Speciile genului Trichoderma sunt rspndite pe suprafaa produselor de origine vegetal, produc celulaze care transform compuii macromoleculari

n celobioz, glucoz i alte zaharuri fermentescibile. Trichothecium rozeum, formeaz pe produsele de panificaie colonii prfoase pulverulente de culoare roz portocalie, sintetizeaz amilaze. Genul Scopulariopsis cuprinde specii care produc mucegirea produselor vegetale i animale. Dac se dezvolt pe brnz conduc la apariia de pete roiatice inestetice. 2.2.3 Bacterii Definiie. Rspndire Caractere morfofiziologice generale. Caractere coloniale Structur intern i extern. Structuri extraparietale Reproducerea i sporularea bacteriilor Criterii de clasificare general a bacteriilor Bacteriile - microorganisme monocelulare de tip procariot care posed un singur cromozom dispersat n citoplasm i care se reproduc asexuat prin sciziune binar (divizare n dou pri identice). Bacteriile reprezint prima form de via aprut pe Terra. Rspndire Ca urmare a capacitii de adaptare la condiiile de mediu, n cursul evoluiei i a seleciei naturale, bacteriile s-au rspndit i n prezent se gsesc n cantiti mari n toate mediile naturale. n sol bacteriile au un rol foarte important n mineralizarea compuilor organici cu formarea unor sruri (azotai, sulfai, fosfai) folosite n nutriia autotrof a plantelor. Actinomicetele confer pmntului culoarea nchis. Numrul bacteriilor din ap variaz: 10 bacterii/cm3 n apa de izvor i 1012 bacterii/cm3 n apa de splare a cerealelor. n regnul vegetal bacteriile fac parte din microflora epifit a plantelor, din microflora rizosfer a plantelor - zona rdcinii foarte bogat n substane nutritive. O parte din bacterii sunt parazite i conduc la bacterioze obturnd vasele liberolemnoase i conducnd la ofilirea plantelor. Bacteriile s-au adaptat i condiiilor regnului animal. n organism, microorganismele au rol n degradarea bolului alimentar, stimuleaz sistemul imunitar al organismului. Din microflora intestinal sunt eliminate mpreun cu materia de dejecie cu un coninut de 109 bacterii/gram. n rumenul animalelor erbivore s-au adaptat i exist bacterii capabile s degradeze celuloza. Unele bacterii sunt parazite i

21

se cunosc peste 300 de boli datorate acestora: tuberculoza, bruceloza, antraxul, tetanosul sunt cteva dintre acestea. Bacteriile sunt agreate de aer, rmn suspendate timp ndelungat, se fixeaz pe particulele de praf. Dintre ele o parte mor datorit radiaiilor ultraviolete. Bacteriile au o mare importan n industria alimentar: fie c stau la baza unor biotehnologii (bacteriile lactice folosite n industrializarea laptelui, bacteriile propionice folosite la obinerea brnzei Schweitzer i n panificaie, bacteriile acetice folosite la obinerea acidului acetic i alte specii folosite la obinerea de antibiotice, alcooli, enzime, hormoni, insecticide), fie au efecte negative (bacteriile de putrefacie, bacteriile productoare de toxine ce pot conduce la toxiinfecii alimentare, bacteriile patogene). Caractere morfofiziologice generale Formele de baz ale celulelor bacteriene sunt: sferic, cilindric, curbat, spiralat, iar prin scindare pot rezulta forme derivate.

1) Forma sferic - Coccus vertical: Diplococcus

, cu formele derivate - scindare n plan , Streptococcus , scindare

n plan orizontal: Tetrade planuri: Sarccina

(genul Pediococcus), scindare n ambele (pachete de 8 celule). Cnd scindarea are loc n

plan neordonat se formeaz aglomerri de celule ntlnite la genul Staphilococcus. 2) Forma cilindric - Bacil , cu formele derivate - diplobacterii i streptobacterii

3) Forma curbat se ntlnete mai ales la bacteriile patogene: vibrio spirilum spirochete 4) Forme filamentoase. Caracterele coloniale Profilul coloniei dezvoltate pe un mediu nutritiv solidificat poate fi lenticular, triunghiular. Perimetrul coloniei este fie circular, circular franjurat, sau rizoidal. Coloniile sunt de tip S (smooth) - neted, lucios; de tip R (rough) - aspru, granulat, de tip M (mucoid).

