TITLU:

Elaborarea tehnologiilor de reproducere pentru speciile de pesti rare, periclitate sau amenintate cu disparitia

Etapa IX Transferul tehnologic al tehnologiilor de reproducere artificiala. Diseminarea materialului de populare obtinut DOCUMENTAIE DE TRANSFER TEHNOLOGIC A TEHNOLOGIEI DE REPRODUCERE ARTIFICIAL A SPECIEI ESOX LUCIUS TIUCA PREZENTAREA TEHNOLOGIEI 1.1. Obiect

Tehnologia elaborat vizeaz reproducerea controlat a speciei Esox lucius in vederea refacerii populatiilor naturale si introducerii i extinderii ei, n acvacultur. 1.2. Domeniul de aplicare

Potentialii beneficiari ai tehnologiei de reproducere sunt agentii economici care au ca obiect principal de activitate pescuitul si acvacultura. Tehnologia de reproducere artificiala devine aplicabila in momentul in care exista baza logistica necesara desfasurarii intregului flux tehnologic si se are in vedere urmatoarele : - Loturi de reproducatori masculi si femele care s constituie baza biologic pentru realizarea reproducerii i obinerea descendenelor de diferite vrste; - Bazine pentru parcarea, prematurarea si maturarea reproducatorilor nainte i dup stimulare hormonala ; - Statie de reproducere artificiala cu toate dotarile necesare : module parcare reproductori, platform pentru fecundare, aparate de incubatie caracteristice fiecarei specii, cazi si bazine de cresterea puilor in primele faze de dezvoltare postembrionara, minilaborator. 1.3. Cerinte de mediu inconjurator Tehnologiile elaborate nu prezinta elemente poluante pentru mediu. Substantele folosite sunt omologate si acceptate in UE si nu afecteaza materialul biologic si nici parametrii chimici ai apei. Apa tehnologica rezultata se incadreaza in parametrii Ord. 161 / 2006 . Riscul evadarii materialului biologic este exclus, sistemul tehnologic fiind prevzut cu elemente de siguranta, site la incintele de incubatie si la conductele de evacuare a apei tehnologice.

2. CONDIII TEHNICE DE APLICARE A TEHNOLOGIEI 2.1 Sistem tehnologic pentru reproducerea artificial a speciei Esox lucius Reproducerea artificial a speciei Esox lucius se poate realiza n orice ferm, pepinier piscicol, care ntrunete urmtoarele condiii : - alimentarea s se fac dintr-o surs de ap care are un debit permanent i relativ constant i care este ferit de orice surs de poluare; - temperatura apei s se menin la valori constante n perioada de reproducere, pentru a asigura desfurarea n condiii optime a procesului tehnologic; - apa s prezinte caracteristici fizico-chimice ale unei ape bune din punct de vedere piscicol. Pentru desfurarea operaiunilor de reproducere artificial la tiuc i alte specii de peti, sistemul tehnologic de reproducere artificial cuprinde urmtorele construcii,instalaii i dotri : bazine de prematurare, bazine de maturare, staie de incubaie, platform pentru realizarea lucrrilor de colectare a produselor sexuale i a fecundrii, minilaborator pentru monitorizarea parametrilor fizico chimici i biologic ai apei, n perioada de dezvoltare embrionar i postembrionar, realizarea tratamentelor i de supraveghere a procesului de incubare i de dezvoltare postembrionar, bazin i sistem de alimentare cu ap a staiei de incubaie i de cretere n perioada de dezvoltare postembrionar a descendenelor. Aceste construcii se recomand a fi amplasate ct mai aproape una de alta, pentru a permite desfurarea rapid a lucrrilor. Sistemului tehnologic de reproducere artificial se va dimensiona n funcie de capacitatea de producie stabilit de utilizator i va asigura prin capacitatea sa reproducerea a minim 50 de familii pentru a asigura meninerea i conservarea biodiversitii genetice a speciei. Bazinele de prematurare (Fig. nr.1 ) sunt destinate parcrii reproductorilor de tiuc n perioada noiembrie martie respectiv, dup pescuitul i selecia din toamn, pn la nceperea lucrrilor de reproducere. Sunt bazine de pmnt, realizate n sptur, au de regul form dreptunghiular, suprafa cuprins ntre 1000 -2000 mp, maximum 3000 mp; adncimea este de 2,0m i debitul de alimentare este de 3-5 l/sec/ha. Adncimea de 2 m este absolut necesar pentru realizarea unui regim termic ct mai constant, deoarece bazinele cu adncime mic sunt expuse variaiilor de temperatur, care influeneaz negativ maturarea gonadelor . Alimentarea i evacuarea apei se realizeaz prin instalaii hidrotehnice denumite tehnologic cugri de alimentare, respectiv de evacuare. Instalaiile de alimentare i de evacuare se dimensioneaz astfel nct inundarea i vidarea s se poat face n circa 3 ore.

Fig. nr 1 Bazine de prematurare Sunt construcii de beton cu trei perei (Fig. nr.2), partea de deschidere fiind la cel de evacuare ctre bazin, iar la cel de alimentare ctre canalul de alimentare. Toate instalaiile vor fi prevzute cu dou rnduri de nie, pentru blocarea apei cu vanei i pentru montarea grtarelor sau sitelor n vederea filtrrii apei, cu scopul de a nu ptrunde alte specii slbatice i de a evita evadarea petilor din bazin. Clugrul este compus din: a) corpul vertical al clugrului; b) corpul orizontal al clugrului.

Fig. nr. 2 Clugr de evacuare Corpul vertical este compus din trei perei, (cu nlimea funcie de nalimea bazinului), radier i fundaia corpului. n interiorul corpului vertical, n afar de vanete, se mai gsesc site, instalate n nie proprii sau deasupra vanetelor,

depind nivelul de reinere a apei. Corpul vertical este acoperit cu un capac. Accesul la corpul vertical este asigurat, de o pasarel din beton armat. Corpul orizontal este compus dintr-o conduct din beton armat cu diametru variabil n funcie de volumul de ap tranzitat. Aceast conduct este aezat pe un postament din beton i face legtura ntre bazin i canalul de evacuare sau alimentare dup cum se observa n fig.3. Funciile clugrului sunt urmtoarele : regleaz i menine nivelul constant al apei; elimin n mod automat surplusul de ap; evacueaz apa din zona de fund; golete bazinul.

Fig. Nr. 3. Clugr n funciune 1 corpul barajului ; 2 coronament ; 3 pasarel ; 4 grtar ; 5 vanet ; 6 gur de fund ; 7 tub din beton ; 8 arip aval ; 9 canal de evacuare ; 10 fundaia corpului orizontal ; 11 fundaia corpului vertical ; 12 piloi din lemn Reinerea i reglarea nivelului de ap se realizeaz prin instalarea vanetelor, acestea scondu-se sau adugndu-se n funcie de cerinele tehnologice. Eliminarea surplusului de ap se face peste vanete, sub forma unei lame deversante. Evacuarea apei de fund se face prin admisia n corpul vertical a apei din zona fundului, prin gura amplasat n peretele frontal, la cota radierului. Cnd peretele vertical frontal lipsete, apa ptrunde ntre cele dou rnduri de vanete prin partea inferioar a primului rnd de vanete.

Golirea bazinului se face prin scoaterea treptat a vanetelor, sau a tuturor deodat i, n acest caz, corpul orizontal funcioneaz ca o conduct cu scurgere forat. Pentru a asigura golirea heleteului, clugrul se amplaseaz la cota cea mai joas. Pmntul pe care se construiesc bazinele s fie de natur argilo-lutos, aceasta nsemnnd un bun teren pentru practicarea pisciculturii i capacitatea de a reine apa n bazin cu rezisten la splare. Bazinele de maturare folosite la parcarea reproductorilor dup administrarea injeciei hipofizare, sunt construite din pmnt realizate n debleu i au suprafa de 20-30 mp i adncimea de 1m.(Fig.nr.1) Au alimentare cu ap permanent. Caracteristic este sistemul de alimentare i de evacuare a apei, modificat n vederea protejrii reproductorilor i anume : gura de alimentare este prevzut cu un manon de prelat lung de 1,2 1,5m, cu rol de a prelungi n interiorul bazinului punctul de alimentare , evitnd astfel traumatizarea reproductorilor. Gura de evacuare are tubul orizontal amplasat cu 10 15 cm sub cota canalului colector, la o distan de circa 50 cm n interiorul bazinului, fa de baza taluzului. Deasupra acestei guri, pe fundul canalului colector, se fixeaz un grtar orizontal, format din vergele metalice aezate la distane de 3 4 cm. Gurile de alimentare i evacuare sunt astfel dimensionate nct bazinul s poat fi inundat i vidat n 20 30 minute. Intr-un bazin de maturare se introduc 15 20 reproductori.

Fig.nr.4 Bazine de maturare

Staia de incubaie va fi astfel construit nct s poat asigura o temperatur constant i s poat fi adaptat i utilizat la reproducerea mai multor specii de peti Dimensiunile construciei sunt determinate de numrul i tipul incubatoarelor si de dimensiunea bazinelor folosite la creterea larvelor . Lungimea obinuit a salii de incubaie este de 40 - 50 m i limea de 10-12 m. minilaborator prevzut cu microscop, lup binocular, cntar electronic, aparate de msur i control al parametrilor chimici i biologici ai apei, de asemenea, inventarul specific reproducerii artificiale (sticlrie de laborator, seringi, tifon, finet, vase de colectare a produselor seminale, recipienti din plastic de diverse dimensiuni, etc.); platforma pentru efectuarea lucrrilor de colectare a produselor sexuale i a fecundaiei prevzut cu mese pentru aezarea vaselor n care se repartizeaz icrele pentru fecundaie, cntarul electronic i alt rnd de mese, aezate n lungul instalaiilor de alimentare cu ap care sunt folosite ca suport pentru vasele de prelucrare a produselor sexuale; aparate de incubaie adaptate n funcie de caracteristicile bioreproductive ale fiecrei specii i tipului de pont. Module pentru parcare, maturare reproductori; Bazine pentru parcare i cretere larve . Sistem de alimentare, distribuie, reglare i evacuare a apei tehnologice. Magazie pentru depozitarea temporar a diverselor materiale i instrumente auxiliare

Fig. nr. 5

Vedere de amsamblu a staiei de incubaie

2.1.1. Descrierea i realizarea instalaiei de incubarea a icrelor de tiuc Instalaia de incubare a icrelor de tiuc are ca scop realizarea unor condiii optime pentru incubarea acestora i creterea larvelor n perioada de dezvoltare postembrionar. Prin tehnologia elaborat n cadrul proiectului s-a realizat un sistem de incubare total diferit de tehnologia clasic, care prevede utilizarea incubatoarelor Nucet i Zug- Weiss , mult mai simplu, mai eficient i mai aproape de condiiile reproducerii naturale. Sistemul const din dou bazine din beton, amplasate ntr-o staie pilot prevzut cu reea de conducte pentru alimentare, distribuie i evacuare a apei tehnologice, platform de porionare, fecundare icre, rame suport pentru incubaia icrelor,module pentru tratamente antifungice ale icrelor . Bazinele au un volum util de 120 mc i dimensiunile de 30x4x1,2 m.(Fig. nr. 6) Sunt alimentate cu ap de helesteu, prin conducte laterale cu diametrul de 100 mm, pe care sunt montai cte 7 robinei. Debitul maxim asigurat de cei 7 robineti de pe fiecare conduct este de cca 70 l/min, debitele de lucru fiind n general mai mici (50 l/min). La fiecare gur de alimentare s-a ataat un filtru tip manon, din esatur de nytal cu latura ochiului de 0,5 mm, pentru a mpiedica ptrunderea n bazine a insectelor acvatice, lipitorilor sau altor duntori. Bazinele sunt prevzute cu vane de fund pentru evacuarea apei, cuplate cu un sistem de prea-plin, care asigur un nivel constant. Vana i sistemul de prea-plin sunt amplasate ntr-o incint filtranta (suprafaa de cca 1 m2), cu pereii din esatur de nytal cu latura de 0,5 mm, pentru a mpiedica evadarea larvelor.

Fig.nr. 6 Bazin pentru incubarea icrelor de tiuc Sursa de ap pentru alimentarea staiei de incubaie,este un helesteu cu suprafaa de 1 ha i adncimea de 1,5 2 m. Nu se recomand bazine mai mici,

pentru a evita fluctuaiile de temperatur. nainte de a intra n sala de incubaie, la punctul de priz, apa trece prin filtru ( fig. 7 i 8 ), care are rolul de a opri ptrunderea organismelor zooplanctonice (n special ciclopi, care atac icrele). Acest filtru poate avea forma cilindric sau paralelipipedic. Filtrul este fixat pe un cadru metalic, cu perei dubli. Peretele exterior este format dintr-o sit mai rar i rezistent (nytal cu ochiuri de 0,5 mm, iar cea din interior este cu ochiuri mai mici 0,250 mm). Dimensionarea filtrelor a fost realizat astfel nct s asigure un debit de lucru de 15 l / sec. Admisia apei n staia de incubaie se realizeaz printr-o conduct metalic cu diametrul de 500 mm. Reglarea debitului se face prin intermediul unei vane. La intrarea n staie, conducta se ramific, pentru a realiza alimentarea independent a celor dou bazine, n dou brae paralele, cu diametrul de 100mm, pe care sunt montai cte 7 robinei.

Fig. 7 i 8 diferite filtre din bazinul decantor

rame suport pentru incubaia icrelor de tiuc (Fig.nr. 9). Acest tip de rama, este asemanator unei cutii deschise n partea de sus, avnd dimensiunile de 34 x 40 cm, marginile de 5 6 cm, din lemn de brad. Pe latura lung prezint o fanta cu dimensiunile de 10-15 cm, care permite eliminarea surplusului de spermatozoizi si evadarea larvelor dup eclozare, n bazin, unde vor incepe ciclul de cretere. Fundul cutiei este din plasa de nytal prinsa in partea de jos, pe care se intind icrele dup fecundare. Aceast ram, permite realizarea incubrii i creterii larvelor n acelai bazin, eliminnd operaiunea de prelevare, transvazare i parcare larve manipulri care duceau la pierderi nsemnate. n acelai timp, acest sistem de incubaie ofer posibilitatea supravegherii directe i nlturrii icrelor moarte, faciliteaz realizarea tratamentelor antifungice i asigur micarea uoar i permanent ,sub

influena curentului pe suprafaa apei apropiindu-se foarte mult de condiiile din mediul natural.

Fig. nr. 9 Rame suport pentru incubaia icrelor de tiuc

- module pentru tratamente antifungice ale icrelor sunt cazi realizate din polistiren armat cu fibr de sticl care au o form trapezoidal i un volum de cca. 700 l . nlimea coloanei de ap este de 30 de cm. Alimentarea cu ap se realizeaz direct din bazinul de cretere prin intermediul unui furtun, iar evacuarea prin intermediul unei evi PVC. Czile asigur tratamentul simultan a 5 rame cu icre.
3. DESCRIEREA TEHNOLOGIEI Tehnologia de reproducere artificial i cretere a speciei Esox lucius presupune parcurgerea urmtoarelor faze: Asigurarea loturilor de reproductori evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; parcarea, prematurarea reproductorilor evaluarea strii reproductive; stimularea maturrii celulelor sexuale; colectarea produselor sexuale; fecundarea; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; creterea larvelor pn la atingerea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor ambalarea i transportul puilor Schema cadru a tehnologiei de obinere a descendenilor speciei Esox lucius este prezentat n figura nr.

10

Schema fluxului tehnologic de obinere prin reproducere artificial a larvelor de tiuc

Asigurarea loturilor de reproductori

Evaluarea preliminar a reproductorilor Evaluarea caracterelor fenotipice Aprecierea strii fiziologice i de ntreinere Parcare reproductori Bazine din pmnt 2000-3000 mp Condiii de parcare Debit de alimentare de 3-5 l/s/ha Nivel de oxigen nu mai mic de 5 mg/l

Evaluarea strii reproductive

Stimulare hormonal Injectare cu hormon sintetic

Maturare Bazine de pmnt de 20-30 mp. Debit de alimentare 8-10 l/s/ha

Femele Prin masare uoar

Prelevare produse sexuale

Masculi Prelevare cu seringa prevzut cu tub tygon sau sacrificare

Fecundare Cu sperm proaspt prin metoda uscat . 5ml sperm la 1 l icre.

Incubare

Incubare Bazine speciale sau incubatoare tip Nucet

Tratamente icre embrionate

Eclozare

Cretere larve

Ambalare

11

Asigurarea lotului de reproducatori. Avnd n faptul c tiuca se reproduce primvara devreme, cnd temperatura apei este de 8-100C reproducatorii sunt separati pe sexe si se parcheaza in bazinele de prematurare la pescuitul din toamn, astfel c perioada de ienare, coincide cu cea de prematurare. Pescuitul se executa cu multa grija, stiuca fiind o specie sensibil la cele mai mici traumatisme. n bazinele de prematurare, unde apa are circuit continuu si sunt create condiii optime de temperatura si oxigen, reproductorii sunt hrnii cu pete mrunt, fr valoare economic, asigurndu-se cca. 3kg peste pentru un kg de tiuc. Densitatea de populare n bazinele de prematurare este de500-600 ex /ha. Evaluarea preliminar a reproductorilor Reproductorii de tiuc vor fi examinai imediat dup pescuit pentru evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului. Sunt selecionai reproductori cu lungimea de 50 -60 cm i greutatea de 1,5-2,0 kg. Nu se admit exemplare lovite sau afectate de boli parazitare sau infecioase. Determinarea sexului n aceast perioad se realizeaz dup caracterele de dimorfism sexual. Primul indiciu al maturrii sexuale este erupia nupial la masculi i anume, masculii maturi au capul i uneori corpul ntreg acoperit de butoni nupiali. Femelele sunt n general de talie mai mare dect masculii de aceeai vrsta, au abdomenul mai proeminent, iar orificiul genital este inflamat i zona moale la palpare. Maturarea reproductorilor La sfritul iernii - de regul la nceputul lunii martie, cnd temperatura apei atinge 5-6 0C, reproductorii sunt transferai n bazinele de maturare separai pe sexe, n care se asigur curent continuu de ap. Separarea femelelor si masculilor pe sexe se face cu mare grija, n loturi ct mai omogene si sunt mentinuti n bazinele de maturare, pentru stabilirea momentului optim de prelevare a icrelor. Pentru a determina desvrirea maturrii gonadelor i declanarea ovulaiei i a spermiaiei este necesar ca temperatura n heleteele de maturare s se menin constant la valoarea necesar perioadei de reproducere ( 12-13 0 C). Scderea sau creterea brusc a temperaturii n afara limitelor optime poate compromite definitiv maturarea femelelor. ntr-un bazin de maturare se introduc , n general, 15 -20 femele, de la care se obin n medie 300.000 de icre. Reproductorii vor fi observai i controlai cu atenie pentru a surprinde momentul n care ncep s se reproduc n mod natural. Este posibil ca unele femele s elimine icre, fr s fi e stimulate hormonal. Stimularea hormonal Pentru stimularea hormonal se va folosi extract de hipofiz de crap. Cantitatea de hormon injectat va depinde strict de greutatea reproductorului, greutate ce

12

trebuie stabilit prin cntrire pentru fiecare exemplar n parte. Pe baza greutii petelui se va calcula doza ce urmeaz s fie administrat. Femelele sunt stimulate cu 3,5-4 mg/kg corp, in functie de gradul de maturare, iar pentru masculi se administreaza 1,52 mg/kg corp. Injeciile hormonale se vor administra cu o sering de 1,0-3,0 cm3 cu ace de calibru 23 - 25, lungi de 3,2 cm cu butuc din material plastic transparent. Injectrile trebuie efectuate n regiunile mai dense ale muchiului dorsal la o distan de aproximativ o treime din lungimea corpului pornind de la cap. Acul seringii se va introduce sub un unghi de 450 . La retragerea acului se va aeza un deget al operatorului pe neptur, timp de cteva secunde pentru a preveni contrapresiunea ce ar expulza soluia injectat. Locul injectrii este apoi uor masat. Injectrile se pot efectua fie prin ridicare parial din ap a reproductorului, fie prin sub ap n momentul n care reproductorii stau pasivi n targa de prelat. Dupa injectare, femelele sunt supravegheate cca. 72 de ore. Dupa aceasta perioada femelele se matureaz si pot ceda cu usurinta produsele sexuale. Cantitatea de sperm pe care o cedeaza masculii este foarte mica, chiar si dup stimulare hormonala si din aceasta cauza pentru fecundarea unei portii de icre sunt necesari 5-7 masculi, pentru a garanta obtinerea unui procent de fecundare ridicat. Atat in cazul metodei de obtinere a icrelor cu stimulare hormonala, cat si fara stimulare hormonala, din cauza nesincronizrii maturarii gonadelor mascule si femele, la masculi maturarea elementelor sexuale se face la inceputul perioadei de reproducere cand temperatura apei este de 4-5o C, iar icrele sunt prelevate de la femele de obicei la 9 10 - 12o C, apare necesitatea de sacrificare a ctorva masculi pentru extragerea testiculelor. Testiculele se zdrobesc pe o sita de nytal in vederea eliberarii spermatozoizilor din tesutul seminal, operatiune executata deasupra icrelor portionate in prealabil. Colectarea icrelor si fecundarea artificiala. Colectarea icrelor se face de la femele perfect mature din punct de vedere sexual. In momentul recoltrii icrelor, pestele se imobilizeaza, infsurandu-se cu un servet de tifon in jurul capului si a cozii, se tine de cap cu mana stnga, cu coada in jos, astfel ca in timpul mulgerii, icrele sa se scurga in vasul pregatit. (Fig.nr. 10)

Fig. nr.10 Colectarea icrelor de tiuc

13

Se maseaza usor abdomenul in directie longitudinala, de sus in jos, in lungul liniei axiale a abdomenului, impingandu-se icrele catre orificiul genital. De la fiecare femela se colecteaza o singura portie de icre; exemplarele a caror gonade sunt bine dezvoltate elimina usor si, in general , intreaga cantitate de icre din ovar: icrele remanente sunt in numar redus. Odata cu icrele se elimina si lichidul ovarian care contine gomesul , foarte necesar in procesul de fecundare, si care se colecteaza in acelasi vas cu icrele. La fel se procedeaz si cu masculii. Sperma se mulge direct peste icre sau se pipeteaza (folosind acelasi tip de pipet ca si la fecundarea crapului), dupa care se toarna peste icre. (Fig. nr. 11)

Fig. nr.11 Colectarea spermei n cristalizoare Incubarea pe rame, in bazinul de crestere postembrionara. Fa de tehnologia clasic n care icrele de tiuc erau supuse operaiunii de descleiere i incubate n incubatoare Zug- Weiss, la CCDP Nucet, s-a elaborat o metoda mai eficienta de incubare a icrelor, pe rame, in bazinele n care are loc si dezvoltarea postembrionara dupa perioada de incubatie. ( Fig. nr. 12). S-a folosit un tip original de rama (realizat la CCDP Nucet). Acest tip de rama, asemanator unei cutii deschise cu dimensiunile de 34 x 40 cm, marginile din lemn de brad de 5 6 cm, cu o fanta pe una din laturi, iar plasa de nytal pe care se intind icrele este prinsa in partea de jos. Fanta de pe latura ramei este foarte eficienta in urmatoarele doua cazuri : - dupa intinderea icrelor pe rama, cand surplusul de spermatozoizi si masa testiculara trebuie indepartate ; - dupa eclozare, cand larvele devin mobile, au posibilitatea sa paraseasca incinta de incubare (rama), fara alte interventii, marind astfel procentul de viabilitate al larvelor eclozate.

14

Fig. nr. 12 Incubarea icrelor de tiuc pe rame, n bazine de beton Temperatura optima de incubatie este de 8-10C, dar procesul de embriogeneza se desfasoar normal si la 6-7C sau 12-13C. Temperaturile peste de peste 13oC determina dezvoltarea anormala a embrionilor, provocand perturbari in morfostructura lor si in ultima instanta moartea. Cresterea larvelor. In prima etap de dezvoltare larvele pot fi crescute in cadrul statiei de incubatie, in bazine speciale de dezvoltare postembrionara, cu urmatoarele dimensiuni : 30 x 4 x 1m. Bazinele sunt prevazute la evacuare cu o incinta filtranta pentru a impiedica evadarea larvelor sau puilor. Alimentarea cu apa se face gravitational, din bazinul decantor, unde sunt fixate filtre, la fiecare coloana ce alimenteaza statiile de reproducere. Caracteristici ale dezvoltrii embrionare i larvare. Dezvoltarea embrionar. Perioada embrionar la tiuc dureaz 10-12 zile, la temperatura de 8 13 C. La 10C dezvoltarea este de 110 grade zile De o deosebit nsemnatate pentru dezvoltarea normal a embrionilor (ca i a larvelor de altfel) este concentraia de oxigen. Pentru 1 kg de icre embrionate, incubate la 12C, nevoia de oxigen crete de la 6 mg/cm/ora (n stadiul de morul 4 celule) pn la 129 mg/cm/or (n stadiul cnd dezvoltarea embrionar se apropie de sfrit 80% din totalul dezvoltrii). La sfaritul perioadei de incubaie, necesarul de oxigen este de 20 de ori mai mare. In dependen cu mecanismul respiraiei, n decursul dezvoltrii embrionare la tiuca, s-au stabilit 7 etape caracteristice, n care se evideniaz rolul micrii embrionului n procesul respiraiei:

15

Intr-o prim etap, la scurt timp dup fecundare, n stadiul de morul, mecanismul respiraiei se desfasoar la nivel intracelular. Procesul ptrunderii oxigenului prin membrana oului i a lichidului perivitelin n interiorul oului are un caracter pasiv de difuziune. In etapa a II-a, naintea nceperii pigmentrii oului, respiraia nu mai este intracelular, schimbul de gaze fiind asigurat de centrii specializai. In etapa a III-a, caracterizat prin conturarea embrionului, odat cu formarea centrilor nervoi, care intervin n mecanismul respiraiei, are loc i o intensificare a schimbului de gaze.

Fig. nr. 13 Icr cu embrion de tiuc Creterea proceselor metabolice se accentueaz n urmtoarele etape, odat cu perfecionarea mecanismelor care rspund de efectuarea lor (apariia eritrocitelor, formarea branhiilor), ca i de vigoarea micrii embrionilor (fig.13). De aceea, n legtur cu etapizarea proceselor de respiraie i necesarul de oxigen trebuie reinut c, datorit nevoii foarte mici de oxigen la puin timp dup fecundaie, icrele pot fi transportate cu uurin, excluzndu-se pericolul asfixiei, dar sunt deosebit de sensibile n etapele urmtoare, cnd nu se recomand s mai fie transportate. Pe masura dezvoltrii embrionului i a creterii consumului de oxigen, orice intervenie n timpul incubaiei poate fi fatal, ca urmare a unei carene de oxigen din ap. Dezvoltarea larvar. Dup eclozare, ramele de incubaie sunt scoase din bazin pentru a fi curate de icrele moarte, ulterior se trec printr-o baie de formalin, punnd cam o treime din ele din nou pe suprafaa bazinului pentru a folosi de suport larvelor proaspt eclozate. Ramele rmn 7 10 zile pe suprafaa bazinului de dezvoltare embrionar, pn cnd, larvele se desprind i ncep s noate cu uurin n momentul cnd noat cu uurin i ncep s se hrneasc cu hran exogen pot fi pescuite, transportate i lansate n bazinele ce urmeaz a fi populate.

16

Studiind etapele de dezvoltare a larvelor i a puilor de tiuc se constat c la ecozare, larvele au 7,5 mm (fig.14). Sacul vitelin este aproape sferic, prezint numeroase picturi de grsime, iar cuta nottoare inconjur corpul, pornind din treimea anterioar a prii dorsale pn n partea posterioar a sacului vitelin. notatoarele pectorale sunt rudimentare, la nceputul formrii lor. Gura este nefuncional. Branhiile nu sunt formate, iar respiraia este asigurat de ctre o reea de vase sanguine a venei ventrale de pe sacul vitelin. Consumul de oxigen este n general redus comparativ cu etapele urmtoare: 0,7 0,8 mg O2/g larve. Larvele sunt foarte debile, stau pe fundul bazinelor sau usor agate pe diferite obiecte cu ajutorul substanei lipicioase secretat n aceast etap. Cnd sunt deranjate, noat greu, prin micri ondulatorii ale corpului. Sunt indiferente la lumin; nutriia este endogen.

