ANALIZA BIOCHIMIC A SALIVEI 1.

Identificarea srurilor minerale din compoziia salivei

Principiul metodei Ionii srurilor minerale din saliv formeaz precipitate cu reactivi specifici fiecrui ion. Astfel ionii de clor dau cu azotatul de argint un precipitat alb de clorur de argint; ionii de fosfat dau cu molibdatul de amoniu un precipitat galben de fosfomolibdat de amoniu; ionul tiocianat d cu clorura feric tiocianatul feric de culoare roie. Reactivi Soluie azotat de argint 5% Acid azotic concentrat Soluie de molibdat de amoniu 5% Soluie de clorur feric 3% Tehnica de lucru Se pregtesc trei eprubete n care se pipeteaz cte 1 ml de saliv. n prima eprubet se adaug cteva picturi de soluie de azotat de argint 5%. Apariia unui precipitat alb indic prezena ionilor de clorur din saliv. n cea de-a doua eprubet se adaug 1 ml de acid azotic concentrat i 2 ml de soluie de molibdat de amoniu 5%. Se amestec uor coninutul eprubetei. Apariia unui precipitat de culoare galben datorat formrii fosfomolibdatului de amoniu indic prezena ionului fosfat n saliv. n cea de-a treia eprubet se adaug 1 - 2 picturi de soluie de clorur feric 3%. Apariia unei coloraii roii indic prezena ionului tiocianat n saliva analizat.
2.

Identificarea mucinelor din compoziia salivei

Mucinele sunt glicoproteine care au ca grupare prostetic compui din clasa glucidelor ce deriv de la aminozaharuri. Principiul metodei Mucinele dau reacia biuretului pozitiv, reacie caracteristic legturilor peptidice. Reacia biuretului se bazeaz pe formarea unor compui de tip chelalic ntre legtura peptidic i ionul de Cu+, n mediu alcalin, cu formarea unui complex colorat violet sau albastru. Reactivi Reactiv biuret Tehnica de lucru ntr-o eprubet se pipeteaz 1 ml de saliv la care se adaug 1 ml de ap distilat. Se omogenizeaz coninutul eprubetei i se adaug 2 ml de reactiv biuret. La limita de separare dintre cele dou lichide apare un inel colorat n violet ce indic prezena mucinelor n saliva analizat.

3.

Identificarea amilazei din compoziia salivei

Amilaza salivar este o enzim care face parte din clasa hidrolazelor i acioneaz asupra polizaharidelor pe care le degradeaz pn la stadiul de dextrine. Principiul metodei Hidroliza amidonului de ctre amilaza salivar conduce la formarea maltozei care va reduce hidroxidul de cupru la suboxid de cupru de culoare rou crmiziu. Reactivi Soluie de amidon 1% Reactiv Fehling (I i II) Tehnica de lucru ntr-o eprubet se pipeteaz 0,5 ml de saliv i 1 ml de soluie de amidon 1%. Se omogenizeaz prin agitare coninutul eprubetei i se incubeaz la 37C timp de 30 de minute (amilaza va hidroliza amidonul pn la maltoz). Se adaug 3 - 4 picturi de reactiv Fehling i se aduce la fierbere. Datorit proprietii reductoare a maltozei asupra reactivului Fehling va aprea un precipitat rou crmiziu de suboxid de cupru.