INSTITUTO TECNOLOGICO DE TIJUANA (ITT)

Subdireccin Acadmica Departamento de Ciencias Bsicas

CARRERA: INGENIERIA QUMICA

Anlisis Instrumental
No. Serie: 6IQ4

TEMA: Turbidimetria y Nefelometra

Nombre del maestro: M.C. Marisela Martnez Quiroz Nombre del alumno: Ornelas Snchez Rodrigo Yael Nmero de control: 10211366 Fecha de entrega: 13 de Febrero del 2012

UNIDAD 2

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Introduccin
Primeramente definiremos lo que se quiere exponer en este trabajo de investigacin. Como se sabe se hablara acerca de la turbidimetria y de la nefelometra, a continuacion se darn una explicaciones breves en que consisten estas dos tcnicas, donde posteriormente se expandirn estos conceptos. Turbidimetria: Mide la disminucin de la luz transmitida a travs de una suspensin de partculas utilizando para ello un

espectrofotmetro (detector en la misma direccin del haz de luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya una buena disminucin de la luz transmitida) ej. determinacin de protenas totales en suero, LCR u orina (haciendo que las protenas precipiten con TCA o cido sulfosaliclico).1 La turbidimetra mide la reduccin de la transmisin de luz debido a partculas de una suspensin y cuantifica la luz residual transmitida.3 Nefelometra: Mide la luz dispersada en direccin distinta a la luz emitida (generalmente con ngulos que oscilan entre 15 y 90). Utiliza como instrumento el nefelmetro (en el que el detector se ubica con un ngulo que oscila entre 15 y 90, por ejemplo a 90. Se suele utilizar para concentraciones ms diluidas).1 De la nefelometra se obtienen mejores resultados, porque determina concentraciones de pocos ppm, con una precisin de 1 al 5%.2 Ambas tcnicas se pueden emplear de manera masiva, por ejemplo en la determinacin y control en el tratamiento de aguas potables, as como en las plantas de tratamiento de aguas residuales.
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Diferencia con la turbidimetra, consiste en la dispersin de luz, si es extensa, es apropiado aplicar la turbidimetra, en cambio si es mnima es apropiada la nefelometra. La nefelometra se basa en la medicin de radiacin dispersa, en cambio la turbidimetra en la medicin de la intensidad de un haz disminuido. 2

Turbidimetria
Bien, ahora iniciaremos con la turbidimetria de manera ms concreta. Es la medida del grado de turbiedad de una suspensin y se puede conocer, debido a un sistema ptico llamado espectrofometro, que este mide las variaciones de un rayo luminoso, dichas variaciones son provocadas por la absorbencia. 5 La turbidimetra mide la absorbancia, que en soluciones diluidas, esta presenta una relacin proporcional al peso seco, donde no importa el tamao de la partcula u organismo.3 Se emplea generalmente en microbiologa, cuya finalidad es cuantificar a la poblacin bacteriana que se tiene en estudio, esto se hace por medio de la determinacin de la biomasa de una muestra, la difusin de la luz por las bacterias del medio se descuida. Por esta razn, se le considera esta medida como una medida de absorbencia. Posteriormente se descuida la intensidad de la luz reflexionada y difundida, aqu podemos decir que la absorbencia es directamente proporcional a la masa bacteriana. Para determinar la concentracin del analito, se aplica la siguiente relacin:

Donde T es la transmitancia, It es la intensidad de la radiacin de la fuente transmitida, Io es la intensidad de la radiacin de la fuente transmitida por un blanco. Esta relacin es similar a la proporcionada por la ley de Beer:
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C es la concentracin es expresada en unidades de masa por unidad de volumen y la concentracin es de las partculas que dispersan la radiacin, b es la longitud del camino ptico y k es la constante que est en funcin de diversos factores como el tamao, longitud de onda y otros mas.4

Turbidimetro?
Las medidas turbidimetricas se pueden realizar con colormetros o con espectrofotmetros comunes. Aunque se pueden obtener mediante instrumentos pticos sencillos, como lo puede ser el turbidimetro 4, a continuacin se presenta un diagrama de un turbidimetro de laboratorio de ngulo dual.

