UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE ALIMENTOS

TEMA

: STAPHYLOCOCCUS AUREUS

CURSO

: Microbiologa de los Alimentos

PROFESOR

Universidad Nacional del Callao

INTEGRANTE

Placido Oscco Richard H.

CODIGO

070057-B

Callao 25 de febrero del, 2012

Staphylococcus Aureus
1. Caractersticas El nombre del gnero Staphylococcus se basa en su imagen microscpica; las clulas se ordenan como uvas en un racimo (staphyle); esta ordenacin se debe a la divisin celular irregular en distintos planos. Staphylococcus es anaerbico facultativo, solo forma citocromos en condiciones aerbicas. Staphylococcus aureus es patgeno (a travs de toxinas y exoenzimas; piogeno). Otras cepas provocan intoxicaciones de alimentos ya que al desarrollarse sobre alimentos no enfriados excreta una enterotoxina1. Son bacterias muy resistente al calor y la desecacin que pueden crecer en medios con elevada salinidad (7.5% de ClNa). Estas propiedades son importantes para explicar algunos aspectos epidemiolgicos de esta bacteria2. La presencia o ausencia de actividad catalasa es una prueba sencilla que se utiliza para subdividirlas en varios gneros. Las catalasas son enzimas que catabolizan perxido de hidrgeno en agua y oxgeno gaseoso. Cuando se pone en contacto una gota de solucin de perxido de hidrgeno con una colonia productora de catalasa, aparecen burbujas a medida que se forma oxgeno gaseoso3 1.1. Morfologa El S. aureus es un coco inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de dimetro, que se divide en tres planos para formar grupos de clulas irregulares semejantes a racimos de uvas. En extendidos de pus los cocos aparecen solos, en pares, en racimos o en cadenas cortas. Los racimos
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Microbiologa General, Hans G. Schlegel; edicin sptima; editorial Omega S.A,Barcelona,1997 Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 3 Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa.

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irregulares son caractersticos de extendidos tomados de cultivos que se desarrollan en medios slidos, mientras que en otros cultivos son frecuentes las formas de diplococos y en cadenas cortas. Unas pocas cepas producen una capsula o capa de baba que incrementa la virulencia del microorganismo. El S. aureus es un microorganismo grampositivo pero las clulas viejas y los microorganismos fagocitados se tienen como gramnegativos4. 1.2. Fisiologa y Estructura 1.2.1. Pared Celular Como la mayora de las bacterias gram positivas, los componentes fundamentales de la pared celular son el peptidoglicano y los cidos teicoicos. El peptidoglicano representa la mitad del peso de la pared celular y proporciona forma y estabilidad al microorganismo; adems, tiene actividad de tipo endotoxina, por lo que interviene de forma importante en la patogenia de la infeccin5. El peptdoglucano est formado por capas de cadenas de glucanos construidas con 10 o 12 subunidades alternantes de cido N-acetilmurmico y N-acetilglucosamina. Las cadenas laterales de oligopptidos estn unidas a las subunidades de cido N-acetilmurmico y se entrecruzan por medio de puentes peptdicos. Por ejemplo, las cadenas de glucanos de S. aureus se entrecruzan mediante puentes de pentaglicina unidos a la L-lisina en una cadena oligopeptdica y a la D-alanina en la cadena adyacente. El peptidoglicano posee una actividad de tipo endotoxina, ya que estimula la reduccin de pirgenos endgenos, la activacin del complemento, la formacin de interleucina-1 por parte de los monocitos y la agregacin de los leucocitos PMN (un proceso que origina la formacin de abscesos)6.

Estructura de la pared celular estafiloccica

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Brock. Biologa de los Microorganismos. Octava edicin. Editorial Prentice Hall.

