucirii catenei n jurul propriei axe i formrii unor puni de hidrogen de tipul: A=U U=A GC CG ARN = polimer compus din ribonucleotide cu o structur, n general, monocatenar. Ca i dezoxiribonucleotidele, ribonucleotidele sunt formate din: - baz azotat: purinic (adenina, guanina) i pirimidinic (uracil, citozin) - o pentoz: riboza - un radical fosfat O celul conine mai multe tipuri de ARN: - ARN mesager - ARN de transfer - ARN ribozomal. Sinteza acestora se realizeaz pe baza informaiei din ADN. Moleculele de ARN nu pot avea dimensiuni prea mari deoarece cu ct crete numrul nucleotidelor (peste cteva mii) cu att scade stabilitatea moleculei. Sinteza ARN (transcripia) se realizeaz tot pe baza compelmentaritii bazelor azotate ca i n cazul replicaiei ADN.

1) ARN viral = materialul genetic de la ribovirusuri, ca: - unele virusuri vegetale: virusul mozaicului tutunului (VMT) - unele virusuri animale: virusul poliomelitei, virusul gripal, virusul turbrii, virusul stomatitei veziculare - unii bacteriofagi Forma: monocatenar sau bicatenar ( mai rar) - linear de obicei - circular la virusul encefalomielitei oarecilor ! Mrimea i masa sa molecular sunt dependente de cantitatea de informaie genetic pe care o posed. 2) ARN mesager (ARN-m) - poart mesajul genetic nscris n secvena sa de ribonucleotide = molecul linear, de dimensiuni variabile, avnd o secven de nucleotide complementar cu secvena unei catene de ADN a crei informaie genetic a copiat-o n celul - reprezint 2 5 % din cantitatea total de ARN (cele mai mari molecule de ARNm conin ntre 500 i 1000 de baze nucleotide) - este monocatenar, are o lungime variabil n funcie de lugimea genei (ADN) pe care a transcris-o. El se asociaz cu ribozomii din citoplasma celular, la nivelul crora dicteaz secvena de aminoacizi din catena polipeptidic. Dup ce molecula de ARN m i ndeplinete rolul su de mesager, el este supus hidrolizei enzimatice (existena sa n timp este limitat fiind distrus la sfritul sintezei proteice) - se afl n celulele tuturor organismelor procariote i eucariote - rol de a: copia informaia genetic dintr-una din catenele moleculei de ADN ( de obicei din catena 3' - 5') o transport la locul sintezei proteice pe suprafaa ribozomilor (TRANSCRIPIE) 3) ARN de transport sau solubil (ARN-t, ARN-s) - rol: de a transporta aminoacizii la locul sintezei proteice de pe suprafaa ribozomului n procesul de TRANSLAIE a informaiei genetice - masa molecular: mic (cca 25 000) = (70 90 de nucleotide) - reprezint aprox 15 % din totalul ARN din celul - form: frunz de trifoi - alctuire ARNt = 4 brae (regiuni bicatenare): > 3 terminate cu bucle (regiuni monocatenare) > 1 ciot de mrime variabil ARNt recunoate la nivelul ribozomului, codonul din ARNm corespunztor aminoacidului pe care l poart. Recunoaterea codon anticodon are loc la nivelul ribozomului n procesul sintezei catenei polipeptidice. - n fiecare celul exist teoretic: 64 tipuri de ARN-t - n mitocondrii se pot afla peste 20 de tipuri de ARNt n timp ce n citoplasma celulelor eucariote numrul tipurilor de ARNt poate s varize ntre 40 i 60. 4) ARN ribozomal (ARN-r) = 85% din cantitatea total de ARN din celul i cea mai mare parte este sintetizat n nucleoli - sintez: tot prin transcriere de ADN , dup care catena de ARNr, se pliaz formnd poriuni bicatenare datorit complementaritii bazelor azotate (100 3000 de nucleotide) - localizare n: 1. ribozomi unde este asociat cu proteinele (proteine ribozomale) att la procariote ct i la eucariote Ribozomii = particule ribonucleoproteice = ARN-r + proteine 2. mitocondrii, cloroplaste = organite celulare de origine endosimbiont (ribozomii din mitocondrii i cloroplaste prezint caracteristici similare cu ribozomii de la procariote). Au fost identificate i forme de ARN bicatenare n genomul unor virusuri precum i mici molecule n nucleul unor eucariote.

FUNCIA AUTOCATALITIC I HETEROCATALITIC Informaia ereditar este nscris n ADN sub form de codificare biochimic, adic sub forma unei secvene date de baze azotate. Ea se poate autoreproduce i poate fi transferat prin transcriere genetic, pe baza principiului complementaritii, diferitelor molecule de ARN. Materialul genetic ndeplinete 2 funcii importante: 1. autocatalitic reprezentat de replicaia ADN-lui 2. heterocatalitic reprezentat de sinteza proteic. 1. FUNCIA AUTOCATALITIC Const n capacitatea moleculeleor de ADN de a se autoreproduce cu mare fidelitate (adic se dubleaz) dup modelul semiconservativ emis de Watson i Crick. replicare semiconservativ Conform acestui model: - iniial are loc ruperea punilor de hidrogen, rezultnd ADN monocatenar - ulterior, fiecare caten original servete drept matri (templat) pt sinteza unei catene noi. - vor rezulta 2 molecule noi, fiecare avnd o caten veche i o caten nou-sintetizat. (secvena nucleotidelor n cele 2 molecule rezultate este identic cu secvena de nucleotide din molecula original) Replicarea (autocopierea) ADN ADN-ul nu se epuizeaz n procesul diviziunii celulare datorit replicaiei (autocopierii) ADN. Sinteza ADN (care se realiz prin intervenia unui complex aparat enzimatic) este o reacie de tip replicativ i este unicul caz din lumea biomoleculelor n care o substan i dirijeaz propria sintez. Prin: - Desfacerea legturilor de hidrogen - n acest proces intervin mai multe enzime ce au rolul de a separa cele 2 catene. - Separarea este treptat, pornit din punctul de iniiere i se continu progresiv spre un punct terminus. Astfel, macromolecula de ADN capt forma literei Y - Punctul de ramificare a macromoleculei de ADN se numete bifurcaie de replicare (unde are loc separarea lanurilor prin ruperea legturilor de hidrogen) - Sinteza unui nou lan prin ataarea nucleotidelor complementare lanului vechi. - Dezoxiribonucleotidele libere din citoplasma celular se pot asocia succesiv, pe baz de complementaritate, cu cele ncadrate deja n monocatenele de ADN, ce joac n acest fel, rol de matri - n acelai timp ntre 2 nucleotide aliniate succesiv se realizeaz legtura chimic covalent fosfodiesteric ce unete grupul 3, - OH al primei nucleotide cu 5, - fosfatul celei de-a 2-a nucleotide, rezultnd cte o caten polinucleotidic nou.