1. Lmpara VIS/NIR. 2. Modulo ptico primario con filtro especial. 3. Ventana de la cmara de muestras. 4. Cmara de muestras con placa giratoria y bao de agua. 5. ptica de luz difusa frontal. 6. Fotodiodos de difusin frontal a 11 grados. 7. Fotodiodo de haz directo. 8. pticas de difusin lateral. 9. Fotodiodos de difusin lateral a 90 grados.
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A continuacin se presenta una ligera idea de cmo es su funcionamiento, este inicia con una botella o cubeta contenedora de la muestra a medir se colora en la cmara de medicin (4), rotada y luego muestreada 250 veces. La luz de una lmpara de tungsteno (1) se define y filtra de manera precisa por el mdulo ptico primario (2), pasa a travs de una ventana (2), y hacia la cmara de muestras (3), donde la luz se difumina por la turbidez y la opacidad fina en la muestra. La luz que se difumina de manera frontal se encuentra definida de manera precisa por la ptica de difusin frontal (5), (3) y es detectada por ocho fotodiodos de silicio hermticamente sellados a un ngulo de 11 (6). La luz que no se difumina es detectada por el fotodiodo de haz directo (7). La luz que se difumina de manera lateral se encuentra definida de manera precisa por la ptica de difusin lateral (8), y es detectada por el fotodiodo de difusin lateral (9) a un ngulo de 90. Las fotocorrientes resultantes son muestreadas, amplificadas, convertidas, analizadas y registradas de manera precisa por el instrumento.6

Nefelometra
Es un mtodo que se emplea en la medicin de una radiacin dispersa en un ngulo de 90 grados con respecto a la fuente. Para determinar la concentracin del analito en este mtodo, se aplica la siguiente relacin:

Donde tenemos que Ks es una constante emprica del sistema, Io es la intensidad de la fuente de radiacin y C es la concentracin, pero en porcentaje.

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El valor de la constante esta en funcin de una curva de calibracin, empleando una serie de patrones de concentracin conocidos.4 La nefelometra constituye un mtodo ms exacto para la medida de la opacidad, es la adicin de luz en ngulos rectos con el haz incidente, permitiendo una mayor sensibilidad con concentraciones menores de partculas suspendidas. Se considera este mtodo que es ms complejo que el mtodo de los tubos de Brown.7 La dispersin solo es afectada la direccin de la propagacin, porque la intensidad de la radiacin es la misma en cualquier direccin. La intensidad depende de: el nmero de partculas suspendidas, su tamao, su forma, los ndices refractivos de la partcula y del medio dispersante, y la longitud de onda de la radiacin dispersada. La relacin entre variables y es ms factible un tratamiento terico, pero debido a su complejidad raras veces se aplica a problemas analticos especficos.8 Este mtodo es prcticamente emprico y solamente se toman en cuenta tres factores: 1. La concentracin: Mayor sea el nmero de partculas, mayor es la dispersin. 2. Tamao de la partcula: Factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla, concentracin de los reactivos, duracin del estado de reposo y la fuerza inica. 3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si estn coloreadas, se debe escoger una porcin del espectro electromagntico en la que la absorcin del medio se reduzca al mnimo. 8

