Analiza microbiologica a apei

Conditii de potabilitate a apei

Pentru a fi potabila apa trebuie sa indeplineasca anumite conditii:

Organoleptice (gust, miros) Fizice (temperatura, turbiditate, culoare, pH, radioactivitate, conductibilitate electrica) Chimice (substante organice, anorganice, subst.ce dau duritatea apei saruri de Ca si Mg) Bacteriologice

Conditii bacteriologice

Flora proprie = germeni psihrofili (criofili) germeni care se dezv.la 22C (saprofiti) Flora mezofila germeni care se dezv. la 37C (germeni de provenienta umana si animala)

Indicatori bacteriologici de contaminare a apei

1) Nr. total de germ. la 37C / 1 ml apa 2) Nr. probabil de germeni colli 3) Nr. probabil de Streptococi intestinali (enterococi de grup D) saprofiti ai omului 4) Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia colli, anti-Salmonella thyphi) 5) Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii) 6) Det. germ. care se dezv. La 22C Analizele curente si obligatorii: 1), 2) si 3)

Metode de recoltare

Apa se recolteaza in recipiente de sticla sterilizate la 180C Daca se recolteaza apa de robinet se sterilizeaza flaconul cu tiosulfat care neutraliz. Cl din apa Transp.flacoanelor: in conditii izoterme la +4C Analiza microbiologica se face la max.6-8 ore din momentul recoltarii probelor.

Determinarea NTG la 37C

din proba de apa se fac dilutii zecimale; din fiecare dilutie se insamanteaza cate 1 ml pe o placa Petri peste care turnam geloza simpla; se fac miscari de rotatie in plan orizontal pt.ca geloza sa inglobeze apa insamantata. se incubeaza la 37C, 48 ore NTG 37C / ml = n x d , n= nr.colonii N d= inversul dilutiei N= nr.placi

Nr. probabil de germeni colli

a)

2 teste : a) de prezumtie b) de confirmare intr-o eprubeta cu un mediu lichid cu lauryl sulfat + lactoza in care se aseaza un tub de fermentatie Durham cu gura in jos (rol: capteaza gazul care se form.prin fermentarea lactozei) Se incub. la 37C, 48 ore (test de imbogatire)

Reactie (+) virarea culorii in galben

Nr. probabil de germeni colli

Confirmarea prezentei germ.colli: insamantare cu ansa din tubul Durham (+) la testul anterior pe un mediu solid Levine specific pt.colli Se incub. la 37C, 24 ore Confirmare colonii de germ.colli in picaturi de fuxina (rosii-violet in centru, cu irizatii spre periferie) ! Caracteristic pt.germ.colli: aparitia unui reflex verde-metalic la supraf.mediului
b)

Nr. probabil de enterococi (Streptococi fecali)

a)

Germ.saprofiti ai intestinului Se gasesc in nr. mult mai mic decat colli (10%, restul colliformi) Rezista mai mult in apa decat colli riscul transmiterii enterovirusurilor Evidentiati prin 2 teste: de prezumtie: se insamanteaza apa pe bulion cu azida de sodiu; se incub. la 37C, 48 ore

Reactie (+) aparitia unui sediment alb care la agitare nu se descompune

Nr. probabil de enterococi (Streptococi fecali)

b)

Testul de confirmare: strapungem cu ansa sedimentul format, insamantare pe acelasi mediu de cultura + indicator de culoare = brom-crezol (violet); se incub. la 44,5C, 24 ore

Confirmare virarea culorii de la violet la galben si aparitia de sediment

Analize complementare
- in epidemii hidrice sau cand se alege o noua sursa de apa

Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia colli, anti-Salmonella thyphi)

Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii) Det. germ. care se dezv. la 22C

Determinarea bacteriofagilor enterici

Rezista in apa mai mult decat bacteriile Se pot evidentia chiar daca germ.respectiv a disparut Proba de apa se insamanteaza cu ansa dintro cultura de Esherichia colli, apoi pe geloza simpla, se incub. la 37C, 24 ore Daca in proba de apa exista bacteriofagi zone de liza a coloniilor (liza clara completa, liza incompleta, liza in plaja) apa nepotabila !

Determinarea germ.sulfitoreducatori (Clostridii)

Anaerobi sporulati cu dubla provenienta: naturala de pe sol si intestinala. Prezenta lor in apa contaminare f.veche Se foloseste un mediu solid cu sulfit de Na si FeCl2 care se toarna in eprubete; se insamanteaza cate 1 ml apa, se incub.la 37C Reactie (+) aparitia de colonii negre (se formeaza FeS) Confirmare: insamantare cu ansa din coloniile negre pe un mediu cu lapte; se incub.la 37C in conditii de anaerobioza formarea unui cheag = prezenta Cl.perfringens in apa

Determinarea germ.la 22C

Se gasesc in mod natural in apa, determinarea florei saprofite arata gradul de poluare: cand apa are germ.supraadaugati flora saprofita e inhibata. Normal flora supraadaugata: endogena = 3:1 Se insamant.pe geloza simpla, incub.la 22C

NTG 22C / ml = n x d N

Norme sanitare privind valoarea indicatorilor microbiologici in apa potabila

NTG / ml Apa robinet d(+) Apa robinet d(-) Apa de fantana Colliformi/ 100 ml 0 Sulfitoreducatori 0

< 20

< 100

< 300

100