Catenele replic rmn ataate prin puni de hidrogen de catenele matri

Rezult 2 molecule fiice de ADN , identice cu cea iniial, ce vor fi repartizate n cele 2 celule fiice n timpul diviziunii. Fiecare molecul de ADN: - conine o caten veche matria - i una nou sintetizat Replicarea macromoleculei de ADN are loc dup modelul semiconservativ, adic fiecare molecul fiic de ADN motenete doar una din cele 2 catene ale moleculei parentale iniiale, de ADN. Alte modele: - replicarea dispersiv - replicarea conservativ la eucariote, replicarea ADN ncepe simultan n mai multe regiuni situate de-a lungul moleculei de ADN = repliconi (ochiuri de replicare) care funcioneaz simultan repliconul= fragment de ADN 30000 300000 perechi de nucleotide genomul viral sau genomul bacterian conine un singur replicon n procesul de replicare intervin mai multe tipuri de enzime: - EXONUCLEAZA intervine n ndeprtarea unui nucleotid, a unei secvene de nucleotide sau a unor enzime. - ADN-TOPOIZOMERAZA - taie i apoi leag catene de ADN, fcnd posibil desfacerea celor 2 catene ale moleculei.

La furca de replicare, acioneaz complexul primozom = 2 enzime: - ADN-PRIMAZA - ADN-HELICAZA desface punile de hidrogen dintre cele 2 catene. Modelul acceptat n prezent este modelul replicrii discontinue propus de Okazaki. 1) Catena veche 3, - 5, servete ca matri pentru sineza unei catene complementare noi, catena 5 ,- 3,, denumit caten leading = catena directoare sau catena principal. Deoarece noua caten prezint liber captul 3-OH, la care pot fi adugate noi nucleotide, sinteza sa are loc n mod continuu, sub aciunea enzimei ADN-polimeraza III Dup sintez, are loc rsucirea catenei nou formate fa de cea original, formndu-se structura bicatenar. 2) Catene iniial 5,- 3, servete ca matri pentru sinteza unei catene complementare noi, catena 3, - 5, denumit caten lagging = caten discontinu, segmentar, ntrziat Deoarece catena nou nu are liber captul 3-OH, sinteza este discontinu, avnd loc dup un alt mecanism de la furca de replicare spre captul liber al catenei ducnd la formarea de fragmente Okazaki. Enzima de iniiere a sintezei este ARN-primaza, sub aciunea creia este sintetizat un primer ARN alctuit din cteva nucleotide. Pornind de la primerul ARN sub aciunea enzimei ADN-polimeraza III are loc ataarea de nucleotide noi, de la furca de replicare ctre captul liber al catenei lagging, formndu-se un fragment Okazaki. Dup sinteza unui fragment Okazaki, ADN-polimeraza III este nlturat. Fragmentul Okazaki = fragment de ADN = cteva mii de nucleotide 1000 -2000 (procariote) 100-200 nucleotide (eucariote). 2. FUNCIA HETEROCATALITIC explicat prin dogma central a geneticii Conform dogmei centrale a geneticii ADN ARN proteine (caten polipeptidic) informaia genetic se reproduce prin replicaie i este decodificat (transformat ntr-o protein specific) prin transcripie i translaie. Excepie: Retrovirusurile = virusuri cu ARN (ex HIV), pe care l convertesc n ADN cu ajutorul unei enzime specifice (reverstranscriptaza), care transcrie informaia genetic n sens invers, de la ARN-viral la ADN. Acest ADN se poate integra n ADN-ul celulei gazd. Celula i protejeaz ADN interpunnd ntre acesta i proteine produi intermediari (ARN), protejnd n felul acesta ADN, care rmne departe de efectul caustic al citoplasmei. CODUL GENETIC Informaia necesar sintezei proteinelor, care dein un limbaj de 20 de semne (aminoacizi) este depozitat n moleculele de ADN care dein un limbaj de 4 semne (baze azotate). Codul genetic = reprezint un sistem biochimic prin care se stabilete relaia dintre acizii nucleici i proteine i const n corespondena dintre fiecare aminoacid i o succesiune de 3 nucleotide Unitile de codificare a informaiei necesare sintezei proteinelor = triplete de nucleotide = codoni CODONUL = un grup de 3 nucleotide alturate din molecula de ARNm, care determin poziia unui aminoacid n molecula proteic sau sfritul sintezei proteice. Matematic, prin aranjamente de 4 nucleotide (baze azotate) luate cte 3, rezult 43 = 64 combinaii. Din cei 64 de codoni ai codului genetic: - 61 codoni codific diferii aminoacizi (codoni sens) - 3 sunt codoni nonsens = STOP, care nu specific vreun aminoacid, dar joac un rol important n citirea mesajului genetic purtat de ARNm, ntruct ei marcheaz sfritul acestui mesaj genetic: UAA, UGA, UAG - din cei 61 codoni sens, 2 codoni: AUG i GUG care codific metionina respectiv valina sunt i codoni cu semnificaia de nceput de sintez. Molecula de ARNm este sintetizat n direcie antiparalel fa de catena de ADN pe care o copiaz. De exemplu, tripleta de baze ACC din structura ADN-ului (3, - ACC 5,) devine o copie 5, - UGG 3, , n molecula ARNm. Tripletele de baze (nucleotide) ale ARNm-ului se numesc codoni i, n mod obinuit, sunt transcrii n direcia 5, - 3, . Aceti codoni sunt complementari cu modelul catenei ADN i identici ca secven, cu deosebirea c ARNm conine U n loc de T.

