esutul nervos

Structur , ultrastructur , organizare func ional

Istoric

http://nobelprize.org

Istoric

http://nobelprize.org

Principii - S Ramn y Cajal

1. Celularitate Celula nervoas este elementul func ional i structural fundamental al creierului. 2. Comunicare sinaptic Termina iile unui neuron comunic cu dendritele altui neuron prin structuri specializate, denumite ulterior sinapse de c tre Sherrington.

Principii - S Ramn y Cajal

3. Specificitatea conexiunilor Neuronii nu formeaz sinapse n mod aleator. 4. Polarizare dinamic Semnalele dintrun circuit neural se propag ntr-o singur direc ie [] Informa ia circul dinspre dendritele unui axon nspre corpul celular i apoi de-a lungul axonului c tre termina iile presinaptice []
E Kandel, In Search of Memory: The Emergence of a New Science of Mind. W. W. Norton & Company, 2006

Istoric

http://nobelprize.org

1. Celularitate

esutul nervos este alc tuit din neuroni interconecta i (circuite) i celule gliale, cu rol de suport. Totalitatea esuturilor nervoase formeaz sistemul nervos. Clasificare: sistem nervos central i periferic.

1. Celularitate

Regiuni distincte ale sistemului nervos alctuiesc, mpreun cu structurile asociate (teci conjunctive, vase de snge) organe: SNC: m duva spin rii i encefal (telencefal, diencefal, trunchi cerebral) SNP: ganglioni (senzitivi i vegetativi) i nervi

1. Celularitate Neuronul

Dendrite

Perikarion (soma, corpul neuronal)

Axon

Structura neuronilor
Dendrite Corpi Nissl Sinaps Perikarion Conul de emergen Axon al altui neuron

Segment axonal ini ial Oligodendrocit Nod Ranvier SNC SNP

axonal

Teac de mielin Ram axonal colateral Axon Celul Schwann

Ram colateral al arboriza iei terminale

Plac mototrie
LC Junqueira, Basic histology, Ed. 9

Perikarionul

Corpi Nissl la baza dendritelor, nu i n conul axonal REN abundent Aparat Golgi - bine dezvoltat Vezicule delimitate de endomembrane Lizozomi Mitocondrii Pic turi lipidice

LC Junqueira, Basic histology, Ed. 9

Perikarionul

Incluziuni Pigmentare
Lipofuscina Neuromelanina Corpi Marinesco (incluziuni nucl.)

Hialine

SE Mills, Histology for Pathologists, Ed. 3

Perikarionul

Nucleu mare, rotund, eucromatic, veziculos Nucleol vizibil Centrioli - rol n organizarea microtubulilor. Citoscheletul este alc tuit din:
microtubuli i proteine asociate (MAP) filamente intermediare (neurofilamente) microfilamente actin .

Neuropil

Dendritele

Prelungiri ale somei preiau i integreaz informa ia Con in corpi Nissl i organite, abundente la baza dendritei i din ce n ce mai pu ine distal (diametru descresc tor); elemente de citoschelet. Transport dendritic anterograd (10 Qm/h) pentru proteine i organite, dar i retrograd. Spini dendritici - specializ ri cvasipermanente care primesc sinapsele excitatorii.

Spinii dendritici

Pn la 40.000/neuron. 0,5-1 Qm. Aparatul spinului stive de cisterne REN Con in i actin , poliribozomi, vezicule cu neurotransmi tori i vezicule de endocitoz Domenii specializate n recep ionarea semnalelor sinaptice, ce i modific morfologia Implicate n poten area pe termen lung a transmiterii sinaptice (LTP). Plasticitate sinaptic memorie, nv are
Annu Rev Neurosci 2007, 30:79

Axonul

Prelungire unic cu diametru constant conducerea unidirec ional a poten ialului de ac iune Con de emergen axonal integreaz informa ia primit de c tre neuron, declan eaz PA. Domeniu distinct dpdv molecular Segmentul de conducere - mielinic sau amielinic Arboriza ia terminal cu ramuri ce sfr esc n butoni

Ji et al., 2001. Molecular identification and sequence analysis of Hillarin, a novel protein localized at the axon hillock. Biochimica et Biophysica Acta 28:246-249

Axonul

Transportul axonal
Transport anterograd
lent al proteinelor i microfilamentelor (1 -3 mm/zi), intermediar (mm/h) al mitocondriilor i rapid (100-400 mm/zi) al veziculelor cu mediatori.