Fig. 14 Larve de tiuc n diferite etape de dezvoltare. a) dup eclozare (L=7,5 mm) ; b) dup circa 10 zile de la eclozare (L = 12-13 mm) ; c) dup circa 30 de zile de la eclozare (L = 15-18 mm), Eclozare, ritmul de cretere este destul de rapid. La vrsta de 2 3 zile (la 1012C), lungimea este de 9 10 mm, capul este desprins de sacul vitelin, care, micorndu-se, devine oval. Numrul de miotoame este de 58 60. Membrana nottoare este continu. Pigmentaia devine mai accentuat, mai ales pe partea ventral a corpului. Gura se observ cu uurin, datorit micrii maxilarului inferior. Apare hemoglobina. Respiraia se face prin branhii, dar i direct, sanguin, iar consumul de oxigen este de 1,9 mg O2/ora/g larve. S-au format primordiile organelor liniei laterale. Bine conturate sunt nottoarele pectorale. n aceast etap, larvele se prind mai puternic de obiectele din ap, avnd, n general, o poziie vertical. Sunt mai active, dar notul este tot greoi, ajutndu-se i de pectorale. La vrsta de 10 zile, lungimea este de 12 -13 mm, (etapa a 3-a de dezvoltare), iar greutatea de 12 13 mg. In aceast etap, glandele lipicioase

17

sunt foarte reduse, vezica notatoare s-a umplut cu aer, iar membrana notatoare s-a ascuit n zona codal unde a inceput formarea tesutului mezenchimatos. Reeaua de vase de pe suprafaa sacului vitelin s-a redus i respiraia se face exclusiv prin branhii. Consumul de oxigen creste: 4 -5 mg/ora/g larve. S-au format canalele semicirculare. Larvele nu mai stau fixate, ci se pot menine n grosimea stratului de ap, miccndu-se cu mai multa uurin. Hrnirea este nca endogen. De reinut c pn la aceast etap, intestinul are forma unui tub drept (etapa unisegmentar liniar). La vrsta de 11 12 zile (L = 13 14 mm) ncepe hrnirea mixt (endogen exogen), cnd rezervele viteline sunt aproape complet consumate. Pe msura dezvoltrii, membrana notatoare se reduce, astfel ca la vrsta de 15 zile (L = 15 mm) se mai observ doar n dreptul notatoarelor, la care formarea esutului mezenchimatos este avansat. Codala a devenit heterocerc, corpul este aproape n ntregime acoperit cu pigmeni cafenii. Acum ncepe diferenierea segmentelor tubului digestiv (anterior, mediu i posterior). Hrana este exclusiv exogen. Larvele noat cu uurina, meninndu-se n straturile superficiale sau n grosimea stratului de ap, notnd vertical sau orizontal. La vrsta de 25 de zile (L = 20 29 mm), radiile notatoare sunt formate, pigmentaia corpului s-a accentuat, iar forma capului capt trsturile specifice adulilor, datorit prelungirii botului. Ctre sfrsitul acestei etape, cnd ncep s se contureze caracteristicile perioadei de pui, larvele ncep s devin ihtiofage (hrnindu-se cu larvele altor peti), dar hrana este preponderent zooplanctonic. Micarea lor este foarte rapid, noat cu uurin la diferite orizonturi, dar continu s rman nc la zona de mal, la adncimi mici, cu o bogat baz trofic. Perioada larvar ia sfrit la vrsta de 30-35 zile (L = 13 37 mm), cnd ncep s se formeze solzii, iar coloraia corpului, mai nchis pe partea dorsal, prezint mici pete de culoare mai deschis. Puii noat cu repeziciune n adncimea apei, n zonele de mal, devenind preponderent ihtiofagi, dar dac larvele altor peti lipsesc se hrnesc foarte bine i cu organisme din plancton i bentos. Hrana i relaiile trofice. Larvele de tiuc au o perioad destul de ndelungat de hranire cu vitelus (9 10 zile), la temperatura apei de 8 10C. La vrsta de 10 11 zile (L= 10-12 mm), larvele ncep s se hrneasc activ mai nti nutriia fiind mixt (endogen exogen), apoi, n urmtoarea etap (dup 2 - 3 zile), exclusiv exogen. n etapa nutriiei mixte, hrana exogen este alctuit ndeosebi din microzooplancton. n luna aprilie, larvele de 10 - 12 mm se hrnesc cu cladocere mici (Sida sp., Diaphanosoma sp., Euricercus sp., Daphnia sp., Cyclops). n etapa nutriiei mixte, ca i n urmatoarele 2 - 3 etape, pna la vrsta de 16 - 17 zile (L = 17-18 mm), larvele au o hran preponderent planctonic . Structura preponderent zooplanctonic a hranei nu se modific nici dup resorbia total a rezervelor viteline, continund pn la vrsta de 20-25 de zile (L = 20-25 mm), cnd n concordan cu modificrile morfologice generale se petrece o schimbare fundamental. Larvele de tiuc ncep s vneze larvele altor specii sau chiar larve mai mici de tiuc, devenind ihtiofage. La nceputul acestei etape, larvele altor peti constituie un component mai mult sau mai puin accidental. Partea principal a hranei o constituie nc organismele zooplanctonice,

18

dar i numeroase larve de insecte din bentos. Pe msura dezvoltrii ns, caracterul de ihtiofagie se accentueaz. Aceast etap, n care larvele i apoi puii de tiuc se hrnesc cu nevertebrate din biocenozele planctonice i bentonice i cu puii altor peti pe care am putea-o denumi etapa de tranzitie, dureaz un timp ndelungat. Chiar i puii n vrst de 7080 de zile (L = 20-45 mm) se mai hrnesc cu larve de chironomide. Dar, dac la vrsta de 20 zile, puii de peti constituie elemente accidentale, cladocere sau copepode sunt din ce n ce mai rare. Deosebit de important este faptul c, structura hranei larvelor i puilor de tiuc este determinat i de structura biocenozelor bazinelor n care se dezvolt, de componena calitativ i cantitativ a populaiilor planctonice i bentonice. De exemplu, analiznd coninutul gastrointestinal al larvelor de 18-20 mm (n etapa cnd hrana este preponderent zooplanctonic) s-au n exclusivitate larve de peti, ceea ce denot abundena acestora. Sau, situaia invers, puii de tiuc de 75-80 mm (varsta 80-90 zile), care de regul n aceast etap devin tipic ihtiofagi, se hrnesc i cu alte organisme (cladocere, dar indeosebi larve de chironomide), dac larvele de peti sunt mai rare n biotopul n care se dezvolt. Cu toate acestea, pe parcursul dezvoltrii, la tiuc, se deosebesc 3 etape caracteristice de hrnire: 1) larvele (de 10 12 mm) sunt preponderent fitoplanctonofage; 2) larvele (de 15 20 mm) sunt preponderent zooplanctonofage; 3) larvele i puii (de 30 -80 mm) sunt preponderent ihtiofagi. Trebuie reinut ca larvele i puii de tiuc nu pot fi hrnii cu hran artificial. De aceea, ntreg procesul de cretere n condiii artificiale trebuie subordonat acestui caracter. In acest sens, pentru creterea larvelor i a puiilor sunt indicate trei metode: - creterea larvelor timp de 3-4 sptmnii n czi sau bazine speciale de cretere, n care sunt hrnite cu plancton. - creterea n heleteie speciale de pmnt, bogate n plancton, pn la vrsta de 6-8 sptamni; - creterea n heleteie mari, alturi de alte specii (ca specie secundar) pn la vrsta de o var. n primul caz, incintele de cretere trebuie amplasate n apropierea unui bazin bogat n zooplancton sau n care s se fi fcut o cultur de zooplancton. De aici se colecteaz planctonul care se distribuie larvelor. n cazul c hrana nu este suficient, ncepe s se manifeste fenomenul de canibalism (ndeosebi la vrsta de 3 - 4 sptmni). La sfritul celor 4 sptamni, n astfel de condiii, lungimea larvelor este de 3 - 5 cm. Pentru creterea n heleteie speciale trebuie s se asigure, de asemenea, o hran abundena. n acest scop se vor folosi heleteie cu fundul plat, puin adnci, n care n prealabil s-au introdus ngrminte minerale i organice. Pot fi folosite i heleteiele de dezvoltare postembrionar a larvelor de crap. La sfritul lunii aprilie se populeaz cu 10.000 25.000 larve/ha, obinnduse o producie de 2.500 5.000 ex. de 6 - 8 sptmni, avnd lungimea de 9 - 10 cm i o greutate de 5 kg. Creterea n heleteie de crap a larvelor de tiuc ca specie secundar este destul de rentabil. Se populeaz heleteele cu crap de cel puin dou veri, iar larvele de tiuc se introduc n etapa nutriiei exogene. Se presupune c puii de

19

tiuc vor gsi hrana i dup vrsta de dou luni (cnd devin ihtiofage), altfel creterea lor este nerentabil. n general, densitatea de populare este de 500 1.000 larve/ha, obinndu-se o producie de pui n primul an de 10 - 50 ex./ha, cu lungimea de 20 - 40 cm i greutatea de 200g. Ambalarea i transportul larvelor de tiuc Materialul biologic de populare n stadiu de pui predezvoltai, se transport n pungi de polietilen standard de 40 l, n care raportul ntre volumul de ap i volumul de oxigen este de 1/1. Densitatea puilor la o pung standard se stabilete funcie de durata transportului i temperatura aerului, conform tabelului de mai jos: Densitatea larvelor de tiuc la punga standard Temperatura 0 C 10 15 Lungime mm 15-20 20-30 15-20 20-30 Durata transportului 25 ore 50 ore 3000 2000 2000 1000 1500 1000 1000 500

10 ore 5000 4000 3000 2000

Transportul puilor n condiii optime se realizeaz cu maini izoterme dotate cu uniti de condiionare a temperaturii mediului incintei. n lipsa acestora transportul se poate realiza cu mijloace de transport obinuite cu respectarea urmtoarelor condiii: capacitatea mainii s fie corelat cu numrul pungilor ce urmeaz s fie transportate; incinta de transport s fie capitonat cu un numr suficient de materiale ( cartoane sau pturi ) care s mpiedice spargerea sacilor; s fie prevzut cu o rezerv de oxigen de minim 50l, rezerv dotat cu manometru i furtun i o rezerv de saci de 10% din numrul sacilor care se transport .

4. REGULI PENTRU VERIFICAREA TEHNOLOGIEI Sistemul tehnologic i tehnologia de reproducere artificial i cretere n perioada de dezvoltare posteembrionar a tiucii se va verifica n baza urmtoarei metodologii: Probe i verificri iniiale a instalaiei de alimentare a apei Verificarea modului de funcionare a instalaiilor de alimentare, distribuie i evacuare a apei, nu se admit pierderi de ap la etaneizrii, nu se admite

20

lipsa postamentului de protecie, nu se admite valori mai mari ale presiunii fa de valoarea de referin stabilit iniial; Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare, nu se admit pierderi de ap la mbinri; Verificarea poziiei vanelor pe traseul de trecere a apei, nu se admit robinei nchii; Verificarea parametrilor chimici ai apei, nu se admite depirea valorii acestora fa de valorile prevzute prin Ord. 161/2006 - Ape de suprafa

Probe i verificri iniiale a modulelor specifice de reproducere i cretere - Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare i evacuare a modulelor de reproducere i de cretere, nu se admit pierderi de ap; - Verificarea asigurrii meninerii nivelului constant de 1, 0 m i respectiv 0,8 m n cele dou tipuri de bazine, nu se admit nivele sub aceste valori; Verificri de lot A. Verificarea materialului de populare n momentul achiziiei - Verificarea densitii materialului n pungile standard de transport; nu se admite depirea normelor i condiiilor de transport prezentate; - Verificarea etaneitii pungilor de transport; nu se admit pungile care pierd ap sau oxigen; - Verificri n momentul populrii materialului piscicol - Verificarea valorii oxigenului dizolvat n ap din incinta de cretere; nu se admit valori mai mici de 7 mg/l - Verificarea temperaturii apei bazinului naintea deversrii materialului de populare; nu se admite deversarea direct a materialului n condiiile n care sunt nregistrate diferene ntre temperatura apei din punga de transport i apa bazinului; deversarea se va realiza dup o prealabil acomodare a materialului piscicol, la temperatura mediului acvatic; - Verificarea reactivitii materialului n momentul populrii; nu se admite ca la populare materialului piscicol s prezinte micri anormale, sau s intre n decubit lateral; C. Verificarea periodic a evoluiei materialului biologic. - Verificarea zilnic, pe ntreaga perioad de cretere a masei medii i lungimii totale a materialului piscicol; numrul minim de exemplare verificate - 15 ; - Verificarea permanent, pe ntreaga perioad de cretere, a strii sanitare a materialului piscicol;

5. METODE DE VERIFICARE Aparatura Pentru verificarea parametrilor chimici ai apei : - Oxigenometru;

21

- pH- metru; - Termometru; - Photometru - Balan analitic; Pentru verificri indicilor tehnologici ai materialului piscicol: - Ihtiometru; - Balan tehnic. Pentru verificarea strii sanitare a materialului piscicol: - Microscop cu putere de rezoluie de la cca 30 X la cca 1000X ( tip. ML 4M) Metode Metode chimice de determinare a calitii apei tehnologice Evaluarea valorilor parametrilor chimici ai apei tehnologice se efectueaz conform Ord. 161/2006: -oxigenul dizolvat se determin cu oxigenometru sau prin metoda Winkler, bazat pe oxidarea de ctre oxigenul molecular din ap, n mediu puternic alcalin, a hidroxidului de mangan bivalent la hidroxid de mangan trivalent, rezultatul fiind exprimat n mg/l; -pH-ul apei se determin n upH, utiliznd pH-metru cu afiare digital; -substana organic, clorurile (Cl-), azotaii (NO3-), azotiii (NO2-), amoniacul liber (NH3), ionul de amoniu (NH4+), alcalinitatea, dioxidul de carbon se apreciaz fotometric cu ajutorul reactivilor test Metode de determinare a strii sanitare a materialului piscicol Starea sanitar a materialului piscicol se evalueaz prin : - Examenul macroscopic pentru stabilirea diagnisticului acest examen este doar orientativ. Se examineaz cu ochiul liber sau cu lupa suprafaa corporal, ochii, branhiile, cavitatea intern. Prin acest examen pot fi decelate zonele modificate ca : necroze, chiti, hipo sau hipersecreii de mucus, hipertrofii sau atrofii ale organelor, modificri de culoare, parazii macroscopici. - Examenul microscopic are valoare de diagnostic. Probele se recolteaz direct din petele viu i constau din : - raclate, superficiale i profunde de pe suprafaa sau zona de examinat, de obicei branhii, tegument, mucoas intestinal ; raclatul se aeaz pe lam i se adaug o pictur de ap distilat peste care se preseaz lamela examinndu-se imediat la microscop ; - preparate strivite se execut din orice esut i const n strivirea unei mici poriuni din acesta ntre lam i lamel, astfel nct pelicula format s devin translucid i ct mai subire. Estimarea rezultatelor se efectueaz la nivel de cmp microscopic prin identificarea agenii etiologici. Metode de determinare a indicilor tehnologici la materialul piscicol - Mas medie - g / ex se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin a trei eantioane de cte 100 de indivizi, din valorile obinute calculndu-se valoarea medie ; - Spor individual de cretere g se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi n momentul

22

populrii, determinndu-se masa iniial, i a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi la finele perioadei de cretere, determinndu-se masa final, se aplic formula : (Wf Wi)/ N, unde - Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului; N numrul de exemplare Rata zilnic a creterii - g/zi, se determin cu formula : (Wf Wi)/ T unde- Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] Rata specific de cretere - SGR - % zi se determin cu formula: SGR = (lnWf-lnWi)*100/T [%/zi], unde: Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] Procent de supravieuire - % - se determin cu formula: Nf/Ni x 100 unde : Nf i Ni numrul de exemplare iniial i final 6. MSURI DE TEHNICA SECURITII MUNCII

La punerea n funciune i exploatare a sistemului tehnologic Asamblarea instalaiilor, punerea n funciune i efectuarea probelor se va efectua numai de personalul calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea acestora ; Instalaiile se vor da n exploatare numai dup verificarea existenei i a corectei strngeri a tuturor organelor de asamblare demontabile; - Deservirea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea sistemului; - Intreinerea i repararea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit n acest scop. Se interzice persoanelor care deservesc sistemul s remedieze defeciunile acestuia. - naintea oricrei intervenii ( desfacere pentru curire, nlocuirea unor piese defecte, ntreinere sau reparaii) se va opri obligatoriu alimentarea cu ap a sistemului; - Operaiile de prelucrare a evilor (tiere, ndoire, fasonare etc.) vor fi executate pe bancul de lucru din ateliere. Se interzice executarea operaiilor de prelucrare a evilor pe schele de montaj, cu excepia ajustrii racordurilor ntre conducte, n vederea definitivrii poziiei de montaj; - Prelucrarea evilor i a prefabricatelor din materiale plastice se va efectua cu scule, dispozitive i utilaje n bun stare de funcionare i se vor respecta Normele specifice de securitate a muncii pentru prelucrarea cauciucului sintetic i a produselor macromoleculare; - Conductele vor fi fixate dup caz pe elemente de susinere ca: stelaje consolidate, console, supori etc. care s permit meninerea acestor conducte n poziia de pozare i vor fi consolidate cu brri demontabile sau alte tipuri de elemente de susinere. La aplicarea tehnologiei de reproducere artificial i cretere

23

La repartizarea personalului de lucru se va ine seama de aptitudini i de nivelul de cunotine profesionale ; Se va evita lucrul n asalt asigurndu-se necesarul de materii prime ; Personalul de deservire trebuie s poarte echipament de protecie : salopet, cizme de cauciuc ; Se va evita contactul epidermei cu substaner folosite la igenizarea incintelor de cretere ; La efectuarea analizelor chimice uzuale, determinarea oxigenului, pH ului se vor respecta Normele specifice de protecia muncii pentru laboratoarele de analize fizico chimice i mecanice Extras 36/1999

24

DOCUMENTAIE DE TRANSFER TEHNOLOGIC A TEHNOLOGIEI DE REPRODUCERE ARTIFICIAL A SPECIEI STIZOSTEDION LUCIOPERCA ALU PREZENTAREA TEHNOLOGIEI 1.3. Obiect

Tehnologia elaborat vizeaz reproducerea controlat a speciei Stizostedion lucioperca alu, n vederea refacerii populaiilor naturale i introducerii i extinderii ei n acvacultur. 1.4. Domeniul de aplicare

Potentialii beneficiari ai tehnologiei de reproducere sunt agentii economici care au ca obiect principal de activitate pescuitul si acvacultura. Tehnologia de reproducere controlat devine aplicabil in momentul in care exista baza logistica necesara desfasurarii intregului flux tehnologic si se are in vedere urmatoarele : - Loturi de reproducatori masculi si femele care s constituie baza biologic pentru realizarea reproducerii i obinerea descendenelor de diferite vrste; - Bazine pentru parcarea, prematurarea si maturarea reproducatorilor - Bazine de reproducere; - Statie de reproducere artificiala cu toate dotarile necesare : module parcare reproductori, platform pentru fecundare, aparate de incubatie caracteristice fiecarei specii, cazi si bazine de cresterea puilor in primele faze de dezvoltare postembrionara, minilaborator. 1.3. Cerinte de mediu inconjurator Tehnologia elaborate nu prezinta elemente poluante pentru mediu. Substantele folosite sunt omologate si acceptate in UE si nu afecteaza materialul biologic si nici parametrii chimici ai apei. Apa tehnologica rezultat se incadreaza in parametrii Ord. 161 / 2006 . Riscul evadarii materialului biologic este exclus, sistemul tehnologic fiind prevzut cu elemente de sigurant, site la incintele de incubatie si la conductele de evacuare a apei tehnologice. 2. CONDITII TEHNICE DE APLICARE A TEHNOLOGIEI 2.1 Sistem tehnologic pentru reproducerea artificial a speciei Stizostedion lucioperca alu n vederea reproducerii dirijat-artificial a alului, avnd n vedere particularitile reproductive ale speciei, trebuie s se asigure o baz tehnicomaterial specific i n concordan cu diferitele etape ale acestui proces.

25

Sistemului tehnologic se va dimensiona n funcie de capacitatea de producie stabilit de utilizator i va asigura prin capacitatea sa, reproducerea a minim 50 de familii pentru a asigura meninerea i conservarea biodiversitii genetice a speciei. n corelaie cu capacitatea de incubare sistemul tehnologic va fi constituit dintr-un, ansamblu de bazine de pmnt : bazine de iernat, bazine de parcarematurare, bazine de reproducere dirijat, module de parcare i de maturare a reproductorilor, module de incubare a icrelor embrionate i de parcarea a larvelor cu urmtoarele caracteristici tehnice: Bazinele de iernat Sunt bazine de pmnt, realizate n sptur, au de regul form dreptunghiular, suprafa cuprins ntre 1000 -2000 mp, maximum 3000 mp; adncimea este de cca. 2,0m i debitul de alimentare este de 3-5 l/sec/ha. Instalaiile de alimentare i de evacuare se dimensioneaz astfel nct inundarea i vidarea s se poat face n circa 3 ore. Odat cu popularea reproductorilor n bazinele de iernat se populeaz i material piscicol puin valoros, de talie mai mic, pentru a constitui hrana alului pn primvara, cnd se face separarea pe sexe a reproductorilor. Bazine de parcare - maturare. Sunt bazine mici, n care reproductorii de alu sunt meninui dup pescuitul de selecie din primvar, pn cnd temperatura apei atinge valori optime de reproducere (12-14oC). Aceste bazine au urmtoarele dimensiuni : (10 15) x (3 4) x (0,75 1) m i sunt amenajate din pmnt, cu alimentare i evacuare continu. Bazinele de reproducere. Sunt bazine cu suprafee mici (0.25 0,5 ha), cu alimentare i evacuare a apei permanent, cu fundul tare i adncimea apei de 0.70 0,9 m, mai rar pn la 1 1,2 m. n aceste bazine se fixeaz saltelele (cuiburile) pe care reproductorii urmeaz s depun. Saltelele de reproducere sunt confecionate din rame de lemn ptrate, cu laturile de 1,0 x 1,0 m, pe care se prinde o sit de nytal. Pe nytal sunt prinse mustile de salcie din loc n loc. Saltelele astfel confecionate se fixeaz direct pe fundul bazinului (fig. nr. 1).

Fig. nr. 1 Saltea pentru reproducerea alului

26

Fig. nr.2. Instalarea saltelelor de reproducere dirijat a alului

Fixarea saltelelor n bazinul de reproducere se face la 2-3 m de mal (pentru a putea observa momentul depunerii) iar distana ntre ele pe latura bazinului de 8-10 m (fig.2). 2.1.1 Descrierea i realizarea instalaiei de incubare a icrelor de alu Instalaia de incubare a icrelor de alu are ca scop realizarea condiiilor de optime de incubare a acestora. Se asigur alimentarea, meninerea unui nivel optim, tratarea icrelor i evacuarea apei individualizat din fiecare incubator Componena instalaiei Instalaia se compune din urmtoarele subansamble: a) Ansamblu pregtire incubaie; b)instalaie de alimentare incubatoare; c)incubator ; d)suport incubatoare; e)instalaie de evacuare.

Descrierea i realizarea instalaiei

a) Ansamblu pregtire incubaie Este constituit din: instalaie de alimentare cu ap tehnologic; tvi pentru fecundare ; rame suport pentru icre; plaform suport. Instalaia de alimentare cu ap tehnologic const dintr- o conduct metalic cu diametrul de 100 mm, racordat la conducta care alimenteaz staia de

27

incubaie, pe care sunt montai robinei la distante de 1,0 m, prin intermediul unor evi cu diametrul de 25mm. Tvile pentru ntinderea icrelor pe rame dup fecundare, sunt confecionate din tabl galvanizat i au dimensiunile de 180 x 67 x 6,5 cm. Avnd n vedere c alaul este o specie care, n mediul natural, depune icrele pe pietre i pe vegetaie acestea fiind lipicioase, pentru incubarea artificial se folosesc rame suport. Ramele suport sunt confecionate dintr-un cadru metalic din srm de inox cu dimetrul de 3 mm, pe care se fixeaz o pnz de nytal. Ramele sunt dreptunghiulare cu dimensiunile de de 50,0 cm lungime i 30,0 lime. n incubator se fixeaz pe suportul special, pe lungime, avnd la capete nite prelungiri n unghi drept , care ptrund n fanta suportului i le menin astfel n poziie vertical. Platforma suport este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt aezate blaturile din lemn.

Fig. nr. 2 Ansamblu pregtire incubaie

b)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a celor 40 de incubatore dispuse pe dou rnduri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic printr-o conduct metalic cu diametrul de 500 mm. Reglarea debitului se face prin intermediul unei vane. La intrarea n staie, conducta se ramific, pentru a realiza alimentarea independent a celor dou rnduri de incubatoare, n dou brae paralele, cu diametrul de 100mm, pe care sunt montai robinei care permite alimentarea optim a fiecrui incubator. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Alimentarea cu ap a incubatoarelor se realizeaz prin lateral, pe deasupra incubatorului, prin conducte metalice cu 25mm, n form curbat la captul superior, (n form de pip), iar reglarea debitului, prin intermediul unor robinete. La captul superior al evii de alimentare

28

se ataeaz, prin intermediul unui furtun, o eav metalic n form de T , latura lung orizontal fiind prevzut cu numeroase orificii de 2mm, care asigur distribuia apei pe ntreaga suprafa a incubatorului i oxigenarea suplimentar a apei tehnologice. Debitul de lucru n perioada de incubaie este 5-6 l / min. b)Incubator tip Nucet utilizat la incubarea icrelor de alu Incubatorul tip Nucet, este realizat dintr-o cutie metalic, cu dimensiunile 60 x 60 x 55 cm, n care se introduce un juvelnic confecionat din sit de Nytal cu ochiuri de 200 , dimensiunile 52 x 52 x 46 cm; juvelnicul este susinut de un stelaj metalic din fier beton 4mm, cu dimensiunile 56 x 56 x 55. Incubatorul mai este echipat cu un suport pentru fixarea ramelor reprezentat de un cadru metalic ptrat, cu latura de 51 cm. Pe dou dintre laturile opuse ale acestui suport sunt realizate fante cu deschiderea de 5mm, la distan de 2 cm, pe care sunt aezate ramele cu icre. Incubatorul are un volum de 180 l ap i o capacitate maxim de incubare de 1,5 kg icre. Evacuarea apei din incubator se realizeaz prin intermediul unui tu de evacuare cu 50 mm, situat pe latura opus alimentrii , n partea superioar. c)Suportul incubatoarelor este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt sudate lonjerone confecionate din eav ptrat pe care sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt dispuse incubatoarele. d) Instalaia de evacuare Asigur evacuarea apei reziduale utilizat n procesul tehnologic. Instalaia este confecionat din tubulatur din PVC mbinat cu adeziv Codex i este construit din 2 jgheaburi nclinate care colecteaz apa evacuat din incubatoare, fixate pe cadrul instalaiei prin intermediul unor coliere.

29

Fig. nr 3. Incinte de incubare a icrelor de alu Tip Nucet

2.1.2 Descriere i realizarea modulului de parcare a reproductorilor

Modulul de parcare a reproductorilor este utilizat pentru reproductorii aflai n perioada de dinaintea depunerii pontei .

Componena unitii de parcare a reproductorilor.

Modulul se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Bazin paralelipipedic cu volumul util de 4,0 mc b) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei c) Instalaie de alimentare

Descrierea i realizarea unitii de parcare a reproductorilor Bazinul este de form paralelipipedic cu dimensiunile de 2 x2 x 1, 2 m i este confecionat din prelat plastifiat. Este asamblat prin lipire prin nclzire local i cu adeziv. Bazinul este montat pe un cadru din eav metalic cu 50, alctuit din 8 elemente cu lungimea de 2, 0 m care constituie partea superioar i inferioar a bazinului i alte 12 elemente pe prtile laterale la distane de 1, 0 m unul de altul, mbinate prin sudur, care asigur forma si rezistena bazinului. Att la partea superioar ct i la cea inferioar sunt lipite benzi suplimentare, care dubleaz peretele bazinului, prevzute cu orificii prin care trece

30

cte o frnghie de relon cu 12 mm care asigur prinderea bazinului de structura metalic. n lateralul bazinului, n partea opus alimentrii, este practicat un orificiu prelungit cu un cilindru de prelat cu diametrul de 100 mm, prin care trec elementele instalaiei de evacuare. nlimea bazinului este de 1,2 m. Montarea bazinului se realizeaz astfel : pe o platform plan i fr asperiti se aeaz plci din polistiren expandat cu grosimea de 20 mm care asigur protecia acestuia de eventuale agri, nepri sau deteriorri. Se asambleaz structura de susinere a acestuia i se prinde bazinul de prelat, cu ajutorul frnghiei de relon. Se monteaz n orificiul lateral al bazinului instalaia de scurgere i se fixeaz furtunul flexibil n inel pentru asigurarea nivelului dorit. Pe marginea superioar a bazinului, opus gurii de evacuare se fixeaz eava de alimentare n unghi de 45 0 fa de peretele bazinului.

Fig.nr. 4. Modulul de parcare a reproductorilor Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de parcare a reproductorilor are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazin. Instalaia este alctuit dintr-un alimentrii un orificiu de scurgere cu diametrul de 100 mm. n acest orificiu se plaseaz o tubulatur ce va asigura preluarea surplusului de ap din incint realiznd n acest fel circulaia apei. Etanarea gurii de scurgere se asigur prin intermediul unui inel O Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon. Tubulatura de evacuare este executat din PVC flexibil avnd diametrul de 100 mm, mbinat cu adeziv de tip Codez.

31

Sistemul de reglare a nivelului apei n bazin este asigurat prin poziionarea tubului flexibil la nivelul dorit. Tubul flexibil este stabilizat de un inel prins de structura metalic a bazinului. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 1,0 m. Instalaia de alimentare cu ap a bazinului de parcare a reproductorilor de alu asigur un debit de ap de 35 l/min. Instalaia este construit din eav de PVC de 1 3/4II i un robinet. eava este poziionat la un unghi de 45 0 fa de peretele bazinului de parcare.

3. DESCRIEREA TEHNOLOGIEI alul este o specie a crei reproducere controlat este foarte dficil din cauza sensibilitii deosebite la manipulari i traumatisme, care duce la nregistrarea unor procente de mortalitate a reproductorilor de pn la 50%. n cadrul proiectului au fost elaborate dou tehnologii : - tehnologia dirijat artificial n care reproductorii n stadiul avansat de maturare sunt introdui n bazine de reproducere pentru depunerea icrelor pe saltele , dup care acestea sunt recoltate i incubate n staie, n incubatoarele Nucet. Prezint avantajul c reproductorii nu sunt stresai, prin manipulri suplimentare i traumatizai, n momentul recoltrii produselor sexuale, pierderile de sunt minime, dar i dezavantajul c se obin cantiti mici de icre, procente de embrionare reduse, iar embrionii sunt expui atacurilor diverilor duntori. -tehnologia artificial, n care dup evaluarea stadiului de dezvoltare al gonadelor, reproductorii sunt parcai n staia de incubaie, stimulai hormonal i obinerea produselor sexuale, fecundarea i incubaia se realizeaz n condiii controlate n totalitate. Prezint avantajul c pot fi utilizai reproductori femele cu gonade n stadiu mediu de maturare, dnd posibilitatea folosirii mai multor reproductori, procesul de recoltare a produselor sexuale, incubare i dezvoltare embrionar sunt controlate n totalitate ducnd la creterea eficienei reproducerii i la obinerea unei descendene mai numeroase. Tehnologia de reproducere dirijat - artificial i cretere a larvelor speciei Stizostedion lucioperca presupune parcurgerea urmtoarelor faze: Asigurarea loturilor de reproductori evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; parcarea, prematurarea reproductorilor evaluarea strii reproductive; introducerea n bazine de reproducere; depunerea pontei; prelevarea saltelelor; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; ambalarea i transportul puilor Tehnologia de reproducere artificial i cretere a larvelor Stizostedion lucioperca presupune parcurgerea urmtoarelor faze: Asigurarea loturilor de reproductori evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; speciei

32

parcarea, prematurarea reproductorilor maturarea reproductorilor evaluarea strii reproductive; stimularea maturrii celulelor sexuale; colectarea produselor sexuale; fecundarea; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; ambalarea i transportul puilor

Primele patru etape respectiv: asigurarea loturilor de reproductori, evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului;parcarea, prematurarea reproductorilor i evaluarea strii reproductive, sunt comune i se desfoar identic n ambele tehnologii. Dup evaluarea strii reproductive , femelele aflate n stadiu avansat de maturare (IV) sunt selecioanate i introduse n bazinele de reproducere dirijat, pentru depunerea icrelor pe saltele, iar cele aflate n stadiul III sunt introduse n madulele de maturare din staia de incubaie, pentru a fi stimulate hormonal. Asigurarea lotului de reproducatori. Reproductorii de alau necesari staiilor de producere i cretere a puilor provin att din mediul natural, prin capturarea acestora primvara devreme, ct i din loturi constituite i crescute n acest scop n fermele piscicole. Capturarea se va realiza cu unelte care s nu provoace rniri sau traumatisme, alul fiind deosebit de sensibil la cele mai mici lovituri, manipularea lui la scoaterea din vre, nvoade, prostovoale, trebuie s se fac cu mare grij. Transportul de la locul de capturare, la staiile de reproducere artificial, se realizeaz n hidrobioane, apa trebuie s fie limpede i bine aerat (se folosesc instalaii de oxigen), iar temperatura s fie de 7 8oC. In vasele de transport se adaug o soluie anti stress Propiscin n cocentraie de 0,02 ml/ l Evaluarea preliminar a reproductorilor Reproductorii de alu vor fi examinai imediat dup pescuit pentru evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului. Sunt selecionai reproductori cu lungimea de 30 -50 cm i greutatea de 1,0-3,0 kg. Reproductorii trebuie s prezinte integritate corporal, caliti biologice i o stare fiziologic bun. Nu se admit exemplare lovite sau afectate de boli parazitare sau infecioase. Determinarea sexului n aceast perioad se realizeaz dup caracterele morfologice de dimorfism sexual. Femelele sunt n general de talie mai mare dect masculii de aceeai vrsta, au abdomenul mai proeminent, iar orificiul genital este inflamat i zona moale la palpare. Maturarea reproductorilor n luna martie, cnd temperatura apei se situeaz, n mod constant n jurul valorii de 7-8 0C, reproductorii de alu sunt pescuii din bazinele de iernare i sunt transferai n bazinele de maturare separai pe sexe, n care se asigur curent continuu de ap. Separarea femelelor si masculilor pe sexe se face cu mare grija, n loturi ct mai omogene si sunt mentinuti n bazinele de maturare, pentru

33

stabilirea momentului optim de prelevare a icrelor. ntr-un bazin de maturare se introduc , n general, 30-40 de reproductori. Reproductorii sunt inui n aceste bazine pn n momentul n care apa atinge Dup acest interval temperatura optim pentru reproducere 10-120C. reproductorii vor fi evaluai sub aspectul strii de maturare a gonadei. Evaluarea strii reproductive Metoda de evaluare att a stadiului de maturare ct i a coeficientului de polaritate presupune colectarea a minimum 5 ovocite din partea posterioar a ovarului prin practicarea unei puncii. Ovocitele colectate se vor fierbe ntre 5 i 10 minute pentru fixarea poziiei nucleului i apoi se vor rci prin aezarea vasului ntr-o incint cu ghea. Pentru a determina poziia nucleului sau vezicii germinative, ovocitul se va seciona exact de-a lungul axei polului animal-vegetal. Dup aceast operaiune poziia nucleului va fi observat i evaluat . Pentru stabilirea coeficientului de polaritate la aceeai prob la care s-a determinat stadiul de maturare se msoar la stereomicroscop distana de la partea superioar a veziculei germinative (A) la polul animal i distana de la polul vegetal la cel animal (B) (Figura. nr.5 ). Coeficientul de polaritate se calculeaz folosind formula c =

A unde B

c - coeficient de polarizare A distana de la vezicula germinal la polul animal B - distana de la polul animal la polul vegetal Pentru determinarea cu acuratee a coeficientului de polarizare sunt necesare efectuarea mai multor msurtori stabilindu-se o medie. Valori mici ale coeficientului indic un grad mare de polarizare al ovocitului deci un stadiu IV de maturare avansat. Schema de evaluare a coeficientului de polarizare a ovocitei. Fig. nr. 5

Introducerea n bazinele de reproducere;

34

Dup evaluarea strii reproductive femelele care sunt n stadiul avansat de maturare sunt selecionate i introduse n bazinul de reproducere, n care sunt fixate saltele. De asemenea, sunt lansai n bazin i masculii care la o masare uoar a abdomenului apar cteva picturi de sperm. ntr-un bazin de un hectar se lanseaz 10-12 femele i tot atia masculi. Lotul trebuie s fie ct mai omogen alegndu-se reproductori de talie apropiat. In 10 24 de ore se formeaz deja perechile de reproductori n bazin, i se poate observa dup mal, prezena lor deasupra saltelelor, acest lucru fiind un indiciu c se apropie momentul depunerii pontei.

