Coloraia Gram este o coloraie compus folosit n microbiologie pentru examenul microscopic al bacteriilor, care a permis clasificarea acestora

n funcie de afinitatea tinctorial a peretelui bacterian. Metoda a fost inventat de bacteriologul danez Hans Christian Gram, n anul 1884. Pricipiu: Colorantul bazic (violet de genian ) patrunde in celula bacterian fixat in prealabil i reacioneaza cu componenii acizi din citoplasm care, dupa tratarea cu soluia Lugol (iodur de potasiu), formeaz un complex stabil intracelular. Acest complex insolubil este specific bacteriilor Gram pozitive ce nu se decoloreaz cu alcool aceton. Bacteriile Gram negative n care nu se formeaza acest complex stabil se decoloreaza i trebuie recolorate cu alt colorant de contrast (fuxina). Solutii necesare: Violet de gentiana, Soluie Lugol (rol de mordansant) , Alcool-aceton, Fuxin diluat 1/10. Tehnica: Se acopera frotiul cu soluie violet de genian i se ine 1 minut. Se indeparteaza colorantul, se spal cu ap si se adaug soluia Lugol 1 minut. Se indeparteaza soluia Lugol fr a spla si se decoloreaza cu alcool aceton prin miscari ale lamei pana cand soluia devine incolora (depinde de grosimea preparatului dar in general 20 secunde). Se spal cu apa i se adaug fuxina 1 minut Spalare si uscare pe hartie filtru. Rezultat: bacteriile Gram pozitive apar colorate in albastru-violet iar cele Gram negative se coloreaz in roz pana la rosu. Cu termenul "Gram variabile" sunt desemnate bacteriile cu perete de tip Gram pozitiv care n anumite condiii se coloreaz precum cele Gram negative, cauzele acestui comportament nefiind inca bine cunoscute.