Codul genetic are urmtoarele caracteristici: - nesuprapus (neacoperit) 2 codoni succesivi (vecini) nu au nucleotide comune - fr virgule ntre 2 codoni succesivi nu exist semne de punctuaie biochimic reprezentate de nucleotide fr sens, citirea informaiei genetice realizndu-se continuu - degenerat (redundant) fiind mai muli codoni dect aminoacizi, acelai aminoacid poate fi codificat de mai muli codoni; ex serina poate fi codificat de 6 codoni (numii sinonimi); - universal n toat lumea vie aceeai codoni codific acelai aminoacid; ex codonul UUU codific fenilalanina att la procariote ct i la eucariote de la cele mai simple bacterii la cele mai complexe animale. Aceasta dem originea foarte veche a codului genetic. Geneticienii au descoperit unele mici excepii de la universalitatea codului genetic, datorate probabil unor mutaii. Astfel, codonul UGA are rolul de stop n genomul nuclear, dar n mitocondrii codific aminoacidul triptofan. Codonul AUA care codific aminoacidul izoleucin n genomul nuclear, la mitocondrii codific aminoacidul metionina. - fenomenul de colinearitate = corespondena dintre secvena nucleotidelor din molecula de ADN sau ARNm i secvena aminoacizilor din molecula proteic. - codoni amigui 2: AUG, GUG care dependent de poziia lor n moleculade ARNm, determin poziia unor aminoacizi diferii. Cei 2 codoni se pot gsi la nceputul molecule de ARNm sau n interiorul acesteia (dar nu terminal, unde se afl unul din cei doi codoni stop): situai n prima poziie, ambii codoni determin includerea aminoacidului metionin-formiat aflai n interiorul ARNm, codonul AUG determin includerea metioninei, iar codonul GUG pe cea a valinei. n general, dup terminarea sintezei proteice, primul aminoacid din catena polipeptidic sintetizat este nlturat. Etapele sintezei proteice Pe baza codului genetic are loc sinteza proteinelor n 2 faze: 1. transcripia copierea mesajului genetic din moleculele de ADN n moleculele de ARNm 2. translaia utilizarea mesajului genetic pt sinteza proteinelor pe baza codului genetic. Dup ce a fost sintetizat , catena polipeptidic (care prezint structur primar) parcurge o serie de modificri posttranslaionale n urma crora va deveni activ metabolic. Transcripia (trasncrierea) Sub aciunea enzimei ARN-polimeraza se transcrie mesajul genetic din fragmentul de ADN respectiv sub forma unei molecule de ARN mesager ARNm. Procesul de transcripie este asemntor la procariote i eucariote: - una din diferene const n faptul c eucariotele conin 3 tipuri de ARN polimeraza (I, II, III) n loc de una singur cum au celulele procariote. Deci, informaia genetic se transcrie dintr-o secven de nucleotide n alt secven de nucleotide. Procesul de transcriere cuprinde 3 faze: a) faza de iniiere: enzima ARN-polimeraza, activat de un factor specific, se asociaz cu o secven din ADN numit promotor (fragment unidirecional din catena de ADN care interacioneaz cu ARN-polimeraza, determinnd att unde s nceap, ct i n ce direcie s se realizeze sinteza ARNm) astfel transcripia nu poate ncepe n orice segment al ADN, ci numai din regiunile care constituie promotori. Codonul de iniiere a sintezei unei uniti de transcripie (a unei molecule de ARNm) se afl n general pe catena 3, - 5, , fiind de obicei TAC (mai rar CAC). Codonul care indic sfritul procesului de transcripie este un codon complementar codonilor stop din codonul genetic al ARNm, respectiv ACT, ATT sau ATC. ntre 2 uniti transcripionale alturate, se afl secvene de ADN non-informaional.Mrimea unei uniti de transcripie difer la procariote fa de eucariote: - la procariote o unitate de trascripie conine informaia genetic a mai multor gene, fiind deci implicat n sinteza mai multor catene polipeptidice conine numai secvene informaionale - la eucariote - o unitate de trascripie conine informaia genetic a unei singure gene, fiind deci implicat n sinteza unei singure catene polipeptidice conine secvene informaionale (exoni) i secvene noninformaionale (introni). Astfel, n urma transripiei la eucariote rezult un ARN precursor = conine exoni + introni. naintea nceperii celei de-a doua etape a sintezei proteice este necesar maturarea ARNm are loc prin eliminarea intronilor i asamblarea exonilor cu ajutorul unor enzime (endonucleaze, ligaze) important n reglajul genetic al sintezei proteice la eucariote. b) faza de alungire: se realizeaz creterea catenei de ARNm prin formarea punilor fosfodiesterice succesive n direcia 5, 3,