Fig nr. 6 Mascul i femel de alu, n stadiu avansat de matuare Depunerea pontei are loc n primele ore ale dimineilor nsorite. Dimineaa i seara se face rondul bazinului pentru a observa saltelele pe care a fost depus ponta. Stabilirea momentului de depunere a icrelor se face de pe mal, prin urmrirea perechilor de reproductori, care stau deasupra cuiburilor de pe saltele. Cuiburile pe care sunt icre se pot observa cu uurin prin transparena apei, fiind instalate aproape de mal, la adncimi de 70-80 cm. n plus, masculii continu s stea pe saltea, sau n apropierea ei, pentru a pzi ponta de eventualii duntori. Cuiburile cu icre, se scot din bazinul de reproducere pe mal, se desprind cu atenie de pe saltele i se transport n trgi cu ap n staia de reproducere (fig. 7). Este foarte important ca icrele s fie recoltate ct mai repede dup depunere, astfel nct s se evite atacul ciupercilor i al duntorilor din bazin . De asemenea, operatia de scoatere din ap a saltelelor , desprinderea cuiburilor i transportul lor n staie n vederea introducerii n incubatoare, trebuie s se realizeze n linite pentru a nu stresa reproductorii care nu au depus nc ponta i cu mare atenie icrele fiind foarte sensibile.

35

Fig. 7 Desprinderea cuiburilor cu icre de alu Incubarea icrelor de alu. Cuiburile de alu se pun cu grij n juvelnicele de nytal din incubatoarele Nucet i se asigur alimentarea cu ap permanent , la un debit de 8l/min. n funcie de stadiul de dezvoltare embrionar, la 12 - 24 de ore dup introducerea la incubaie, se face tratamentul icrelor cu formalin (concentraie2 ml : 1 l ap), timp de expunere 10 - 15 minute (n funcie de temperatura apei). Operaiunea se repet la 12 ore, pn cnd, coada embrionului nconjoar aproape n ntregime sacul vitelin, i se observ pulsaiile inimii.

Fig. nr. 8 Icre embrionate de alau lipite pe musti de salcie La temperaturi ale apei n jur de 10oC, dezvoltarea embrionar dureaz 11-12 zile, iar la 15 16oC, 5 - 7 zile. Procentul de embrionare este n jur de 60 - 75%, iar cel de eclozare de peste 50%. Dup eclozare, se scot mustile de salcie din juvelnice . Avnd n vedere c larvele de alu sunt sensibile i noat greoi din cauza sacului vitelin voluminos, se introduc 2 3 rame curate pentru ca larvele de alu s se sprijine i s se odihneasc.

36

Schema cadru a tehnologiei de obinere prin reproducere artificial a descendenilor speciei Stizostedion lucioperca este prezentat n figura nr 9 Fig nr. 9

Schema fluxului tehnologic de obinere prin reproducere artificial a larvelor de alu

Captura reproductorilor Din mediul natural. Asigurarea loturilor de reproductori

Evaluarea preliminar a reproductorilor Aprecierea strii fiziologice i de ntreinere

Parcare reproductori Bazine din pmnt 2000-3000 mp

Condiii de parcare Debit de alimentare de 3-5 l/s/ha Nivel de oxigen nu mai mic de 5 mg/l

Testarea opional a reproductorilor Evaluarea stadiului de maturare a gonadelor

Stimulare hormonal Injectare cu extract hipofizar

Maturare Module de maturare Debit de alimentare 8-10 l/s/ha

Femele Prin masare uoar

Prelevare produse sexuale

Masculi Prelevare cu seringa prevzut cu tub tygon sau sacrificare

Fecundare Cu sperm proaspt prin metoda uscat . 5ml sperm la 1 l icre.

Incubare Incubare Incubatoare tip Nucet

Tratamente icre embrionate

Eclozare larve

Parcare

Ambalare

37

Stimularea hormonal La stabilirea dozelor se au n vedere urmtorii factori : - temperatura apei; - stadiul de maturare al reproductorilor, - tipul de substane homonale utilizate. Pentru stimularea hormonal a alului se va folosi extract de hipofiz de crap. Cantitatea de hormon injectat va depinde de greutatea reproductorului, greutate ce trebuie stabilit prin cntrire pentru fiecare exemplar n parte. Pe baza greutii petelui se va calcula doza ce urmeaz s fie administrat. Femelele sunt stimulate cu 5-15 mg/kg corp, in functie de gradul de maturare, iar pentru masculi se administreaza 35 mg/kg corp. Injeciile hormonale se vor administra cu o sering de 1,0-3,0 cm3 cu ace de calibru 23 - 25, lungi de 3,2 cm cu butuc din material plastic transparent. Injecia se efectueaz fie n muchiul dorsal , fie la baza nottoarei pectorale. Injectrile se pot efectua prin ridicare parial din ap a reproductorului, fie sub ap n momentul n care reproductorii stau pasivi n targa de prelat. Dupa injectare, reproductorii separai pe sexe, sunt introdui n czi, pentru maturare, n staia de incubaie. n perioada de maturare temperatura optim este de 14-160C, iar cantitatea de oxigen dizolvat de minim 6 mg /l. Ovulaia se poate produce dup cca. 48 de ore dup administrarea injeciei. Colectarea icrelor si fecundarea artificial. Colectarea icrelor se face de la femele perfect mature din punct de vedere sexual. In momentul recoltrii icrelor, pestele se imobilizeaza, infsurandu-se cu un servet de tifon in jurul capului si a cozii, se tine de cap cu mna stnga, cu coada in jos, astfel ca in timpul mulgerii, icrele sa se scurg n vasul pregtit. (Fig.nr. 9)

Fig. nr.9 Colectarea icrelor de alu

38

Se maseaz uor abdomenul in directie longitudinala, de sus in jos, in lungul liniei axiale a abdomenului, impingandu-se icrele catre orificiul genital. De la fiecare femela se colecteaza o singura portie de icre; exemplarele a caror gonade sunt bine dezvoltate elimina usor si, in general , intreaga cantitate de icre din ovar: icrele remanente sunt in numar redus. De la o femel de alu se recolteaz o cantitate de icre cuprins ntre 150 i 200 ml. La fel se procedeaz si cu masculii. Sperma se mulge direct peste icre sau se recolteaz cu ajutorul unei seringi prevzut cu tub tygon de 5-6 cm. Tubul se introduce ncet n orificiul urogenital. La exemplarele la care spermiaia este complet, sperma ncepe s urce n sering n momentul retragerii pistonului. Fecundarea Icrele colectate de la o singur femel se fecundeaz separat cu amestec de sperm provenit de la 5-6 masculi. Cantitatea de sperm folosit este de 2ml pentru o porie de 200 ml icre. Fecundarea se realizeaz prin metoda uscat, sperma distribuindu-se uniform, n masa icrelor. Amestecul este omogenizat, dup care se adaug lichidul fecundant . Fig. nr. 10

Fig. nr.10 Fecundarea icrelor de alu

Timpul de fecundare este de 3 -5 minute. Este necesar ca pe parcursul acestei perioade s se intervin de una, dou ori pentru agitarea uoar a icrelor. n acelai timp sunt pregtite tvile pentru fecundare , n care se aeaz ramele suport de nytal Dup scurgerea celor trei minute, timp n care mobilitatea spermatozoizilor scade, i cnd procesul de fecundare se consider ncheiat, icrele sunt dispersate pe ramele suport din nytal. Avnd n vedere c icrele de alu sunt lipicioase , vor adera pe pnza de nytal. La dispersia acestora pe rame, trebuie s se acorde o atenie deosebit astfel nct, acestea s nu se aglomereze, pentru a permite

39

oxigenarea uniform. Ramele cu icre sunt lsate n tvi cca 5 minute, pentru fixarea definitiv a icrelor pe pnza de nytal. Incubarea icrelor. Incubarea icrelor va ncepe odat cu introducerea i fixarea ramelor n incubatorul Nucet. Durata perioadei de incubaie este variabil n funcie de temperatura medie zilnic : 11 zile la 13C, 4-5 zile la temperaturi de 14-15 C Pentru alu temperatura optim de incubaie este de 150 C. Durata medie a embriogenezei la aceste valori ale temperaturii apei este n jur de 5 - 6 zile. Aceste temperaturi ofer bune condiii de dezvoltare embrionar i nu nlesnesc dezvoltarea fungilor. Pe durata embriogenezei debitul de alimentarea al incintelor de incubaie se va corela cu necesitile fiziologice ale embrionului n diferitele lui stadii de dezvoltare. Debitul de alimentare al incubatoarelor pn la faza de gastrulaie a icrei va fi reglat de aa manier nct s creeze unui curent de ap care s nu produc deslipirea icrelor de pe rame (3- 4 l/min). Dup gastrulaie, incubatorul se alimenteaz cu un volum de ap mai mare (5 7 l/min.) Un factor important ce trebuie asigurat i controlat pe perioada de dezvoltare embrionar este consumul de oxigen care pe perioada embriogenezei crete pe msura dezvoltrii embrionului. Pe parcursul embriogenezei nivelul oxigenului n incintele de incubare va fi meninut la valori de minim 5 6 mg/l. Controlul fungilor pe perioada incubaiei se va realiza prin mbierea icrelor, cu soluie de formalin, timp de 15 minute. Primul tratament se va realiza la 24 de ore de la fecundare , iar urmtoarele la intervale de 12 ore pn n momentul apariiei veziculelor optice. Pe perioada incubaiei se va stabili supravieuirea n diferite faze ale dezvoltrii embrionare. Procentul de fecundare se va stabili la cca. 48 de ore de la fecundare, ceea ce corespunde stadiului de gastrul. Pentru determinarea procentului de fecundare icrele din incubator se examineaz fiecare ram stabilindu-se prin metoda caroiajelor, prin numrare direct, numrul de icre normale. Dup eclozare, ramele se scot din incubator, iar larvele sunt inute n incubatoare, pn n momentul resorbiei sacului vitelin. Caracteristici ale dezvoltrii embrionare si larvare Avnd n vedere faptul c, alul este o speciei foarte sensibil n primele etape de dezvoltare, reuita reproducerii concretizat n procentul de viabilitate a larvelor depinde n mare msur de cunoatere particularitilor de dezvoltare embrionar i larvar n vederea stabilirii interveniilor tehnologice adecvate. Dezvoltarea embrionar. Durata procesului de dezvoltare embrionar este influenat de temperatura apei n care are loc incubaia: 11 zile la 13C , 4-5 zile la 15 16C La puin timp dup fecundare, diametrul icrei variaz ntre 1,2 si 1,4 mm. Dup 48 ore, n condiiile dezvoltrii embrionare la 15-16C, embrionul se fl n stadiu de gastrul. Dup 72 de ore se observ formarea corpului embrionului (la

40

care se disting 21 de miomere) i care nconjoar pe jumatate sacul vitelin; ochii sunt puin pigmentai, se observ inima i circulaia sanguin. Dupa 5 zile se constat o cretere vizibil a embrionului. Corpul nconjur aproape o dat i jumtate sacul vitelin; se observ circa 34 de miomere. Ochii sunt pigmentai, au culoarea cafenie. Se disting primordiile orificiului nazal, inima i circulaia sanguin. Din timp n timp, embrionul se zvrcolete n interiorul icrei. Dup 7 zile, n preajma eclozrii, embrionul nconjoar de dou ori sacul vitelin. Ochii sunt puternic pigmentai. In zona capului, pe sacul vitelin i mai puin pe restul corpului, se observ mici cromatofori cafenii. Se mai observ tubul digestiv, inima i sngele de culoare roz i cuta notatoare. Dac pe parcursul dezvoltrii embrionare intervine o schimbare brusc a condiiilor de mediu, embrionii pot muri n proporie de 90%. Efectul este cu att mai puternic cu ct embrionii se afl ntr-un stadiu naintat de dezvoltare. Incubandu-se icre fecundate la 12-13C, timp de 3 zile (s-a depasit stadiul de gastrul, obsevnd nceputul formrii corpului embrionului), care apoi au fost introduse n acvarii, la temperatura de 22-23C, s-a observat o accelerare a dezvoltrii embrionare. Dup circa 10 ore de la incubaie, n noile condiii, embrionul era format, nconjurnd mai mult de jumtate din sacul vitelin i se puteau numra aproximativ 20-21 de miomere. Ochii erau formai, fr a fi pigmentai. A doua zi, adic la 24 ore dup ce icrele au fost introduse n acvarii (la aproximativ 5 zile de la fecundaie), 95% din embrioni au eclozat (fig. 11). Eclozarea a avut loc n stadiul n care embrionii nconjurau aproape n intregime sacul vitelin, ochii erau foarte puin pigmentai, iar sacul vitelin i corpul lipsite de pigmeni; deci, o dezvoltare embrionar incomplet. Larvele nu au supravieuit mai mult de 10 zile, cu toate c au avut condiii bune de mediu.

Fig.nr.1 Icr inainte de eclozare Dar nu numai variaiile de temperatur, ci i insuficiena concentraiei de oxigen afecteaz dezvoltarea embrionar. Dac n perioada de embriogenez (ncepnd din stadiul de gastrul) se provoac o caren progresiv a concentraiei

41

de oxigen din ap, se obin embrioni cu importante fenomene de degenerescen (acefalie, microcefalie, ciclopie, deformarea coloanei vertebrale) Dezvoltarea larvar. Larvele de alu sunt deosebit de sensibile la variaiile conditiilor de mediu i supravieuiesc ntr-un procent mic. Prin creterea experimental a larvelor n condiii artificiale, s-a dovedit c cerinele ecologice ale acestora sunt deosebit de specializate i lipsa unui singur element din complexul de factori mediali necesari unei dezvoltri normale afecteaz fundamental vitalitatea larvelor. La scurt timp dup eclozare (1-2 ore), larvele au 3,90-4,10 mm lungime, corpul este transparent, alburiu glbui, cu mici cromatofori negri, alctuit din 3941 miomere. Gura are aspectul unei fante. Ochii sunt pigmentai, culoarea - cafeniu nchis, aproape neagr. Sacul vitelin este oval i prezint o pictur de grsime. Pe partea dorsal, ncepnd din prima jumtate a corpului, se observ cuta notatoare, care se prelungete pe partea ventral, pn n dreptul sacului vitelin. nnottoarele pectorale sunt membranoase. Prin transparen se observ intestinul, care este foarte subire. Larvele noat greoi i au tendina de a se lsa pe fundul juvelnicului, apoi se ridic n orizontul superficial printr-un not sacadat. Uneori ajung pe fundul apei doar pentru o clip, continund s noate cu mici pauze. La vrsta de 3 zile, lungimea larvelor este de 5 5,25 mm, sacul vitelin este nc prezent, dar cu dimensiuni reduse fa de etapa precedent. Se observ mugurii branhiali (fr a fi acoperit de opercul), iar gura este funcional. Pigmentaia de pe partea ventral a corpului se accentueaz. Prin transparena corpului, pe material viu, se observ creierul i primordia coloanei vertebrale. Se pot numra 45 - 46 de miomere, iar intestinul se poate distinge. Larvele noat cu uurin, dar au nc tendina de a se scufunda. De la varsta de 7 - 8 zile se constat un ritm de cretere mai lent, la 9 zile, lungimea este doar de 6,5 - 7 mm, deci o cretere de 2 mm n 4 zile. Larvele sunt transperante, n schimb pigmentaia s-a extins i n zona dorsal a corpului. Nu se mai observ rmie ale sacului vitelin i nici picturi de grsime. Membrana nottoare este prezent i ncep s se formeze radiile nottoarelor dorsale, anala i caudala. Gura este bine dezvoltat i mobil. Intestinul este evident curbat ventral n zona formrii stomacului, iar prin transparen se observ mici striaii n peretele intestinal. Aceasta este etapa de trecere la hrnirea activ, deoarece au fost gsite primele organisme n coninutul gastrointestinal. La vrsta de 15 - 16 zile, larvele au 10 - 12 mm. Corpul este mai puin transparent, glbui. Petele pigmentare cafenii acoper aproape toat suprafaa corpului. Mai prezint nc membrana notatoare, care este ns sensibil redus, fiind mai dezvoltat n zona nottoarelor dorsale i caudale, unde au nceput s se observe primordiile radiilor. Gura, ventral, este bine dezvoltat, iar pe maxilarul inferior (privit la binocular) se observ mici dini, la nceputul formrii lor. Intestinul se caracterizeaz prin accentuarea curburii. Larvele not cu uurin, cantonnduse n zonele cu adncimi mici i cu vegetaie acvatic bogat n baz trofic. La vrsta de 26 - 30 de zile, larvele se gsesc n etapa de trecere la perioada de pui, predominnd caracteristicile acesteia din urm perioade. Lungimea este de 20 - 23 mm, corpul este netransparent, iar pigmentaia mai dens pe partea dorsal

42

a corpului. Lipsete cuta notatoare, iar notatoarele sunt formate toate. Inoat cu repeziciune, cantonndu-se la adancimi mai mari, dar tot n apropierea malului. La 45 de zile, lungimea variaz ntre 38 - 40 mm; au corpul acoperit cu solzi, iar coloritul i forma corpului sunt asemntoare adulilor. Inoat cu repeziciune, fiind cantonate att la adncimi mici (n zona ntinsurilor), ct i la adncimi mari, dar n zone bogate n organisme planctonice i bentonice. Dezvoltarea tubului digestiv n primele etape i rolul su n supravieuirea larvelor. Procentul cel mai mare de mortalitate la larvele de alu se nregistreaz dup consumarea rezervelor viteline, n etapa de trecere la hrnirea exogen i supravietuiesc numai acei indivizi care s-au adaptat la hrana exclusiv exogen. n msura n care tubul digestiv se dezvolt normal, avnd capacitatea de a digera hrana exogen, larvele depesc etapa critic. n etapa de trecere la nutriia mixt, secreiile gastrice apar ca o consecin a unor excitaii mai ndelungate a peretelui intestinal de ctre organismele ptrunse n intestin. Din observaiile noastre rezult c, n aceast etap, algele, rotiferele sau naupliile din intestin nu sunt digerate, chiar dac se gsesc n partea terminal, a intestinului n momentul eliminrii lor. Din punct de vedere morfologic, tubul digestiv este drept, cu o deschidere foarte mic a lumenului, iar peretele intern al intestinului este cptuit cu un strat de celule cilindrice care formeaz mici pliuri. La vrsta de 8-9 zile (L = 7 mm), n bioecologia larvelor se petrec schimbri importante. Rezervele viteline sunt total consumate, hrnirea se efectueaz doar cu organisme din mediul extern. Tractusul digestiv are tot form de tub drept (3,5 mm lungime), dar n partea anterioar se observ o uoar curbur vertical. Aceasta marcheaz nceputul formrii segmentelor, aa cum au fost descrise la crap (B r e z e a n u, 1972 a), cu diferena c n partea anterioar a segemntului anterior se va forma stomacul. Hrnirea este intens, baza trofic fiind alctuit n principal din zooplancton. La vrsta de 20 - 25 de zile (L= 17 - 19 mm, ) la nivelul segmentului mediu al intestinului, imediat dup esofag, ncepe s se formeze stomacul. La nceput se observ o usoar dilatare a segmentului anterior, care apoi se dezvolt, nscriind o cretere ctre partea posterioar. La vrsta de 27 - 30 de zile (L= 22-25 mm), stomacul apare ca un organ bine individualizat, n prelungirea segmentului esofagian, ca un sacule oval, formnd ramura descendent (cardial), cu orificiul de intrare cardia. n partea anterioar comunic cu intestinul prin orificiul piloric, formnd ramura ascendent sau piloric. Tot aici se formeaza apendici pilorici (mai nti 2 - 3, apoi la vrsta de 45 - 50 de zile - 5 - 7). Epiteliul peretelui intern formeaz numeroase pliuri dispuse n zigzag, foarte elastice, stomacul putndu-i mri capacitatea de 2 - 3 ori. La exemplarele de 25 - 30 mm, stomacul lipsit de hran are 3-4 mm lungime i 1 - 2 mm grosime, iar la cele cu stomacul foarte plin dimensiunile se dubleaz. n epiteliul mucoasei stomacale se gsesc numeroase celule cu rol glandular, secretnd fie mucilagii, fie fermeni (pepsina este caracteristic pentru rpitori). Coninutul stomacal macerat este evacuat n intestin, acelai coninut gsindu-se i n apendicii pilorici. Cu totul deosebit este dezvoltarea tubului digestiv la larvele care nu s-au adaptat la hrnirea exogen. Astfel, chiar la vrsta de 15 - 16 zile, larvele care supravieuiesc au intestinul tot n form de tub drept, cu un lumen foarte mic, lipsit de pliurile peretelui intern. Cele cteva rotifere sau cladocere din coninutul

43

gastrointestinal dovedesc c larvele au o nutriie anormal. Atrofia intestinului se poate datora unor cauze de natur intern (motenirea unor anomalii din stadiile anterioare de dezvoltare care au ajuns la o stare acut) sau de natur extern (lipsa hranei adecvate n etapa de trecere la nutriia mixt). Hrana i relaiile trofice ale larvelor i puilor. Important la alu este c n etapa de trecere de la nutriia endogen la cea exogen, spectrul ecologic al larvelor este foarte limitat, cerinele organismului fa de condiiile de mediu fiind deosebit de specifice, iar asimilarea lor foarte anevoioas. Aceast hipersensibilitate explic ntr-o anumit msur supravieuirea sczut a larvelor; este ceea ce se inelege prin perioada critic. Trebuie subliniat c dezvoltarea general a larvelor, modul de hrnire, componena calitativ i cantitativ a organismelor nutritive sunt fundamental influenate i de biotopul n care vieuiesc. Observnd larve vii la microscop se constat c n etapa nutriiei endogene, maxilarul inferior este imobil, gura nu execut micri de nghiire, iar intestinul este foarte subire, ca un tub, astupat. Pentru a se hrni este necesar ca mai nti gura s devin funcional. n prima etap, ptrunderea hranei este ntmpltoare i nici fenomenul de digestie nu are loc. n ziua a 3 - a sau a 4 - a de via, algele unicelulare sau rotiferele foarte mici care se gsesc n intestin nu sunt digerate, chiar dac se gsesc n partea posterioar a intestinului n momentul eliminrii lor. Aceasta pseudohrnire exogen dureaz pn la vrsta de 5 zile, timp n care se dezvolt i se perfecioneaz att aparatul bucal, ct i restul segmentelor tubului digestiv. n aceast etap, n coninutul gastrointestinal au fost identificate speciile: Oscilatoria sp., Euglena oxiuri, Closterium sp., Cosmarium sp., Pediastrum duplex, Gomphonema sp. De la vrsta de 6 zile (L= 5,5 6 mm), n coninutul gastrointestinal al larvelor s-au identificat alge (Oscilatoria sp., Merismopedia punctata, Euglena oxiuri, Cosmarium sp., Pediastrum sp., Navicula sp.,) rotifere (Brachionus urceolaris, Br. caliciflorus, Br. angularis, Lecane hamata, L. luna), nauplii i ou de rotifere. n aceast etap, larvele mai au rezerve viteline, astfel nct nutriia este mixt (endogen exogen), dar judecnd dup numrul i aspectul organismelor din intestin, ele sunt adaptate la nutriia exogen. La vrsta de 9 zile ( L = 6 - 6,75 mm), hrana este fitoplanctonic zooplanctonic, cu o uoara dominan a zooplanctonului, iar rezervele viteline sunt complet consumate. La vrsta de 15 - 16 zile (L= 10 - 12 mm), algele i chiar rotiferele sunt din ce n ce mai puin consumate. Dei numeric se intlnesc pn la 10-12 exemplare din fiecare grup, gravimetric sunt nensemnate, masa principal a coninutului gastrointestinal fiind acum alctuit ndeosebi din cladocere (pn la 9 exemplare) i nauplii (1 - 5 exemplare). Nutriia devine mai consistent datorit insi naturii organismelor ingerate, mai bogate n elemente nutritive. Interesant de semnalat c dintre cladocere, specia frecvent n coninutul intestinal este Simocephalus sp., i nu Moina sp. abundent n plancton. La vrsta de 23 - 25 de zile (L = 17 - 19 mm) hrana este alctuit n principal din copepode (n diferite stadii de dezvoltare) i cladocere. Acest fapt demonstreaz o evident electivitate. Se poate spune c, dac la nceputul

44

nutriiei exogene larvele trec printr-o etapa a nutriiei cu alge i rotifere, acum au o etap a nutriiei cu cladocere i copepode. Hrnirea intens cu copepode i cladocere este concomitent cu transformrile morfologice care marcheaz etapa de trecere ctre perioada de pui. Etapa nutriiei planctonice a larvelor de alu este destul de indelungat (20 40 zile), fapt ce subliniaz posibilitatea i utilitatea creterii larvelor de alu n heleteiele de cretere a crapului. Pe msur ce larvele cresc (L =19 - 20 mm), pe msur ce caracterele morfologice se modific, devenind din ce n ce mai specifice perioadei de pui, hrnirea se schimb. Organismele cele mai frecvente din coninutul gastrointestinal sunt acum formele mai mari de cladocere i copepode ( Daphnia longispina, Bosmina sp., Leptodora chindti, Cyclops strenus, Canthocaptus staphilinus, Heterocope caspia, Euritemora velox, Acanthocyclops viridis, Nitocrella hibernica, Olicamptus mohamed). Asistm la o schimbare a bazei trofice. n aceast etap, cnd larvele prefer formele planctonice mari, se ntrevede caracterul de rpitor al alului. O schimbare evident n modul de hrnire i n componena hranei se observ la vrsta de 24 - 26 de zile (L = 21 - 23 mm), cnd caracterele morfologice specifice perioadei de pui sunt evidente (forma corpului asemntoare adultilor, solzi, colorit specific). Acum nu se mai hrnesc cu organisme planctonice mici si mijlocii (dei acestea nu lipsesc din hran), iar principalul component devin mizidele (Limnomisia benedeni), care alctuiesc 60 - 70% din hran. n coninutul gastrointestinal al larvelor de 30-34 mm se pot gsi 5 - 6 miside. Aceasta etap am putea s-o denumim etapa nutriiei cu mizide. Odata cu creterea, caracterul de rpitor se accentueaz, fapt ce determin i modificarea hranei. La vrsta de 35 - 40 de zile (L = 27 - 30 mm), cnd larvele au trecut n perioada de pui, alul ncepe sa devin ihtiofag. Un factor important este c n primele etape de dezvoltare, larvele de alu utilizeaz aceeai baz trofic ale bazinelor pot fi crescute n aceleai heleteie cu crapul. Mentionm ns, c puii de crap, de exemplu, trebuie s fie mai n vrst, pentru a nu fi consumai de ctre puii de alu. Rezumnd cele consemnate putem sublinia c, n funcie de predominana unor grupe de organisme, n hrana larvelor i a puilor se pot deosebi mai multe etape: 1) etapa de hrnire cu alge i rotifere (pn la vrsta de 10 - 11 zile); 2) etapa de hrnire cu cladocere i copepode (pn la vrsta de 23 - 25 de zile); 3) etapa de hrnire cu mizide i larve de peti (pn la vrsta de 50 - 60 zile). n ultima etap, puii de alu devin rpitori, accentundu-se tendina de ihtiofagie. Ambalarea i transportul larvelor de alu Materialul biologic de populare n stadiul de larv n vrst de 7-8 zile, se transport n pungi de polietilen standard de 40 l, n care raportul ntre volumul de ap i volumul de oxigen este de 1/1. Densitatea larvelor la o pung standard se stabilete funcie de durata transportului i de temperatura aerului, conform tabelului de mai jos: Densitatea larvelor de alu la punga standard

45

Temperatura 0 C 10 15

Lungime mm 5-7

Durata transportului 10 ore 25 ore 150.000 100.000 100.000 70.000

Transportul puilor n condiii optime se realizeaz cu maini izoterme dotate cu uniti de condiionare a temperaturii mediului incintei. n lipsa acestora transportul se poate realiza cu mijloace de transport obinuite cu respectarea urmtoarelor condiii: capacitatea mainii s fie corelat cu numrul pungilor ce urmeaz s fie transportate; incinta de transport s fie capitonat cu un numr suficient de materiale ( cartoane sau pturi ) care s mpiedice spargerea sacilor; s fie prevzut cu o rezerv de oxigen de minim 50l, rezerv dotat cu manometru i furtun i o rezerv de saci de 10% din numrul sacilor care se transport .