Transport retrograd al veziculelor delimitate de endomembran Proteine motorii: kinezina (anterograd) si dyneina (retrograd)
J. J. L. van der Want, Brain ResearchProtocols 1:269 (1997)

Polarizarea neuronului

Domeniu axonal i somato-dendritic

Cel. epitelial Motoneuron

Polarizare a moleculelor exprimate (receptorii NMDA, GluR) Sinapsele ~ jonc iunilor strnse, nu contribuie la men inerea polariz rii Diferen e: polul apical nu vine n contact cu mediul
C. G. Dotti, Cell, 62:63, 1990

Tipuri de neuroni

Num r de prelungiri: 1. N. bipolari c i senzitive:

n retin neuronii olfactivi

2. N. multipolari cei mai numero i 3. N. pseudounipolari un trunchi comun care se ramifica apoi in T. ggl. spinali senzitivi
LC Junqueira, Basic histology, Ed. 9

Tipuri de neuroni

Topografie: 1. N. senzitivi conduc informa ie c tre SNC 2. N. motori conduc informa ie dinspre SNC c tre cel. efectoare 3. Interneuroni interconecteaz al i neuroni

Tipuri de neuroni

Morfologie: 1. n. piramidali n. efectori ai cortexului: multipolari, perikarion mare, dendrit mare apical 2. n. granulari interneuroni mici 3. cel. Purkinje cerebel, dendrite f. ramificate

dendrit apical

dendrite

3
dendrite bazale

2 1

Tipuri de neuroni

Morfologie: 4. Cel. stelate ex.: cel amacrine starburstdin retin . Interneuroni.

Tipuri de neuroni

Lungimea axonului: N. de proiec ie (Golgi I) axon lung, senzitivi sau motori N. de asocia ie (Golgi II) interneuroni

nveli ul axonului: N. mieliniza i N. nemieliniza i

2. Comunicare sinaptic

Sinapsa jonc iune intercelular specific neuronilor Realizeaz transmiterea unidirec ional a impulsurilor nervoase, cel mai frecvent prin substan e solubile neurotransmi tori

Sinapse - clasificare

Cf. mecanismului de transmitere: Sinapse chimice (cu neurotransmi tori) Sinapse electrice (prin jonc iuni gap) - foarte pu ine n SNC Sinapse mixte (cuplaj intre sinapsa electrica si cea chimica). Sunt rare: http://www.itg.uiuc.edu nucleii vestibulari laterali, nucleii tractului mezencefalic al trigemenului.

Sinapsa chimica - MET

Elemente:
* * *
Mt M REN Buton presinaptic (axon): mitocondrie (M), vezicule sinaptice (*), REN, microtubuli (Mt), neurofilamente Zona activ Spa iu sinaptic, 20-30 nm, electronodens, cu filamente Elem. postsinaptic poate fi spin, dendrit , som , axon. Cu mitocondrii, neurofilamente

Material electronodens

Func ionarea sinapsei chimice

LC Junqueira, Histologie, Ed. 11

Func ionarea sinapsei chimice

Fig. 14-12, Principles of Neural Science 4th ed., Kandel ER et al, McGraw-Hill, 2000

Sinapse - clasificare

Clasificarea morfologic (ultrastructural ) Gray:

Sinapse asimetrice material electronodens mai gros pe memb. postsinaptic , spa iu sinaptic 30nm Sinapse simetrice material electronodens de grosime egal pe membr. pre- i postsinaptice, spa iu sinaptic 20nm

http://www.itg.uiuc.edu

Sinapse - clasificare

Aspectul veziculelelor sinaptice: V. clare, sferice, 40-60 nm acetilcolina V. clare, turtite, 20-60 nm neurotransmi tori inhibitori V cu miez dens, sferice, 40-60 nm catecolamine V cu miez dens, sferice, mari (80-100 nm) i halou clar neuropeptide

Sinapse - clasificare

Clasificarea morfofunc ional :

Excitatorii - asimetrice, cu vezicule, efect de depolarizare (cre terea PR) a membranei postsinaptice poten ial postsinaptic excitator (EPSP) Inhibitorii - simetrice, v. clare sferice sau turtite, efect de hiperpolarizare (sc derea PR) - poten ial postsinaptic inhibitor (IPSP) Tipul de receptori postsinaptici determin efectul transmiterii sinaptice

http://www.itg.uiuc.edu

Sinapse - clasificare

Sinapse continue (discoidale) morfologie uniform n sec iune Sinapse perforate mai multe zone electronodense n aceea i sinaps . Posibil rol n plasticitatea sinapselor i poten are pe termen lung (LTP) (Popov V. et al, Neuroscience 128:251, 2004)
http://www.mc.vanderbilt.edu

Sinapse - clasificare

Clasificarea topografic : 1. tipurile clasice (cele mai frecvente):

axospinoase (sinapsa se face cu spinul dendritic) - numai excitatorii axodendritice excitatorii sau inhibitorii axosomatice axoaxonice - numai inhibitorii (cu segmente nemielinizate ale axonului postsinaptic)

2. tipurile noi de sinapse (de regula inhibitorii):

dendritice dendro- somatice axonice somatodendritice somatice axonice

Sinapse - clasificare

Clasificarea topografic : 3. Sinapse speciale (particip concomitent mai multe prelungiri):

reciproce - dendrodendritice; 2 sinapse nvecinate ce conduc impulsul nervos n sens invers n panglic (n retina) - axodendritic ; particip 1 axon si 2 dendrite foarte apropiate intre ele; Axonul prezint pe linia median o densificare n form de panglic s. serial - axoaxonic ; o n iruire de sinapse axoaxonice

Sinapsa - MET

Sinaps dendro-dendritic . Se observ le te o sinaps cu D2

i un axon (A) ce stabi-

Neurotransmi tori

Mediatori chimici ai transmisiei sinaptice Au efect rapid (laten 1-2 ms) i localizat (sinaptic) Criterii
Sunt sintetiza i n neuron Prezen i n elementul presinaptic i elibera i n cantit i suficiente pentru declan area unui r spuns mediat de receptorii de pe versantul postsinaptic Administrarea exogen are efecte similare cu eliberarea endogen Exist mecanisme biochimice pentru inactivarea neurotransmi torilor din spa iul sinaptic

Sisteme de neuroni ce folosesc acela i neurotransmi tor: noradrenergic, dopaminergic, serotoninergic, colinergic

Neurotransmi tori

Neurotransmi torii NT inhibitori:

GABA (acid K-amino-butiric) glicina purine (adenozina, AMP, ADP, ATP)

NT excitatori
glutamat aspartat taurina

NT cu efecte dependente de tipul receptorului:

acetilcolina noradrenalina serotonina dopamina monoamine

Neuromodulatori

Durat mai mare a efectului, laten mai mare Ac iune mai pu in localizat (ac ioneaz asupra mai multor neuroni) O substan poate ac iona ca neurotransmi tor, neuromodulator sau neurohormon (uneori). Neuromodulatorii pot fi peptide comune cu sistemul neuroendocrin difuz: colecistokinina, Fendorfina, substan a P, angiotensina, VIP Efecte pe membrana presinaptic (moduleaz exocitoza) i postsinaptic influen eaz legarea mediatorilor de receptori