c)faza de ncheiere: se poate realiza direct prin ntlnirea unui codon stop n cadrul secvenei transcrise din ADN sau indirect prin intervenia unui factor proteic de terminare. Translaia (traducerea) = sinteza lanului polipeptidic Are loc la nivelul ribozomilor. la nivelul lor se face asamblarea aminoacizilor. Pentru ca translaia s aib loc trebuie mai nti ca toi factorii implicai s ajung la locul sintezei proteice. Translaia poate fi mprit ca i transcrierea n 3 faze: 1) Iniierea traducerii n citoplasm se afl: - molecule de ATP = substan fosfat macroergic - 64 tipuri de ARNt - 20 tipuri de aminoacizi proteici - ARNm - ribozomi La eucariote, ARNm ncepe cu codonul AUG care corespunde metioninei. Deci primul aminoacid al moleculei proteice va fi metionina care ulterior poate fi nlturat. Reaciile caracteristice sunt: Activarea aminoacizilor prin reacia cu ATP care le va dona energie: AA + ATP aminoacilsintetaze AA~ AMP + P~P AA= un aminoacid oarecare ATP = acid adenozintrifosforic AMP= acid adenozinmonofosforic P~P= pirofosfat ~ = legtur chimic purttoare de enrgie chimic Legarea aminoacizilor activai de ARNt AA~ AMP + ARNt aminoacilsintetaze AA~ ARNt + AMP AMP va fi rencrcat cu energie prin fosforilare (AMP + P~P ATP) la nivelul mitocondriilor, deci este reciclabil. Un anumit aminacid se ataeaz numai la acea molecul de ARNt care la polul opus are anticodonul corespunztor, adic un grup de 3 nucleotide complementare codonului; ex: ARNt care ataeaz lizina conine anticodonul UUC. Cele 2 reacii sunt catalizate de enzimele aminoacil-sintetaze. Energia necesar activrii AA rezult din hidroliza ATP. La nivel mitocondrial, AMP prin fosforilare, reface ATP. Ribozomii sunt formai din 2 subuniti, fiecare fiind format din 1/3 proteine i 2/3 molecule de ARNr. Fiecare ribozom are 3 poziii de legare a ARNt: - poziia P (situsul peptidil ARNt) = locul de legare a ARNt care ine catena polipeptidic aflat n alungire - poziia A (situsul aminoacil ARNt) = locul de legare a ARNt care aduce urmtorul aminoacid care se va ataa catenei polipeptidice aflat n curs de sintetizare. - poziia E = situsul de pe care se detaeaz ARNt care prsete locul sintezei dup ce a eliberat aminoacidul pe care l-a transportat. Sinteza proteic se realizeaz stadial, din ARNm se citete cte un codon la fiecare stadiu, ncepnd din captul 5 spre captul 3. Fiecare codon este recunoscut de ctre aminoacidul corespunztor din ARNt care poart un aminoacid corespunztor codonului din ARNm. 2) Alungirea catenei polipeptidice Se realizeaz prin adugarea aminoacizilor, unul cte unul, la aminoacidul precedent, ntre care se formeaz legturi dipeptidice. Reaciile se desfoar n prezena factorilor de alungire, utiliznd energia rezultat din hidroliza GTP. AA1-ARNt1 + AA2-ARNt2 peptidiltransferaze GTP AA1~AA2 + ARNt1 + ARNt2 Adugarea aminoacizilor se face conform citirii mesajului genetic, codon cu codon, prin micarea ribozomului i a ARNm, unul dup altul, unidirecional (5, 3,). Acum poate ncepe etapa translaiei (traducerii), adic sinteza propriu-zis a proteinei.. Ea presupune trecerea ARNm printre subunitile ribozomului . n spaiul dintre cele 2 subuniti este loc pentru numai 2 codoni ai ARNm. Informaia din ARNm este codificat n sensul 5, 3,, deci ordinea nucleotidelor din schem se citete de la dreapta la stnga Aceeai molecul de ARNm trece succesiv prin mai muli ribozomi (se formeaz poliribozomi) i pe baza ei se formeaz mai multe exemplare din molecula proteic respectiv.

3) Terminarea traducerii - sistarea sintezei proteice


Adugarea aminoacizilor la lanul polipeptidic continu pn cnd codonul STOP din ARNm ajunge n locusul A al ribozomului. Procesul se produce n prezena factorului de eliberare RF care se leag direct la codonul STOP din locusul A al ribozomului. Factorul de eliberare determin hidroliza polipeptidului format complet, aflat n locusul P al ribozomului, i eliberarea lui prin tunelul subunitii mari ribozomale. Sfritul sintezei proteice este marcat de eliberarea ARNt, care poate fi utilizat n alte biosinteze, de dezorganizarea ribozomilor n cele 2 subuniti i de dezintegrarea ARNm. Proteinele rezultate sunt folosite n metabolismul celular ndeplinind rol structural sau catalitic. Modificri post-translaionale: n urma sintezei proteice , rezult o caten polipeptidic, n care aminoacizii se afl ntr-o succesiune caracteristic. Aceasta reprezint structura primar a catenei polipeptidice, form n care proteina este de obicei inactiv. Catenele polipeptidice se pot rsuci n spiral sau se pot plia, formnd structura secundar. Forma tridimensional a olipeptidelor rsucite sau pliate = str. teriar sau cuaternar este determinat de relaiile structurale dintre catenele polipeptidice componente ale unei proteine.