4. REGULI PENTRU VERIFICAREA TEHNOLOGIEI Sistemul tehnologic i tehnologia de reproducere artificial i cretere n perioada de dezvoltare posteembrionar a alului se va verifica n baza urmtoarei metodologii: Probe i verificri iniiale a instalaiei de alimentare a apei Verificarea modului de funcionare a instalaiilor de alimentare, distribuie i evacuare a apei, nu se admit pierderi de ap la etaneizrii, nu se admite lipsa postamentului de protecie, nu se admite valori mai mari ale presiunii fa de valoarea de referin stabilit iniial; Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare, nu se admit pierderi de ap la mbinri; Verificarea poziiei vanelor pe traseul de trecere a apei, nu se admit robinei nchii; Verificarea parametrilor chimici ai apei, nu se admite depirea valorii acestora fa de valorile prevzute prin Ord. 161/2006 - Ape de suprafa

Probe i verificri iniiale a modulelor specifice de reproducere i cretere - Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare i evacuare a modulelor de reproducere i de cretere, nu se admit pierderi de ap; - Verificarea asigurrii meninerii nivelului constant de 1, 0 m i respectiv 0,8 m n cele dou tipuri de bazine, nu se admit nivele sub aceste valori;

46

Verificri de lot A. Verificarea materialului de populare n momentul achiziiei - Verificarea densitii materialului n pungile standard de transport; nu se admite depirea normelor i condiiilor de transport prezentate; - Verificarea etaneitii pungilor de transport; nu se admit pungile care pierd ap sau oxigen; - Verificri n momentul populrii materialului piscicol - Verificarea valorii oxigenului dizolvat n ap din incinta de cretere; nu se admit valori mai mici de 7 mg/l - Verificarea temperaturii apei bazinului naintea deversrii materialului de populare; nu se admite deversarea direct a materialului n condiiile n care sunt nregistrate diferene ntre temperatura apei din punga de transport i apa bazinului; deversarea se va realiza dup o prealabil acomodare a materialului piscicol, la temperatura mediului acvatic; - Verificarea reactivitii materialului n momentul populrii; nu se admite ca la populare materialului piscicol s prezinte micri anormale, sau s intre n decubit lateral; C. Verificarea periodic a evoluiei materialului biologic. - Verificarea zilnic, pe ntreaga perioad de cretere a masei medii i lungimii totale a materialului piscicol; numrul minim de exemplare verificate - 15 ; - Verificarea permanent, pe ntreaga perioad de cretere, a strii sanitare a materialului piscicol;

5. METODE DE VERIFICARE Aparatura Pentru verificarea parametrilor chimici ai apei : - Oxigenometru; - pH- metru; - Termometru; - Photometru - Balan analitic; Pentru verificri indicilor tehnologici ai materialului piscicol: - Ihtiometru; - Balan tehnic. Pentru verificarea strii sanitare a materialului piscicol: - Microscop cu putere de rezoluie de la cca 30 X la cca 1000X ( tip. ML 4M) Metode Metode chimice de determinare a calitii apei tehnologice Evaluarea valorilor parametrilor chimici ai apei tehnologice se efectueaz conform Ord. 161/2006: -oxigenul dizolvat se determin cu oxigenometru sau prin metoda Winkler, bazat pe oxidarea de ctre oxigenul molecular din ap, n mediu puternic alcalin, a

47

hidroxidului de mangan bivalent la hidroxid de mangan trivalent, rezultatul fiind exprimat n mg/l; -pH-ul apei se determin n upH, utiliznd pH-metru cu afiare digital; -substana organic, clorurile (Cl-), azotaii (NO3-), azotiii (NO2-), amoniacul liber (NH3), ionul de amoniu (NH4+), alcalinitatea, dioxidul de carbon se apreciaz fotometric cu ajutorul reactivilor test Metode de determinare a strii sanitare a materialului piscicol Starea sanitar a materialului piscicol se evalueaz prin : - Examenul macroscopic pentru stabilirea diagnosticului acest examen este doar orientativ. Se examineaz cu ochiul liber sau cu lupa suprafaa corporal, ochii, branhiile, cavitatea intern. Prin acest examen pot fi decelate zonele modificate ca : necroze, chiti, hipo sau hipersecreii de mucus, hipertrofii sau atrofii ale organelor, modificri de culoare, parazii macroscopici. - Examenul microscopic are valoare de diagnostic. Probele se recolteaz direct din petele viu i constau din : - raclate, superficiale i profunde de pe suprafaa sau zona de examinat, de obicei branhii, tegument, mucoas intestinal ; raclatul se aeaz pe lam i se adaug o pictur de ap distilat peste care se preseaz lamela examinndu-se imediat la microscop ; - preparate strivite se execut din orice esut i const n strivirea unei mici poriuni din acesta ntre lam i lamel, astfel nct pelicula format s devin translucid i ct mai subire. Estimarea rezultatelor se efectueaz la nivel de cmp microscopic prin identificarea agenii etiologici. Metode de determinare a indicilor tehnologici la materialul piscicol Mas medie - g / ex se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin a trei eantioane de cte 100 de indivizi, din valorile obinute calculndu-se valoarea medie ; - Spor individual de cretere g se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi n momentul populrii, determinndu-se masa iniial, i a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi la finele perioadei de cretere, determinndu-se masa final, se aplic formula : (Wf Wi)/ N, unde - Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului; N numrul de exemplare - Rata zilnic a creterii - g/zi, se determin cu formula : (Wf Wi)/ T unde- Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Rata specific de cretere - SGR - % zi se determin cu formula: SGR = (lnWf-lnWi)*100/T [%/zi], unde: Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Procent de supravieuire - % - se determin cu formula: Nf/Ni x 100 -

48

unde : Nf i Ni numrul de exemplare iniial i final 6. MSURI DE TEHNICA SECURITII MUNCII La punerea n funciune i exploatare a sistemului tehnologic - Asamblarea instalaiilor, punerea n funciune i efectuarea probelor se va efectua numai de personalul calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea acestora ; Instalaiile se vor da n exploatare numai dup verificarea existenei i a corectei strngeri a tuturor organelor de asamblare demontabile; - Deservirea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea sistemului; - Intreinerea i repararea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit n acest scop. Se interzice persoanelor care deservesc sistemul s remedieze defeciunile acestuia. - naintea oricrei intervenii ( desfacere pentru curire, nlocuirea unor piese defecte, ntreinere sau reparaii) se va opri obligatoriu alimentarea cu ap a sistemului; - Operaiile de prelucrare a evilor (tiere, ndoire, fasonare etc.) vor fi executate pe bancul de lucru din ateliere. Se interzice executarea operaiilor de prelucrare a evilor pe schele de montaj, cu excepia ajustrii racordurilor ntre conducte, n vederea definitivrii poziiei de montaj; - Prelucrarea evilor i a prefabricatelor din materiale plastice se va efectua cu scule, dispozitive i utilaje n bun stare de funcionare i se vor respecta Normele specifice de securitate a muncii pentru prelucrarea cauciucului sintetic i a produselor macromoleculare; - Conductele vor fi fixate dup caz pe elemente de susinere ca: stelaje consolidate, console, supori etc. care s permit meninerea acestor conducte n poziia de pozare i vor fi consolidate cu brri demontabile sau alte tipuri de elemente de susinere. La aplicarea tehnologiei de reproducere artificial i cretere - La repartizarea personalului de lucru se va ine seama de aptitudini i de nivelul de cunotine profesionale ; - Se va evita lucrul n asalt asigurndu-se necesarul de materii prime ; - Personalul de deservire trebuie s poarte echipament de protecie : salopet, cizme de cauciuc ; - Se va evita contactul epidermei cu substaner folosite la igenizarea incintelor de cretere ; - La efectuarea analizelor chimice uzuale, determinarea oxigenului, pH ului se vor respecta Normele specifice de protecia muncii pentru laboratoarele de analize fizico chimice i mecanice Extras 36/1999

49

DOCUMENTAIE DE TRANSFER TEHNOLOGIC A TEHNOLOGIEI DE REPRODUCERE ARTIFICIAL A SPECIEI SILURUS GLANIS SOMN PREZENTAREA TEHNOLOGIEI 1.5. Obiect

Tehnologia elaborat vizeaz reproducerea controlat a speciei Silurus glanis somn, n vederea refacerii populaiilor naturale i introducerii i extinderii ei n acvacultur. 1.6. Domeniul de aplicare

Potentialii beneficiari ai tehnologiei de reproducere sunt agentii economici care au ca obiect principal de activitate pescuitul si acvacultura. Tehnologia de reproducere controlat devine aplicabil in momentul in care exista baza logistica necesara desfasurarii intregului flux tehnologic si se are in vedere urmatoarele : - Loturi de reproducatori masculi si femele care s constituie baza biologic pentru realizarea reproducerii i obinerea descendenelor de diferite vrste; - Bazine pentru parcarea, prematurarea si maturarea reproducatorilor - Statie de reproducere artificiala cu toate dotarile necesare : module parcare reproductori, platform pentru fecundare, aparate de incubatie caracteristice fiecarei specii, module pentru cresterea puilor in primele faze de dezvoltare postembrionara, minilaborator. 1.3. Cerinte de mediu inconjurator Tehnologia elaborat nu prezinta elemente poluante pentru mediu. Substantele folosite sunt omologate si acceptate in UE si nu afecteaza materialul biologic si nici parametrii chimici ai apei. Apa tehnologica rezultat se incadreaza in parametrii Ord. 161 / 2006 . Riscul evadarii materialului biologic este exclus, sistemul tehnologic fiind prevzut cu elemente de sigurant, site la incintele de incubatie si la conductele de evacuare a apei tehnologice. 2. CONDITII TEHNICE DE APLICARE A TEHNOLOGIEI 2.1 Sistem tehnologic pentru reproducerea artificial a speciei Silurus glanis somn. Pentru reproducerea artificial a somnului, avnd n vedere particularitile reproductive ale speciei, trebuie s se asigure o baz tehnico-material specific i n concordan cu diferitele etape ale acestui proces. Sistemului tehnologic se va dimensiona n funcie de capacitatea de producie stabilit de utilizator i va asigura prin capacitatea sa, reproducerea a minim 10 de familii pentru a asigura meninerea i conservarea biodiversitii genetice a speciei.

50

n corelaie cu capacitatea de incubare sistemul tehnologic va fi constituit dintr-un ansamblu de bazine de pmnt : bazine de parcare-iernare, bazine de prematurare, module pentru parcarea i maturarea reproductorilor, module de incubare a icrelor embrionate i module pentru parcarea i creterea larvelor cu urmtoarele caracteristici tehnice: Bazinele de parcare- iernare Sunt bazine de pmnt, realizate n sptur, au de regul form dreptunghiular, suprafa cuprins ntre 1000 -2000 mp, maximum 3000 mp; adncimea este de cca. 2,0m i debitul de alimentare este de 3-5 l/sec/ha. Instalaiile de alimentare i de evacuare se dimensioneaz astfel nct inundarea i vidarea s se poat face n circa 3 ore. Norma de populare este de 40-50 ex / ha. Odat cu introducerea reproductorilor la iernat, se populeaz i material piscicol puin valoros, de talie mai mic, pentru a constitui hrana somnului pn primvara, cnd se face separarea pe sexe a reproductorilor. Bazinele de prematurare . Sunt bazine mici, n care reproductorii de somn sunt meninui dup pescuitul de selecie din primvar, pn cnd temperatura apei atinge valori optime de reproducere (20-22 0C). Aceste bazine au urmtoarele dimensiuni : (10 15) x (3 4) x (0,75 1) m i sunt amenajate din pmnt, cu alimentare i evacuare continu. Modulul pentru parcarea i maturarea reproductorilor Pentru parcarea i maturarea reproductorilor de somn se utilizeaz 4 module: dou pentru femele i dou pentru masculi. (Fig.nr.1) ntr-un modul se introduc cte 4-5 exemplare, asigurnd parcarea n vederea reproducerii a unui numr de 10 femele i 10 masculi. Componena unitii de parcare i maturare a reproductorilor. Modulul se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Bazin paralelipipedic cu volumul util de 4,0 mc b) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei d) Instalaie de alimentare Descrierea i realizarea unitii de parcare a reproductorilor Bazinul este de form paralelipipedic cu dimensiunile de 2 x2 x 1, 2 m i este confecionat din prelat plastifiat. Este asamblat prin lipire prin nclzire local i cu adeziv. Bazinul este montat pe un cadru din eav metalic cu 40, alctuit din 8 elemente cu lungimea de 2, 0 m care constituie partea superioar i inferioar a bazinului i alte 12 elemente pe prtile laterale la distane de 1, 0 m unul de altul, mbinate prin sudur, care asigur forma si rezistena bazinului. Att la partea superioar ct i la cea inferioar sunt lipite benzi suplimentare, care dubleaz peretele bazinului, prevzute cu orificii prin care trece cte o frnghie de relon cu 12 mm care asigur prinderea bazinului de structura metalic.

51

n lateralul bazinului, n partea opus alimentrii, este practicat un orificiu prelungit cu un cilindru de prelat cu diametrul de 100 mm, prin care trec elementele instalaiei de evacuare. nlimea bazinului este de 1,2 m. Montarea bazinului se realizeaz astfel : pe o platform plan i fr asperiti se aeaz plci din polistiren expandat cu grosimea de 20 mm care asigur protecia acestuia de eventuale agri, nepri sau deteriorri. Se asambleaz structura de susinere a acestuia i se prinde bazinul de prelat, cu ajutorul frnghiei de relon. Se monteaz n orificiul lateral al bazinului instalaia de scurgere i se fixeaz furtunul flexibil n inel pentru asigurarea nivelului dorit. Pe marginea superioar a bazinului, opus gurii de evacuare se fixeaz eava de alimentare n unghi de 45 0 fa de peretele bazinului.

Fig.nr. 1. Modulele pentru parcarea i maturarea reproductorilor Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de parcare a reproductorilor are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazin. Instalaia este alctuit dintr-un alimentrii un orificiu de scurgere cu diametrul de 100 mm. n acest orificiu se plaseaz o tubulatur ce va asigura preluarea surplusului de ap din incint realiznd n acest fel circulaia apei. Etanarea gurii de scurgere se asigur prin intermediul unui inel O Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon. Tubulatura de evacuare este executat din PVC flexibil avnd diametrul de 100 mm, mbinat cu adeziv de tip Codez. Sistemul de reglare a nivelului apei n bazin este asigurat prin poziionarea tubului flexibil la nivelul dorit. Tubul flexibil este stabilizat de un inel prins de structura metalic a bazinului.

52

Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 1,0 m. Instalaia de alimentare cu ap a bazinului de parcare a reproductorilor de somn asigur un debit de ap de 35 l/min. Instalaia este construit din eav de PVC de 1 3/4II i un robinet. eava este poziionat la un unghi de 45 0 fa de peretele bazinului de parcare.

Instalaia de incubare a icrelor de somn

Instalaia de incubare a icrelor de somn are ca scop realizarea condiiilor de optime de incubare a acestora. Se asigur alimentarea, meninerea unui nivel optim, tratarea icrelor i evacuarea apei individualizat din fiecare incubator Componena instalaiei Instalaia se compune din urmtoarele subansamble: a) Ansamblu pregtire incubaie; b)instalaie de alimentare incubatoare; c)incubator ; d)suport incubatoare; e)instalaie de evacuare. Descrierea i realizarea instalaiei b) Ansamblu pregtire incubaie Este constituit din: instalaie de alimentare cu ap tehnologic; tvi pentru fecundare ; rame suport pentru icre; plaform suport. Instalaia de alimentare cu ap tehnologic const dintr- o conduct metalic cu diametrul de 100 mm, racordat la conducta care alimenteaz staia de incubaie, pe care sunt montai robinei la distante de 1,0 m, prin intermediul unor evi cu diametrul de 25mm. Tvile pentru ntinderea icrelor pe rame dup fecundare, sunt confecionate din tabl galvanizat i au dimensiunile de 180 x 67 x 6,5 cm. Avnd n vedere c somnul este o specie care, n mediul natural, depune icrele pe vegetaie acestea fiind lipicioase, pentru incubarea artificial se folosesc rame suport. Ramele suport sunt confecionate dintr-un cadru metalic din srm de inox cu dimetrul de 3 mm, pe care se fixeaz o pnz de nytal. Ramele sunt dreptunghiulare cu dimensiunile de de 50,0 cm lungime i 30,0 lime. n incubator se fixeaz pe suportul special, pe lungime, avnd la capete nite prelungiri n unghi drept , care ptrund n fanta suportului i le menin astfel n poziie vertical. Platforma suport este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt aezate blaturile din lemn. -

53

b)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a celor 40 de incubatore dispuse pe dou rnduri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic printr-o conduct metalic cu diametrul de 500 mm. Reglarea debitului se face prin intermediul unei vane. La intrarea n staie, conducta se ramific, pentru a realiza alimentarea independent a celor dou rnduri de incubatoare, n dou brae paralele, cu diametrul de 100mm, pe care sunt montai robinei care permite alimentarea optim a fiecrui incubator. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Alimentarea cu ap a incubatoarelor se realizeaz prin lateral, pe deasupra incubatorului, prin conducte metalice cu 25mm, n form curbat la captul superior, (n form de pip), iar reglarea debitului, prin intermediul unor robinete. La captul superior al evii de alimentare se ataeaz, prin intermediul unui furtun, o eav metalic n form de T , latura lung orizontal fiind prevzut cu numeroase orificii de 2mm, care asigur distribuia apei pe ntreaga suprafa a incubatorului i oxigenarea suplimentar a apei tehnologice. Debitul de lucru n perioada de incubaie este 5-6 l / min. b)Incubator tip Nucet utilizat la incubarea icrelor de somn Incubatorul tip Nucet, este realizat dintr-o cutie metalic, cu dimensiunile 60 x 60 x 55 cm, n care se introduce un juvelnic confecionat din sit de Nytal cu ochiuri de 500 , dimensiunile 52 x 52 x 46 cm; juvelnicul este susinut de un stelaj metalic din fier beton 4mm, cu dimensiunile 56 x 56 x 55. Incubatorul mai este echipat cu un suport pentru fixarea ramelor reprezentat de un cadru metalic ptrat, cu latura de 51 cm. Pe dou dintre laturile opuse ale acestui suport sunt realizate fante cu deschiderea de 5mm, la distan de 2 cm, pe care sunt aezate ramele cu icre. Incubatorul are un volum de 180 l ap i o capacitate maxim de incubare de 1,5 kg icre. Evacuarea apei din incubator se realizeaz prin intermediul unui tu de evacuare cu 50 mm, situat pe latura opus alimentrii , n partea superioar. c)Suportul incubatoarelor este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt sudate lonjerone confecionate din eav ptrat pe care sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt dispuse incubatoarele. d) Instalaia de evacuare Asigur evacuarea apei reziduale utilizat n procesul tehnologic. Instalaia este confecionat din tubulatur din PVC mbinat cu adeziv Codex i este construit din 2 jgheaburi nclinate care colecteaz apa evacuat din incubatoare, fixate pe cadrul instalaiei prin intermediul unor coliere.

54

Fig. nr 2. Incinte de incubare a icrelor de somn Tip Nucet

Modulul de parcare a larvelor (Fig. nr. 3) este utilizat pentru parcarea acestora pe o perioad de 4-5 zile dup eclozare.

Module pentru parcarea larvelor de somn

Fig nr.3 Componena subansamble:

Module de parcarea i creterea larvelor de somn instalaiei Instalaia se compune din urmtoarele

55

a) Instalaie de alimentare; b) Bazin pentru parcarea larvelor de somn; c) Instalaie de evacuare. Descrierea i realizarea instalaiei a)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a incintelor ce sunt dispuse pe dou niveluri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic cu diametrul de - 75 ce asigur distribuirea apei tehnologice, fiecare bazin fiind alimentat de la un robinet cu reglare fin cu ventil care permite alimentarea optim a acestora. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Prin intermediul unor coturi , apa ptrunde ntr-o eav prevzut cu numeroase orificii care asigur distribuirea apei uniform pe suprafaa incintelor de cretere i oxigenarea suplimentar. Instalaiei de alimentare a bazinelor pentru parcarea larvelor de somn este realizat din PVC. S-au utilizat, conductele de 40 pentru robinetele de alimentare a fiecrui bazin, utilizndu-se evi, coturi i T - uri b)Bazinul pentru parcarea larvelor de somn Bazinul pentru parcarea larvelor de somn este o incint n care se realizeaz parcarea pe o perioad de 5 zile a larvelor eclozate. Bazinul este realizat din PVC. Are forma tronconic cu diametrul inferior de 900 mm, cel superior de 1000 mm i nlimea de 1200 mm, care are prevzut la captul opus alimentrii un orificiu de scurgere cu diametrul de 50 mm. n acest orificiu se plaseaz o tubulatur ce va asigura preluarea surplusului de ap din incint realiznd n acest fel circulaia apei. Tubul de evacuare este confecionat din eav din PP-R, racordat la orificiu de scurgere prin intermediul unui cot. Capacitatea acestor incinte este de 10-12 mii larve.

Module pentru creterea larvelor de somn Descrierea i realizarea instalaiei

Unitatea de cretere a puilor de somn este destinat dezvoltrii acestora ncepnd de la faza de larve de 5 zile pn la vrsta de 45 zile. Instalaia asigur spaiul necesar dezvoltrii acestora, alimentarea cu ap i reglarea nivelului acesteia, evacuarea apei uzate. Componena unitii de cretere. Instalaia se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Instalaie de alimentare; b) Bazin de cretere paralelipipedic c) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei

56

a) Instalaia de alimentare cu ap a unitii de cretere a puilor de somn asigur debitul de ap tehnologic cu caracteristicile fizice i chimice optime pentru creterea puietului de sturioni. Instalaia este construit din eav de PVC de 1II , un robinet, coturi, un teu i segmente din eav de 1II perforat, poziionate pe marginea superioar a bazinului mbinate prin tuburi flexibile i fixate cu coliere din mas plastic. b) Bazinul de cretere este confecionat din fibr de sticl cu latura de 2,0 mm i nlimea de 0,9 m. n centrul bazinului este practicat un orificiu prin care trec elementele instalaiei de evacuare. Bazinul este prevzut cu picioare fixndu-se direct pe pardoseala halei. c)Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de cretere a puilor de somn are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazinul circular. Instalaia este alctuit dintr-un cilindru de inox perforat, cu nlimea de 20 cm, care este etaniezat n orificiul de scurgere prin intermediul unei rame de lemn pe care se lipete burete. Perforaiile cilindrului interior asigur scurgerea apei din bazin. n funcie de mrimea puietului cilindrul poate fi mbrcat n mnecue de nytal care s nu permit evadarea materialului piscicol. Tubulatura de evacuare este executat din coturi, tuburi i un teu realizate din PVC avnd diametrul de 110 mm, mbinate cu adeziv de tip Codez. Legtura dintre orificiul de scurgere i conductele de evacuare se realizeaz printr-un manon flexibil fixat cu coliere 110. Tubul de reglaj are ataat un mner n partea superioar cu care poate fi poziionat astfel nct s se poat obine nivelul dorit sau, n caz de scoatere, se poate evacua apa din bazinul de cretere. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 0,8 m. 3. DESCRIEREA TEHNOLOGIEI Tehnologia de reproducere artificial i cretere a larvelor speciei presupune parcurgerea urmtoarelor faze: Asigurarea loturilor de reproductori evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; parcarea, prematurarea reproductorilor maturarea reproductorilor stimularea maturrii celulelor sexuale; colectarea produselor sexuale; fecundarea; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; prelevarea i parcarea larvelor n incintele de parcare; ambalarea i transportul larvelor; cresterea larvelor pn la vrsta de 45 zile Silurus

glanis

Schema cadru a tehnologiei de obinere prin reproducere artificial a descendenilor speciei Silurus glanis somn este prezentat n figura nr. 4

57

Fig nr. 4

Schema fluxului tehnologic de obinere prin reproducere artificial a larvelor de somn

Asigurarea loturilor de reproductori

Evaluarea preliminar a reproductorilor Aprecierea strii fiziologice i de ntreinere

Parcare reproductori Bazine din pmnt 2000-3000 mp

Condiii de parcare Debit de alimentare de 3-5 l/s/ha Nivel de oxigen nu mai mic de 5 mg/l

Testarea opional a reproductorilor Evaluarea stadiului de maturare a gonadelor

Stimulare hormonal Injectare cu extract hipofizar

Maturare Module de maturare Debit de alimentare 8-10 l/s/ha

Femele Prin masare uoar

Prelevare produse sexuale

Masculi Prelevare cu seringa prevzut cu tub tygon sau sacrificare

Fecundare Cu sperm proaspt prin metoda uscat . 2 ml sperm la 100 ml

Incubare Incubare Incubatoare tip Nucet

Tratamente icre embrionate

Eclozare larve

Parcare

Ambalare

58

Asigurarea lotului de reproductori. Reproductorii de somn utilizati la reproducere artificial provin din loturile crescute n ferme, special n acest scop. Toamna, reproductorii sunt pescuii din bazinele de cretere i introdui n bazinele de iernare unde se asigur cca. 4kg hran / kg somn, constituit din pete fr valoare economic. Pentru constituirea lotului de reproductori se aleg peti n vrst de 4-8 ani, cu greutatea de 6-10 kg.

Fig nr. 5 reproductori de somn Evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; Reproductorii de somn sunt pescuii din bazinele de iernare i se separ pe sexe cnd temperatura apei atinge 15-18oC. Dup separarea lor se introduc n bazinele de prematurare populate cu pete de calitate inferioar, ca suport alimentar. Criterii morfologice Criterii/sex Forma papilei genitale Forma capului Rugozitatea nottoarelor pectorale Culoarea tegumentului n zona ventral Sedimentarea eritrocitelor utilizate la determinarea sexului la somn Mascul Femel Concav, mic Bombat, oval Puin ptros Ptrat Aspre Netede la atingere nchis Lent Deschis Rapid

Reproductorii sunt inui n bazinele de maturare pn n momentul n care temperatura apei atinge i se menine n jurul valorii de 22-24 oC i nu scade sub 19-20 0C

59

Stimularea maturrii celulelor sexuale Cnd temperatura apei se menine n jurul valorii de 24 oC reproductorii masculi i femele, sunt pescuii din bazinele de maturare i introdui n modulele de parcare maturare din staia de incubaie. nainte de introducerea n modulele de maturare, reproductorii sunt inui pentru 15 minute ntr-o soluie salin 2,5% . Tratamentul hormonal se realizeaz dup 24 de ore de la parcarea reproductorilor n staia de incubaie. Pentru stimularea maturrii celulelor sexuale la somn, se utilizeaz hipofiza de crap. Stimularea hormonal se realizeaz n dou trepte : - treapta I - 0,5 mg/ kg corp att la femele, ct si la masculi; - treapta a II-a - 4 mg / kg corp la femele i 3 mg / kg corp la masculi . nainte de injectare i de recoltarea gameilor, femelele i masculii sunt anesteziai ntr-o soluie de 2-fenoxietanol (1:1000). Injecia se efectueaz n muchiul dorsal, la baza nottoarei dorsale. Dupa injectare, reproductorii separai pe sexe, sunt introdui n czi, pentru maturare, n staia de incubaie. n perioada de maturare temperatura optim este de 240C, iar cantitatea de oxigen dizolvat de minim 6 mg /l. Ovulaia se poate produce dup cca. 12 -13 ore de la administrarea celei de a doua doze. Colectarea icrelor si fecundarea artificial. Colectarea icrelor se face de la femele perfect mature din punct de vedere sexual. Procedeul de recoltarea este masarea abdomenului, cunoscut tehnologic ca mulgere Se maseaz uor abdomenul in directie longitudinala, de sus in jos, in lungul liniei axiale a abdomenului, impingandu-se icrele catre orificiul genital. De la fiecare femela se colecteaza o singura portie de icre; exemplarele a caror gonade sunt bine dezvoltate elimina usor si, in general , intreaga cantitate de icre din ovar: icrele remanente sunt in numar redus. Dup recoltarea icrelor se cntrete un gram de icre i se numr pentru determinarea fecunditii absolute (numr icre / femel) i relativ (numr icre / kg femel ). De la o femel de somn se recolteaz cca. 160- 200.000 icre. La fel se procedeaz si cu masculii, sperma se recolteaz n cristalizoare prin mulgere, sau cu ajutorul unei seringi prevzut cu tub tygon de 5-6 cm. Tubul se introduce ncet n orificiul urogenital. La exemplarele la care spermiaia este complet, sperma ncepe s urce n sering n momentul retragerii pistonului. Sperma este depozitat timp de 4 ore la temperatura de 4 0C. Concentraia spermei este determinat la microscop (400 ) cu camera Thoma, iar numrul mediu este exprimat la 20 de diviziuni ale camerei Thoma. Din punct de vedere volumetric, cantitatea medie de sperm recoltat este de 2,0 2, 5 ml/kg mas corporal. Masculii produc ntre 0,13 0,14 109 spermatozoizi/kg mas corporal Fecundarea artificial Icrele povenite de la fiecare femel, sunt cntrite i distribuite n vase de plastic, cte 200 g icre n fiecare vas. Fecundarea se realizeaz cu amestec de sperm provenit de la cel puin 2-3 masculi. Pentru fecundarea a 100 g icre sunt

60

necesari 2 ml sperm. Icrele i sperma sunt omogenizate ntr-o soluie de fecundare format din 0,3 % NaCl. Volumul soluiei de activare este de 50 ml/100 g icre. Amestecul este omogenizat timp de 10 secunde, iar apoi, dup 2 minute, se administreaz nc 25 ml soluie de activare i sunt ntinse pe ramele de nytal cu ajutorul unei pene. Dup alte 5 minute, icrele fecundate sunt introduse pentru incubare n incubatoarele Nucet . Incubarea produselor sexuale Incubarea icrelor va ncepe odat cu introducerea i fixarea ramelor n incubatorul Nucet. Incubaia dureaz 3 zile, la temperatura de 21-23C. Pentru somn temperatura optim de incubaie este de 23-240 C. Pe durata embriogenezei debitul de alimentarea al incintelor de incubaie se va corela cu necesitile fiziologice ale embrionului n diferitele lui stadii de dezvoltare. Debitul de alimentare al incubatoarelor pn la faza de gastrulaie a icrei va fi reglat de aa manier nct s creeze unui curent de ap care s nu produc deslipirea icrelor de pe rame (3- 4 l/min). Dup gastrulaie, incubatorul se alimenteaz cu un volum de ap mai mare (5 7 l/min.) Un factor important ce trebuie asigurat i controlat pe perioada de dezvoltare embrionar este consumul de oxigen care pe perioada embriogenezei crete pe msura dezvoltrii embrionului. Pe parcursul embriogenezei nivelul oxigenului n incintele de incubare va fi meninut la valori de minim 5 6 mg/l. Controlul fungilor pe perioada incubaiei se va realiza prin mbierea icrelor, cu soluie de formalin, timp de 15 minute. Primul tratament se va realiza la 24 de ore de la fecundare , iar urmtoarele la intervale de 12 ore pn n momentul apariiei veziculelor optice. Pe perioada incubaiei se va stabili supravieuirea n diferite faze ale dezvoltrii embrionare. Procentul de fecundare se va stabili la cca. 24 de ore de la fecundare. Dup eclozare, ramele se scot din incubator, iar larvele sunt inute n incubatoare, nc 2-3 zile. Prelevarea i parcarea larvelor Prelevarea larvelor eclozate se realizeaz pe pern de ap n mod continuu, n tancuri individuale de colectare. Tancul de colectare este prevzut cu un juvelnic din plas de nytal cu latura ochiului de 0,3 - 0,5 mm pentru concentrarea larvelor. Larvele concentrate sunt prelevate cu ajutorul unor palete i introduse n incinte speciale de parcare. Operaiunea se efectueaz continuu pn la sfritul eclozrii. Numrarea larvelor se efectueaz direct n momentul colectrii. Densitatea de populare va fi de 40 60 ex/l. Curentul de ap n bazinele de parcare a larvelor va fi reglat de 5 l/min. Larvele vor rmne n aceste incinte o perioad de 5 - 7 zile pn la resorbia sacului vitelin. Ambalarea i transportul larvelor de somn

61

Larvele de somn se transport n pungi de polietilen standard de 40 l, n care raportul ntre volumul de ap i volumul de oxigen este de 1/1. Densitatea larvelor la o pung standard se stabilete funcie de durata transportului i temperatura aerului, conform tabelului de mai jos: Densitatea larvelor de somn la punga standard Tabelul nr.2 Temperatura
0

Masa medie G/ex 10 ore

Durata transportului 25 ore 50 ore

25

0,01 0,02 0,03

15000 7000 5000

15000 7000 5000

7000 4000 2000

Transportul larvelor n condiii optime se realizeaz cu maini izoterme dotate cu uniti de condiionare a temperaturii mediului incintei. n lipsa acestora transportul se poate realiza cu mijloace de transport obinuite cu respectarea urmtoarelor condiii: capacitatea mainii s fie corelat cu numrul pungilor ce urmeaz s fie transportate; incinta de transport s fie capitonat cu un numr suficient de materiale ( cartoane sau pturi ) care s mpiedice spargerea sacilor; s fie prevzut cu o rezerv de oxigen de minim 50l, rezerv dotat cu manometru i furtun i o rezerv de saci de 10% din numrul sacilor care se transport . Caracteristici ale dezvoltrii embrionare si larvare Dezvoltarea embrionar este rapid. Incubaia dureaz 3 zile, la temperatura de 23-24C. Urmrind dinamica dezvoltrii embrionare, se constat c la scurt timp dup fecundare se contureaz corpul embrionului la care se distinge un numr variabil de miomere. La circa 20 - 30 de ore se formeaz 28 - 30 de miomere, sacul vitelin devine piriform, apar primordiile ochilor i capsulele auditive. n etapa n care se disting 36 de miomere, sacul vitelin devine sferic. Se observ intestinul, care ajunge pn n dreptul celui de al 19 lea miomer. La somn, n aceast etap de dezvoltare, nevoia de oxigen a embrionului este relativ mai sczut, comparativ cu majoritatea ciprinidelor fitofage. Embrionii i larvele rezist la concentraii foarte sczute de oxigen n ap. n timpul zilei, de exemplu, cantitatea de oxigen n incubator, poate scdea ntre 3 i 7 mgO2/l, la 22 - 25C, iar n timpul nopii ntre 1,5 si 3,5 mgO2/l, la 23C. Dup circa 48 de ore, embrionul este bine conturat, avnd 6,37 mm. Procesul de segmentare nu a luat sfrit, iar numrul miomerelor a ajuns la 41. Sistemul

62

venos i circulaia sanguin sunt funcionale; schimbul de gaze are loc la nivelul venelor lui Cuvier.. Cu putin timp nainte de eclozare, embrionul are 7,4 mm, la cap, n zona epifizei i puin napoia ochilor, se observ un numr nu prea mare de glande de eclozare. Comparativ cu alte specii, glandele de eclozare sunt mai reduse, ca urmare a faptului c membrana oului este mai fragil i liza se face cu uurin. n apropierea gurii se observ prima pereche de musti, pe care se gsesc numeroase glande cu o secreie cleioas, care ajut larvele s se prind de plantele din ap. Capul este scurt i lipsit de sacul vitelin, a crui form este sferic. Gura este format, avnd o poziie terminal-inferioar. n zona operculelor se observ arcul mandibular al aortei i jumatatea ventral a arcului hioidian, care se unete cu aorta mandibular. Pe suparafaa sacului vitelin se dezvolt reeaua venelor lui Cuvier, care servesc la respiraie. Nu se observ nc nottoarele pectorale. Ochii nu sunt pigmentai i embrionul nu manifest nici un fel de reacie la lumin. Perioada larvar. La sfritul celor trei zile de incubaie, la temperatura de 24 - 25C, se produce eclozarea embrionului. La puin timp dup eclozare, larvele au cca. 8,4 mm lungime. Gura este terminal, mare, dar funcional. Se observ i cea de-a doua pereche de musti, mult mai mici dect prima pereche (care s-au alungit), i care folosesc la fixarea larvelor de diferite obiecte din ap. Operculele sau format, dar sunt nc reduse; nu sunt mobile i nu acoper zona marginal a branhiilor. Pe arcurile branhiale au nceput s se formeze branhiile sub form de muguri. Dei la procesul de respiraie particip n aceast etap i branhiile, principalul organ care foloseste la schimbul de gaze, ramn nc, venele lui Cuvier, dezvoltate sub forma unei reele pe suprafaa sacului vitelin. Aripioarele pectorale sunt la nceputul formrii lor. Pe suprafaa corpului se observ numeroi melanofori; de asemenea, ochii au nceput s se pigmenteze, dar numai n partea central, zona marginal fiind nca nepigmentat. Larvele au o puternic reacie negativ la lumin i de aceea n timpul zilei stau la fundul apei. n mod experimental, proiectndu-se un fascicul de lumina asupra lor, ele se raspndesc n direcie opus, iar dac lumina este difuz i vine de sus, larvele se aseaza pe fundul vasului. Sunt n general sedentare, stnd fixate cu ajutorul mustilor pe obiectele de pe fundul apei. In acest timp ns, efectueaz n permanen micri ondulatorii cu partea terminal a corpului i coada, crend o micare a apei care le ajut la o bun respiraie. De aceea, rolul mustilor n aceast etap este mai ales acela de a le fixa, de a le frna, n momentul cnd execut micari ondulatorii. Dupa circa 7 zile de la ecozare, lungimea este de 14 mm n aceast etap, larvele ncep s se hraneasc activ, dei mai au nc rezerve viteline (se gsesc n etapa nutriiei mixte endogen exogen). Gura este mare, funcional, i prevazut n zona marginal cu terminaii nervoase, cu rol gustativ; acelai rol l au i mustile care nu mai prezint glande lipicioase, deci nu mai folosesc la fixarea larvelor. Este de fapt o modificare n concordan cu apariia funciei de hrnire activ, care presupune capacitatea i necesitatea de deplasare i de vnare a hranei. Rolul principal n procesul de respiraie l au branhiile; reeaua venelor lui Cuvier (acum complet acoperite de opercul) este foarte redus i nu mai folosete la

63

respiraie. n aceasta etap ncepe s se formeze esutul mezenchimatos n dreptul aripioarelor neperechi i la pectorale. Pigmentaia se aceentueaz datorit nmulirii numrului de melanofori rspndii pe toat suprafaa corpului. Larvele se deplaseaz n zona de la fundul apei i mai au nc o slab reacie negativ la lumin. Dup 8 - 9 zile de la eclozare, larvele au consumat n ntregime rezervele viteline i se hrnesc ndeosebi cu plancton. Pn la vrsta de 15-20 de zile, principala baz trofic este alctuit din zooplancton (copepode i cladocere), iar de la vrsta de 25 - 30 de zile n coninutul stomacal se gsesc i larve de chironomide i efemeride. Puii de o var devin ihtiofagi . Aadar, pe parcursul dezvoltrii, larvele i puii de somn folosesc mai multe nivele trofice; cunoaterea acestor nivele ne permite dirijarea corect a creterii lor. Creterea larvelor pn asemntoare adulilor la atingerea caracterelor fenotipice

Schema cadru a tehnologiei de cretere a puilor de somn este prezentat n Figura 6.