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Los cidos teicoicos representan el 40% del peso de la pared.Son polmeros compuestos por ribitol y N-acetil-glucosamina (polisacrido A) y son especficos de especie; estn unidos covalentemente al peptidoglucano de la pared o ligados a los lpidos de la membrana celular. Los cidos teicoicos median la unin de staphylococcus aureus a las superficies mucosas mediante uniones especficas a la fibronectina. La mayora de las cepas de staphylococcus aureus(pero no las de estafilococos coagulosa negativa) estn recubierto uniformemente por una protena, denominada protena A, la cual utiliza para una prueba especfica de aglutinacin con anticuerpos monoclonales en la identificacin de staphylococcus aureus7. Se han identificado once serotipos capsulares de S. aureus, y casi todas las infecciones se asocian a los serotipos 5 y 7. Los serotipos 1 y 2 se asocian a cpsulas de gran grosor y colonias de aspecto mucoide. La cpsula protege a las bacterias al inhibir la fagocitosis de estos microorganismos por los leucocitos polimorfonucleares (PMN)8. Otra protena asociada a la pared celular es la coagulasa, que puede encontrase ligada a la clula (coagulasa ligada o clumpingfactor) o de forma libre en el medio (coagulasa libre). La coagulasa ligada es capaz de convertir directamente, sin intervencin de factores plasmticos, fibringeno en fibrina produciendo la coagulacin del plasma. La coagulasa libre requiere unirse a la protrombina para activarse y catalizar la conversin del fibringeno en fibrina. La detencin de la protena A, el clumping factor, o la coagulasa libre es fundamental en la identificacin de staphylococcus aureus. Otras protenas de superficie median la adherencia a los tejidos del husped mediante uniones especficas al colgeno, elastina y fibronectina.9 1.2.2. Membrana Citoplasmtica La membrana citoplasmtica est formada por un complejo de protenas, lpidos e hidratos de carbono10. Acta de barrera osmtica para la clula y proporciona una sujecin para la biosntesis celular y las enzimas respiratorias11. 1.2.3. Capsula Algunas cepas de staphylococcus aureus estn recubiertas por una capa de polisacridos, denominada slime o capsula mucoide, que confiere, en ciertas condiciones, una mayor capacidad de adherencia, as como un aumento del efecto antifagocitico12. 2. Clasificacin
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Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa. 9 Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 10 Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 11 Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa. 12 Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009

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2.1. Antgeno o estructura antgena La estructura antignica de S. aureus es compleja y mal conocida. En la pared celular se han demostrado cerca de 30antgenos, y los ms importantes son: 1. El polisacrido A, especfico de especie, constituido por cidos teicoicos, polmeros de fosfato de ribitol, que estn unidos al peptidoglicano por enlaces covalentes. Son antignicos e inducen la aparicin de anticuerpos, y se ha demostrado un aumento de anticuerpos antirrubitol en los casos de endocarditis estafiloccica. En S. epidermidis, los cidos teicoicos son polmeros de fosfato glicerol y en S. saprophyticus, polmeros de fosfato de ribitol. Los bacterifagos se fijan en esta capa. 2. La protena A, especfica de especie, se encuentra en la pared celular y puede liberarse en el medio. Presenta la propiedad de unirse a la extremidad Fc de las IgG normales y a la extremidad F (ab)2 de las IgG especficas, as como de activar el complemento. 3. Existen, adems, en la pared celular un nmero indeterminado de protenas responsables de la tipo especificidad. 4. Tambin se han aislado cierto nmero de cepas mucoides c a p s u l a d a s , e s p e c i a l m e n t e e n l o s a n i m a l e s , c u y a composicin e importancia no se conocen13.

3. Caracterstica del crecimiento 3.1. Cultivo y aislamiento Staphylococcus aureus crece bien en medio de cultivos no selectivos, como agar sangre, agar chocolate o agar infusin cerebro- corazn. Tambin los medios lquidos utilizados para hemocultivos permiten recuperar fcilmente este microorganismo. En el cultivo de muestras clnicas donde pueden encontrarse bacterias gran negativas junto con Staphylococcus aureus, debe incluirse un medio selectivo. El medio selectivo mas empleado en los laboratorios clnicos para aislar Staphylococcus aureus es el medio agar sal manitol (medio de chapman, que por su gran contenido de sal inhibe el crecimiento de la mayora de las bacteria gran negativa. Adems este medio permite realizar una identificacin presuntiva basndose en la coloracin amarilla caracterstica que adquieren las colonias Staphylococcus aureus fermenta manitol con produccin de acido. La acidificacin produce un cambio en el color del medio que vira de rosado plido a amarillo. La mayora de los Staphylococcus coagulasa negativa no fermentan manitol y crecen en el medio formando colonias de color blanco-rosado14.

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Brock. Biologa de los Microorganismos. Octava edicin. Editorial Prentice Hall. A. Fumarola, et al. Microbiologa y parasitologa medica. Segunda edicin. Editorial Masson.

