BIOFIZICA MEMBRANELOR

Organizarea materiei vii

 

Elementele constitutive ale materiei vii sunt acelea i cu cele care alc tuiesc materia nevie Gradul de structurare (ordine) a materiei este caracteristica esen ial care deosebe te sistemele materiale vii de cele nevii Elementele primelor trei perioade din sistemul periodic, cu atomi mici, reprezint aproximativ 98% din materia vie, dintre care H, C, O, N reprezint 96%; acestea pot fi metale (Ca, K, Na, Mg etc) sau metaloizi (C, Cl, S etc) Elemente aflate n cantit i mai mici i al c ror rol nu este pe deplin elucidat: Cd, Cr, As, Se, Pd, Mo, numite oligoelemente

Biofizica molecular iofizica

     

Caracterizarea componen ilor macromoleculari ai materiei vii (biomolecule) Stabilirea mecanismul de interac iune n cadrul proceselor celulare Presupune metode de separare i purificare determinarea structurii chimice (tertiare si cuaternare) Diversitate foarte mare: 1012 proteine i 1010 acizi nucleici mare: Prin izolare se pierd aspectele func ionale legate de aspectele coexisten a n mediul biologic Avantaj l au tehnicile biofizice de studiu in vivo

Apa componentul majoritar



Organismul uman cuprinde ~ 70% ap i 30% componen i de alt natur Apa total este repartizat :
 

~33% extracelular (plasma si sp. Interstitial); ~66% intracelular.

Apa total se rennoie te la fiecare 16 zile. Organismul prelucreaz zilnic aproximativ 2,5 l de ap ingestie eliminare (excre ie, transpira ie, respira ie)

For e intermoleculare
Leg tura (interac iunea) 1. Covalent Exemplu leg turi care determin structura primar , leg turi bisulfidrice: -SS-COOCa2+ -COONa+ClNa+ (H2O)n Interac iuni ale dipolilor permanen i sau indu i C=O----H-NO-H----N O-H----O= N-H----N N-H----O2 Formeaz bistratul lipidic i grup rile nepolare ale proteinelor Energia interac iunii (kJ/mol) 146 - 680 40 - 400 4 40 4 40 8 25 25 25 15 10 4 8,5

2. Ionic 3. Ion dipol 4. Dipol-dipol 5. De hidrogen

6. Hidrofobe

Interac iuni dipol dipol

Structura membranei
FOSFOLIPIDELE constituent structural principal
1 Qm2 5106 molecule lipidice, ntreaga membran a unei celule animale aproximativ 109 molecule lipidice

Formarea stratului dublu fosfolipidic este un proces rapid i spontan in ap = proces de autoasamblare

miceliu

bistrat lipidic

For e ce contribuie la stabilizarea stabilizar structurilor membranare

 

interac iile hidrofobe for ele de atrac ie Van der Waals: Waals:
 

dintre lan urile de acizi gra i dintre grup rile polare ale fosfolipidelor

pun ile de H dintre grup rile polare ale ile fosfolipidelor i moleculele de ap Bistratul lipidic = cristal lichid
structur mezomorf

Modelul mozaic fluid fluid

Singer i Nicolson (1972)

Structura membranei
Proteinele rol func ional (mediator al schimburilor de substan ,
energie i informa ie dintre exterior i mediul intracelular)


Proteine extrinseci pot fi deplasate din membrane prin metode blnde cu solven i hipotoni, solu ii saline concentrate sau cationi bivalen i.
 

exoplasmatice: receptorii membranari, proteine cu rol n imunitate citoplasmatice: spectrina, ankirina ancorare la citoschelet




Proteine intrinseci:
nu pot fi extrase din membran dect cu ajutorul detergen ilor, care dezasambleaz complet membrana celular traverseaz membrana celular o dat (glicoforina) sau de mai multe ori (proteinele transportoare, pompe ionice, enzime etc)

Proteine interac ioneaz cu fosfolipidele membranare prin leg turi ioneaz hidrofobe sau tip dipol-dipol. dipolMajoritatea proteinelor care traverseaz membrana prezint gruparea NH2 terminal la exterior, iar COOH terminal este situat spre citoplasm .

Dinamica componentelor membranelor biologice

flexie flip-flop (rar)

difuzie lateral (frecvent)

rota ie

Celul de oarece Timp

Dinamica lipidelor

Celul uman

Dinamica proteinelor

Model de membrana

Func iile membranelor biologice

 

compartimenteaz materia vie ( (bariere selective); ); intervin n desf urarea proceselor metabolice (interac iunile lipoproteice sunt esen iale pentru func ia enzimelor din membran ), dou din procesele majore de conversie a energiei n natur se petrec n membran : fotosinteza i fosforilarea oxidativ ; controleaz fluxul de informa ie dintre celule i mediul nconjur tor, con in receptori specifici pentru stimuli exteriori i legarea hormonilor de membran . Genereaz semnale chimice i electrice; sufer modific ri func ionale adaptative (induc ia enzimelor din reticulul endoplasmic sub ac iunea medicamentelor); au rol n procesele imunitare, n reac iile de ap rare ale celulelor , i organismului.