Norma de populare
Larvele obinute de la fiecare femel sunt populate separat n incintele de cretere. se stabilete lundu-se n Norma de populare este de 1500ex/m3 i considerare pierderile tehnologice pe etapa de cretere care n general sunt estimate la 30%.

Pregtirea modulelor de cretere i popularea larvelor.

Pregtirea incintelor de cretere se realizez cu 48 de ore nainte de populare. Acestea sunt riguros igenizate pe toat suprafaa cu soluie de Germostop 10%, soluie ce este meninut timp de o or, dup care este ndeprtat prin cltiri repetate. nlimea coloanei de ap n incintele de cretere a larvelor se regleaz la 20 cm. Apa tehnologic din incinte va fi evaluat din punct de vedere fizico-chimic prin determinarea temperaturii, a pH ului, oxigenului. Debitul de alimentare n incintele de prematurare se stabilete ntre 5 -7 l/min. Lansarea larvelor n incintele de cretere se realizeaz dup egalizarea temperaturii apei din incinta de transport. Nivelul oxigenului dizolvat se va menine la un nivel minim de 7mg/l. Imediat dup populare puii vor fi intens monitorizai pentru a se observa modul n care acetia se adapteaz la noile condiii de mediu. Concomitent cu monitorizarea materialului biologic se monitorizeaz la interval de trei ore parametrii fizico-chimici, respectiv temperatura i oxigenul.

64

Hrnirea
Creterea larvelor pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor se realizeaz pe seama unei scheme de hrnire ce presupune administrarea de hran vie n primele 78 zile de cretere i mai apoi pe o diete mixt format din hran natural i furaj. Hrnirea exclusiv cu hran natural se bazeaz pe folosirea, fie simpl, fie combinat, a unor organisme planctonice i bentonice. Sunt folosite cladocerele Daphnia sp., Moina sp. i Bosmina sp. filopodul Artemia salina i oligochetul Tubifex sp., ambele categorii de organisme colectate din mediul natural sau obinute n culturi. Combinaiile de hran natural practicate sunt urmtoarele: 90 % zooplancton i 10 % Tubifex sp. 50% zooplancton dulcicol sau salin 50% Tubifex sp.

Ambele tipuri de hran (plancton i bentos) nainte de administrate sunt supuse unui tratament profilactic cu o soluie 1% de albastru de metilen n cazul oligocetului Tubifex sp. i cu o soluie de 23 mg/l permanganat de potasiu n cazul zooplanctonului dulcicol. Raia de hran se stabilete zilnic funcie de greutatea lotului. Raia administrat n 24 de ore se calculeaz n procent de 100% din greutatea lotului n ziua respectiv. Fracii egale din aceast raie se distribuie la interval de 3 ore, att n perioada zilei, ct i n perioada nopii. Hrnirea larvelor folosind hran natural vie n diet mixt cu furaj va presupune aplicarea urmtoarei scheme de hrnire ce va permite trecerea ealonat la o hrnire bazat exclusiv de furaj : - primele 5 zile: 85% zooplancton, 5% bentos ,10% furaj; - urmtoarele 5 zile: 60 % zooplancton, 20%, bentos, 25% furaj; - urmtoarele 5 zile: 50% zooplancton, 5%, bentos, 50 % furaj; - urmtoarele 5 zile: 10 % zooplancton, 5 %, bentos, 85 % furaj; - perioada urmtoare hrnirea va fi asigurat numai de furaj. Odat cu trecerea exclusiv pe furaj, raia zilnic va fi de stabilit funcie de consum, procentul variind ntre 4-20 % din greutatea lotului. Se recomand folosirea furajelor cu un coninut proteic de 35 -45%. Cantitatea de furaj administrat, precum i granulaia acestuia, va ine seama n principal de talia puilor i de temperatur apei tehnologice. Procentul de hran la puii de somn se va stabili la 10% din greutatea total a lotului/zi pentru exemplarele cu masa corporal de 0,5g, n condiiile n care temperatura apei tehnologice este de 25 0C. Acest procent va fi redus odat cu creterea temperaturii. n condiiile n care lotul are o mas corporal de 1 3 g/ex. raia va fi stabilit la 2,5 -3,5 % din greutatea lotului. Intervalul de timp ntre mese va fi de 4 6 ore.

65

n condiiile n care lotul va deveni heterogen va fi absolut necesar s fie regrupat pe categorii de greutate, situaie n care raia va fi ajustat funcie de biomas, iar granulaia furajului administrat va fi corelat cu dimensiunea materialului biologic. Sporul de cretere ce trebuie obinut dup 45 de zile, pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor este de 3-4 g / ex. Condiii de ntreinere pe perioada creterii. In incintele de cretere trebuie s se respecte o igien strict. Igenizarea se va realiza nainte de fiecare mas i va consta n ndeprtarea dejeciilor i a eventualelor resturi de furaj rmase de la masa precedent. Cel puin odat la 24 de ore se vor igeniza pereii incintei prin frecarea acestora cu un burete mbibat ntr-o soluie de permanganat de potasiu cu o concentraie de 23 mg/l. Se mai poate utiliza albastru de metil n concentraie de 1%. In timpul creterii se fac tratamente preventive pentru mixobacterii i ihtiofitiriaza: simptomele acestor boli sunt: slbire, albirea cozii cu necroz i apoi cderea zonei necrozate din coad. Pentru tratament se utilizeaz oxitetraciclin + neomicin ca bi 5 g/100 l ap de dou ori/zi. Pentru ihtioftiriaz se utlizeaz verde de malahit combinat cu formalin (4 g verde malahit/l formalin proaspt ; din aceast soluie se iau 20 25 ml/m3 ap i se distribuie direct n cad oprind curentul de ap timp de o or, dar intervenind cu instalaie de aerare a apei. Tratamentul se repet de 3 ori la interval de 24 de ore.

66

Schema fluxului tehnologiei de cretere a puilor de somn

Figura 6

Pregtirea sistemului de cretere Igenizare incinte de cretere

Monitorizarea parametrilor chimici ai apei tehnologice

Populare material biologic Populare individual a larvelor Debit de alimentare 5l/min n momentul populrii larvelor, 7 15l/min n perioada de cretere

Creterea pui

Hrnire pui Funcie de t0 apei; Raia zilnic conform, stabilit funcie de masa corporal a lotului

Igenizarea incintelor Zilnic dup fiecare mas administrat

Monitorizarea ritmului de cretere Cntriri sptmnale; Selecie i regruparea materialului biologic pe categorii de greutate; Administrarea de furaj adecvat fiecrei grupe de

Monitorizarea strii sanitare Instituirea msurilor de tratament la apariiei primelor simptome de mbolnvire Monitorizarea factorilor fizici i chimici ai apei tehnologice

Recoltare material populare somn

67

4. REGULI PENTRU VERIFICAREA TEHNOLOGIEI Sistemul tehnologic i tehnologia de reproducere artificial i cretere n perioada de dezvoltare posteembrionar a alului se va verifica n baza urmtoarei metodologii: Probe i verificri iniiale a instalaiei de alimentare a apei Verificarea modului de funcionare a instalaiilor de alimentare, distribuie i evacuare a apei, nu se admit pierderi de ap la etaneizrii, nu se admite lipsa postamentului de protecie, nu se admite valori mai mari ale presiunii fa de valoarea de referin stabilit iniial; Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare, nu se admit pierderi de ap la mbinri; Verificarea poziiei vanelor pe traseul de trecere a apei, nu se admit robinei nchii; Verificarea parametrilor chimici ai apei, nu se admite depirea valorii acestora fa de valorile prevzute prin Ord. 161/2006 - Ape de suprafa

Probe i verificri iniiale a modulelor specifice de reproducere i cretere - Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare i evacuare a modulelor de reproducere i de cretere, nu se admit pierderi de ap; - Verificarea asigurrii meninerii nivelului constant de 1, 0 m i respectiv 0,8 m n cele dou tipuri de bazine, nu se admit nivele sub aceste valori; Verificri de lot A. Verificarea materialului de populare n momentul achiziiei - Verificarea densitii materialului n pungile standard de transport; nu se admite depirea normelor i condiiilor de transport prezentate; - Verificarea etaneitii pungilor de transport; nu se admit pungile care pierd ap sau oxigen; - Verificri n momentul populrii materialului piscicol - Verificarea valorii oxigenului dizolvat n ap din incinta de cretere; nu se admit valori mai mici de 7 mg/l - Verificarea temperaturii apei bazinului naintea deversrii materialului de populare; nu se admite deversarea direct a materialului n condiiile n care sunt nregistrate diferene ntre temperatura apei din punga de transport i apa bazinului; deversarea se va realiza dup o prealabil acomodare a materialului piscicol, la temperatura mediului acvatic; - Verificarea reactivitii materialului n momentul populrii; nu se admite ca la populare materialului piscicol s prezinte micri anormale, sau s intre n decubit lateral;

68

C. Verificarea periodic a evoluiei materialului biologic. - Verificarea zilnic, pe ntreaga perioad de cretere a masei medii i lungimii totale a materialului piscicol; numrul minim de exemplare verificate - 15 ; - Verificarea permanent, pe ntreaga perioad de cretere, a strii sanitare a materialului piscicol;

5. METODE DE VERIFICARE Aparatura Pentru verificarea parametrilor chimici ai apei : - Oxigenometru; - pH- metru; - Termometru; - Photometru - Balan analitic; Pentru verificri indicilor tehnologici ai materialului piscicol: - Ihtiometru; - Balan tehnic. Pentru verificarea strii sanitare a materialului piscicol: - Microscop cu putere de rezoluie de la cca 30 X la cca 1000X ( tip. ML 4M) Metode Metode chimice de determinare a calitii apei tehnologice Evaluarea valorilor parametrilor chimici ai apei tehnologice se efectueaz conform Ord. 161/2006: -oxigenul dizolvat se determin cu oxigenometru sau prin metoda Winkler, bazat pe oxidarea de ctre oxigenul molecular din ap, n mediu puternic alcalin, a hidroxidului de mangan bivalent la hidroxid de mangan trivalent, rezultatul fiind exprimat n mg/l; -pH-ul apei se determin n upH, utiliznd pH-metru cu afiare digital; -substana organic, clorurile (Cl-), azotaii (NO3-), azotiii (NO2-), amoniacul liber (NH3), ionul de amoniu (NH4+), alcalinitatea, dioxidul de carbon se apreciaz fotometric cu ajutorul reactivilor test Metode de determinare a strii sanitare a materialului piscicol Starea sanitar a materialului piscicol se evalueaz prin : - Examenul macroscopic pentru stabilirea diagnisticului acest examen este doar orientativ. Se examineaz cu ochiul liber sau cu lupa suprafaa corporal, ochii, branhiile, cavitatea intern. Prin acest examen pot fi decelate zonele modificate ca : necroze, chiti, hipo sau hipersecreii de mucus, hipertrofii sau atrofii ale organelor, modificri de culoare, parazii macroscopici. - Examenul microscopic are valoare de diagnostic. Probele se recolteaz direct din petele viu i constau din : - raclate, superficiale i profunde de pe suprafaa sau zona de examinat, de obicei branhii, tegument, mucoas intestinal ; raclatul se aeaz pe lam

69

i se adaug o pictur de ap distilat peste care se preseaz lamela examinndu-se imediat la microscop ; - preparate strivite se execut din orice esut i const n strivirea unei mici poriuni din acesta ntre lam i lamel, astfel nct pelicula format s devin translucid i ct mai subire. Estimarea rezultatelor se efectueaz la nivel de cmp microscopic prin identificarea agenii etiologici. Metode de determinare a indicilor tehnologici la materialul piscicol Mas medie - g / ex se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin a trei eantioane de cte 100 de indivizi, din valorile obinute calculndu-se valoarea medie ; - Spor individual de cretere g se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi n momentul populrii, determinndu-se masa iniial, i a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi la finele perioadei de cretere, determinndu-se masa final, se aplic formula : (Wf Wi)/ N, unde - Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului; N numrul de exemplare - Rata zilnic a creterii - g/zi, se determin cu formula : (Wf Wi)/ T unde- Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Rata specific de cretere - SGR - % zi se determin cu formula: SGR = (lnWf-lnWi)*100/T [%/zi], unde: Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Procent de supravieuire - % - se determin cu formula: Nf/Ni x 100 unde : Nf i Ni numrul de exemplare iniial i final 6. MSURI DE TEHNICA SECURITII MUNCII La punerea n funciune i exploatare a sistemului tehnologic Asamblarea instalaiilor, punerea n funciune i efectuarea probelor se va efectua numai de personalul calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea acestora ; Instalaiile se vor da n exploatare numai dup verificarea existenei i a corectei strngeri a tuturor organelor de asamblare demontabile; - Deservirea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea sistemului; - Intreinerea i repararea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit n acest scop. Se interzice persoanelor care deservesc sistemul s remedieze defeciunile acestuia. - naintea oricrei intervenii ( desfacere pentru curire, nlocuirea unor piese defecte, ntreinere sau reparaii) se va opri obligatoriu alimentarea cu ap a sistemului; -

70

Operaiile de prelucrare a evilor (tiere, ndoire, fasonare etc.) vor fi executate pe bancul de lucru din ateliere. Se interzice executarea operaiilor de prelucrare a evilor pe schele de montaj, cu excepia ajustrii racordurilor ntre conducte, n vederea definitivrii poziiei de montaj; Prelucrarea evilor i a prefabricatelor din materiale plastice se va efectua cu scule, dispozitive i utilaje n bun stare de funcionare i se vor respecta Normele specifice de securitate a muncii pentru prelucrarea cauciucului sintetic i a produselor macromoleculare; Conductele vor fi fixate dup caz pe elemente de susinere ca: stelaje consolidate, console, supori etc. care s permit meninerea acestor conducte n poziia de pozare i vor fi consolidate cu brri demontabile sau alte tipuri de elemente de susinere.

La aplicarea tehnologiei de reproducere artificial i cretere - La repartizarea personalului de lucru se va ine seama de aptitudini i de nivelul de cunotine profesionale ; - Se va evita lucrul n asalt asigurndu-se necesarul de materii prime ; - Personalul de deservire trebuie s poarte echipament de protecie : salopet, cizme de cauciuc ; - Se va evita contactul epidermei cu substaner folosite la igenizarea incintelor de cretere ; - La efectuarea analizelor chimice uzuale, determinarea oxigenului, pH ului se vor respecta Normele specifice de protecia muncii pentru laboratoarele de analize fizico chimice i mecanice Extras 36/1999

71

DOCUMENTAIE DE TRANSFER TEHNOLOGIC A TEHNOLOGIEI DE REPRODUCERE ARTIFICIAL A SPECIEI TINCA TINCA - LIN PREZENTAREA TEHNOLOGIEI 1.7. Obiect

Tehnologia elaborat vizeaz reproducerea controlat a speciei Tinca tina lin,n vederea refacerii populaiilor naturale i introducerii i extinderii ei n acvacultur. 1.8. Domeniul de aplicare

Potentialii beneficiari ai tehnologiei de reproducere sunt agentii economici care au ca obiect principal de activitate pescuitul si acvacultura. Tehnologia de reproducere controlat devine aplicabil in momentul in care exista baza logistica necesara desfasurarii intregului flux tehnologic si se are in vedere urmatoarele : - Loturi de reproducatori masculi si femele care s constituie baza biologic pentru realizarea reproducerii i obinerea descendenelor de diferite vrste; - Bazine pentru parcarea, prematurarea si maturarea reproducatorilor - Statie de reproducere artificiala cu toate dotarile necesare : module parcare reproductori, platform pentru fecundare, aparate de incubatie caracteristice fiecarei specii, module pentru cresterea puilor in primele faze de dezvoltare postembrionara, minilaborator. 1.3. Cerinte de mediu inconjurator Tehnologia elaborat nu prezinta elemente poluante pentru mediu. Substantele folosite sunt omologate si acceptate in UE si nu afecteaza materialul biologic si nici parametrii chimici ai apei. Apa tehnologica rezultat se incadreaza in parametrii Ord. 161 / 2006 . Riscul evadarii materialului biologic este exclus, sistemul tehnologic fiind prevzut cu elemente de sigurant, site la incintele de incubatie si la conductele de evacuare a apei tehnologice. 2. CONDITII TEHNICE DE APLICARE A TEHNOLOGIEI 2.1 Sistem tehnologic pentru reproducerea artificial a Tinca tinca - lin Pentru reproducerea artificial a linului, avnd n vedere particularitile reproductive ale speciei, trebuie s se asigure o baz tehnico-material specific i n concordan cu diferitele etape ale acestui proces. Sistemului tehnologic se va dimensiona n funcie de capacitatea de producie stabilit de utilizator i va asigura prin capacitatea sa, reproducerea a minim 10 de familii pentru a asigura meninerea i conservarea biodiversitii genetice a speciei. n corelaie cu capacitatea de incubare sistemul tehnologic va fi constituit

72

dintr-un ansamblu de bazine de pmnt : bazine de parcare-iernare, bazine de prematurare, module pentru parcarea i maturarea reproductorilor, module de incubare a icrelor embrionate i module pentru parcarea i creterea larvelor cu urmtoarele caracteristici tehnice: Bazinele de parcare- iernare Sunt bazine de pmnt, realizate n sptur, au de regul form dreptunghiular, suprafa cuprins ntre 1000 -2000 mp, maximum 3000 mp; adncimea este de cca. 2,0m i debitul de alimentare este de 3-5 l/sec/ha. Instalaiile de alimentare i de evacuare se dimensioneaz astfel nct inundarea i vidarea s se poat face n circa 3 ore. Norma de populare este de 40-50 ex / ha. Bazinele de prematurare . Sunt bazine mici, n care reproductorii de lin sunt meninui dup pescuitul de selecie din primvar, pn cnd temperatura apei atinge valori optime de reproducere (20-22 0C). Aceste bazine au urmtoarele dimensiuni : (10 15) x (3 4) x (0,75 1) m i sunt amenajate din pmnt, cu alimentare i evacuare continu. Modulul pentru parcarea i maturarea reproductorilor Pentru parcarea i maturarea reproductorilor de lin se utilizeaz 4 module: dou pentru femele i dou pentru masculi. ntr-un modul se introduc cte 4-5 exemplare, asigurnd parcarea n vederea reproducerii a unui numr de 10 femele i 10 masculi. Componena unitii de parcare i maturare a reproductorilor. Modulul se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Bazin paralelipipedic cu volumul util de 4,0 mc b) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei e) Instalaie de alimentare Descrierea i realizarea unitii de parcare a reproductorilor Bazinul este de form paralelipipedic cu dimensiunile de 2 x2 x 1, 2 m i este confecionat din prelat plastifiat. Este asamblat prin lipire prin nclzire local i cu adeziv. Bazinul este montat pe un cadru din eav metalic cu 40, alctuit din 8 elemente cu lungimea de 2, 0 m care constituie partea superioar i inferioar a bazinului i alte 12 elemente pe prtile laterale la distane de 1, 0 m unul de altul, mbinate prin sudur, care asigur forma si rezistena bazinului. Att la partea superioar ct i la cea inferioar sunt lipite benzi suplimentare, care dubleaz peretele bazinului, prevzute cu orificii prin care trece cte o frnghie de relon cu 12 mm care asigur prinderea bazinului de structura metalic. n lateralul bazinului, n partea opus alimentrii, este practicat un orificiu prelungit cu un cilindru de prelat cu diametrul de 100 mm, prin care trec elementele instalaiei de evacuare. nlimea bazinului este de 1,2 m. Montarea bazinului se realizeaz astfel : pe o platform plan i fr asperiti se aeaz plci din polistiren expandat cu grosimea de 20 mm care

73

asigur protecia acestuia de eventuale agri, nepri sau deteriorri. Se asambleaz structura de susinere a acestuia i se prinde bazinul de prelat, cu ajutorul frnghiei de relon. Se monteaz n orificiul lateral al bazinului instalaia de scurgere i se fixeaz furtunul flexibil n inel pentru asigurarea nivelului dorit. Pe marginea superioar a bazinului, opus gurii de evacuare se fixeaz eava de alimentare n unghi de 45 0 fa de peretele bazinului. Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de parcare a reproductorilor are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazin. Instalaia este alctuit dintr-un alimentrii un orificiu de scurgere cu diametrul de 100 mm. n acest orificiu se plaseaz o tubulatur ce va asigura preluarea surplusului de ap din incint realiznd n acest fel circulaia apei. Etanarea gurii de scurgere se asigur prin intermediul unui inel O Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon. Tubulatura de evacuare este executat din PVC flexibil avnd diametrul de 100 mm, mbinat cu adeziv de tip Codez. Sistemul de reglare a nivelului apei n bazin este asigurat prin poziionarea tubului flexibil la nivelul dorit. Tubul flexibil este stabilizat de un inel prins de structura metalic a bazinului. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 1,0 m. Instalaia de alimentare cu ap a bazinului de parcare a reproductorilor de lin asigur un debit de ap de 35 l/min. Instalaia este construit din eav de PVC de 1 3/4II i un robinet. eava este poziionat la un unghi de 45 0 fa de peretele bazinului de parcare.

Instalaia de incubare a icrelor de lin

Instalaia de incubare a icrelor de lin are ca scop realizarea condiiilor de optime de incubare a acestora. Se asigur alimentarea, meninerea unui nivel optim, tratarea icrelor i evacuarea apei individualizat din fiecare incubator Componena instalaiei Instalaia se compune din urmtoarele subansamble: a) Ansamblu pregtire incubaie; b)instalaie de alimentare incubatoare; c)incubator ; d)suport incubatoare; e)instalaie de evacuare.

Descrierea i realizarea instalaiei

74

d) Ansamblu pregtire incubaie Este constituit din: instalaie de alimentare cu ap tehnologic; tvi pentru fecundare ; rame suport pentru icre; plaform suport. Instalaia de alimentare cu ap tehnologic const dintr- o conduct metalic cu diametrul de 100 mm, racordat la conducta care alimenteaz staia de incubaie, pe care sunt montai robinei la distante de 1,0 m, prin intermediul unor evi cu diametrul de 25mm. Tvile pentru ntinderea icrelor pe rame dup fecundare, sunt confecionate din tabl galvanizat i au dimensiunile de 180 x 67 x 6,5 cm. Avnd n vedere c linul este o specie care, n mediul natural, depune icrele pe vegetaie acestea fiind lipicioase, pentru incubarea artificial se folosesc rame suport. Ramele suport sunt confecionate dintr-un cadru metalic din srm de inox cu dimetrul de 3 mm, pe care se fixeaz o pnz de nytal. Ramele sunt dreptunghiulare cu dimensiunile de de 50,0 cm lungime i 30,0 lime. n incubator se fixeaz pe suportul special, pe lungime, avnd la capete nite prelungiri n unghi drept , care ptrund n fanta suportului i le menin astfel n poziie vertical. Platforma suport este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt aezate blaturile din lemn. b)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a celor 40 de incubatore dispuse pe dou rnduri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic printr-o conduct metalic cu diametrul de 500 mm. Reglarea debitului se face prin intermediul unei vane. La intrarea n staie, conducta se ramific, pentru a realiza alimentarea independent a celor dou rnduri de incubatoare, n dou brae paralele, cu diametrul de 100mm, pe care sunt montai robinei care permite alimentarea optim a fiecrui incubator. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Alimentarea cu ap a incubatoarelor se realizeaz prin lateral, pe deasupra incubatorului, prin conducte metalice cu 25mm, n form curbat la captul superior, (n form de pip), iar reglarea debitului, prin intermediul unor robinete. La captul superior al evii de alimentare se ataeaz, prin intermediul unui furtun, o eav metalic n form de T , latura lung orizontal fiind prevzut cu numeroase orificii de 2mm, care asigur distribuia apei pe ntreaga suprafa a incubatorului i oxigenarea suplimentar a apei tehnologice. Debitul de lucru n perioada de incubaie este 5-6 l / min. b)Incubator tip Nucet utilizat la incubarea icrelor de lin Incubatorul tip Nucet, este realizat dintr-o cutie metalic, cu dimensiunile 60 x 60 x 55 cm, n care se introduce un juvelnic confecionat din sit de Nytal cu ochiuri de 200 , dimensiunile 52 x 52 x 46 cm; juvelnicul este susinut de un stelaj metalic din fier beton 4mm, cu dimensiunile 56 x 56 x 55.

75

Incubatorul mai este echipat cu un suport pentru fixarea ramelor reprezentat de un cadru metalic ptrat, cu latura de 51 cm. Pe dou dintre laturile opuse ale acestui suport sunt realizate fante cu deschiderea de 5mm, la distan de 2 cm, pe care sunt aezate ramele cu icre. Incubatorul are un volum de 180 l ap i o capacitate maxim de incubare de 1,5 kg icre. Evacuarea apei din incubator se realizeaz prin intermediul unui tu de evacuare cu 50 mm, situat pe latura opus alimentrii , n partea superioar. c)Suportul incubatoarelor este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. Pe picioarele suportului sunt sudate lonjerone confecionate din eav ptrat pe care sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt dispuse incubatoarele. d) Instalaia de evacuare Asigur evacuarea apei reziduale utilizat n procesul tehnologic. Instalaia este confecionat din tubulatur din PVC mbinat cu adeziv Codex i este construit din 2 jgheaburi nclinate care colecteaz apa evacuat din incubatoare, fixate pe cadrul instalaiei prin intermediul unor coliere.

Module pentru creterea larvelor de lin Descrierea i realizarea instalaiei

Unitatea de cretere a puilor de lin este destinat dezvoltrii acestora ncepnd de la faza de larve de 5 zile pn la vrsta de 45 zile. Instalaia asigur spaiul necesar dezvoltrii acestora, alimentarea cu ap i reglarea nivelului acesteia, evacuarea apei uzate. Componena unitii de cretere. Instalaia se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Instalaie de alimentare; b) Bazin de cretere paralelipipedic c) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei a) Instalaia de alimentare cu ap a unitii de cretere a puilor de lin asigur debitul de ap tehnologic cu caracteristicile fizice i chimice optime pentru creterea puietului de sturioni. Instalaia este construit din eav de PVC de 1II , un robinet, coturi, un teu i segmente din eav de 1II perforat, poziionate pe marginea superioar a bazinului mbinate prin tuburi flexibile i fixate cu coliere din mas plastic.

76

b) Bazinul de cretere este confecionat din fibr de sticl cu latura de 2,0 mm i nlimea de 0,9 m. n centrul bazinului este practicat un orificiu prin care trec elementele instalaiei de evacuare. Bazinul este prevzut cu picioare fixndu-se direct pe pardoseala halei. c)Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de cretere a puilor de lin are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazinul circular. Instalaia este alctuit dintr-un cilindru de inox perforat, cu nlimea de 20 cm, care este etaniezat n orificiul de scurgere prin intermediul unei rame de lemn pe care se lipete burete. Perforaiile cilindrului interior asigur scurgerea apei din bazin. n funcie de mrimea puietului cilindrul poate fi mbrcat n mnecue de nytal care s nu permit evadarea materialului piscicol. Tubulatura de evacuare este executat din coturi, tuburi i un teu realizate din PVC avnd diametrul de 110 mm, mbinate cu adeziv de tip Codez. Legtura dintre orificiul de scurgere i conductele de evacuare se realizeaz printr-un manon flexibil fixat cu coliere 110. Tubul de reglaj are ataat un mner n partea superioar cu care poate fi poziionat astfel nct s se poat obine nivelul dorit sau, n caz de scoatere, se poate evacua apa din bazinul de cretere. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 0,8 m.

3. DESCRIEREA TEHNOLOGIEI Tehnologia de reproducere artificial i cretere a larvelor speciei presupune parcurgerea urmtoarelor faze: Asigurarea loturilor de reproductori evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; parcarea, prematurarea reproductorilor maturarea reproductorilor stimularea maturrii celulelor sexuale; colectarea produselor sexuale; fecundarea; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; ambalarea i transportul larvelor; cresterea larvelor pn la vrsta de 45 zile Tinca

tinca

Schema cadru a tehnologiei de obinere prin reproducere artificial a descendenilor speciei Tinca tinca este prezentat n figura nr. 1

77

Fig nr. 1

Schema fluxului tehnologic de obinere prin reproducere artificial a larvelor de lin

Asigurarea loturilor de reproductori

Evaluarea preliminar a reproductorilor Aprecierea strii fiziologice i de ntreinere

Parcare reproductori Bazine din pmnt 2000-3000 mp

Condiii de parcare Debit de alimentare de 3-5 l/s/ha Nivel de oxigen nu mai mic de 5 mg/l

Selecia reproductorilor. Parcarea reproductorilor n staia de incubaie

Stimulare hormonal Injectare cu extract hipofizar 10mg/kg corp femele i 6mg/kgcorp masculi

Maturare Module de maturare Debit de alimentare 8-10 l/s/ha

Femele Prin masare uoar

Prelevare produse sexuale

Masculi Prelevare prin masare sau cu seringa prevzut cu tub tygon

Fecundare Cu sperm proaspt prin metoda uscat . 1 ml sperm la 100 l icre Incubare Incubare Incubatoare tip Nucet

Tratamente icre embrionate

Eclozare larve

Parcare

Ambalare

78

Asigurarea lotului de reproductori. Reproductorii de lin utilizati la reproducere artificial provin din loturile crescute n ferme, special n acest scop, sau din capturarea lor din mediul natural. Toamna, reproductorii sunt pescuii din bazinele de cretere i introdui n bazinele de iernare. De cele mai multe ori, reproductorii de lin sunt introdui la iernat, mpreun cu celelalte specii de ciprinde. Pentru constituirea lotului de reproductori se aleg peti n vrst de 3-6 ani, cu greutatea de 0,8 -2,0 kg.