Neuropeptide

LC Junqueira, Histologie, Ed. 11

Func ionarea sinapsei

Un neuron folose te mai multe substan e neuroactive (ex.: acetilcolin i VIP) Aceea i molecul are efecte diferite n func ie de context (n principal tipul de receptor de care se leag )

Dopamina

Dopamina coexist n neuronii trunchiului cerebral cu peptide precum colecistokinina. Func ioneaz ca:
neurotransmi tor cnd este eliberat de neuronii din substantia nigra. neuromodulator: motiva ie, pl cere neurohormon eliberat din neuronii hipotalamici (nucleul arcuat) n adenohipofiza (inhib secre ia de prolactin )

Excit , inhib sau moduleaz activitatea celulei int , n func ie de natura receptorului din membrana postsinaptic .

Substan e neuroactive

Monoamine:
catecolamine - adrenalina, noradrenalina, dopamina; amine din triptofan - serotonina, triptamina

Aminoacizi: aspartat, glutamat, GABA, glicina, taurina Peptide:

ac ioneaz ca neuromodulatori: colecistokinina, endorfine, encefaline, substanta P, VIP actioneaza ca neurohormoni: LH-RH, TSH-RH, somatostatina, vasopresina

Purine: adenozina, AMP, ADP, ATP Gaze: NO (oxid nitric), CO

Fuziunea veziculelor sinaptice cu membrana presinaptic

Fig. 14-13, Principles of Neural Science 4th ed., Kandel ER et al, McGraw-Hill, 2000

Zona activ

presinaptic

Vezicule acoperite cu clatrin

Receptorul NMDA

NMDA (N-metil Daspartat) este agonist Rec. pt. glutamat, glicin (co-agonist) Necesit i depolarizarea membranei (eliminarea Mg++) Produce poten iale postsinaptice excitatorii Contribuie la plasticitatea sinaptic prin cre terea conc. intracelulare de Ca

LTP

Poten area pe termen lung a transmiterii sinaptice (LTP) Modificarea intensit ii poten ialului post-sinaptic (r spunsului) la stimul ri similare Specificic / asociativ (semnale convergente provenite din mai multe c i de semnalizare) Precoce (declan area NMDR, conductan a AMPAr) / tardiv (modificarea proteinelor postsinaptice prin fosforilare; transmiterea intracel. a semnalului modificarea nivelului de expresie a proteinelor sinaptice receptoare) Duce la modific ri morfologice ale sinapselor Implicat n memorie/nv are
Nat Rev Neurosci 2008, 9:813

Celularitate

Neuroni Celule gliale (neuroglie - Virchow, 1859)

SNC (+ celule ependimare)

Astrocit

Oligodendrocit

Celul microglial

SNP: celule Schwann, celule satelit

Corp celular Procese celulare

Dale Purves et al., Neurosciences: Third Edition, Sinauer Associates, 2004

Astrocite 20-50% din volumul creierului (celule gliale : neuroni 10:1) Tipuri morfologice: protoplasmice (subst. cenu ie) i fibroase (subst. alb ) Morfologie:
celule stelate, cu prelungiri (observabil folosind impregnare argentic , nu HE) nucleu rotund, eucromatic, f r nucleol

Astrocite - tipuri

Morfologie:
a. fibros subst. alb , prelungiri sub iri, pu in ramificate a. protoplasmatic subst. cenu ie, prelungiri mai groase, foarte ramificate

Astrocit fibros

Astrocit protoplasmic

Astrocite Ultrastructur :
filamente intermediare 8nm GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein); exist i prelungiri f r GFAP, n form de v luri granule de glicogen lamina bazal vezicule delimitate mb.

GFAP - imunofluorescen

200nm

GFAP - imunohistochimie

Astrocite alte tipuri

Arahnoid Pia mater

Glia limitans: situat subpial Prelungirile astrocitelor formeaz un strat continuu la periferia SNC Celule n candelabru, penate
Glia limitans

Astrocite alte tipuri

Glia radial Celule gliale prezente n cursul form rii structurilor SNC, cu morfologie bipolar n telencefal: o prelungire contacteaz suprafa a ventriculilor cerebrali, cealalt ajunge subpial Produce proteine de adeziune i ale matricei extracelulare Postnatal: celulele Bergmann n cerebel, celulele Mller n retin , glia radial a girului dentat hipocampic

Cerebel. Verde cel. gliale, ro u neuroni.