Organizarea materialului genetic


VIRUSURI Definiie: virusurile = particule infecioase, submicroscopice, acelulare, parazite intracelular obligatoriu Structur: - nveli proteic capsida = capsomere proteice (helicoidale sau poliedrice) - materialul genetic genom viral = acidul nucleic ADN sau ARN (liniari, circulari, segmentari) Clasificare: - ribovirusuri: material genetic ARN mono-/ bicatenar (virusul gripal, HIV, VMT virusul mozaicului tutunului, virusul turbrii, poliomelitei) - dezoxiribovirusuri (adenovirusuri): material genetic ADN: - ADN bicatenar (virusul hepatitei B, bacteriofagul T4, virusul herpesului) - ADN monocatenar (parvovirusul) Acidul nucleic (ADN/ ARN) o molecul liniar sau circular Numrul de nucleotide dintr-un genom viral 3200-1,2 milioane de perechi - cele mai mici virusuri au 4 gene - virusurile mai mari au cteva sute de gene Genomul viral conine codificat informaia genetic pe care celula gazd specific o poate recunoate i decodifica. Virusul prezint 3 stri de existen: - virion = virus matur, complet( capsid proteic + genom viral) - virus vegetativ = virus decapsidat acidul nucleic viral aflat liber n citoplasma celulei gazd - provirus acidul nucleic integrat n cromozomul unei celule gazd PROCARIOTE (bacteriile) Definiie: organisme unicelulare sau coloniale, rspndite pretutindeni Structur: - organizare celular de tip procariot: - perete celular (murein) - membran celular cu mezozom - citoplasm cu ribozomi i enzime oxido-reductoare - nucleoid nucleu fals, primitiv, neindividualizat, lipsit de membran nuclear = echivalent nuclear, (genofor) ancorat de membrana celular prin mezozom. Materialul genetic procariotic: 1) cromozomul bacterian (L = 1400 m): 9

- o molecul de ADN circular, bicatenar cu superspiralizri i rsuciri (care s i permit includerea n celule cu dimensiuni de 1- 2) = 40 50 bucle, inele mari meninute cu ajutorul unor mici fragmente de ARN liniar; sau - ADN liniar ( bacteria Pseudomonas). 2) material genetic accesoriu = plasmid (n citoplasm) = 0,5 2 % din totalul ADN bacterian: - fragmente circulare de ADN bicatenar = 6 10 gene pot fi transferate de la o celul la alta Rolul plasmidelor: implicate n fenomenele de parasexualitate (plasmide de tip F) inducerea rezistenei la unii factori de stres (plasmide de tip R) implicate n producerea de antibiotice n producerea ADN-ului recombinant (plasmidul tip Ti) EUCARIOTE Definiie: organisme uni-/ pluricelulare, ce includ 4 regnuri: Protista, Fungi, Plantae, Animalia !!! Materialul genetic la eucariote: - nuclear (99%) nucleu - extranuclear (1%) cloroplaste (ADN plastidial sau cloroplastic) / mitocondrii (ADN mitocondrial) - transmitere pe linie matern, odat cu citoplasma (non-mendelian) Structur: - organizare celular de tip eucariot: - membran celular ( perete celular la plante/ celuloz i fungi/ chitin) - citoplasm cu organite i incluziuni - nucleu nucleu adevrat, individualizat, cu: - membran nuclear dubl, cu pori - nucleoli - carioplasm (nucleoplasm) = cromatin cromozomi (n timpul diviziunii celulare): - ADN 13 -16% - ARN 12 13% - proteine histonice i nonhistonice 68 72% - lipide, polizaharide - ioni de Ca i Mg La microscopul electronic n timpul interfazei: cromatina = irag de perle = NUCLEOSOMI Nucelosomul: - diametru: 10 nm - structur: - miez = 4 perechi de molecule proteice histonice (H2A, H2B, H3, H4) - un segment de ADN = 146 perechi de nucleotide Nucleosomii sunt legai prin secvene de ADN = ADN- linker = 60 perechi de nucleotide cuplate cu o alt protein histonic = protein linker (H1) Compactarea filamentului nucleohistonic prin interaciuni cu proteina histonic linker SOLENOID (diametrul de 30 nm) Proteinele cromatinei : - histonice asigur stabilitatea ADN (mpiedic accesul enzimelor i activarea genelor) - non-histonice (mai puine) rol n exprimarea genelor (transcripie) recunosc i se leag specific cu anumite secvene ale ADN Exist 2 stri structurale i funcionale ale cromatinei: - eucromatina = cromatina mai lax, mai decondensat = partea activ a genomului, se replic timpuriu, conine secvene unice de ADN 10

heterocromatina = regiuni intens colorate, condensate, nu e accesibil enzimelor transcripiei i rmne necodificat Structur - cromozomul n metafaz puternic condensat, spiralizat = bicromatidic: - 2 cromatide (2 molecule ADN) 2 brae egale sau inegale - centromer (constricie primar) la suprafaa lui se afl kinetocorul (ADN+ proteine) locul unde fibrele fusului de diviziune se prind de cromozom - constricie secundar - 2 satelii Capetele cromozomilor = telomere: au rol n replicare i n protejarea cromozomilor mpotriva interaciunilor chimice i a atacurilor enzimatice. Genele de la eucariote : - au o structur discontinu: exoni = secvene codificatoare introni = secvene necodificatoare

GENETIC UMAN
GENOMUL UMAN - Complementul cromozomial = ADN nuclear (conine informaia genetic esenial) + ADN mitocondrial (conine informaia necesar funciilor specifice mitocondriilor) = ADN informaional + ADN noninformaional Genomul uman nuclear are 24 de tipuri diferite de molecule de ADN bicatenar, fiecare legat de proteine histonice i nonhistonice = 24 de tipuri de cromozomi clasificai n: - 22 AUTOZOMI - 2 HETEROZOMI Cromozomii = structuri (corpusculi colorai) permanente n nucleu dar vizibile numai n timpul diviziunii celulare (cnd sunt condensai) = uniti genetice permanente care i conserv individualitatea, proprietile structural funcionale i se transmit prin autoreplicare de-a lungul generaiilor celulare Rol: purttorii informaiei ereditare 1) AUTOZOMI identici la cele 2 sexe au gene care controleaz diferite caractere mofo anatomice i eco fiziologice ale organismelor reprezint mjoritatea cromozomilor dintr-un complement cromozomial 2) HETEROZOMI cromozomi ai sexului au i gene cu rol decisiv n determinarea sexului unui individ nu sunt prezeni la toate speciile de organisme uneori, se deosebesc de autozomi nu numai prin coninutul lor informaional ci i printr-o morfologie particular rmn n mare parte condensai n nucleii interfazici ceea ce permite evidenierea lor sub forma unor corpuri cromatice, ataate de membrana nuclear = cromatin sexual Cariotipul uman (complementul cromozomial diploid): 46 cromozomi din care: 44 autozomi 2 heterozomi - XY, - XX identici Formula cromozomial - n celulele somatice, diploide: 11