Fig. nr. 2 Reproductor de lin

Evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului; Reproductorii de lin sunt pescuii din bazinele de iernare i se separ pe sexe cnd temperatura apei atinge 15-18oC. Separarea pe sexe se realizeaz cu usurin, reproductorii prezentnd un dimorfism sexual pronunat: masculul prezint o dezvoltare pronunat a centurii pelviene i a nottoarelor de la acest nivel, cu arcuirea i ngroarea pe o parte a acestora i au talia mai mare dect femelele. Pentru reproducerea artificial sunt folosii reproducatori cu greutate medie cuprins ntre 800 -1500 g/ ex la femele i 1500 2000 g / ex la masculi . Reproductorii sunt inui n bazinele de maturare pn n momentul n care temperatura apei atinge i se menine n jurul valorii de 22-24 oC i nu scade sub 19-20 0C, n timpul nopii

79

Stimularea maturrii celulelor sexuale Cnd temperatura apei se menine n jurul valorii de 22 oC reproductorii masculi i femele, sunt pescuii din bazinele de maturare i introdui n modulele de parcare maturare din staia de incubaie. Tratamentul hormonal se realizeaz dup 24 de ore de la parcarea reproductorilor n staia de incubaie. Pentru stimularea maturrii celulelor sexuale la lin, se utilizeaz hipofiza de crap. Doza total de este de 10mg /kg corp pentru femele i 6 mg / kg corp la femele . Masculii sunt stimulai cu singur doz de 6mg/kg corp Stimularea hormonal a femelelor se realizeaz n dou trepte: - treapta I - 3-4 mg/ kg corp ; - treapta a II-a - 6-7 mg / kg corp la femele Injecia se efectueaz intraperitoneal. La temperaturi de 23- 25 0C, reproductorii sunt injectai seara, administrndu-se prima doz la femele i ntreaga cantitate de hormon la masculi. Ce-a de a doua doz la femele se administraz la interval 8-10 ore. Dupa injectare, reproductorii separai pe sexe, sunt introdui n czi, pentru maturare, n staia de incubaie. n perioada de maturare temperatura optim este de 240C, iar cantitatea de oxigen dizolvat de minim 6 mg /l. Ovulaia se poate produce dup cca. 12 - 16 ore de la administrarea celei de a doua doze. Colectarea icrelor si fecundarea artificial. Colectarea icrelor se realizeaz prin masarea uoar a abdomenului. Se maseaz uor abdomenul in directie longitudinala, de sus in jos, in lungul liniei axiale a abdomenului, mpingndu-se icrele catre orificiul genital. Femelele cedeaz icrele n una sau mai multe porii. De la o femel se recolteaz ntre 50 i 150 g icre. Dup recoltarea icrelor se cntrete un gram de icre i se numr pentru determinarea fecunditii absolute (numr icre / femel) i relativ (numr icre / kg femel ). La un gram corespund cca. 1400 boabe. La fel se procedeaz si cu masculii, sperma se recolteaz n cristalizoare prin mulgere, sau cu ajutorul unei seringi prevzut cu tub tygon de 5-6 cm. Tubul se introduce ncet n orificiul urogenital. La exemplarele la care spermiaia este complet, sperma ncepe s urce n sering n momentul retragerii pistonului. Din punct de vedere volumetric, cantitatea medie de sperm recoltat este de 2,0 2, 5 ml/kg mas corporal. Fecundarea artificial Icrele obinute de la fiecare femel sunt fecundate cu amestec de sperm provenit de la mai muli masculi. Pentru fecundarea a 100 g icre sunt necesari 2 ml sperm. Fecundarea se realizeaz prin metoda uscat. Sperma se disperseaz peste icre dup care, amestecul este omogenizat timp de cca. 2minute. Icrele fecundate sunt ntinse pe rame i dup alte 5 minute, icrele fecundate sunt introduse pentru incubare n incubatoarele Nucet .

80

Fig. nr. 3 Intinderea icrelor pe rame Incubarea produselor sexuale Incubarea icrelor va ncepe odat cu introducerea i fixarea ramelor n incubatorul Nucet. Incubaia dureaz 2-3 zile, la temperatura de 23-25C. Pentru lin temperatura optim de incubaie este de 23-250 C. Pe durata embriogenezei debitul de alimentarea al incintelor de incubaie se va corela cu necesitile fiziologice ale embrionului n diferitele lui stadii de dezvoltare.

Fig. nr. 4 Introducerea ramelor n incubatoare Debitul de alimentare al incubatoarelor pn la faza de gastrulaie a icrei va fi reglat de aa manier nct s creeze unui curent de ap care s nu produc deslipirea icrelor de pe rame (3- 4 l/min). Dup gastrulaie, incubatorul se alimenteaz cu un volum de ap mai mare (5 7 l/min.)

81

Un factor important ce trebuie asigurat i controlat pe perioada de dezvoltare embrionar este consumul de oxigen care pe perioada embriogenezei crete pe msura dezvoltrii embrionului. Pe parcursul embriogenezei nivelul oxigenului n incintele de incubare va fi meninut la valori de minim 5 6 mg/l. Controlul fungilor pe perioada incubaiei se va realiza prin mbierea icrelor, cu soluie de formalin, timp de 15 minute. Primul tratament se va realiza la 24 de ore de la fecundare , iar urmtoarele la intervale de 12 ore pn n momentul apariiei veziculelor optice. Pe perioada incubaiei se va stabili supravieuirea n diferite faze ale dezvoltrii embrionare. Procentul de fecundare se va stabili la cca. 24 de ore de la fecundare. Dup eclozare, ramele se scot din incubator, iar larvele sunt inute n incubatoare, nc 2-3 zile. Prelevarea i parcarea larvelor Prelevarea larvelor eclozate se realizeaz pe pern de ap n mod continuu, n tancuri individuale de colectare. Tancul de colectare este prevzut cu un juvelnic din plas de nytal cu latura ochiului de 0,2 mm pentru concentrarea larvelor. Larvele concentrate sunt prelevate cu ajutorul unor mensurii i introduse n alte incubatoare curate, unde sunt meninute pn la resorbia sacului vitelin cca. 5 zile, la temperaturii de 24-25 0C. Densitatea de populare va fi de 20-25.000 ex/ incubator. Curentul de ap n bazinele de parcare a larvelor va fi reglat de 5 l/min. Ambalarea i transportul larvelor de lin Larvele de lin se transport n pungi de polietilen standard de 40 l, n care raportul ntre volumul de ap i volumul de oxigen este de 1/1. Densitatea larvelor la o pung standard se stabilete funcie de durata transportului i temperatura aerului, conform tabelului de mai jos: Densitatea larvelor de lin la punga standard Tabelul nr.1 Temperatura
0

Masa medie G/ex 10 ore

Durata transportului 25 ore 50 ore

25

0,001 0,02 0,03

200.000 10.000 5.000

150.000 7.000 5.000

70.000 5.000 2.000

Transportul larvelor n condiii optime se realizeaz cu maini izoterme dotate cu uniti de condiionare a temperaturii mediului incintei. n lipsa acestora

82

transportul se poate realiza cu mijloace de transport obinuite cu respectarea urmtoarelor condiii: capacitatea mainii s fie corelat cu numrul pungilor ce urmeaz s fie transportate; incinta de transport s fie capitonat cu un numr suficient de materiale ( cartoane sau pturi ) care s mpiedice spargerea sacilor; s fie prevzut cu o rezerv de oxigen de minim 50l, rezerv dotat cu manometru i furtun i o rezerv de saci de 10% din numrul sacilor care se transport . Creterea larvelor pn asemntoare adulilor la atingerea caracterelor fenotipice

Schema cadru a tehnologiei de cretere a puilor de somn este prezentat n Figura 5.

Norma de populare
Larvele obinute de la fiecare femel sunt populate separat n incintele de cretere. Norma de populare este de 10.000 ex/m3 i se stabilete lundu-se n considerare pierderile tehnologice pe etapa de cretere care n general sunt estimate la 30%.

Pregtirea modulelor de cretere i popularea larvelor.

Pregtirea incintelor de cretere se realizez cu 48 de ore nainte de populare. Acestea sunt riguros igenizate pe toat suprafaa cu soluie de Germostop 10%, soluie ce este meninut timp de o or, dup care este ndeprtat prin cltiri repetate. nlimea coloanei de ap n incintele de cretere a larvelor se regleaz la 20 cm. Apa tehnologic din incinte va fi evaluat din punct de vedere fizico-chimic prin determinarea temperaturii, a pH ului, oxigenului. Debitul de alimentare n incintele de prematurare se stabilete ntre 5 -7 l/min. Lansarea larvelor n incintele de cretere se realizeaz dup egalizarea temperaturii apei din incinta de transport. Nivelul oxigenului dizolvat se va menine la un nivel minim de 7mg/l. Imediat dup populare puii vor fi intens monitorizai pentru a se observa modul n care acetia se adapteaz la noile condiii de mediu. Concomitent cu monitorizarea materialului biologic se monitorizeaz la interval de trei ore parametrii fizico-chimici, respectiv temperatura i oxigenul.

83

Hrnirea
Creterea larvelor pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor se realizeaz pe seama unei scheme de hrnire ce presupune administrarea de hran vie n primele 57 zile de cretere i glbenu de ou mixat i mai apoi pe o diet mixt format din hran natural i furaj. Hrnirea cu hran natural se realizeaz cu zooplancton foarte mrunt. Dieta este completat cu galbenu de ou mixat. Hrnirea larvelor folosind hran natural vie n diet mixt cu furaj va presupune aplicarea urmtoarei scheme de hrnire ce va permite trecerea ealonat la o hrnire bazat exclusiv de furaj : - primele 5 zile: 85% zooplancton, 15% furaj; - urmtoarele 5 zile: 60 % zooplancton, 40% furaj; - urmtoarele 5 zile: 50% zooplancton, 50 % furaj; - urmtoarele 5 zile: 10 % zooplancton, 90% furaj; - perioada urmtoare hrnirea va fi asigurat numai de furaj. Odat cu trecerea exclusiv pe furaj, raia zilnic va fi de stabilit funcie de consum, procentul variind ntre 4-20 % din greutatea lotului. Pentru creterea linului sunt utilizate furaje de crap cu un coninut n protein brut de 35 -45% i granulaie de 0,1-0,2 mm . Furajul se administreaz n 8-10 mese pe zi . Sporul de cretere ce trebuie obinut dup 30 de zile, pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor este de 300 500 mg / ex. Condiii de ntreinere pe perioada creterii. In incintele de cretere trebuie s se respecte o igien strict. Igenizarea se va realiza nainte de fiecare mas i va consta n ndeprtarea dejeciilor i a eventualelor resturi de furaj rmase de la masa precedent. Cel puin odat la 24 de ore se vor igeniza pereii incintei prin frecarea acestora cu un burete mbibat ntr-o soluie de permanganat de potasiu cu o concentraie de 23 mg/l. Se mai poate utiliza albastru de metil n concentraie de 1%.

84

Schema fluxului tehnologiei de cretere a puilor de lin

Figura 2

Pregtirea sistemului de cretere Igenizare incinte de cretere

Monitorizarea parametrilor chimici ai apei tehnologice

Populare material biologic Populare individual a larvelor de lin Debit de alimentare 5l/min n momentul populrii larvelor, 7 15l/min n perioada de cretere

Creterea pui

Hrnire pui Funcie de t0 apei; Raia zilnic conform, stabilit funcie de masa corporal a lotului

Igenizarea incintelor Zilnic dup fiecare mas administrat

Monitorizarea ritmului de cretere Cntriri sptmnale; Selecie i regruparea materialului biologic pe categorii de greutate; Administrarea de furaj adecvat fiecrei grupe de

Monitorizarea strii sanitare Instituirea msurilor de tratament la apariiei primelor simptome de mbolnvire Monitorizarea factorilor fizici i chimici ai apei tehnologice

Recoltare material populare lin

85

4. REGULI PENTRU VERIFICAREA TEHNOLOGIEI Sistemul tehnologic i tehnologia de reproducere artificial i cretere n perioada de dezvoltare posteembrionar a linului se va verifica n baza urmtoarei metodologii: Probe i verificri iniiale a instalaiei de alimentare a apei Verificarea modului de funcionare a instalaiilor de alimentare, distribuie i evacuare a apei, nu se admit pierderi de ap la etaneizrii, nu se admite lipsa postamentului de protecie, nu se admite valori mai mari ale presiunii fa de valoarea de referin stabilit iniial; Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare, nu se admit pierderi de ap la mbinri; Verificarea poziiei vanelor pe traseul de trecere a apei, nu se admit robinei nchii; Verificarea parametrilor chimici ai apei, nu se admite depirea valorii acestora fa de valorile prevzute prin Ord. 161/2006 - Ape de suprafa

Probe i verificri iniiale a modulelor specifice de reproducere i cretere - Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare i evacuare a modulelor de reproducere i de cretere, nu se admit pierderi de ap; - Verificarea asigurrii meninerii nivelului constant de 1, 0 m i respectiv 0,8 m n cele dou tipuri de bazine, nu se admit nivele sub aceste valori; Verificri de lot A. Verificarea materialului de populare n momentul achiziiei - Verificarea densitii materialului n pungile standard de transport; nu se admite depirea normelor i condiiilor de transport prezentate; - Verificarea etaneitii pungilor de transport; nu se admit pungile care pierd ap sau oxigen; - Verificri n momentul populrii materialului piscicol - Verificarea valorii oxigenului dizolvat n ap din incinta de cretere; nu se admit valori mai mici de 7 mg/l - Verificarea temperaturii apei bazinului naintea deversrii materialului de populare; nu se admite deversarea direct a materialului n condiiile n care sunt nregistrate diferene ntre temperatura apei din punga de transport i apa bazinului; deversarea se va realiza dup o prealabil acomodare a materialului piscicol, la temperatura mediului acvatic; - Verificarea reactivitii materialului n momentul populrii; nu se admite ca la populare materialului biologic s prezinte micri anormale, sau s intre n decubit lateral; C. Verificarea periodic a evoluiei materialului biologic.

86

- Verificarea zilnic, pe ntreaga perioad de cretere a masei medii i lungimii totale a materialului piscicol; numrul minim de exemplare verificate - 15 ; - Verificarea permanent, pe ntreaga perioad de cretere, a strii sanitare a materialului piscicol;

5. METODE DE VERIFICARE Aparatura Pentru verificarea parametrilor chimici ai apei : - Oxigenometru; - pH- metru; - Termometru; - Photometru - Balan analitic; Pentru verificri indicilor tehnologici ai materialului piscicol: - Ihtiometru; - Balan tehnic. Pentru verificarea strii sanitare a materialului piscicol: - Microscop cu putere de rezoluie de la cca 30 X la cca 1000X ( tip. ML 4M) Metode Metode chimice de determinare a calitii apei tehnologice Evaluarea valorilor parametrilor chimici ai apei tehnologice se efectueaz conform Ord. 161/2006: -oxigenul dizolvat se determin cu oxigenometru sau prin metoda Winkler, bazat pe oxidarea de ctre oxigenul molecular din ap, n mediu puternic alcalin, a hidroxidului de mangan bivalent la hidroxid de mangan trivalent, rezultatul fiind exprimat n mg/l; -pH-ul apei se determin n upH, utiliznd pH-metru cu afiare digital; -substana organic, clorurile (Cl-), azotaii (NO3-), azotiii (NO2-), amoniacul liber (NH3), ionul de amoniu (NH4+), alcalinitatea, dioxidul de carbon se apreciaz fotometric cu ajutorul reactivilor test Metode de determinare a strii sanitare a materialului piscicol Starea sanitar a materialului piscicol se evalueaz prin : - Examenul macroscopic pentru stabilirea diagnosticului acest examen este doar orientativ. Se examineaz cu ochiul liber sau cu lupa suprafaa corporal, ochii, branhiile, cavitatea intern. Prin acest examen pot fi decelate zonele modificate ca : necroze, chiti, hipo sau hipersecreii de mucus, hipertrofii sau atrofii ale organelor, modificri de culoare, parazii macroscopici. - Examenul microscopic are valoare de diagnostic. Probele se recolteaz direct din petele viu i constau din : - raclate, superficiale i profunde de pe suprafaa sau zona de examinat, de obicei branhii, tegument, mucoas intestinal ; raclatul se aeaz pe lam

87

i se adaug o pictur de ap distilat peste care se preseaz lamela examinndu-se imediat la microscop ; - preparate strivite se execut din orice esut i const n strivirea unei mici poriuni din acesta ntre lam i lamel, astfel nct pelicula format s devin translucid i ct mai subire. Estimarea rezultatelor se efectueaz la nivel de cmp microscopic prin identificarea agenii etiologici. Metode de determinare a indicilor tehnologici la materialul piscicol Mas medie - g / ex se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin a trei eantioane de cte 100 de indivizi, din valorile obinute calculndu-se valoarea medie ; - Spor individual de cretere g se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi n momentul populrii, determinndu-se masa iniial, i a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi la finele perioadei de cretere, determinndu-se masa final, se aplic formula : (Wf Wi)/ N, unde - Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului; N numrul de exemplare - Rata zilnic a creterii - g/zi, se determin cu formula : (Wf Wi)/ T unde- Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Rata specific de cretere - SGR - % zi se determin cu formula: SGR = (lnWf-lnWi)*100/T [%/zi], unde: Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] - Procent de supravieuire - % - se determin cu formula: Nf/Ni x 100 unde : Nf i Ni numrul de exemplare iniial i final 6. MSURI DE TEHNICA SECURITII MUNCII La punerea n funciune i exploatare a sistemului tehnologic Asamblarea instalaiilor, punerea n funciune i efectuarea probelor se va efectua numai de personalul calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea acestora ; Instalaiile se vor da n exploatare numai dup verificarea existenei i a corectei strngeri a tuturor organelor de asamblare demontabile; - Deservirea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea sistemului; - Intreinerea i repararea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit n acest scop. Se interzice persoanelor care deservesc sistemul s remedieze defeciunile acestuia. - naintea oricrei intervenii ( desfacere pentru curire, nlocuirea unor piese defecte, ntreinere sau reparaii) se va opri obligatoriu alimentarea cu ap a sistemului; -

88

Operaiile de prelucrare a evilor (tiere, ndoire, fasonare etc.) vor fi executate pe bancul de lucru din ateliere. Se interzice executarea operaiilor de prelucrare a evilor pe schele de montaj, cu excepia ajustrii racordurilor ntre conducte, n vederea definitivrii poziiei de montaj; Prelucrarea evilor i a prefabricatelor din materiale plastice se va efectua cu scule, dispozitive i utilaje n bun stare de funcionare i se vor respecta Normele specifice de securitate a muncii pentru prelucrarea cauciucului sintetic i a produselor macromoleculare; Conductele vor fi fixate dup caz pe elemente de susinere ca: stelaje consolidate, console, supori etc. care s permit meninerea acestor conducte n poziia de pozare i vor fi consolidate cu brri demontabile sau alte tipuri de elemente de susinere.

La aplicarea tehnologiei de reproducere artificial i cretere - La repartizarea personalului de lucru se va ine seama de aptitudini i de nivelul de cunotine profesionale ; - Se va evita lucrul n asalt asigurndu-se necesarul de materii prime ; - Personalul de deservire trebuie s poarte echipament de protecie : salopet, cizme de cauciuc ; - Se va evita contactul epidermei cu substaner folosite la igenizarea incintelor de cretere ; - La efectuarea analizelor chimice uzuale, determinarea oxigenului, pH ului se vor respecta Normele specifice de protecia muncii pentru laboratoarele de analize fizico chimice i mecanice Extras 36/1999

89

TEHNOLOGIE DE REPRODUCERE ARTIFICIALA A SPECIILOR DE STURIONI.

1. GENERAITI

1.1. Obiect Prezenta tehnologie vizeaz obinerea prin reproducerea artificial a speciilor parentale de sturioni . Trei obiective sunt urmrite prin aceast tehnologie, respectiv: Asigurarea descendenilor pentru reabilitarea populaiei slbatice de sturioni din fluviul Dunrea ; Introducerea n acvacultur a speciilor de sturioni ; Puietul obinut din speciile pure de sturioni va constitui baza de genofond crescut strict n condiii de acvacultur ceea ce va contribui la dezvoltarea acesteia i la protejarea stocurilor de sturioni din mediul natural. 1.2. Domeniul de aplicare Tehnologia de reproducere artificial a speciilor parentale de sturioni este destinat agenilor economici care au ca domeniu de activitate pescuitul i acvacultuta. Tehnologia este aplicabil numai n condiiile existenei sistemului tehnologic specific staiilor de reproducere artificial, respectiv incinte de parcare a reproductorilor, incinte de incubare a produselor embrionate, alimentate de preferin din surse de suprafa sau surse freatice. 1.3.Cerine de mediu nconjurtor Tehnologia nu prezint elemente poluante pentru mediu. Substanele folosite sunt omologate i acceptate n UE i nu afecteaz materialul biologic i nici parametrii chimici ai apei. Apa tehnologic rezultat se ncadreaz n parametrii Ord. 161/2006. Riscul evadrii materialului biologic este exclus sistemul tehnologic fiind prevzut cu elemente de siguran, site la incintele de incubaie i la conductele de evacuare a apei tehnologice.

2. CONDIII TEHNICE DE APLICARE A TEHNOLOGIEI

Tehnologia de reproducere artificial a speciilor parentale de sturioni devine aplicabil n momentul n care este realizat sistemul tehnologic specific, asigurat priza la sursa de ap i sunt fixate traseele instalaiei de transport a acesteia.

90

2.1 Sistem tehnologic pentru reproducerea artificial a speciilor parentale de sturioni Sistemului tehnologic de reproducere artificial se va dimensiona funcie de capacitatea de producie stabilit de utilizator i va asigura prin capacitatea sa reproducerea n serie a dou familii de morun, cinci familii de nisetru, 20 familii de pstrug i 20 familii de ceg. n corelaie cu capacitatea de incubare sistemul tehnologic va fi constituit dintr-un grup de pompare, module de parcare i maturare a reproductorilor, module de incubare a icrelor embrionate i module de parcarea a larvelor a crui dimensionare i caracteristici tehnice sunt urmtoatrele:

Nr. Crt.
. .

Tipul de instalaie
Sistem de pompare Module de parcare a reproductorilor

Nr. uniti
2 4

Caracteristici tehnice
Q - 110 m3 /h, nlimea de pompare 36m circular; Diametru 6m; nlimea 1,2 m; Capacitatea: 22,6 m3 Capacitate de stocare 150 Kg Forma dreptunghiular: 2,8 x 0,61 x 0,61 Tip: Brate , capacitatea 15 l Capacitatea de incubare minim 300 g Forma dreptunghiular: 2,2 x 0,42 x 0,17

. . .

Module de maturare a reproductorilor Module de incubare a icrelor fecundate Module de parcare a larvelor

4 40 36

2.1.1 Descrierea i realizarea instalaiei de incubare a icrelor de sturioni. Instalaia de incubare a icrelor de sturioni are ca scop realizarea condiiilor de optime de incubare a acestora. Se asigur alimentarea, meninerea unui nivel optim, tratarea icrelor i evacuarea apei individualizat pe fiecare, din care 20 incubatoarea aezate pe dou nivele. Componena instalaiei Instalaia se compune din urmtoarele subansamble: a) Instalaie de alimentare; b) Incubator pentru sturioni; c) Suport incubatoare; d) Instalaie de evacuare.

91

Foto. 1. Incinte de incubare a icrelor de sturioni Tip Brate

Descrierea i realizarea instalaiei
a)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a celor 20 de cdie dispuse pe dou niveluri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic cu diametrul de II 1 i se asigur distribuirea apei tehnologice pe dou niveluri prin intermediul a dou inele suprapuse, fiecare incubator fiind alimentat de la un robinet cu reglare fin cu ventil care permite alimentarea optim a fiecrui incubator. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Realizarea instalaiei de alimentare a incubatoarelor pentru sturioni a fost realizat n principal din elemente din polipropileus RANDOM (PP - R) de culoare alb. S-au utilizat, conform proiectului, conductele de 25 pentru robinetele de alimentare a fiecrui incubator, utilizndu-se evi, coturi i evi 25 i robinete de col cu ventil 1/2 x 3/8 conectate de la racorduri 25 x 12II . Conducta central are diametrul de 32 mm pe aceasta fiind montat un robinet de 1II care regleaz debitul total de ap a reelei de alimentare cu ap. Pentru realizarea mbinrilor elementelor instalaiei de alimentare, s-a utilizat un aparat de polipropilen i un calibrator pentru tuburi. b)Incubator pentru sturioni Incubatorul pentru sturioni este o incint n care se realizeaz embrionarea i eclozarea faza tehnologic de obinere a larvelor de sturioni prin

92

agitarea icrelor n curent de ap. Incubatorul permite efectuarea acestui lucru cu ajutorul unui consum de ap foarte redus. Prile componente ale incubatorului: Corp incubator; Cuva basculant; Contragreutate; Cadru despritor; Tub de evacuare. Corpul incubatorului este realizat din plexiglas transparent, plcile fiind lipite cu cloroform. Este o construcie paralelipipedic cu o fa nclinat, la captul opus este practicat un orificiu de scurgere cu diametrul de 30 mm. n interiorul corpului sunt fixate prin lipire ghidaje pentru culisarea cadrului despritor cu plas i opritori pentru limitarea curselor cuvei basculante. Cuva basculant este executat din plexiglas lipit cu cloroform, are o form paralelipipedic cu latura lung nclinat i n pereii laterali sunt practicate orificii prin care trec uruburile care permit bascularea cuvei. n peretele vertical posterior este executat un orificiu, care permite prin intermediul unui urub, montarea unei contragreuti. Contragreutatea este un disc din alam care fiind montat pe un urub permite reglarea cantitii de ap din cuv i bascularea acesteia. Cadrul despritor este executat din plexiglas lipit cu cloroform, n interiorul cadrului este fixat o plas din relon, cadrul desparte n dou compartimente corpul incubatorului separnd zona de incubaie de zona de colectare a apei de scurgere. Tubul de evacuare este o construcie n form de S confecionat din eav din PP-R i dou coturi lipite la capete decalate cu 90o . c)Suportul incubatoarelor este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. n partea inferioar a acestora sunt sudate piulie prin care trec uruburi care permit reglarea i poziionarea pe vertical a suportului n funcie de nivelurile terenului pe care este montat instalaia. Pe picioarele suportului sunt sudate lonjerone confecionate din eav ptrat pe care sunt montate prin sudur rigle din profil L 40x20x2,5 pe care sunt dispuse 20 de incubatoare, pe dou nivele cte 5 buc pe fiecare latur a suportului. Pe lonjerone sunt sudate supori i plcue pe care se fixeaz instalaia de alimentare cu ap a incubatoarelor. d) Instalaia de evacuare Asigur evacuarea apei reziduale utilizat n procesul tehnologic. Instalaia este confecionat din tubulatur din PVC mbinat cu adeziv Codex i este construit din 4 jgheaburi nclinate care colecteaz apa evacuat din incubatoare, fixate pe cadrul instalaiei prin intermediul unor coliere. Cele 4 jgheaburi sunt introduse ntr-o reea de teuri , coturi i evi 110 care se mbin ntr-o evacuare comun printr-o reducie cu dimensiunile 110 x 50 care este conectat cu reeaua de scurgere din hala de incubaie. Caracteristici tehnice

93

Lungime Lime nlime Greutate proprie Racord alimentare Racord evacuare Volum de ap incubator Mod de funcionare. Reglaje.

2225mm 1650mm 1800mm 300 kg 1II 50 15 l

Instalaia se monteaz n hala de incubaie i se racordeaz la o conduct de alimentare de 1II . Evacuarea se va efectua ntr-o conduct de scurgere existent n hal. Pe riglele suportului metalic, dup reglarea cu ajutorul uruburilor a acestuia n hal, se introduc incubatoarele pentru sturioni astfel nct cuvele basculante s fie dispuse n zona robonetelor de alimentare. Incubatoarele sunt alimentate cu ap tehnologic prin umplerea i bascularea cuvelor. Cantitatea de ap din cuvele basculante se stabilete prin reglarea poziiei contragreutilor care se asigur cu piulie. Nivelul apei din incubatoare se regleaz prin poziionarea tubului de evacuare astfel ca apa s se scurg n jgheaburile colectoare. Evacuarea complet a incubatoarelor se va face prin rotirea maxim n jos a tubului de evacuare.

2.1.2 Descriere i realizarea modulului de parcare a reproductorilor

Modulul de parcare a reproductorilor este utilizat pentru reproductorii aflai n perioada de dinaintea depunerii pontei .

Componena unitii de parcare a reproductorilor.

Modulul se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Bazin circular 6000 b) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei f) Instalaie de alimentare

Descrierea i realizarea unitii de parcare a reproductorilor Bazinul este de form circular i este confecionat din folie de poliplan cu diametrul de 6 m. Este bordat cu un perete circular cu nlimea de 1,2 m asamblat prin lipire prin nclzire local i adeziv. Peretele are 16 pri speciale care permit fixarea acestuia la montajul general, sub form de pliuri asamblate prin lipire. Pe suprafaa exterioar la mijlocul peretelui sunt ataate elemente din poliplan lipite, prin care este petrecut o ntritur din poliplan cu limea de 0,15 m perimetral, lipit la capete, care asigur creterea rezistenei peretelui sub aciunea presiunii apei din bazin. n partea inferioar a peretelui bazinului se afl lipit un alt rnd de elemente de poliplan prin care este petrecut o coard de relon cu toroane cu diametrul de 12

94

mm care asigur rigiditatea fundului bazinului la mbinarea acestuia cu peretele lateral i prin modificarea lungimii permite o pretensionare a mbinrii prevenind astfel suprasolicitarea n zonele lipite. n lateralul bazinului, n partea opus alimentrii, este practicat un orificiu prin care trec elementele instalaiei de evacuare. Pentru montarea bazinului se utilizeaz 16 elemente metalice de 50 cu lungimea de 1 m, teuri i 16 picioare 40 cu lungimea de 0,9 m sprijinite pe tlpi din polietilen. n braele orizontale ale teurilor se introduc elementele 50 care se petrec prin pliurile existente pe bordura superioar a peretelui vertical. Dup obinerea perimetrului bazinului se monteaz picioarele 40 care se petrec printre peretele vertical, ntritura de poliplan (banda) i coarda de relon. Fixarea elementelor i a picioarelor n teuri se realizeaz prin intermediul unor nituri din mas palstic. Dup nlarea peretelui bazinului se monteaz la fiecare picior talpa din polietilen i se ajusteaz tensiunea din coard, respectiv lungimea acestuia. Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de parcare a reproductorilor de sturioni are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazinul circular. Instalaia este alctuit dintr-un disc din duramid plasat lateral pe partea opus alimentrii avnd un orificiu cu diametrul de 100 mm. Pe partea opus discului se afl o buc executat din poliamid care este asamblat cu acesta prin intermediul unor uruburi cromate i a unui inel O prin care se asigur etanarea gurii de scurgere. Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon. Inelul O asigur o etanare de rezisten deosebit pe perimetru ntre buc, disc i bazinul de poliplan. Tubulatura de evacuare este executat din PVC flexibil avnd diametrul de 100 mm, mbinat cu adeziv de tip Codez. Sistemul de reglare a nivelului apei n bazinul circular este asigurat prin poziionarea tubului flexibil la nivelul dorit. Tubul flexibil este stabilizat de un inel prins de structura metalic a bazinului. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 1,0 m. Instalaia de alimentare cu ap a bazinului de parcare a reproductorilor de sturioni asigur un debit de ap de 35 l/min. Instalaia este construit din eav de PVC de 1 3/4II i un robinet. eava este poziionat la un unghi de 45 0 fa de peretele bazinului de parcare. Caracteristici tehnice. - Diametrul bazinului circular 6 m; - nlimea peretelui vertical 1,2 m; - Volumul optim de ap - 19 m3; - Volumul maxim de ap - 22,6m3; - Diametrul platformei de deservire 7,3 m; - Diametrul racord alimentare 60;

95

Mod de funcionare. Reglaje. Pe o platform plan i fr asperiti se aeaz plci din polistiren expandat cu grosimea de 20 mm care asigur protecia bazinului circular de eventuale agri, nepri sau deteriorri. Se asambleaz bazinul circular confecionat din poliplan i structura de susinere a acestuia. Se monteaz n orificiul lateral al bazinului instalaia de scurgere ii se fixeaz furtunul flexibi n inel pentru asigurarea nivelului dorit. Pe marginea superioar a bazinului, opus gurii de evacuare se fixeaz eava de alimentare n unghi de 45 0 fa de peretele bazinului. 2.1.3. Descriere reproductorilor i realizarea modulului de maturare a

Modulul de maturare a reproductorilor este utilizat pentru reproductorii aflai n perioada de depunere a pontei . Componena unitii de maturare a reproductorilor. Modulul se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Bazin dreptungiular b) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei c)Instalaie de alimentare Descrierea i realizarea unitii de maturare a reproductorilor. Bazinul este de form dreptunghiular i este confecionat din fibr de sticl sau din PVC. Dimensiunile acestor incinte sunt variabile . Raportul ntre lungime, lime i nlime este stabilit funcie de specia ce urmez s parcurg etapa tehnologic de maturare i trebuie s nu permit reproductorului s se rsuceasc. Bazinul este prevzut n lateral, n partea opus alimentrii, cu un orificiu prin care trec elementele instalaiei de evacuare. Orificiul de evacuare al apei este plasat la 200mm fa de cot fund bazin pentru a nu permite icrelor eliminate s fie antrenate de curentul de ap. Incintele de maturare trebuie s fie amplasate la o cot convenabil care s permit manevrarea petilor n i din bazin cu ajutorul trgii. Incintele sunt acoperite cu un ecran de protecie. Interiorul incintelor va fi fie de culoare albastr, fie de culoarea nisipului pentru a prevenirii ptrunderii luminii. Nuana va fi aleas astfel nct s permit observarea cu uurin a icrelor eliberate de femel n momentul atingerii ovulaiei. Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de maturarea a reproductorilor de sturioni are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazinul circular. Instalaia este alctuit dintr-un disc din duramid plasat lateral la 200mmm de fundul bazinului, pe partea opus alimentrii avnd un orificiu cu diametrul de 100 mm. Pe partea opus discului se afl o buc executat din poliamid care este asamblat cu acesta prin intermediul unor uruburi cromate i a unui inel O prin care se asigur etanarea gurii de scurgere. Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon.