Lordkipanidze T. et al., Glia 51:229, 2005

Astrocite - citoarhitectur Astrocitele protoplasmatice sunt organizate n domenii ce nu se suprapun Sinapsele unui domeniu interac ioneaz cu un singur astrocit Modularea transmiterii sinaptice?
Cortex uman. Albastru nuclei, verde neuroni, ro u capilare, alb astrocite;
Oberheim NA et al., Trends Neurosci 29:547, 2006

Astrocite - citoarhitectur

Astrocitele vin n contact cu (aproape) toate componentele celulare ale creierului:

alte astrocite (jonc iuni gap) celulele ependimare neuroni (perikarioni, prelungiri, sinapse) oligodendroglie celulele endoteliale capilare

Astrocite citoarhitectur Astrocitele contacteaz capilarele din subst. cenu ie picioru e vasculare. Induc formarea i men in bariera snge-creier.

Kacem K et al., Glia 23:1, 1998

Astrocitele Astrocitele nu prezint PA, ci cre teri ale concentra iei intracelulare de Ca2+ (valuri de Ca2+) activarea c i de semnalizare intracelular Induse de neurotransmi tori elibera i (sinaptic i extrasinaptic) de neuroni ex. Glu rec. NMDA astrocitari. Al i receptori: adrenergici, purinergici, GABA Valurile se propag prin jonc iuni gap inter-gliale

Retin . Galben cre terea concentra iei intracel. Ca2+. Interval aprox. 6 sec.
Newman EA et al., Science 275:844, 1997

Func iile astrocitelor

1. Homeostazia mediului neuronal:

sechestrarea/redistribu ia K+ extracelular rezultat din PA neuronale ndep rtarea neurotransmi torilor din sinapse: preiau glutamatul sinaptic i l convertesc n glutamin butonul presinaptic. Protejeaz neuronii mpotriva excitotoxicit ii (apoptoz neuronal datorat angaj rii prelungite a receptorilor Glu n ischemia cerebral )

Func iile astrocitelor

2. Suport metabolic pentru neuroni:

Regleaz fluxul sangvin cerebral local Produc lactat prin glicoliz suport energetic pentru neuroni Sinteza precursorilor glutamatului i GABA Detoxifierea amoniului Produc factori trofici pentru neuroni NGF (Nerve Growth Factor), BDNF (Brain-Derived Neurotrophic Factor), GDNF (Glial-DNF) etc. Intervin n dezvoltarea SN, r spunsului regenerativ postlezional, dar i n condi ii bazale

Func iile astrocitelor

Stimularea neuronal aferent determin influx de Ca2+ n astrocite i vasodilata ie mediat de glutamat

nainte

n timpul
Zonta M et al., Nature Neurosci 6:43, 2003

Dup

Func iile astrocitelor

Mecanismul de reglare a fluxului sangvin local mediat de transmiterea sinaptic

Haydon PG et al., Physiol Rev 86:1009, 2006

3.

Astrocite a.
Modularea transmiterii sinaptice
Eliberare de substan e neuroactive: glutamat, taurin , ATP, peptide (enkefaline, endoteline) indus de valurile de Ca. Prezint vezicule de exocitoz i moleculele necesare procesului.

Vezicule exo/endocitoz n astrocite cultivate

200nm
Montana V. et al., Glia 54:700, 2006

Func iile astrocitelor

3. Modularea transmiterii sinaptice

b. Diminuarea concentra iei de neurotransmi tor n sinaps : Glu prin transportori, sau acetilcolin prin eliberarea de liganzi specifici

AChBP = acetylcholine binding protein

Smit AB. et al., Nature 411:261, 2001

Modularea transmiterii sinaptice

Montana et al., Physiol Rev 86:1009, Haydon PG V. et al., Glia 54:700, 2006 2006

Func iile astrocitelor

4. n dezvoltarea SN:
a. Glia radial (n special) ghideaz migrarea/cre terea axonal i dendritic .