= 44 A + XX = 44 A + XY Sexul este determinat cromozomal (de tip Drosofila): - = homogametic (XX) - = heterogametic (XY) iar tipul de individ care se dezvolt depinde de garnitura cromozomal a zigotului care se formeaz n urma fecundaiei. cariotipul constituie un criteriu important n identificarea multor specii = ordonarea cromozomilor din setul cromozomal caracteristic unei anumite specii, n perechi omoloage n funcie de mrimea, forma lor cariograma (idiograma) = reprezentarea schematic, grafic a cromozomilor din cariotipul unei specii pe baz de msurtori permit analiza cromozomilor importan: n cercetrile de genetic, taxonomie, ameliorarea plantelor, animalelor Cromozomii umani sunt descrii, fotografiai, ordonai i clasificai, dup sistemul Denver, n 7 grupe notate de la A la G, n ordinea mrimii lor cariograma (idiograma) = distribuia ordonat a cromozomilor omologi metafazici sub forma unei diagrame, n funcie de criterii morfologice: - forma, lungimea, poziia centromerilor, prezena sataliilor, numrul de benzi. Cromozomii apar bandai datorit unei metode de colorare (bandare cromozomial) se bazeaz pe afinitatea diferit a poriunilor cromozomiale pentru un anumit colorant: pe cromozom apar benzi ntunecate ce alterneaz cu benzi luminoase. Numrul de benzi este identic pe ambii cromozomi omologi, dar diferit fa de celelalte perechi de cromozomi. Ex. de tehnici de bandare: - mBAND (tehnica de bandare multicolor) rol n identificarea anomaliilor cromozomiale - tratarea cromozomilor metafazici cu florocrom i observarea n lumin fluorescent - bandare prin colorare cu soluie Giemsa Cromozomii umani pot avea 400 850 de benzi Cromozomii umani pot fi clasificai n 7 grupe (sistemul Denver): - A cromozomii 1 3, metacentrici, submetacentrici cei mai mari cromozomi - B cromozomii 4 5, submetacentrici - C cromozomii 6 12, metacentrici i submetacentrici - D cromozomii 13 15, acrocentrici - E cromozomii 16 18, metacentrici i submetacentrici - F cromozomii 19 20, metacentrici mici - G cromozomii 21 22, acrocentrici, cei mai mici cromozomi cromozomul X aparine grupei C cromozomul Y aparine grupei G ntregul set de cromozomi caracteristici speciei = compelment cromozomial st la baza alctuirii cariotipului: la om 2 seturi de cromozomi (23 de perechi) unul de origine patern i unul matern Hrile genetice = reprezentarea grafic a aarnjamentului genelor n cromozomi Hrile cromozomiale = reprezentarea grafic (n form liniar) a unui grup linkage sau cromozomilor n care poziia genelor sau a markerilor genetici este indicat n funcie de distanele relative dintre ele. Harta citologic a cromozomilor (harta fizic) = prezint poziia unui locus sau a unei gene pe cromozom se ntocmete cu ajutorul tehnicilor de bandare a cromozomilor

12

MUTAGENEZ, TERATOGENEZ I CARCINOGENEZ


I. MUTAGENEZ = procesul de producere a mutaiilor MUTAIA = fenomenul prin care se produc modificri n structura i funciile materialului genetic, care nu sunt consecina recombinrii genetice; se produce sub aciunea factorilor mutageni Clasificarea mutaiilor: Mutaiile pot fi: dup modul de apariie: naturale , spontane, fr intervenia omului ex. rasa de oi cu picioare scurte Ancona artificiale (cu frecven mare) induse experimental, prin utilizarea fatorilor mutageni (fizici, chimici, biologici) din punct de vedere al efectului lor (asupra viabilitii organismului): folositoare (foarte puine) sunt viabile au un rol n apariia de noi specii = speciaie neutre duntoare (majoritatea) sunt de obicei letale; ex. plantele albinotice n funcie de tipul de celule n care apar: mutaii gametice se transmit ereditar mutaii somatice induc organismului n care au aprut o structur mozaicat (ex. uvie de pr alb la un om tnr) afecteaz doar anumite pri ale corpului dup modul de manifestare: dominante recesive codominante letale dup localizare: autozomale heterozomale n funcie de nivelul de organizare al materialului genetic afectat (dup cantitatea de material genetic implicat): mutaii genice = modificarea structural a unei singure gene afecteaz un numr redus de nucleotide cea mai mic mutaie = MUTAIE PUNCTIFORM (o pereche de nucleotide) la nivelul segmentelor de gene pot avea loc: nlocuiri/ substituia, pierderi/ deleia, adugiri/ adiia , inversii i inseria unei perechi de nucleotide care duc la modificri ale informaiei ereditare mutaii cromozomale = modificri n forma i structura cromozomilor (rearanjri ale unor fragmente) la nivelul cromozomilor pot aprea: MUTAII STRUCTURAL CROMOZOMALE: - deleii (pierderi, deficien) de segmente cromozomale/ cromatidice - duplicaii ( dublri) de segmente cromozomale - inversii (inversri) de segmente cromozomale - translocaii (nlocuiri) de segmente cromozomale/ cromatidice ntre cromozomi neomologi mutaii genomice = modificri ale setului haploid de cromozomi n celulele somatice duc la apariia fenomenelor de: - poliploidie = mrirea numrului setului de cromozomi 3x, 4x, 5x etc. MUTAII NUMERIC CROMOZOMALE: - aneuploidie = prin erori de separare a cromozomilor omologi pereche n meioz, prin non-disjuncie, se formeaz organisme cu 2n-1, 2n-2, 2n+1, 2n+2 cromozomi Factorii mutageni = factori care induc modificri n structura i funciile matarialului genetic Mutaiile se produc sub aciunea unor factori = ageni mutageni. 1) ageni mutageni fizici:

13

diferite radiaii: ionizante radiaii electromagnetice (raze Rntgen sau X, raze gamma, alfa, beta) i corpusculare (electroni, protoni, neutroni): efect - fragmentarea cromozomilor / cromatidelor neionizante (raze ultraviolete, infraroii): efect - ionizarea abzelor azotate n timpul replicrii ADN, determinnd mperecheri aberante de tipul T-G i G-T sau T-T. cosmice modificri n structura i funciile acizilor nucleici, ncetinirea sau blocarea mitozei, sterilitate, moarte; !!! au efect cancerigen i teratogen (apariia unor malformaii n cursul vieii intrauterine) Unele leziuni produse de radiaii la nivelul ADN-ului sunt reparate cu ajutorul unor complexe enzimatice specifice, prin procesul reparator al ADN. - variaii brute de temperatur (ocuri termice reci sau calde) - fora de acceleraie 2) ageni mutageni chimici: - acidul nitros (HNO2) - unii colorani - unele medicamente (antibiotice, steroizi, narcotice, atropin, nicotin); ex Talidomida - ageni alkilani (iperita, colchicina, dietilsulfatul, etilmetansulfonat): efect fragmentarea macromoleculei de acizi nucleici, erori de replicare a acizilor nucleici, eliminarea bazelor azotate purinice din acizii nucleici, inhibarea fusului celular cu blocarea diviziunii celulare - pesticide - cofein n cantiti mari aceste substane blocheaz sinteza acizilor nucleici i inhib asamblarea fusului de diviziune, induc multiplicarea eronat a ADN-ului, substituirea sau inversia segmentelor cromozomale !!! ca i agenii mutageni fizici, cei chimici au efect cancerigen i teratogen. 3) ageni mutageni biologici - virusuri: rubeolei, oreionului, hepatitei, herpesului, HIV, oncovirusuri (ageni cancerigeni) - unele microorganisme parazite : micoplasme (bacterii primitive) - uneori: excreii ale unor insecte sau substane produse de unele plante (pelinul) sau ciuperci necomestibile pot avea efect mutagen determin alterri ale informaiei genetice, restructurri cromozomale sau transformarea celulelor normale n celule tumorale. efecte: tumori, sarcoame, leucemii La porumb i bacterii s-au descris aa numitele GENE SRITOARE = TRANSPOZONI (elemente genetice mobile) care se pot desprinde dintr-un anumit loc din cromozom i s se integreze n alt loc, n acelai cromozom sau n alt cromozom: determinnd inactivarea / activarea unor gene alternd structura i funcia genelor (devenind ageni mutageni) II. TERATOGENEZA = unele mutaii pot determina n cursul dezvoltrii intrauterine apariia unor malformaii la embrion / fetus Agenii teratogeni = orice factor de mediu care acioneaz asupra ftului uman, determinnd anomalii congenitale. - acioneaz i interfereaz cu procesele de embriogenez n timpul formrii primordiilor diferitelor organe (n primul trimestru de sarcin) Exemple: - radiaii ionizante (radiaiile X) - carene alimentare - unele medicamente - substane chimice toxice - teste hormonale efectuate n cursul sarcinii - consumul mare de alcool, droguri - infecii virale materne (rubeola) Producerea malformaiilor depinde de: - natura agentului teratogen

14

momentul organogenezei n care acioneaz durata expunerii la agentul teratogen doza acestuia particularitile genetice ale embrionului

III. CARCINOGENEZA = procesul prin care este indus cancerul: celual normal devine celul canceroas CANCERUL = o tulburare a diviziunii celulare care se declaneaz atunci cnd celula normal crete i se dezvolt necontrolat i invaziv ducnd la proliferarea necontolat a celulelor TUMORI = neoplasme: circulaia sg/limfatic tot corpul (metastaze). Tipuri de cancere: Tumora: benign malign metastaz Cancerul care se formeaz n: - epitelii = carcinom - esutul mezenchimal = sarcom - globule albe = leucemie - esutul limfoid = limfom - celulele plasmei i ale mduvei osoase = mielom Agenii carcinogeni muli sunt i ageni mutageni: - diferite substane chimice (ex din fumul de igar) - radiaii ionizante i neionizante - particule de siliciu i azbest - virusuri oncogene (ex Papiloma virus cancer de col uterin) - unii factori ereditari - stresul Cauza producerii cancerelor: instabilitatea genetic a populaiei de celule la nivel genic, cromozomial (structural sau numeric). Se manifest prin: creterea nr. de mutaii amplificarea genelor rearanjamente cromozomiale aneuploidie Celulele canceroase = mutante ale celulelor normale produse de diferite tipuri de gene: - proto-oncogene - gene supresoare ale tumorii (antioncogene) - gene ale reparrii leziunilor din ADN 1) Proto-oncogenele - se afl n mai muli cromozomi din genom - active n stadiile timpurii ale dezvoltrii - prin mutaii pot deveni oncogene active - proto-oncogenele pot fi activate prin: translocaii amplificri genice mutaii punctiforme 2) Gene supresoare ale tumorii (antioncogene) supresori tumorali - proteine care determin blocarea creterii i proliferrii celulare (inhib diviziunea celular) / apoptoz (moarte celular) - sunt activate de: deleii ntinse (pierderea unui segment de cromozomi) deleia unor nucleotide (mutaii genice) hipermetilarea unor baze azotate 3) Gene ale reparrii leziunilor din ADN