96

Inelul O asigur o etanare de rezisten deosebit pe perimetru ntre buc, disc i bazinul de poliplan. Tubulatura de evacuare este executat din PVC flexibil avnd diametrul de 100 mm, mbinat cu adeziv de tip Codez. Sistemul de reglare a nivelului apei n bazinul circular este asigurat prin poziionarea tubului flexibil la nivelul dorit. Tubul flexibil este stabilizat de un inel prins de structura bazinului. Instalaia de alimentare cu ap a bazinului de maturare a reproductorilor de sturioni asigur un debit de ap de 35 l/min. Instalaia este construit din eav de PVC de 1 3/4II i un robinet. eava este poziionat la un unghi de 45 0 fa de peretele bazinului de parcare. Caracteristici tehnice ale unitilor de maturare corelate funcie de dimensiunile reproductorilor din cadrul speciei

Caracteristici tehnice -mmLungime Lime Inlime Suprafaa platformei deservire/unitate maturare

Specia de genitor

de de

Morun 120 150 kg 2800 1000 900 4000

Nisetru 15-30 kg 2000 610 600 2500

Pstrug 7 12 kg 1500 610 600 2000

Mod de funcionare. Reglaje. La nivelul solului, pe o platform plan se instalez bazinele de maturare. Se monteaz n orificiul lateral al bazinului instalaia de scurgere i se fixeaz furtunul flexibi n inel pentru asigurarea nivelului dorit. Pe marginea superioar a bazinului, opus gurii de evacuare, se fixeaz eava de alimentare n unghi de 45 0 fa de peretele bazinului. 2.1.4. Descriere i realizarea eclozare modulului de parcare a larvelor dup

Modulul de parcare a larvelor (Foto 2 ) este utilizat pentru stocarea acestora pe o perioad de 3 5 zile dup eclozare.

97

Foto 2

Module de parcare a larvelor

din urmtoarele

Componena instalaiei Instalaia se compune subansamble: a) Instalaie de alimentare; b) Bazin pentru parcarea larvelor de sturioni; c) Suport bazine ; g) Instalaie de evacuare. h) Instalaie de aerare Descrierea i realizarea instalaiei

a)Instalaia de alimentare Instalaia de alimentare este destinat alimentrii individuale a incintelor ce sunt dispuse pe dou niveluri. Instalaia de alimentare se realizeaz de la o surs unic cu diametrul de - 75 ce asigur distribuirea apei tehnologice pe dou niveluri prin intermediul a dou inele suprapuse, fiecare bazin fiind alimentat de la un robinet cu reglare fin cu ventil care permite alimentarea optim a acestora. Ptrunderea apei spre robinete se face printr-un inel asigurndu-se uniformitatea curgerii apei prin robinete. Instalaiei de alimentare a bazinelor pentru parcarea larvelor de sturioni este realizat din PVC. S-au utilizat, conductele de 40 pentru robinetele de alimentare a fiecrui bazin, utilizndu-se evi, coturi i T - uri b)Bazinul pentru parcarea larvelor de sturioni Bazinul pentru parcarea larvelor de sturioni este o incint n care se realizeaz parcarea pe o perioad de 3-5 zile a larvelor eclozate. Bazinul este realizat din fibr de sticl. Este o construcie paralelipipedic care are prevzut la captul opus alimentrii un orificiu de scurgere cu diametrul de 50 mm. n acest orificiu se plaseaz o tubulatur ce va asigura preluarea surplusului de ap din incint realiznd n acest fel circulaia apei. Tubul de evacuare este o construcie n form de U confecionat din eav din PP-R i dou coturi lipite la capete decalate cu 90o . Capacitatea acestor incinte este de 10-12 mii larve. c)Suportul incubatoarelor este o construcie din profile metalice cu picioare din eav ptrat. n partea inferioar a acestora sunt sudate piulie prin

98

care trec uruburi care permit reglarea i poziionarea pe vertical a suportului n funcie de nivelurile terenului pe care este montat instalaia. Pe picioarele suportului sunt sudate lonjerone confecionate din eav ptrat pe care sunt montate prin sudur rigle din profil L 2000x430x2,5 pe care sunt dispuse bazinele, pe dou nivele. d) Instalaia de evacuare Asigur evacuarea apei reziduale utilizat n procesul tehnologic. Instalaia de evacuare aferent fiecrui bazin este confecionat din tubulatur din PVC cu 50 i se mbin prin T-uri 50/ 75 la o conduct comun de colectare 75. Conducta comun de colectare este fixat pe cadrul instalaiei prin intermediul unor coliere. e)Instalaia de aerare Se compune dintr-o tubulatur de polipropilen cu 25 cu T-uri i nipluri. Alimentarea cu aer se realizeaz prin furtun flexibil avnd la capt o pies de difuzie a aerului. Reglarea debitului de aer se face prin intermediul unui robinet din PVC. Alimentarea cu aer se realizeaz de la un compresor cu un debit nominal minim de aer de 100l/min. Caracteristici tehnice Lungime Lime nlime Racord alimentare Racord evacuare Volum de ap Mod de funcionare. Reglaje. Modulul se monteaz n hala de incubaie i se racordeaz la o conduct de alimentare de 75. Evacuarea se va efectua ntr-o conduct de scurgere existent n hal. Pe riglele suportului metalic se introduc bazinele pentru parcarea larvelor de sturioni. Nivelul apei din bazine se regleaz prin robinetul evei de alimentare. Debitul de alimentare va fi stabilit la 4 5 l/min. Surplusul de ap este preluat de tubulatura n form de U. Evacuarea complet a bazinelor se va face prin ndeprtarea tubuluturii n form de U prin scoaterea acesteia. 2.1.5. Descriere i realizarea modulului de cretere a puilor de sturioni 2200mm 420mm 170mm 40 50 158 l

Unitatea de cretere a puilor de sturioni este destinat dezvoltrii acestora ncepnd de la faza de larve de 5 zile pn la vrsta de 45 zile.

Descrierea i realizarea instalaiei

99

Instalaia asigur spaiul necesar dezvoltrii acestora, alimentarea cu ap i reglarea nivelului acesteia, evacuarea apei uzate. Componena unitii de cretere. Instalaia se compune din urmtoarele subansamble principale: a) Suport bazin b) Postament bazin c) Bazin de cretere circular 4400 d) Instalaie evacuare i reglare a nivelului apei e) Instalaie de alimentare Descrierea i realizarea unitii de cretere. a)Suportul bazinului este o construcie metalic executat din eav ptrat sau rectangular, avnd o platform situat la un nivel de 0,7 m cu picioare uniform repartizate care s permit o repartiie egal a greutii apei din bazin i a personalului de deservire. Perimetral sunt dispui stlpi i bare din eav care materializeaz un parapet la nlimea de 0,8 m, stabilindu-se astfel un sprijin sigur mpotriva cderii accidentale de pe platform. Diametrul platfrormei este de 5,7 asigurndu-se fa de bazinul circular un spaiu de deservire de aproximativ 0,6 m pentru personalul de lucru. Pe una din laturile suportului (n numr de 14) este realizat o scar de acces avnd deasemeni pe ambele pri baze de susinere. Picioarele suportului au tlpi care permit o aezare orizontal a acestuia prin utilizarea de pene cu dimensiuni variabile care se vor aeza ntre talpa picioarelor i pardoseala halei de cretere a sturionilor. b)Postamentul bazinului este aezat deasupra platformei suportului fiind executat dintr-o structur de dulapi din lemn cu grosimea de 50 mm. n centrul postamentului este practicat un orificiu cu diametrul de 200 mm i servete trecerii elementelor din care este confecionat instalaia de evacuare. Pe structura confecionat din lemn se aeaz plci din polistiren expandat cu grosimea de 20 mm care asigur protecia bazinului circular de eventuale agri, nepri sau deteriorri accidentale din exterior, realizndu-se un sprijin eficient cu caracter elasto-plastic. n zona central a elementelor din polistiren este deasemeni practicat un orificiu. Plcile din scnduri de lemn sunt fixate cu legturi de structur metalic a suportului bazinului asigurndu-se o fixare ferm fr deplasarea acestuia. c)Bazinul de cretere este confecionat din folie de poliplan cu diametrul de 4,4 m. Este bordat cu un perete circular cu nlimea de 0,9 m asamblat prin lipire prin nclzire local i adeziv. Peretele are 14 pri speciale care permit fixarea acestuia la montajul general, sub form de pliuri asamblate prin lipire. Pe suprafaa exterioar la mijlocul peretelui sunt ataate elemente din poliplan lipite, prin care este petrecut o ntritur din poliplan cu limea de 0,15 m perimetrali, lipit la capete, care asigur creterea rezistenei peretelui sub aciunea presiunii apei din bazin.

100

n partea inferioar a peretelui bazinului se afl lipit un alt rnd de elemente de poliplan prin care este petrecut o coard de relon cu toroane cu diametrul de 12 mm care asigur rigiditatea fundului bazinului la mbinarea acestuia cu peretele lateral i prin modificarea lungimii permite o pretensionare a mbinrii prevenind astfel suprasolicitarea n zonele lipite. n centrul bazinului este practicat un orificiu prin care trec elementele instalaiei de evacuare. Pentru montarea bazinului de cretere se utilizeaz 14 elemente metalice de 50 cu lungimea de 1 m, teuri i 14 picioare 40 cu lungimea de 0,9 m sprijinite pe tlpi din polietilen. n braele orizontale ale teurilor se introduc elementele 50 care se petrec prin pliurile existente pe bordura superioar a peretelui vertical. Dup obinerea perimetrului bazinului se monteaz picioarele 40 care se petrec printre peretele vertical, ntritura de poliplan (banda) i coarda de relon. Fixarea elementelor i a picioarelor n teuri se realizeaz prin intermediul unor nituri din mas palstic. Dup nlarea peretelui bazinului se monteaz la fiecare picior talpa din polietilen i se ajusteaz tensiunea din coard, respectiv lungimea acestuia. d)Instalaia de evacuare i reglare a nivelului apei din unitatea de cretere a puilor de sturioni are ca scop evacuarea apei uzate i reglarea nivelului tehnologic necesar al acesteia n bazinul circular. Instalaia este alctuit dintr-un disc central din duramid avnd un orificiu central cu diametrul de 200 mm n care se introduce un alt disc perforat realizat din plexiglas. Perforaiile discului interior asigur scurgerea apei din bazin. n funcie de mrimea puietului sub discul perforat se pot monta site din polietilen, relon sau alam cu dimensiunea ochiului corespunztoare care s nu permit evadarea materialului piscicol. Sub discul central se afl o buc executat din poliamid care este asamblat cu acesta prin intermediul unor uruburi cromate i a unui inel O. uruburile cromate avnd cap nnecat trec prin placa de fund a bazinului din poliplan i astfel se asigur etanarea gurii de scurgere. Pentru suplimentarea etanrii se poate utiliza un adeziv sau mastic pe baz de silicon. Inelul O asigur o etanare de rezisten deosebit pe perimetru ntre buc, discul central i bazinul de poliplan. Tubulatura de evacuare este executat din coturi, tuburi i un teu realizate din PVC avnd diametrul de 110 mm, mbinate cu adeziv de tip Codez. Conectarea la reeaua de canalizare a staiei de cretere a sturionilor se realizeaz printr-o reducie 110 x 50 i tub flexibil. Legtura dintre orificiul de scurgere i conductele de evacuare se realizeaz printr-un manon flexibil fixat cu coliere 110. Sistemul de reglare a nivelului apei n bazinul circular const dintr-o eav cu mner care culiseaz n interiorul unui tub de 110 montat pe captul ascendent al elementului T a instalaiei de golire. n acelai element T dar pe ramura descendent se afl lipit cu adeziv un inel de PVC cu un canal circular n care se fixeaz un inel O care etaneaz deplasarea pe vertical a tubului de reglare a nivelului i a golirii bazinului circular.

101

Tubul de reglaj are ataat un mner n partea superioar cu care poate fi poziionat astfel nct s se poat obine nivelul dorit sau, n caz de scoatere, se poate evacua apa din bazinul de cretere. Nivelul maxim al apei din bazin poate fi de aproximativ 0,8 m. e)Instalaia de alimentare cu ap a unitii de cretere a puilor de sturioni asigur debitul de ap tehnologic cu caracteristicile fizice i chimice optime pentru creterea puietului de sturioni. Instalaia este construit din eav de PVC de 1II , un robinet, coturi, un teu i segmente din eav de 1II perforat, poziionate pe marginea superioar a bazinului circular, mbinate prin tuburi flexibile i fixate cu coliere din mas plastic. Caracteristici tehnice. - Diametrul bazinului circular 4,4 m; - nlimea peretelui vertical 0,9 m; - Volumul optim de ap 12.4 m3; - Volumul maxim de ap 13,8 m3; - Diametrul platformei de deservire 5,7 m; - Diametrul racord alimentare 14; - Diametrul racord evacuare 50. Mod de funcionare. Reglaje. n hala de cretere a sturionilor se asambleaz suportul bazinului. Pe platform se monteaz postamentul confecionat din scndur i polistiren. Se asambleaz bazinul circular confecionat din poliplan i structura de susinere a acestuia. Se monteaz n orificiul central al bazinului instalaia de scurgere i tubulatura de evacuare i reglaj care se conecteaz la instalaia de evacuare a halei. Pe marginea superioar a bazinului se fixeaz cu furtune flexibile i cleme elementele de eav PVC 32 perforate astfel nct acestea s fie orientate spre interiorul bazinului. Se monteaz teul central, coturile i evile de alimentare, robinetul central de reglare a debitului apei i se conecteaz la sursa de ap tehnologic. Unitatea de cretere a puilor de sturioni are posibilitatea de reglare a nivelului apei din bazin prin ridicarea sau coborrea evii de reglare a nivelului cu care se poate evacua n totalitate apa din bazin prin scoaterea complet a tubului. Prin nlocuirea sitei din centrul bazinului se poate asigura protecia puilor de sturioni n funcie de vrsta acestora. Reglarea debitului de ap de alimentare a unitii de cretere se face n funcie de necesiti prin folosirea robinetului central. 2.2. Condiii de calitate i debit ale apei tehnologice utilizate pe etapa de reproducere a speciilor parentale de sturioni 2.2.1. Calitatea apei tehnologice Limite parametrilor fizico-chimici ai apei tehnologice pentru sturioni trebuie s se ncadreze n urmtoarele valori prezentate n tabelul 1i 2. Valorile optime ale parametrilor chimici eseniali pentru producerea

102

i creterea hibrizilor i speciilor parentale de sturioni

Tabelul nr.1

Limite Parametru chimic Minime pH - upH 6,5 6,9 O2 solvit mg/l 6 Sub. Organic mg KMnO4 mg/l 5 CBO5 mg/l 5 Ca2+ - mg/l 30 2+ Mg - mg/l 5 Cl ( cloruri )- mg/l 6 NO3 - mg/l 1 NO2- - mg/l 0 3PO4 - mg/l 0,005 Fe total - mg/l 0 0,2 2SO4 - mg/l 0 - 15 NH3 - mg/l 0 0,001 NH4+ - mg/l 0,05 0,5 Sulfuri totale - mg/l H2S - mg/l CO32+ - mg/l HCO3- - mg/l Alcalinitate ml HCL/l Duritate (0 D) Fenoli - mg/l Rez.fix - mg/l Suspensii - mg/l Clor rezidual mg/l 0 20 - 100 0,2 8 0 100 15 - 25

Optime 7 7,8 7 - 12 35-50 6 90-120 10-40 30 2,5 - 4 0 0,005 0,05 1,5 20 - 40 0,002 0,5 - 1 lips urme 200 - 400 2-4 12 - 18 0,001 0,02 200 - 500 30 - 60

Maxime 8 8,2 14 55-60 7 160 50 40 4 0,1 3 70 - 80 0,01 2 3 urme 0,1 10 - 20 600 6 20 0,02 700 1000 80 0,005

Nivelul optim al temperaturii n perioada de reproducere Tabelul nr.2 Specia Temperatura apei Durata perioadei de interval optime pentru dezvoltare embrionar reproducere - zile 0 - C Acipenser stellatus 15 - 23 5-3

103

Acipenser gueldenstaedti Acipenser ruthenus Huso huso

8 - 15 10 12 7 - 17

7-5 8-7 10 11

2.2.2. Debite n cadrul fiecrui sector de producie debitele vor fi asigurate dup cum urmeaz ( tabel nr. 3): Valori optime ale debitelor pe sectoare de producie Tabelul nr. 3

Sector de producie

Tip de incint Incinte de parcare i prematurare a reproductori Incinte de maturare a reproductori Incinte de incubare a icrelor Incinte de parcare a prelarvelor Incinte de cretere a larvelor

Debitul optim de alimentare al incintei l /min 57,0 76,0 7 10 5, 0 7 15 l/min

Sector reproducere

Sector larve

cretere

3. DESCRIEREA TEHNOLOGIEI
Tehnologia de reproducere artificial i cretere a speciilor parentale de sturioni presupune parcurgerea urmtoarelor faze: captura reproductorilor, evaluarea caracterelor fenotipice; evaluarea strii reproductive; transportul i parcarea; stimularea maturrii celulelor sexuale; colectarea produselor sexuale; fecundarea; incubarea produselor sexuale n incinte special amenajate; parcarea larvelor ambalarea i transportul larvelor creterea larvelor pn la atingerea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor Schema cadru a tehnologiei de obinere a descendenilor de hibrizi i specii parentale de sturioni este prezentat n Figura 1.

Schema fluxului tehnologic de obinere prin reproducere artificial a larvelor de hibrizi i specii parentale de sturioni

104

Figura 1 Captura reproductorilor Pescuit n deriv cu ohane de 60 80 120 mm Cantonarea materialului n incinte de plas Evaluarea preliminar a reproductorilor Transportul reproductorilor
Czi din fibr de stic cu o capacitate de 500 l prevzute cu instalaie de oxigenare a apei

Parcare reproductori Bazine betonate Czi din fibr de sticl

Condiii de parcare Debit de alimentare de 57 - 76 l/min Nivel de oxigen nu mai mic de 5 mg/l

Testarea opional a reproductorilor Evaluarea stadiului de maturare a ovocitelor funcie de poziia veziculei germinative Stimulare hormonal Injectare cu hormon sintetic Femele procedeu chirurgical sau mulgere Prelevare produse l Fecundare Cu sperm proaspt i pstrat la
0

Masculi Prelevare cu seringa prevzut cu tub tygon Semiumed Usact

Fecundare pentru obinerea hibrizilor Icre morun x sperm ceg

Fecundare specii parentale (pentru a evita consangvinizarea) - icrele obinut de la fiecare femel, indiferent de specie vor fi mprite n
Prelucare gamei

Descleiere cu nmol Incubare incubatoare Zug Weiss, incubatoare Eclozare Parcare larve

Ambalare, transport

105

3.1. Capturarea i parcare n zona de pescuit a reproducatorilor Reproductorii de sturioni necesari staiilor de producere i cretere a puilor se vor obine prin pescuit, n perioada migraiei de primvar, la o temperatur a apei Dunrii de 10 - 220C. Captura se va realiza cu ave n deriv, cu latura ochiului de 60 - 100 mm. Avele se vor lansa din barc de ctre o formaie de pescuit compus din 2 pescari, unul pentru deplasarea ambarcaiunii i orientarea ei fa de unealt i cellalt pentru lansarea efectiv a uneltei de la firul apei spre mal. Operaiunea de lansare va avea loc dintr-un punct stabilit din mijlocul fluviului, barca urmnd o traiectorie de arc de parabol, care se apropie de mal pn la scufundarea total a uneltei. Unealta va curge pe o distan de 9001000 m, iar durata de lansare, curgere i scoatere a uneltelor va fi n medie de 4050 minute. Materialul va fi capturat n condiii de pstrare a integritii corporale. Nu se admite utilizarea bureului pentru tragerea lui n barc. Timpul de retenie a materialului n zon din momentul pescuirii pn n momentul transportului va fi de 24 de ore . Materialul capturat nu va fi rnit sau traumatizat. 3.2. Evaluarea caracterelor fenotipice i a strii reproductive Reproductorii de sturioni vor fi examinai imediat dup captur pentru evaluarea caracterelor fenotipice i determinarea sexului. Exemplarele capturate vor fi evaluate somatic i meristic conform datelor de mai jos (tabelul nr. 4): Caracteristici biologice ale lotului de genitorilor participani la reproducre Tabelul nr.4

Specia

Caracteristici Caracteristici meristice Acipenser ruthenus somatici Lt G SD SL SV (cm) (kg) 60 4-5 12-13 57-71 13-16 70 Forma rostului : - triunghiular, ascuit, puin ridicat la extremitate;

sp.br.
15-26

- scurt, triunghiular si rotunjit la vrf; Forma gurii: - transversal dreapt, buza superioar ntreag, cea inferioar ndreptat n jos Forma mustilor: rotunde, franjurate la marginea intern

Specia

Huso huso

Caracteristici somatici Lt G (cm) (kg) 200 150

Caracteristici meristice SD 11-14 SL 41-52 SV 9-12 sp.br.

24

106

Forma gurii: - transversal semilunar, foarte larg, buza superioar continu, cea inferioara are o ntrerupere larg

Forma rostului : - scurt i gros n partea posterioar, ascuin n cea anterioar;

Forma mustilor: musti lungi, turtite lateral, cu capetele franjurate. Caracteristici Caracteristici meristice somatici Lt G SD SL SV (cm) (kg) 60 4-5 8-16 25-44 6-14 70 Forma rostului : - scurt, rotunjit, lat si obtuz; Specia
Acipenser gueldenstaedti

sp.br.
20-24

Forma gurii: - buza superioar despicat la mijloc, iar cea inferioar ntrerupt; Forma mustilor: rotunde i nefranjurate, aezate mai aproape de vrful botului dect de gur

Specia

Forma gurii: - buza superioar ntreag, iar cea inferioar ntrerupt la mijloc; Forma mustilor: rotunde i nefranjurate, aezate mai aproape de vrful botului dect de gur, dar nu ajung la gur

Caracteristici Acipenser stellatus somatici Lt G (cm) (kg) 110 6-9 Forma rostului : - lung, lit i spatulat;

Caracteristici meristice SD 10-15 SL 26-40 SV 9-14 sp.br.

24-26

Lt lungimea total, stabilit de la vrful rostrului la lobul superior; SD scuturi dorsale; SL scuturi laterale; SV scuturi ventrale Examinarea pe teren n scopul determinrii sexului i a gradului de maturitate se va realiza prin palpare intern. Procedeul, va presupune dilatarea porului genital i palparea intern prin perceperea formei, mrimii i structurii gonadei. Gonadele masculilor i ale femelelor se deosebesc uor prin palpare. Ovarul nu este cptuit de membran, are o structur zgrumuroas, se simt ovocitele. Testiculul este acoperit cu o membran subire i la pipit este neted. Exemplarele care ntrunesc calitatea de reproductor din punct de vedere morfologic i al stadiului de maturare vor fi reinute, marcate i apoi pregtite pentru transport. 3.3.Transportul si parcarea reproductorilor Transportul din zona de pescuit la staia de reproducere se va realiza n condiii de pstrare a integritii materialului biologic. n acest sens se vor folosi bazine din fibr de sticl de capaciti diferite, bine etanate, dimensionate funcie de specia de sturion i dotate cu instalaie de aerare. Densitatea de ncrcare n cazul unui bazin de transport bine utilat poate fi de aproximativ 150 kg/m3.

107

mg/l.

Pe timpul transportului nu este permis ca oxigenul s scad sub valoarea de 7

Imediat dup transport materialul va fi parcat pentru recuperare. Bazinele de parcarea a reproductorilor vor fi alimentate la un debit minim de 57 60 l/ min. Indiferent de ct de avansat este stadiul de maturare parcarea reproductorilor este obligatorie naintea efecturii operaiunilor de reproducere. Exemplarele preluate imediat dup transport, chiar dac sunt ntr-un stadiu avansat de maturare nu rspund corespunztor la stimularea hormonal. Este obligatorie o perioad de repaus de minimum 24-36 de ore de la transport. Dup acest interval reproductorii vor fi evaluai sub aspectul strii de maturare a gonadei. Metoda de evaluare att a stadiului de maturare ct i a coeficientului de polaritate presupune colectarea a minimum 5 ovocite din partea posterioar a ovarului prin practicarea unei puncii. Ovocitele colectate se vor fierbe ntre 5 i 10 minute pentru fixarea poziiei nucleului i apoi se vor rci prin aezarea vasului ntr-o incint cu ghea. Pentru a determina poziia nucleului sau vezicii germinative, ovocitul se va seciona exact de-a lungul axei polului animal-vegetal. Dup aceast operaiune poziia nucleului va fi observat i evaluat . Pentru stabilirea coeficientului de polaritate la aceeai prob la care s-a determinat stadiul de maturare se msoar la stereomicroscop distana de la partea superioar a veziculei germinative (A) la polul animal i distana de la polul vegetal la cel animal (B) (Figura. nr. 2). Coeficientul de polaritate se calculeaz folosind formula c =

A unde B

c - coeficient de polarizare A distana de la vezicula germinal la polul animal B - distana de la polul animal la polul vegetal Pentru determinarea cu acuratee a coeficientului de polarizare sunt necesare efectuarea mai multor msurtori stabilindu-se o medie. Valori mici ale coeficientului indic un grad mare de polarizare al ovocitului deci un stadiu IV de maturare avansat. Schema de evaluare a coeficientului de polarizare a ovocitei la sturioni. Fig. nr.2

Dup aceat etap reproductorilor li se va stabili doza i schema de injectare. Pentru nlesnirea injectrii, reproductorii vor fi ulterior parcai

108

individual, n bazine de maturare specifice, asigurate cu un debit de primenire de 76,0 l/ minut. 3.4. Stimularea hormonal. Pentru stimularea se va folosi produsul NERISTIN 5A. Inducerea ovulaiei complete i eliminarea produselor sexuale se va realiza prin administrarea a dou injecii cu preparat hormonal. Intervalul dintre injecia iniial, primar i cea de-a doua, decisiv este de 12 ore. Cantitatea de hormon injectat va depinde strict de greutatea reproductorului, greutate ce trebuie stabilit prin cntrire pentru fiecare exemplar n parte. Pe baza greutii petelui se va calcula doza total ce urmeaz s fie administrat. Prima injecie n mod curent reprezint 20 % din doza total, cea de a doua diferena, respectiv 80%. Dozele de hormoni sintetici vor fi : - 0,2 ml/kg corp la femele; - 0,1 ml/kg corp la masculi Injeciile hormonale se vor administra cu o sering de 1,0-3,0 cm3 cu ace de calibru 23 - 25, lungi de 3,2 cm cu butuc din material plastic transparent. Injectrile trebuie efectuate n regiunile mai dense ale muchiului dorsal la o distan de aproximativ o treime din lungimea corpului pornind de la cap. Acul seringii se va introduce perpendicular fa de corpul petelui n cazul n care acesta depete 1215 kg, i sub un unghi de 450 la exemplarele mai mici. La retragerea acului se va aeza un deget al operatorului pe neptur, timp de cteva secunde pentru a preveni contrapresiunea ce ar expulza soluia injectat. Locul injectrii este apoi uor masat. Injectrile se pot efectua fie prin ridicare parial din ap a reproductorului, fie prin sub ap n momentul cnd stau pasivi pe fundul incintei. Ovulaia se poate produce n 20 pn la 32 de ore dup ce se administreaz primei injecie. 3.5. Colectarea produselor sexuale Colectarea produselor sexuale la femel demareaz n momentul n care aceasta ncepe s elimine o cantitate consistent de icre lipicioase. Procedeul de colectare a ovocitelor va consta n masare abdominal sau aa numitul procedeu de mulgere.n cazul n care femela nu elimin ovocitele va fi incizat, iar ovulele vor putea fi colectate prin masare uoar. La masculi sperma se va colecta fie n momentul cnd femelele ncepe s elimine icre lipiciase fie cu cteva ore nainte de aceasta. Pentru colectarea spermei reproductorul va fi scos din incint, poziionat n decubit dorsal, zona urogenital va fi foarte bine tears de ap. Colectarea spermei se va face cu ajutorul seringilor prevzute cu tuburi tygon de 5 - 6 cm. Tubul se introduce ncet n orificiul genital. La exemplarele la care spermiaia este complet, sperma ncepe s urce n sering n momentul retragerii pistonului. Obligatoriu sperma va fi analizat la microscop n vederea stabilirii viabilitii. Acest lucru se realizeaz cu ajutorul unui microscop (ML-4 tip I.O.R.). Combinaia optic potrivit pentru acest control este ocular 10X cu obiectiv 20X sau 40X. Se folosete de obicei o lam cu caroiaj (Brker). Frotiul se citete extemporaneu

109

conform metodei clasice cunoscute n practica reproducerii artificiale dup ce sperma a fost activat cu apa tehnologic. n cazul n care viabilitatea spermatozoizilor este de doar 50% se va avea n vedere utilizarea la fecunadare a unei cantiti duble de sperm. Dac sperma se colecteaz nainte de obinerea icrelor de la femele aceasta va fi pstrt n cutii Petri la frigider la 40 C. 3.6. Fecundarea Icrele odat colectate de la o singur femel vor fi distribuite echilibrat n recipienii n care urmeaz s se fac fecundarea. n general poriile nu trebuie s fie mai mari de 300 ml. Indiferent de metoda de fecundare folosit lichidul celomic trebuie scurs. Cantitatea de sperm necesar fecundrii unei porii se va stabili plecnd de la considerentul c pentru fecundarea unui singur ovocit sunt suficieni 4x104 spermatozoizi. n mod curent pentru 1 kg de icre se utilizeaz 10 ml de sperm cu un procent de viabilitate de 90%. La procente de viabilitate de 50% cantitatea se va dubla. Pentru a crete variabilitatea se va folosi sperm de la 2 3 masculi. n cazul n care se folosete metoda uscat de fecundare sperma se va distribui uniform, n masa icrelor, dup care se va adaug volumul de ap calculat la cantitatea de icre din recipient. La metoda umed sperma, nainte de a fi distribuit peste cantitatea de icre va fi diluat cu ap ntr-un raport de 1/200 i mai apoi distribuit. Timpul de fecundare va fi de 3 minute. Este necesar ca pe parcursul acestei perioade s se intervin de una, dou ori pentru agitarea uoar a icrelor. Dup scurgerea celor trei minute, timp n care mobilitatea spermatozoizilor scade, i cnd procesul de fecundare se consider ncheiat, amestecul ap-sperm se ndeprteaz cu atenie astfel nct s nu se piard material biologic. Dup fecundare icrele vor fi descleiate. Operaiunea n sine const n ndeprtarea stratului exterior al icrei, bogat n mucoproteine, substane care n contact cu apa devin lipicioase. Pentru descleiere se folosete un singur procedeu, respectiv ocluziunea suprafeei lipicipoase a icrei fecundate cu nmol . Pregtirea materialului de descleiere trebuie s fie realizat nainte ca icrele s fie fecundate. Nmolului va fi recoltat din zone care nu sunt potenial toxice, va fi mixat cu ap pentru nlturarea suspensiilor grosiere, supernatantul va fi nlturat, iar reziduul de nmol va fi filtrat. La folosire, raportul dintre nmol i ap va fi de 1/10. Pentru descleiere se folosesc 2 pn la 4 volume de supernatant la un volum de icre. In aceste condiii descleierea se poate realiza fr probleme ntr-un interval de 30-50 de minute, intervalul depinznd de temperatura apei. La sfritul procesului, icrele i vor pierde ntreaga adezivitate. 3.7. Incubarea icrelor. Incubarea icrelor va ncepe imediat dup descleiere, odat cu trecerea n aparatele de incubaie. Durata perioadei de incubaie este variabil de la o specie la alta, precum i n cadrul aceleai specii, n funcie de temperatura medie zilnic. Pentru sturioni temperatura optim de incubaie este de 13 14 0 C. Durata medie a embriogenezei la aceste valori ale temperaturii apei este n jur de 5 - 7 zile. Aceste temperaturi ofer bune condiii de dezvoltare embrionar i nu nlesnesc dezvoltarea fungilor.