Cerebel. Verde celule Bergmann, ro u celule Purkinje

Lordkipanidze T. et al., Glia 51:229, 2005

Func iile astrocitelor

4.

b.

n dezvoltarea SN:
Contribuie la sinaptogenez , favoriznd structurarea i activitatea sinapselor

Culturi celulare. Sinaptotagmina prot. presinaptic , PSD95 prot. postsinaptic

Ullian EM et al., Science 291:657, 2001

Func ii astrocite

4.

c.

n dezvoltarea SN:
Celule stem gliale i neuronale. n cursul dezv. SN glia radial se poate diferen ia n neuroni.

Noctor SC et al., Nature 409:714, 2001

Func iile astrocitelor

La om adult zona subventricular (pere ii laterali ai ventr. I i II, girul dentat) con ine celule ce se divid.

Band astrocitar ZSV

Sanai N et al., Nature 427:740, 2004

Girul dentat
Eriksson PS et al., Nature Medicine 4:1313, 1998

gfap

Func iile astrocitelor

5. n circumstan e patologice:
R spund la leziuni traumatice, inflamatorii, infec ii: astrocitoz /glioz Hipertrofia astrocitelor, cre terea cantitativ a filamentelor intermediare, proliferare Proliferare i n scleroza multipl

Glioz

Oligodendroglia Celule gliale cu prelungiri mai pu in ramificate Deriv din precusori comuni cu astrocitele MO:
form oval nucleu rotund, heterocromatic, halou perinuclear prelungiri pu ine, groase, pu in ramificate n apropierea corpilor neuronali (subst. cenu ie) interfasciculare (subst. alb ), dispuse n iruri

Oligodendroglia

ME:
citoplasm electronodens nu au lamin bazal mitocondrii, RER, microtubuli

Oligodendroglia - func ii Realizeaz nveli ul de mielin la nivelul substan ei albe a CNS. Exprim proteine specifice: MBP proteina bazic a mielinei (Myelin Basic Protein) Un oligodendrocit mielinizeaz mai mul i axoni: prelungiri lameliforme, turtite inta atacului autoimun n scleroza multipl
Junqueira LC, Basic histology text & atlas, 10 th ed, McGraw-Hill

Microglia

Celule asem n toare macrofagelor din alte esuturi. Sinonim: cel. Del-Rio - Hortega Proteine de suprafa similare macrofagelor (CD68, CMH clasa II) Deriv din precusori mezenchimali (hematopoietici) i nu din neuroectoderm MO i ME
form eliptic nucleu eliptic, heterocromatic prelungiri multe, sub iri lizozomi

Microglia - func ii Principalele celule mediatoare ale r spunsului imun la nivelul SNC n condi ii bazale prezint modific rii ale lungimii proceselor i endociteaz diferite elemente extracelulare Vin n contact cu astrocite, neuroni, capilare sangvine
Nimmerjahn A et al., Science 308:1314, 2005

Cortex. Verde microglie, ro u astrocite

Microglia - func ii

n inflama ii acute sau cronice ale SNC se activeaz i fagociteaz eventualele microorganisme. Pot ac iona ca i celule prezentatoare de antigen Produc factori neurotrofici i citokine ce influen eaz activitatea neuronal sau pot activa astrocitele Diferen ierea din precursori medulari poate avea loc i post-lezional

Constituen i SNC
Elemente celulare Soma Dendrite Axoni amielinici Sinapse Axoni mielinici Astrocite protoplasmatice Astrocite fibroase Oligodendrocite satelite Oligodendrocite interfasciculare Microglii Celule ependimare Substan a cenu ie + + + + +++ + + + Substan a alb + + +++ + + nveli ul ventricular + nveli ul subpial + + -