MEMBRANELE = BARIERE ENTROPICE



Scopul = asigurarea delimit rii dintre dezordinea entropic a mediului i ordinea antientropic specific proceselor metabolice Trei nivele de separare majore:


membrane bazale epiteliale asigur prima bariera dintre mediul extern i mediul intern (intersti ial) al organismului, membrane plasmatice bariera de ordin II, separ spa iul intersti ial de cel intracelular, membrane intracitoplasmatice (endomembranele) i ale organitelor celulare bariera de ordinul III, asigur segregarea func ional metabolic n cadrul celulei. Membrana nuclear este ultima barier care izoleaz materialul genetic (cel mai nalt grad de structurare) de mediul extern

Fenomene de transport membranar

Fenomene de microtransfer (molecul cu molecul ): I. Transport pasiv conform gradientului de concentra ie
 

Difuziune simpl Difuziune facilitat

 

prin transportori prin proteine-canal proteine-

II. Transport activ cu consum energetic

 

Transport activ primar prin pompe ionice Transport activ secundar:

 

cotransport (simport) contratransport (antiport)

Fenomene de macrotransfer (num r mare de molecule simultan): I. Fagocitoz transport de material solid II. Pinocitoz transport de material lichid
  

Endocitoz Exocitoz Transcitoza

Transportul pasiv

Difuzia simpl
In sensul gradientului electrochimic Legea Fick:

dm !  P S p (c dt
Membrana = barier energetic pentru molecule polare

Difuzie simpl

Canalele ionice
 

 

Sunt proteine integrale care traverseaz bistratul lipidic i au n centrul lor un canal trecere de diametru de ordinul angstromilor. Din punct de vedere termodinamic, canalele ionice sunt disipatori de energie liber , stochat sub form de gradient de concentra ie i de stochat poten ial electric. sunt bidirec ionale se caracerizeaz prin conductan a ionic i permeabilitatea specific
 

neselective cu conductan fix au permeabilitate diferit func ie de diametrul particulei selective cu conductan variabil aceste canale prezint dou conforma ii posibile caracterizate prin dou st ri diferite de conductan : conforma ia de repaus (nchis ), sau ntr-o conforma ie de activitate (deschis ). ntr-

Se clasific dup natura agentului care le activeaz :  Canalele comandate electric sunt implicate n propagarea poten ialului de ac iune n celulele excitabile (axoni, fibre musculare),  Canale comandate chimic sunt implicate n transmiterea intercelular a excita iei precum i n func ionarea unor celule receptoare specializate. Eficacitatea transportului prin canale ionice este foarte mare, printr-un singur canal putnd trece 106-108 ioni pe secund .

Canal de Na+ comandat electric

Difuzia facilitat
   

modificare de conforma ie de tip flip-flop asigur trecerea particulelor polare particulelor prin stratul hidrofob. for a care determin transportul este tot gradientul de concentra ie se desf oar cu viteze mult mai mici comparativ cu difuzia prin canale ionice (ex. transportorul de glucoz din membrana eritrocitar ~ 300 molecule/sec Specificitate ridicat pentru molecula transportat (selec ie 3D)

Difuzie facilitat

Transportul activ

Pompa de Na+- K+
peste 1/3 din ATP-ul sintetizat ntr-un organism animal n repaus este hidrolizat de (Na+,K+)-ATP-az . peste 1/3 din intensitatea MB asigur gradientului electrochimic dintre spa iul intra i extra celular.

+  3Na i+  2K e  ATPi p 3Na e  2K i+  ADPi  Pi

Simportul - Antiportul
Simport: - transportul glucozei la nivelul celulelor intestinale - transportul cuplat al apei cu Na+ n esuturile epiteliale (i.e. nefron, vezica biliar , intestin) Antiport - transportul de Ca2+ la nivelul sarcolemei fibrei musculare. Ca2+ este scos din celul prin cuplaj cu intrarea pasiv a Na+ prin transportori specifici

Fenomene de macrotransport
Pinocitoza
 

independent de receptori = endocitoz n faz lichid sau constitutiv mediat de receptori = clatrinic

Exocitoza
Vezicule secretoare din corp. Golgi fuzioneaz cu MP i vars con inutul n exterior Se observ c interiorul veziculei se dispune la exteriorul MP

Membrana biologic transportorul de ap