22

n medii lichide, sub form de culturi staionare, bacteriile aerobe rmn asociate prin scindare, formnd voal fin, cutat, ascendent pe pereii vasului, care poate avea aspect gelatinos (bacterii acetice). Bacteriile anaerobe (bacteriile lactice) produc tulburarea persistent a mediului. Unele colonii sunt pigmentate, cu nuane bej, crem, brun, roz spre rou sau chiar albastru, galben-auriu. Funcie de necesitatea de oxigen, bacteriile se clasific n: Bacterii: - aerobe (bacteriile acetice, de putrefacie), se dezvolt la suprafaa solului, a alimentelor; - facultativ aerobe - altereaz lichide ca vinul, berea, laptele; - anaerobe - degradeaz n profunzime solul i alimente cum ar fi conservele; Din punct de vedere a temperaturii de dezvoltare bacteriile se clasific n: Bacterii: - mezofile (domeniul de temperatur 20 - 40oC) - marea majoritate; - termofile - se gsesc n apele termale; - psihrofile - se gsesc n produsele conservate prin congelare. Bacteriile se dezvolt pe ntreg domeniul de pH, dar optim este valoarea pH = 7. n alimente, bacteriile se prezint sub dou forme: - forma vegetativ - foarte activ n stadiul de cretere i reproducere; - forma sporulat - caracterizat de o stare latent n care metabolismul este redus; se conserv toate proprietile bacteriilor pn cnd apar condiii favorabile germinrii sporilor i apariiei formei vegetative. Structura intern a celulei bacteriene Celula bacterian este o celul de tip procariot caracterizat prin absena organitelor intracelulare, libere de membran, cu acidul nucleic dispersat n citoplasm n lipsa unui nucleu propriu-zis. Peretele celular are o structur complex, asigur form i rezisten mecanic celulei i are rol funcional n procesul de sciziune. Este alctuit din dou substraturi: substratul bazal; substratul structurilor specifice a crui compoziie determin ca grupe mari de bacterii s se comporte diferit la colorare. Din acest punct de vedere, bacteriile se clasific n: - bacterii Gramm pozitive - grosimea stratului specific este 0,02 - 0,06 m; acestea rein mai bine colorantul primar; - bacterii Gramm negative - grosimea stratului specific este de 0,01 m; colorantul primar nu este reinut, se dizolv uor n solveni, iar pentru studiul microscopic este necesar o colorare secundar. - bacterii AAR (acidoalcoolorezistente) - cum este de exemplu bacilul tuberculozei cu un strat specific ce le confer rezisten mrit la aciunea acizilor i alcoolilor. Colorarea acestor bacterii presupune un tratament
23

prealabil care s permit permeabilizarea peretelui celular i ptrunderea coloranilor. n interiorul peretelui celular se gsete membrana citoplasmatic - la bacteriile G (+) strns asociat cu peretele celular, iar la bacteriile G (-) distanat de spaiul periplasmic. n interiorul membranei citoplasmatice se gsesc dispersai: aerozomi, ribozomi, i alte incluziuni de natur organic cu rol n creterea i dezvoltarea celulei. Structuri extraparietale Pe lng structura celular propriu zis, la bacterii se formeaz i structuri externe, extraparietale. Glicocalix - un strat protector care mrete rezistena bacteriilor i se ntlnete la bacteriile G (+). Capsula - un strat protector de dimensiune variabil care protejeaz celula de deshidratare i-i mrete rezistena la factorii chimici. Capsulele sunt de mai multe tipuri: - microcapsul - start omogen uniform repartizat n jurul celulei; - strat mucos; - zooglee - foi gelatinoase ce leag ntr-o mas mai multe celule. Cilii sau flagelii sunt formaiuni filamentoase ce constituie organul de locomoie al bacteriilor mobile. Reproducerea i sporularea bacteriilor n prezena unui mediu ce conine substane nutritive uor asimilabile n concentraie apropiat cu cea intracelular, la un pH i o temperatur favorabile, are loc cu mare rapiditate creterea n volum a celulei, ca urmare a biosintezei de compui celulari i declanarea procesului de sciziune binar - proces de reproducere caracteristic tuturor bacteriilor. n condiii nefavorabile, celulele genereaz formaiuni intracelulare denumite endospori. Dintr-o celul vegetativ se formeaz un singur endospor care pstreaz toate caracterele genetice ale bacteriei i, n condiii favorabile, prin germinare, va forma o celul vegetativ. Din acest punct de vedere, bacteriile se clasific n: - bacterii asporogene - nu produc spori (bacteriile lactice, acetice); - bacterii sporogene (bacterii din genul Bacillus, Clostridium). Etapele sporulrii: - plierea membranei protoplasmatice cu formarea protoplastului; - separarea protoplastului; - protejarea protoplastului prin plierea membranei protoplasmatice a celulei mam; - maturizarea endosporului.

24

Caractere specifice endosporilor: - termorezisten - formele vegetative sunt inactivate la 80oC - 10 min., iar endosporii rezist chiar cteva ore la fierbere; - rezisten la uscciune, n timp (pot rezista i 320 ani); - germinarea are loc n etape: absorbia de ap i umflare, activarea enzimelor, formarea de tuburi germinative, eliberarea celulei vegetative. Criterii de clasificare general a bacteriilor Clasificrile bacteriilor se realizeaz dup anumite criterii de baz: 1) - caractere morfologice; 2) - afinitate tinctorial. Pentru a determina afinitatea tinctorial se recurge la colorarea difereniat propus de Gramm: Etapele colorrii Gramm: I Executarea frotiului colorat i uscat - celulele de bacterii sunt plasate sub form de suspensie, n pictur, pe lam; - etalarea, deshidratarea i fixarea bacteriilor prin trecerea lamei prin flacra becului de gaz; II Colorarea cu violet de genian i eliminarea colorantului, adugarea de mordant (soluie Lugol); III Diferenierea - pe frotiu se adaug amestecul de solveni - alcool + aceton care solubilizeaz i elimin colorantul de celule bacteriene G (-); IV Colorarea suplimentar cu fuxin ce ptrunde numai n celulele libere de colorantul anterior, astfel nct ntr-un frotiu n care avem bacterii cu afiniti diferite, prin parcurgerea metodei Gramm, microscopic, bacteriile G(+) se coloreaz n violet, iar cele G(-) se coloreaz n rou. 3) Modul de asimilare a zaharurilor; 4) Capacitatea de a hidroliza protidele; 5) Modul de comportare n prezena aerului; 6) Temperatura optim de cretere; 7) Rezistena la antibiotice; 8) n cazul bacteriilor patogene se recurge i la teste serologice.

25