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Otros medios de cultivo selectivos empleados para aislamiento de Staphylococcus aureus son el agar sangre suplementado con colistina y acido nalidixico y el agar feniletanol, que tambin inhibe el crecimiento de bacterias gran negativas15. En los ltimos aos, se han desarrollado medios de cultivos que incorporan sustratos cromognicos y permiten la identificacin directa de Staphylococcus aureus. En presencia de enzimas especificas, los sustratos son modificados y los cromgenos colorean especficamente las colonias. Aunque el coste de estos medios es elevada, permiten realizar la identificacin directa de Staphylococcus aureus, facilitando adems la deteccin de cultivos polimicrobianos. En el cultivo de muestra normalmente estriles deben empelarse, adems de medios slidos, caldo de enriquecimiento como tioglicolato o caldo brain heart16. 3.1.1. Variantes de colonias pequeas Se han descrito variantes de colonias pequeas de Staphylococcus aureus que crecen en medio de agar sangre como colonias aproximadamente 1/10 del tamao del morfotipo habitual. Estas colonias son no pigmentadas y no hemolticas y requieren al menos 48 horas de incubacin para desarrollarse en cultivos. Son auxotroficas para hemina o menadiona, utilizan poco carbohidrato y son resistentes a gentamicina17. En los cultivos, estas variantes pequeas pueden aparecer solas o junto con el morfotipo habitual, dando la impresin de un cultivo mixto. Tras subcultivos pueden quedar estables o revertir al morfotipo salvaje, especialmente si se suplementa el medio con hemina y menadiona y se incuba el cultivo en atmosfera de CO2. Las variantes de colonas pequeas se aslan con mayor frecuencia a partir de muestras clnicas de pacientes con infecciones persistentes, tales como fibrosis qustica y osteomielitis crnica y de muestras de pacientes que han recibido tratamientos prolongados con aminoglicosidos y trimethoprim-sulfametoxazol18.

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Brooks, et. al., Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg, 16a ed.

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Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 Koneman, et al. Diagnstco Microbiolgico Texto y atlas a color. Quinta edicin. Editorial Medica Panamericana. 18 Brock. Biologa de los Microorganismos. Octava edicin. Editorial Prentice Hall.

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3.2. Identificacin Una vez aislada Staphylococcus aureus, la identificacin puede realizarse mediantes unas pocas pruebas bioqumica convencionales. Inicialmente la deteccin de catalasa permite diferenciar el gnero Staphylococcus (catalasa positiva) de los gneros Streptococcus y Enterocococcus del gener Micrococcus, que es tambin catalasa positiva pero no fermenta glucosa en anaerobiosis. La prueba de coagulasa sigue siendo la ms utilizada para la identificacin de Staphylococcus aureus. Se basa en la capacidad de las cepas de Staphylococcus aureus para producir esta enzima extracelular que coagula el plasma. La deteccin de coagulase permite diferenciar staphylococcus aureus (coagulase positiva) de todas las dems especies de staphylococcus (coagulase negativa). Se han desarrollado diferentes tcnicas comerciales que permiten detectar mediante hemaglutinacin o aglutinacin en ltex el clamping factor (coagulasa ligada) y la protena A, utilizando protenas de ltex sensibilizadas con fibringeno humano y un anticuerpo monoclonal frente a la protenaA19. Estas pruebas resultan ms sensibles y especificas que la prueba convencional que determina nicamente el clumling factor o el coagulasa ligada (prueba sobre portaobjeto). Otra caracterstica especifica de staphylococcus aureus es la produccin de una ADNas termoestable que se puede identificar fcilmente mediante cultivo en medios que contienen ADN, por ejemplo el medio ADN verde malaquita (). Algunas especies de staphylococcus coagulasa negativa pueden presentar una actividad ADNsa dbil. Otras pruebas que ayudan en la identificacin de staphylococcus aureus, aunque no son especificas de esta especie, son la fermentacin de manitol y la produccin de fosfatasa alcalina20. Los laboratorios clnicos generalmente disponen de sistema comerciales de identificacin. Estos sistemas manuales o automticos, utilizan distintos sustratos deshidratados y permiten la identificacin de diferentes especies de estafilococos con una fiabilidad que oscila del 70 a ms del 90%, dependiendo del sistema; la tecnologa es de fcil realizacin y permite obtener resultados con relativa rapidez. La identificacin directa de staphylococcus aureus en muestra clnicas puede realizarse mediante tcnicas de amplificacin gentica, como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y PCR en tiempo real, utilizando genes exclusivos de la especie staphylococcus aureus. Sin embargo, estas tcnicas tienen un elevado costo, son muy laboriosos y, de momento no ests disponible en la mayora de laboratorios clnicos21. En ocasiones, con fines epidemiolgicos, se requiere identificar cepas o grupos de cepas.

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Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa. Brooks, et. al., Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg, 16a ed.