110

Pe durata embriogenezei debitul de alimentarea al incintelor de incubaie se va corela cu necesitile fiziologice ale embrionului n diferitele lui stadii de dezvoltare. Debitul de alimentare al incubatoarelor pn la faza de gastrulaie a icrei va fi reglat de aa manier nct s creeze unui curent de ap care s pun ntr-o micare uoar ntreaga mas de icre (2- 3 l/min). Dup gastrulaie, incubatorul se alimenteaz cu un volum de ap mai mare (5 7 l/min.) Un factor important ce trebuie asigurat i controlat pe perioada de dezvoltare embrionar este consumul de oxigen care pe perioada embriogenezei crete pe msura dezvoltrii embrionului. Pe parcursul embriogenezei nivelul oxigenului n incintele de incubare va fi meninut la valori de minim 5 6 mg/l. Controlul fungilor pe perioada incubaiei se va realiza prin mbierea icrelor, direct n incubatoare, cu verde de malachit 67 ppm timp de 30 de secunde n dou reprize, la 12 i 24 de ore de la fecundare. Pe perioada incubaiei se va stabili supravieuirea n diferite faze ale dezvoltrii embrionare. Procentul de fecundare se va stabili n momentul fazei a II-a a diviziunii (stadiul 5; 4 blastomere) echivalentul unei perioade de 8 - 10 ore de la fecundare. Pentru determinarea procentului de fecundare icrele din incubator se omogenizeaz extrgndu-se un numr de 200 - 300 buci.Icrele astfel colectate sunt meninute n ap tehnologic ntr-o plac Petri cu diametrul de 10 cm. Citirea se efectueaz la o lup sau stereomicroscop nregistrndu-se procentele de icre polispermatice, icre activate, icre normale, icre nefertilizate. Dup eclozare icrele vor fi colectate separat de la fiecare femel hibridat, iar n cazul speciilor paraentale de la fiecare porie. 3.8. Prelevarea i parcarea larvelor Prelevarea larvelor eclozate se realizeaz pe pern de ap n mod continuu n tancuri individuale de colectare. Tancul de colectare este prevzut cu un juvelnic din plas de nytal cu latura ochiului de 0,3 - 0,5 mm pentru concentrarea larvelor. Larvele concentrate sunt prelevate cu ajutorul unor palete i introduse n incinte speciale de parcare. Operaiunea se efectueaz continuu pn la sfritul eclozrii. Numrarea larvelor se efectueaz direct n momentul colectrii. Densitatea de populare va fi de 40 60 ex/l. Curentul de ap n bazinele de parcare a larvelor va fi reglat de 5 l/min. Larvele vor rmne n aceste incinte o perioad de 3-5 zile. 3.9. Ambalarea i transportul larvelor de sturioni Materialul sturionicol n stadiu de larv se transport n pungi de

polietilen standard de 40 l, n care raportul ntre volumul de ap i volumul de oxigen este de 1/1. Densitatea larvelor la o pung standard se stabilete funcie de durata transportului i temperatura aerului, conform tabelului de mai jos: Densitatea larvelor de sturioni la punga standard

111

Tabelul nr.5 Temperatura

0

Masa medie G/ex 10 ore

Durata transportului 25 ore 50 ore

20

0,01 0,02 0,03

15000 7500 5000 15000 7500 5000

15000 7500 5000 11000 5500 3700

7000 4600 2300 5000 2500 1700

25

0,01 0,02 0,03

Transportul larvelor n condiii optime se realizeaz cu maini izoterme dotate cu uniti de condiionare a temperaturii mediului incintei. n lipsa acestora transportul se poate realiza cu mijloace de transport obinuite cu respectarea urmtoarelor condiii: capacitatea mainii s fie corelat cu numrul pungilor ce urmeaz s fie transportate; incinta de transport s fie capitonat cu un numr suficient de materiale ( cartoane sau pturi ) care s mpiedice spargerea sacilor; s fie prevzut cu o rezerv de oxigen de minim 50l, rezerv dotat cu manometru i furtun i o rezerv de saci de 10% din numrul sacilor care se transport . n condiiile n care transportul se realizeaz la o temperatur a aerului de 250C, se impune asigurarea a 0,5 kg fulgi de ghea pentru fiecare sac transportat la fiecare 100 Km parcuri. Gheaa va fi introdus n pungi de plastic. 3.10. Creterea larvelor pn la atingerea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor Schema cadru a tehnologiei de cretere a descendenilor speciilor parentale de sturioni este prezentat n Figura 2.

3.10.1. Norma de populare

Larvele obinute de la fiecare femel sunt populate separat n incintele de cretere. se stabilete lundu-se n Norma de populare este de 1500ex/m2 i considerare pierderile tehnologice pe etapa de cretere care n general sunt estimate la 30%.

112

3.10.2. Pregtirea larvelor.

modulelor

de cretere

i popularea

Pregtirea incintelor de cretere se realizez cu 48 de ore nainte de populare. Acestea sunt riguros igenizate pe toat suprafaa cu soluie de Germostop 10%, soluie ce este meninut timp de o or, dup care este ndeprtat prin cltiri repetate. nlimea coloanei de ap n incintele de cretere a larvelor se regleaz la 20 cm. Apa tehnologic din incinte va fi evaluat din punct de vedere fizico-chimic prin determinarea temperaturii, a pH ului, oxigenului. Debitul de alimentare n incintele de prematurare se stabilete ntre 5 -7 l/min. Lansarea larvelor n incintele de cretere se realizeaz dup egalizarea temperaturii apei din incinta de transport. Nivelul oxigenului dizolvat se va menine la un nivel minim de 8mg/l. Imediat dup populare materialul sturionicol va fi intens monitorizat pentru a se observa modul n care acesta se adapteaz la noile condiii de mediu. Concomitent cu monitorizarea materialului biologic se monitorizeaz la interval de trei ore parametrii fizico-chimici, respectiv temperatura i oxigenul.

3.10.3. Hrnirea
Creterea larvelor pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor se realizeaz pe seama unei scheme de hrnire ce presupune administrarea de hran vie n primele 78 zile de cretere i mai apoi pe o diete mixt format din hran natural i furaj. Hrnirea exclusiv cu hran natural se bazeaz pe folosirea, fie simpl, fie combinat, a unor organisme planctonice i bentonice. Sunt folosite cladocerele Daphnia sp., Moina sp. i Bosmina sp. filopodul Artemia salina i oligochetul Tubifex sp., ambele categorii de organisme colectate din mediul natural sau obinute n culturi. Combinaiile de hran natural practicate sunt urmtoarele: 90 % Tubifex sp. i 10 % zooplancton 50% Tubifex sp. i 50% zooplancton dulcicol sau salin

Ambele tipuri de hran (plancton i bentos) nainte de administrate sunt supuse unui tratament profilactic cu o soluie 1% de albastru de metilen n cazul oligocetului Tubifex sp. i cu o soluie de 23 mg/l permanganat de potasiu n cazul zooplanctonului dulcicol. Raia de hran se stabilete zilnic funcie de greutatea lotului. Raia administrat n 24 de ore se calculeaz n procent de 100% din greutatea lotului n ziua respectiv. Fracii egale din aceast raie se distribuie la interval de 3 ore, att n

113

perioada zilei, ct i n perioada nopii.

Hrnirea larvelor folosind hran natural vie n diet mixt cu furaj va presupune aplicarea urmtoarei scheme de hrnire ce va permite trecerea ealonat la o hrnire bazat exclusiv de furaj : - primele 5 zile: 5% zooplancton, 85% bentos ,10% furaj; - urmtoarele 5 zile: 5% zooplancton, 60%, bentos, 35% furaj; - urmtoarele 5 zile: 5% zooplancton, 45%, bentos, 50 % furaj; - urmtoarele 5 zile: 5% zooplancton, 10%, bentos, 85 % furaj; - perioada urmtoare hrnirea va fi asigurat numai de furaj. Odat cu trecerea exclusiv pe furaj, raia zilnic va fi de stabilit funcie de consum, procentul variind ntre 4-20 % din greutatea lotului. Se recomand folosirea furajului din gama Trouvit cu un coninut proteic de 45-55 %. Cantitatea de furaj administrat, precum i granulaia acestuia, va ine seama n principal de talia sturionului i de temperatur apei tehnologice. Procentul de hran la puii de sturioni se va stabili la 20% din greutatea total a lotului/zi pentru exemplarele cu masa corporal de 0,5g, n condiiile n care temperatura apei tehnologice este de 170C. Acest procent va fi redus odat cu creterea temperaturii. n condiiile n care lotul are o mas corporal de 2 5 g/ex. raia va fi stabilit la 4 4,5% din greutatea lotului. Intervalul de timp ntre mese va fi de 4 6 ore. Procentul de hran i modularea raiei este prezentat n tabelul de mai jos Procentul de hran i modularea raiei
Tabelul nr. 6

Mas pete (g) 2 3 10

Diam. (mm ) 0,5 0,7 0,7 0,9 1 - 1,5

16

Temperatura C 17 20 4 4,5 4 4,5 3,6 4,5

25 4 4 4

Trecerea de la un tip de furaj la altul i de la o granulaie la alta se va realiza progresiv, cu mare atenie, respectnd urmtoarea succesiune: 75% regim curent 25 % regim nou; 50 % regim curent - 50 % regim nou; 25 % regim curent-75% regim nou; 100% regim nou. Dac apar probleme de comportament sau se nregistreaz pierderi de greutate se renun la schimbare, se revine la forma iniial i mai apoi procedeul este reluat progresiv. n condiiile n care lotul va devini heterogen va fi absolut necesar s fie regrupat pe categorii de greutate, situaie n care raia va fi ajustat funcie de biomas, iar granulaia furajului administrat va fi corelat cu dimensiunea materialului biologic. Sporurile de cretere ce trebuie obinute pe etapele de dezvoltare pn la conturarea caracterelor fenotipice asemntoare adulilor sunt urmtoarele: Variant Spor de cretere - g

114

Specii parentale de sturioni

10 zile

20 zile 2 1,6 1,5 0,8

30 zile 5,2 4 3 1,5 8 5 3 2

40 zile

Huso huso - morun 0,9 Acipenser gueldenstaedti - 0,5 nisetru Acipenser stellatus - pstrug 0,3 Acipenser ruthenus - ceg 0,15

3.10.4. Condiii de ntreinere pe perioada creterii. In incintele de cretere trebuie s se respecte o igien strict. Igenizarea se va realiza nainte de fiecare mas i va consta n ndeprtarea dejeciilor i a eventualelor resturi de furaj rmase de la masa precedent. Cel puin odat la 24 de ore se vor igeniza pereii incintei prin frecarea acestora cu un burete mbibat ntr-o soluie de permanganat de potasiu cu o concentraie de 23 mg/l. Se mai poate utiliza albastru de metil n concentraie de 1%. 4. Imbolnviri i tratament

4.1. Boli parazitare

Paraziii susceptibili s se dezvolte n cresctoriile sturionicole unde creterea se realizeaz n bazine de plastic sau beton sunt cei cu ciclu direct, toi paraziii cu ciclu complex de dezvoltare sunt exclui. Infestarea se poate produce doar n condiiile n care unitatea utilizeaz ca surs de alimentare o ap de surafa sau cnd se folosesc instrumente ce au intrat n contact cu material biologic infestat i acestea nu au fost dezinfectate. Paraziii externi ce pot penetra n sistem n condiiile mai sus prezentate sunt din categoria protozooarelor (Trichodina sp, Trichodinella sp. i Tripartiella sp. , Chilodonella sp. i Costia natrix ), monogenilor (Gyrodactylus sp. ) i a crustaceilor (Argulus foliaceus ). Parazitoza cu gradul cel mai mare de periculozitate este cea produs de crustaceul Argulus foliace. Parazitul afecteaz n mod special puietul de 1,5 - 5g . Parazitul se fixeaz n zona inimii, iar neptura lui este letal. Este suficient ca ntr-o incint de cretere s existe 5 10 exemplare de Argulus foliaceus ca mortalitatea s se ridice la 60%. Toi paraziii semnalai necesit un tratament. Paraziii externi sunt sensibili la clorura de sodiu, formol, verde de malachit, sulfat de cupru, cloramina T, permanganat de potasiu, ns sturionii, cu excepia clorurii de sodiu nu tolereaz nici una din aceste substane. Doza de clorur de sodiu recomandat n combaterea parazitozelor care nu produce un efect negativ asupra materialului sturionicol este de 5kg /m3. Timpul de expunere este de 60 minute. Pe durata tratamentului alimentarea cu ap a incintei va fi oprit. Se va verifica permanent ca oxigenul dizolvat n ap s nu scad sub 6 mg/l. Scderea oxigenului dizolvat sub aceast valoare impune oxigenarea apei pn la nivelul de saturaie impus de temperatur. Oxigenarea apei se poate realiza injectnd oxigen tehnic prin intermediul unui furtun de difuzie ngrelat pe fundul incintei .

115

Tratament se va aplica numai dup ce a fost testat n prealabil pe un lot mic. Dac rspunsul la test este pozitiv tratamentul se va practica asupra ntregului efectiv. Pe durata tratamentului lotul va fi supravegheat de personal calificat. Incintele n care se va efectua tratamentul n prealabil vor fi atent igenizate.

mbolnvirile bacteriene apar ca efect al lipsei de igien a incintelor i a prezenei hranei neconsumate. Aceste dou elemente favorizeaz dezvoltarea bacteriilor care pot deveni o real problem n aceast perioad. Cele mai des acioneaz Myxobacter sp. i Flexibacter sp. Yrsinia ruckeri, Flavobacterium . Exemplarele afectate de mixobacterii prezint nottoarele pectorale distruse, acestea putnd s dispar. Mortalitile pot fi de 100% din efectiv dac nu se intervine cu tratament Yersiniosa provocat de Yrsinia ruckeri se manifest prin enterit mai mult sau mai puin hemoragic, asociat cu zone congestionate n jurul gurii, regiunii uro genitale i o congestionare a tubului digestiv. Mortalitile pot atinge 100% din efectiv. Flavobacterium produce leziuni la nivelul branhiilor, leziuni cutanate i ale nottoarelor. n cazul mbolnvirilor bacteriene, funcie de agentul etiologic depistat se poate aplica una din schemele de tratament prezentate n tabelul de mai jos:
Scheme de tratemant n cazul bolilor bacteriene

4.2. Boli bacteriene

Tabelul nr.7 Agentul Produsul Modul de tratare Doza i timpul de patogen expunere Mixobacter oxitetraciclin Imbiere, repetat 4 8 ppm timp de 1 h sp. * zilnic timp de 10 zile i Produse Imbiere, repetat 4 8 ppm timp de 1 h Flexibacter sp furanice zilnic timp de 10 zile Yrsinia Tetraciclin Administrare n furaj 60 80 mg/kg ruckeri* timp de 10 zile greutate corporal * antibioticul va fi stabilit n baza antibiogramei
4.3. Boli provocate de ageni chimici Chimismul apei are o influen hotrtoare asupra dezvoltrii materialului sturionicol. Acionnd direct sau indirect asupra acestuia substanele organice sau anorganice solvite n ap aflate n cantiti corespunztoare necesitilor biologice i asigur o dezvoltare normal. Orice abatere a anumitor substane de la un optim poate fi ireversibil pentru materialul sturionicol. Exist foarte multe substane care solvite n ap determin n anumite condiii diferite mbolnviri. Principalii ageni chimici provocatori de mbolnviri sunt: gazele solvite n ap ( n primul rnd oxigenul ), pH-ul , amoniacul, nitriii.

116

Starea de morbiditate produs de gazele solvite n ap poate avea la origine suprasaturarea gazoas sau coninutul redus de oxigen.

Suprasaturarea gazoas este n principal rezultatul creterii coninutului de azot sau oxigen n ap. Suprasaturarea apei n gaze solvite n cazul aplicrii acestei tehnologii se poate produce ca urmare a nclzirii brusce cu peste 10 0 C a apei tehnologice i a utilizrii n exces a aerului comprimat sau a oxigenului tehnic. Expunerea materialului sturionicol timp de 48 de ore la o suprasaturare de 103% a apei n azot poate provoca embolia gazoas (infiltrarea bulelor de gaz n circuitul sanguin). Suprasaturarea apei n oxigen poate fi tolerat de sturioni pn la 120%. mbolnvirea, n prima faz, se poate diagnostica numai prin examinarea la microscop a foielor branhiale i evidenierea embolilor gazoi. Simptomatologic materialul sturionicol exteriorizeaz o stare apatic. n vederea prevenirii efectelor suprasaturrii gazoase a apei tehnologice se recomand meninerea constant a temperaturii apei pe perioada creterii, controlul periodic a nivelului de saturare gazoas n cazul utilizrii aerului comprimat sau a oxigenului tehnic.

4.3.1. Suprasaturarea gazoas

4.3.2. Coninutul redus de oxigen

Cerinele sturionilor fa de coninutul de oxigen din ap variaz funcie de specie, vrst, starea fiziologic, starea de sntate. n cadrul acestui sistem tehnologic de cretere, n care se urmrete obinerea de material sturionicol cu ct mai bune performane, cantitatea de oxigen din ap constituie un factor limitativ n atingerea acestora. Sturionii pot tolera valori ale oxigenului dizolvat n ap de 3,9 mg/l ns acestea induc n primul rnd inapetena, cu consecine asupra ritmului de cretere. De aceea este contraindicat ca n cadrul acestui tip de tehnologiei de cretere coninutul oxigenului dizolvat n ap s fie inferior saturaie de 90%. Nivelul de saturaie trebuie meninut constant la aceast valoare ndeosebi n condiiile n care temperatura apei crete i greutatea petelui pe unitatea de volum este mai mare. Sturionii expui deficitului de oxigen n primul rnd nu se mai hrnesc, sunt dispersai n toat masa incintei, noat aproape de suprafaa apei, sunt apatici, lipsii de reactivitate. Meninerea pe o perioad mai ndelungat a acestor specii n condiii de deficit de oxigen dizolvat n ap duce la scderea performanelor tehnologice transpuse prin ncetinirea ritmului de cretere, slab asimilare a hranei, sensibilitate accentuat la agresiuni produse n special de ageni bacteriologici. Scderea brusc a coninutului de oxigen din ap are ca rezultat asfixia materialului sturionicol.

4.3.3. Stri patologice provocate de pH-ul necorespunztor al apei

Sturionii au o dezvoltare optim n condiiile unei ape neutre ( pH 7 upH

117

) sau uor alcaline ( pH 7,8 8 upH ). Apele acide nu sunt tolerate de aceste specii. Caracterul acid sau bazic al apei exprimat prin uniti de pH acioneaz att direct ct i indirect asupra materialului sturionicol. Actiune direct a pH-ului din domeniul acid ( pH 5,5 upH )are ca efect creterea frecvenei micrilor respiratorii, ceea ce denot c oxigenul este parial folosit, secreia de mucus este mrit, tegumentul se nroete n zona ventral, branhiile pe margini devin brune. Petii noat lent i mor n poziii normale. n cazul unui pH alcalin ( pH 8,5 ), branhiile au marginile albe, se franjureaz, apare necroza branhial. nttoarele se franjureaz, tegumentul devine mat. Aciunea indirect a pH-ului const n implicarea pe care o are acest parametru asupra fenomenelor toxice din ap. O valoare sczut a pH-ului nlesnete creterea toxicitii nitriilor i metalelor din ap, o valoare ridicat a pHului crete toxicitatea amoniacului.

4.3.4.Stri patologice provoacate de substanele azotate din

Substanele azotate din ap cu efect patogen pentru sturioni sunt amoniacul nedisociat i nitriii. Nitraii sunt tolerai de sturioni pn la nivelul de 20 30 mg/l cu condiia ca oxigenul s fie meninut permanent la nivel de saturaie 100%. Dac nu este respectat aceast condiie nitraii pierd un atom de oxigen i trec n nitrii genernd la rndul lor stri patologice. Amoniacul nedisociat i nitriii sunt bine tolerai de sturioni la valori de 0,002 mg/l. Pentru sturioni concentraia maxim admis de amoniac nedisociat n ap este de 0,01mg/l. Peste aceast valoare amoniacul nedisociat devine toxic producnd intoxicaii exogene i endogene. Indiferent de tipul de intoxicaie efectul amoniacului asupra sturionilor se manifest prin reducerea ritmului de cretere, inflamarea ntregului aparat branhial, hipersecreie de mucus, hemoragii branhiale i tegumentare. Ficatul i rinichiul se atrofiaz ntr-un procent de 25 38% din masa iniial a organelor respective. n cazul nitriilor concentaia maxim admis este de 0,1 mg/l. Acumularea excesiv a nitriilor n organismul sturionilor are ca efect inapetena, ntrzieri n cretere , scderea rezistenei la mbolnviri. 5. CONDIII PRIVIND APLICAREA TEHNOLOGIEI Se vor respecta condiiile tehnice i se vor aplica lucrrile specifice etapelor tehnologice prezentate ; n condiiile n care nu sunt afectai negativ indicatorii tehnologici i preul de producie se admit modificrile n aplicarea tehnologiei pentru micorarea consumurilor de materii prime i energie, creterea productivitii muncii. 6. LISTA CU PRINCIPALELE MATERII PRIME, MATERIALE NECESARE PENTRU REALIZAREA TEHNOLOGIEI

ap

118

n afara materialului biologic reproductiv care se va folosi la realizarea descendenei pentru aplicarea tehnologiei se vor utiliza i urmtoarele principale materii prime produse de o serie de uniti: Poz. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Denumire Hormon sintetic - Nerestin Ou de Artemia Tubifex Furaj Germostop Albastru de metilen Permanganat de potasiu Productor/distribuitor Federaia Rus Argent S.U.A. Asociaii familiare cu activitate de acvaristic S.C. Romavet S.R.L Bucureti Depozite farmaceutice Depozite farmaceutice Depozite farmaceutice

7. REGULI PENTRU VERIFICAREA TEHNOLOGIEI Sistemul tehnologic i tehnologia de reproducere artificial i cretere a sturionilor se va verifica n baza urmtoarei metodologii:

Probe i verificri iniiale a instalaiei de alimentare a apei

Verificarea modului de funcionare a instalaiilor de pompare (presiune, vibraii, etaneizare,protecie electric), nu se admit vibraii n postamentul de fixare, nu se admit pierderi de ap la etaneizrii, nu se admite lipsa postamentului de protecie, nu se admite valori mai mari ale presiunii fa de valoarea de referin stabilit iniial; Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare, nu se admit pierderi de ap la mbinri; Verificarea poziiei vanelor pe traseul de trecere a apei, nu se admit robinei nchii; Verificarea parametrilor chimici ai apei, nu se admite depirea valorii acestora fa de valorile prevzute prin Ord. 161/2006 - Ape de suprafa

Probe i verificri iniiale a modulelor specifice de reproducere i cretere

Verificarea etaneitii mbinrilor la instalaia de alimentare i evacuare a modulelor de reproducere i de cretere, nu se admit pierderi de ap; Verificarea asigurrii meninerii nivelului constant de 0,4 m i respectiv 0,9 m n cele dou tipuri de czi, nu se admit nivele sub aceste valori;

Verificri de lot

A. Verificarea materialului sturionicol

-

Verificarea strii sanitare a materialului sturionicol, nu se admit exemplare lovite sau afectate de boli parazitare sau infecioase; Verificare caractereleor somatice i meristice, nu se admit exemplare care sunt n afara parametrilor precizai n tabelul nr. 4;

n momentul achiziiei

119

Verificarea densitii materialului n pungile standard de transport; nu se admite depirea normelor i condiiilor de transport prezentate; Verificarea etaneitii pungilor de transport; nu se admit pungile care pierd ap sau oxigen; Verificri n momentul populrii materialului piscicol Verificarea valorii oxigenului dizolvat n ap din incinta de cretere; nu se admit valori mai mici de 7 mg/l Verificarea temperaturii apei bazinului naintea deversrii materialului sturionicol; nu se admite deversarea direct a materialului n condiiile n care sunt nregistrate diferene ntre temperatura apei din punga de transport i apa bazinului; deversarea se va realiza dup o prealabil acomodare a materialului sturionicol la temperatura mediului acvatic; Verificarea reactivitii materialului sturionicol n momentul populrii; nu se admite ca la populare materialului sturionicol s prezinte micri anormale, sau s intre n decubit lateral;

C. Verificarea periodic a evoluiei materialului biologic.

- Verificarea zilnic, pe ntreaga perioad de cretere a masei medii i lungimii totale a materialului piscicol; numrul minim de exemplare verificate - 15 ; - Verificarea permanent, pe ntreaga perioad de cretere, a strii sanitare a materialului piscicol;

D. Verificarea materialului piscicol n perioada de cretere

Verificarea Verificarea Verificarea Verificarea Verificarea Verificarea masei medii - g / ex; sporul individual de cretere g ; sporului total de cretere g; ratei zilnice a creterii - g/zi, ratei specifice de cretere - SGR - % zi; procentul de supravieuire - %

8. METODE DE VERIFICARE

Aparatura Pentru verificarea parametrilor chimici ai apei :

Oxigenometru; pH- metru; Termometru; Photometru Balan analitic; Ihtiometru; Balan tehnic. Microscop cu putere de rezoluie de la cca 30 X la cca 1000X ( tip. ML 4M)

Pentru verificri indicilor tehnologici ai materialului piscicol: Pentru verificarea strii sanitare a materialului piscicol:

120

Evaluarea valorilor parametrilor chimici ai apei tehnologice se efectueaz conform Ord. 161/2006: -oxigenul dizolvat se determin cu oxigenometru sau prin metoda Winkler, bazat pe oxidarea de ctre oxigenul molecular din ap, n mediu puternic alcalin, a hidroxidului de mangan bivalent la hidroxid de mangan trivalent, rezultatul fiind exprimat n mg/l; -pH-ul apei se determin n upH, utiliznd pH-metru cu afiare digital; -substana organic, clorurile (Cl-), azotaii (NO3-), azotiii (NO2-), amoniacul liber (NH3), ionul de amoniu (NH4+), alcalinitatea, dioxidul de carbon se apreciaz fotometric cu ajutorul reactivilor test

Metode Metode chimice de determinare a calitii apei tehnologice

Starea sanitar a materialului piscicol se evalueaz prin : - Examenul macroscopic pentru stabilirea diagnisticului acest examen este doar orientativ. Se examineaz cu ochiul liber sau cu lupa suprafaa corporal, ochii, branhiile, cavitatea intern. Prin acest examen pot fi decelate zonele modificate ca : necroze, chiti, hipo sau hipersecreii de mucus, hipertrofii sau atrofii ale organelor, modificri de culoare, parazii macroscopici. - Examenul microscopic al materialului sturionicol are valoare de diagnostic. Probele se recolteaz direct din petele viu i constau din : - raclate, superficiale i profunde de pe suprafaa sau zona de examinat, de obicei branhii, tegument, mucoas intestinal ; raclatul se aeaz pe lam i se adaug o pictur de ap distilat peste care se preseaz lamela examinndu-se imediat la microscop ; - preparate strivite se execut din orice esut i const n strivirea unei mici poriuni din acesta ntre lam i lamel, astfel nct pelicula format s devin translucid i ct mai subire. Estimarea rezultatelor se efectueaz la nivel de cmp microscopic prin identificarea agenii etiologici.

Metode de determinare a strii sanitare a materialului piscicol

Metode de determinare a indicilor tehnologici la materialul piscicol

-

Mas medie - g / ex se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin a trei eantioane de cte 100 de indivizi, din valorile obinute calculndu-se valoarea medie ; Spor individual de cretere g se determin gravimetric i const n cntrirea a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi n momentul populrii, determinndu-se masa iniial, i a cel puin trei eantioane de cte 15 indivizi la finele perioadei de cretere, determinndu-se masa final, se aplic formula : (Wf Wi)/ N, unde - Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului; N numrul de exemplare Rata zilnic a creterii - g/zi, se determin cu formula : (Wf Wi)/ T

121

unde- Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] Rata specific de cretere - SGR - % zi se determin cu formula: SGR = (lnWf-lnWi)*100/T [%/zi], unde: Wf, Wi masa medie final i iniial a lotului T durata ciclului de cretere [zile] Procent de supravieuire - % - se determin cu formula: Nf/Ni x 100 unde : Nf i Ni numrul de exemplare iniial i final 9. MSURI DE TEHNICA SECURITII MUNCII

La punerea n funciune i exploatare a sistemului tehnologic

Asamblarea utilajelor, punerea n funciune i efectuarea probelor se va efectua numai de personalul calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea acestora ; Utilajele se vor da n exploatare numai dup verificarea existenei i a corectei strngeri a tuturor organelor de asamblare demontabile; Deservirea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit care s cunoasc bine construcia, tehnologia de lucru i funcionarea sistemului; Intreinerea i repararea sistemului se va face numai de personal calificat i instruit n acest scop. Se interzice persoanelor care deservesc sistemul s remedieze defeciunile acestuia. naintea oricrei intervenii ( desfacere pentru curire, nlocuirea unor piese defecte, ntreinere sau reparaii) se va opri obligatoriu alimentarea cu ap a sistemului; Echipamentele tehnice acionate electric, precum i echipamentele electrice, trebuie s corespund prevederilor din Normele generale de protecia muncii i din NSSM pentru utilizarea energiei electrice n medii normale; nainte de punerea n funciune a echipamentelor tehnice acionate electric lucrtorii sunt obligai s verifice vizual, imposibilitatea atingerii pieselor care se afl normal sub tensiune i legtura la centura de mpmntare; Deplasarea de la un loc de munc la altul a echipamentelor tehnice mobile acionate electric, trebuie efectuat numai dup ntreruperea alimentrii cu curent electric; Toate echipamentele tehnice electrice sau acionate electric trebuie verificate la recepie, dup fiecare reparare sau modificare tehnic, pentru a se testa eficacitatea msurilor de protecie mpotriva pericolului de electrocutare; Operaiile de prelucrare a evilor (tiere, ndoire, fasonare etc.) vor fi executate pe bancul de lucru din ateliere. Se interzice executarea operaiilor de prelucrare a evilor pe schele de montaj, cu excepia ajustrii racordurilor ntre conducte, n vederea definitivrii poziiei de montaj; Prelucrarea evilor i a prefabricatelor din materiale plastice se va efectua cu scule, dispozitive i utilaje n bun stare de funcionare i se vor respecta Normele specifice de securitate a muncii pentru prelucrarea cauciucului sintetic i a produselor macromoleculare;

122

Conductele vor fi fixate dup caz pe elemente de susinere ca: stelaje consolidate, console, supori etc. care s permit meninerea acestor conducte n poziia de pozare i vor fi consolidate cu brri demontabile sau alte tipuri de elemente de susinere.

La aplicarea tehnologiei de reproducere artificial i cretere

-

La repartizarea personalului de lucru se va ine seama de aptitudini i de nivelul de cunotine profesionale ; Se va evita lucrul n asalt asigurndu-se necesarul de materii prime ; Personalul de deservire trebuie s poarte echipament de protecie : salopet, cizme de cauciuc ; Se va evita contactul epidermei cu substaner folosite la igenizarea incintelor de cretere ; La efectuarea analizelor chimice uzuale, determinarea oxigenului, pH ului se vor respecta Normele specifice de protecia muncii pentru laboratoarele de analize fizico chimice i mecanice Extras 36/1999

123

Schema fluxului tehnologiei de cretere a puilor de sturioni Figura 2

Pregtirea sistemului de cretere Igenizare incinte de cretere

Monitorizarea parametrilor chimici ai apei tehnologice

Populare material sturionicol Populare individual a larvelor de hibrizi i specii parentale Debit de alimentare 5l/min n momentul populrii larvelor, 7 15l/min dup depunerea dopului pigmentar Hrnire pui Funcie de t0 apei; Raia zilnic conform, stabilit funcie de masa corporal a lotului

Creterea pui

Igenizarea incintelor Zilnic dup fiecare mas administrat

Monitorizarea ritmului de cretere Cntriri sptmnale; Selecie i regruparea materialului biologic pe categorii de greutate; Administrarea de furaj adecvat fiecrei grupe de greutate

Monitorizarea strii sanitare Instituirea msurilor de tratament la apariiei primelor simptome de mbolnvire Monitorizarea factorilor fizici i chimici ai apei tehnologice

Recoltare material sturionicol

124

125