15

ANOMALII CROMOZOMIALE ASOCIATE CANCERULUI 1) Mutaii genomice ANEUPLOIDIE fenomen caracteristic cancerului POLIPLOIDIE 2) Mutaii cromozomiale TRANSLOCAII = transferul reciproc sau nereciproc al unor segmente ntre cromozomii neomologi repoziionarea genelor din cromozomi (producerea unei translocaii e condiionat de pierderea telomerului) 3) Mutaii punctiforme i amplificarea genic - pot activa proto-oncogene - amplificarea unei proto-oncogene n celula canceroas 4) Implicarea situsurilor fragile n cancer Situsurile fragile = regiuni ale cromozomilor unde cromatina nu este condensat n timpul mitozei lacune mono/ bicromatidice, fragmente libere, structuri inelare 5) Mutaii citogenetice adiionale mutaii structurale (mutaii cromozomiale) sau numerice (aneuploidii) Producerea cancerului (carcinogeneza) are loc n mai multe etape: - iniierea = apariia de mutaii n celulele somatice - dezvoltarea i progresia = proliferarea celulelor mutante n evoluia tumorilor exist mai multe stadii: stadiul 0 = cancer in situ celulele canceroase se localizeaz n esutul n care s-au format stadiul I = celulele canceroase invadeaz 1 2 straturi de esuturi locale nvecinate stadiul II = celulele canceroase invadeaz regiunea nvecinat fr a ptrunde n vasele limfatice stadiul III = intrarea n sistemul limfatic stadiul IV = apariia metastazelor (tumori secundare) Direcii de tratare a cancerului: - medicamentos (s interacioneaz cu enzimele) - ntreruperea vascularizaia tumorilor - terapie genic de nlocuire a oncogenelor i antioncogenelor cu alelele lor normale

DOMENII DE APLICABILITATE I CONSIDERAII BIOTICE N GENETICA UMAN


SFATUL GENETIC = consilierea viitorilor prinilor privind probabilitatea i riscul de a avea urmai afectai de o maladie genetic. Exist 3 categorii de factori care recomand solicitarea sfaturilor genetice: 1) factori de cuplu: - infertilitatea - dup dou / mai multe avorturi spontane - nainte de a dona ovule, sperm sau embrioni - existena unei maladii genetice la unul din viitorii prini - dac mama depete 35 de ani, iar tatl depete vrsta 45 de ani - suspiciuni de posibile anomalii fetale ca: printe cu tulburri neurologice, depresiv, alcoololic, diabetic, dependent de droguri sau sub tratament pentru o maladie cronic 2) factori de familie a cuplului: - descendeni cu anomalii psihoneuronale, cromozomiale, somatomotorii - decese premature ale descendenilor sau ascendenilor - rude afectate de maladii genetice - frecvente cazuri de cancer n familie 3) factori diveri: - apartenena prinilor la un grup etnic sau geografic cu inciden mare a bolilor genetice - teama prinilor de a avea un copil cu o afeciune genetic - existena sarcinii n urma unui viol sau incest 16

- un grad de rudenie ntre viitorii prini (veri primari, secundari) Dup examenul clinic i analiza pedigreului familiilor medicii recomand efectuarea unor teste.

DIAGNOSTICUL PRENATAL - vizeaz examinarea embrionului i ftului n vederea supravegherii evoluiei sarcinii i identificrii unor eventuale anomalii. Dup riscurile cele implic: 1) metodele neinvazive - ecografia = analiza cu ultrasunete, permite: determinarea locului implantrii embrionului numrul de embrioni dintr-o sarcin vrsta sarcinii ritmul de cretere a ftului morfologia i sexul ftului volumul lichidului amniotic 2) metode invazive - implic un risc ce poate s provoace afeciuni ftulu, mamei sau chiar un avort biopsia esutului din corion n primul trimestru de sarcin analiza celulelor corionului care au acelai material genetic cu al ftului permite detectarea anomaliilor cromozomiale (Sdr Down) i anomalii genetice metabolice (anemia falciform) amniocenteza analiza lichidului amniotic - n al doilea trimestru de sarcin: obinerea de celule fetale pt analiza cariotipului (detectarea de maladii cromozomiale sau genetice) puncia n cordonul ombilical pentru obinerea unor probe de snge fetal cnd exist suspiciuni a unor afeciuni de tipul hemoglobinopatiilor, defecte de coagulare sau infecii virale ale ftului FERTILIZAREA IN VITRO (FIV) crearea omului n afara corpului uman - este recomandat numai dup ce un cuplu este dovedit infertil Se fac urmtoarele proceduri: 1) aplicarea unui tratament zilnic cu substane care stimuleaz ovulaia (se aplic femeii care furnizeaz ovocitele) 2) extragerea laparoscopic a ovocitelor 3) ovocitele plasate ntr-un vas Petri ntr-un mediu de cultur special - sunt puse n contact cu spermatozoizi i sunt incubate 24 de ore celulele ou 4) celulele ou sunt introduse ntr-un mediu de cultur pentru a se divide, devenind embrion. 5) Dac celulele ou se dezvolt normal, 4 dintre ele sunt introduse n uter CLONAREA TERAPEUTIC = tehnic prin care se obin copii identice de celule cu acelai material genetic - utilizarea de celulele stem = celule capabile s se diferenieze ntr-o mare varietate de tipuri de celule - clonarea ADN pentru producerea unui numr mare de gene identice (genele pot fi ale unei celule somatice sau ale unei celule embrionare) Prin diveri vectori, genele clonate pot fi introduse n genom pentru a nlocui gene mutante disfuncionale sau pot fi introduse n bacterii. TERAPIA GENIC - presupune intoducerea unui material genetic n celule cu scop terapeutic: nlocuirea genelor anormale cu cele sntoase n transportul i inserarea genelor sntoase se utilizeaz: - vectori naturali ca virusurile 17

vectori artificiali particulele de ADN mbrcate n lipide

18