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Para ellos, pueden emplearse tcnica fenotpicas como la fago tipia o tcnicas genotpicas entre las que hay una gran variedad22. 4. Patogenia y datos clnicos 4.1. Infeccin La patogenia de las infecciones producidas por staphylococcus aureus es un fenmeno complejo debido principalmente al amplio armamentarium de factores de virulencia que puede expresar este microorganismo. Aproximadamente un 20% de las personas es portadora permanente de staphylococcus aureus en las fosas nasales y un 30% lo es de forma intermitente. Staphylococcus aureus puede adems colonizar otras reas tales como la piel y el tracto gastrointestinal. Cuando la integridad de las barreras mecnicas se rompe, estos microorganismos pueden alcanzar tejidos ms profundos y producir infeccin. Los pacientes con infecciones por staphylococcus aureus suelen infectarse por la misma cepa que coloniza sus fosas nasales. La colonizacin tambin permite la transmisin entre individuos tanto en el ambiente hospitalario como en la comunidad. Para una adecuada supervivencia o invasin al husped, todo este sistema complejo de factores de virulencia tiene que estar coordinado por un sistema de comunicacin celulacelula que se conoce con el nombre de qurum sensing (QS). El QS est mediado por pequeas protenas producidas por las bacterias que se denominan autoinductores y que, dependiendo de factores ambientales, pueden activar un gran nmero de genes incluyendo factores de virulencia. El sistema QS mas estudiado en staphylococcus aureus se denomina reguladores de genes accesorios o agr, cuyo papel en las diferentes fases de produccin de infeccin, y especialmente en la formacin de biocapas, es controvertido. Cepas mutantes en agr tienen disminuida la virulencia y determinados tipos de agr se relaciona con cuadros clnicos especficos23. 4.2. Factores de virulencia de staphylococcus aureus Fase Adherencia bacteriana Factores de virulencia ms relevantes Factor de agregacin (clumping factor), protenas de unin o fibringenos, fibronectina y sialoproteina sea. Infecciones asociadas Endocarditis, infecciones asociadas a prtesis y catteres intravasculares, osteomielitis, artritis. Infecciones recurrentes, fibrosis qustica y todas las anteriores.

Persistencia Formacin de biocapas (polisacrido bacteriana de adhesin intracelular), variantes de colonias pequeas y persistencia intracelular. Evasin de Capsula polisacrido, protena A, los protena inhibidora de la quimiotaxis mecanismo (CHIP), protena de adherencia
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Infecciones cutneas invasivas, neumona necrotizante, abscesos.

A. Fumarola, et al. Microbiologa y parasitologa medica. Segunda edicin. Editorial Masson Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009

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de defensa del husped Penetracin e invasin tisular Shock sptico y cuadros txicos extracelular (Eap), citotoxinas (leucocidina de Panton Valentine y toxina. Proteasas, lipasas, nucleasas, hialurionidasas, fosfolipasa C y elastasas. Enterotoxinas, toxina del sndrome del shock toxico 1, toxinas exfoliativas A y B, -toxinas, peptidoglicano y cidos teicoicos.

Destruccin tisular e infecciones metastasicas. Toxiinfecciones alimentarios. Sndrome del shock toxico, sndrome de la piel escaldada, imptigo bulloso y sepsis.

Fase de la patogenia de las infecciones por staphylococcus aureus y factores de virulencia involucrados