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Nefelmetro?
Un instrumento para medir partculas suspendidas en un lquido, es el nefelmetro. Algunos nefelmetros empleados en las pruebas de calidad de agua, se les llama generalmente turbidimetros. Un nefelmetro emplea una fotocelda puesta en un ngulo recto con respecto a la fuente de luz. Cuanta ms luz sea reflejada en una determinada densidad de partculas depende de las propiedades de las partculas como su forma, color y reflectividad. Estableciendo una correlacin de trabajo entre turbidez y slidos suspendidos. En pocas palabras, un turbidimetricas nefelometrico siempre monitorea la luz reflejada por las partculas y no a la disminucin a causa de la turbidez.4 A continuacin se presenta un esquema de como es un nefelmetro y como funciona. El nefelmetro muestra un dispositivo de

iluminacin (10) y un dispositivo detector (19). Por medio del dispositivo de iluminacin (10) se ilumina una muestra a analizar que se encuentra en una cmara (16), siendo detectada la luz parasita procedente de la muestra por el dispositivo detector (19). Entre la cmara de muestras (16) y el dispositivo detector (19) se encuentra un elemento de ensombrecimiento central (17), que se ha dispuesto en un plano conjugado respecto a la fuente luminosa (11) del dispositivo de iluminacin (10). El dispositivo detector (10) muestra adems otro elemento de ensombrecimiento (20), que

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se encuentra en un plano conjugado respecto al diafragma de apertura de salida (15) del dispositivo de iluminacin (10). A travs del elemento de

ensombrecimiento central (17) se absorbe luz directa de la muestra a analizar, mientras que el otro elemento de ensombrecimiento (20) absorbe luz espuria que, sin atravesar la muestra, sale del diafragma de apertura de salida (15) del dispositivo de iluminacin (10) e incide, pasando por la muestra, en el dispositivo de lentes de entrada (18) del dispositivo detector (19).9

Qu podemos tomar en cuenta para seleccionar al mejor mtodo?

La eleccin entre ambos mtodos, esta en funcin de dos factores: La intensidad de la radiacin que se transmite o que es dispersada con la intensidad de la radiacin que procede de la fuente. Cuando se tiene una concentracin de partculas que dispersan presentes en la solucin es pequea, It sera similar a Io. Por lo tanto lo ideal sera utilizar la nefelometra, esto es, debido a que la muestra presenta un numero relativamente pequeo de partculas. Solo se puede aplicar la turbidimetria, cuando se tienen grandes concentraciones de partculas dispersantes en la solucin.4

Tamao de las partculas dispersantes. En la nefelometra, la intensidad de la radiacin es dispersada a 90o es mayor, si las partculas son lo bastante pequeas como para que se aprecie una dispersin Rayleigh. Pero, si las partculas son grandes, entonces la intensidad de la dispersin disminuir

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en esas condiciones. En la turbidimetria, la seal consiste en la variacin de la radiacin transmitida, por cuyo caso el tamao no importa. 1

Aplicaciones
A pesar de que los trminos turbidimetra y nefelometra suelen restringirse a aquellas aplicaciones en las que se mide la concentracin de partculas en suspensin existen tambin otros tipos de aplicaciones basados en las medidas de dispersin de la luz. Entre ellas podemos citar la determinacin de la forma y tamao de las partculas as como la de los pesos, moleculares (especialmente en el caso de polmeros)4, asi mismo en la determinacin de los iones sulfato y para determinar concentraciones especificas, de colonias de bacterias y como la medicin de protenas empleando el mtodo de la dispersin luminosa molecular. 1 La nefelometra se ha empleado para el anlisis y la identificacin de fibrongeno, trombota, triglicridos, complejos antgeno anticuerpo y otras sustancias.7 Por ejemplo para conocer el nivel de la inmunoglobulina en la sangre, se realiza un examen para buscar las protenas IgM, IgG e IgA.10

Fuentes
1. http://es.scribd.com/doc/56689304/PRACTICA-1-NEFELOMETRIA 2. http://www.mitecnologico.com/iia/Main/TurbidimetriaYNefelometria 3. http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm 4. http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y-Nefelometria 5. http://www.multilingualarchive.com/ma/frwiki/es/Turbidim%C3%A9trie 6. http://www.optek.com/es/Schematic_Dual_Lab_Turbidimeter.asp 7. http://foro.deoaxaca.mx/index.php?topic=7157.0

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8. http://es.wikipedia.org/wiki/Nefelometr%C3%ADa 9. http://patentados.com/invento/nefelometro.html 10. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003545.htm

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