4.2.1. Adherencia bacteriana Staphylococcus aureus posee diferentes protenas de superficie que median la adherencia a los tejidos del husped. Se conocen con el nombre de componentes microbianos de superficie que se adhieren a molculas titulares (MSCRAMM). Estas protenas reconocen como receptores a molculas tales como el fibringeno, la fibronectina y el colgeno y no solo desempean un papel relevante en la patogenia de infecciones asociados a dispositivos protsicos sino tambin en endocarditis, osteomielitis y artritis. Entre ellas destaca el factor de agregacin, las protenas de unin al fibringeno, ala fibronectina o a la sialoproteina sea. Los MSCRAMM se producen principalmente en bacterias en fase de crecimiento logartmico, lo que favorece la colonizacin de superficie24. 4.2.2. Persistencia bacteriana Una vez colonizada la superficie tisular o protsica, staphylococcus aureus tiene la capacidad de constituir una biocapa bacteriana mediada principalmente por la produccin de una sustancia denominada polisacrido de adhesin intracelular (PIA) mediado, a su vez, por un gen denominado ica. La constitucin de biocapas bacterianas protege a staphylococcus aureus de la actividad de los mecanismos de defensa del husped y de los antimicrobianos y explica parcialmente la dificultad de erradicar infecciones asociadas a dispositivos protsicos sin la retirada de los mismos. (). Esta bacteria, adems, parece tener la capacidad de sobrevivir intracelularmente, incluso en clulas endoteliales, lo que contribuye a la evasin de los sistemas defensivos en caso de endocarditis. Algunas especies de staphylococcus aureus pueden formar lo que se conoce con el nombre de variantes de colonias pequeas que se hallan en estado de semilatencia, evadiendo de esta manera la accin de los mecanismos de defensa y de algunos antimicrobianos, pero que pueden revertir a su estado salvaje produciendo infecciones recurrentes. Muchos de estos factores estn regulados por el sistema QS25. 4.2.3. Estrategia frente a los mecanismo de defensa del husped
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Staphylococcus aureus posee diferentes factores que lo permiten evadir los sistemas defensivos. Muchos aislados pueden producir una capsula polisacrido, especialmente del tipo 5y 8, con caractersticas antifagociticas y de formacin de abscesos. Posee una protena de superficie denominada protena A, que tiene la capacidad de unirse a la fraccin Fc de la IgG, lo que inactiva la actividad opsonizante de esta inmunoglobulina. Adicionalmente, puede producir la protena inhibidora de la quimiotaxis y la extravasacin de los leucocitos polimorfonucleares (PMN) en el lugar de la infeccin. Finalmente staphylococcus aureus puede producir una gran cantidad de citotoxinas capaces de destruir, entre, otros a los leucocitos polimorfonucleares (PMN). Destacan las hemolisinas, especialmente la -toxina, y la leucocidinade Panton-Valentine (LPV), que parece tener especial relevancia en las infecciones que se producen en la comunidad. 4.2.4. Penetracin e invasin de tejidos Staphylococcus aureus tiene la capacidad de producir un nmero importante de enzima que facilitan la invasin y destruccin tisular. Destacan las proteasas, lipasas, nucleasas, hialuronidasa, fosfolipasa C y elastasas, que tienen un papel relevante en la instauracin de infecciones metastasicas26.

4.2.5. Shock sptico y produccin de toxinas Staphylococcus aureus puede producir Shock sptico mediante la activacin del sistema inmunolgico y del sistema de coagulacin mediado por el peptidoglicano, los cidos teicoicos de la superficie y por la -toxina. Adicionalmente, tambin puede producir superantigenos tales como las enterotoxinas, que causan toxinfecciones alimentarias, y la toxina TSST-1, causante del sndrome del shock toxico. A diferencia de lo descrito anteriormente para los elementos estructurales como el peptidoglicano, estos superantigenos pueden generar cuadros similares al shock sptico por la produccin incontrolada de citocinas. Finalmente staphylococcus aureus puede producir la toxina exfoliativa o epidermolisina, responsable del sndrome de la piel escaldada o del imptigo bulloso. La produccin de toxinas tiene lugar especialmente en bacteria en fase de latencia, lo que favorece su diseminacin27. Los factores de virulencia de staphylococcus aureus para producir enfermedades y evadir los mecanismos de defensa del husped son numerosos. Sin embargo; cabe resaltar que no todas las cepas de esta especie se comportan de la misma manera. Existe diferencia importante en cuanto a tipos de adhesinas o toxinas y en cuanto a la capacidad de evadir el mecanismo de defensa o la capacidad de producir biocapas bacterianas. Si bien algunas determinantes de virulencia se relacionan con el tipo clonal, otro no se relacionan con informacin gentica. De hecho, no existe demasiada informacion sobre la expresin de muchos de estos genes durante la infeccin.

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4.3. Intoxicacin 4.3.1. Toxina y enzimas implicados S. aureus produce un gran nmero de factores de virulencia (tabla 22-3), entre los que figuran cinco toxinas citolticas (que daan la membrana) (alfa, beta, delta, gamma y leucocidina de Panton-Valentine [P-V]), dos toxinas exfoliativas (A y B), ocho enterotoxinas (A a E, G a I) y la toxina-1 del sndrome del shock txico (TSST-1). Las toxinas citolticas se han descrito tambin como hemolisinas, aunque no constituye un nombre adecuado debido a que las actividades de las cuatro primeras toxinas no se restringen nicamente a los hemates y la leucocidina P-V es incapaz de lisar estas clulas. Las citotoxinas pueden provocar la lisis de los neutrfilos, lo que da lugar a la liberacin de las enzimas lisosomales que posteriormente daan los tejidos circundantes. Una citotoxinas, la leucocidina de P-V, se ha relacionado con infecciones cutneas graves28. La toxina exfoliativa A, las enterotoxinas y TSST-1 pertenecen a una clase de polipptidos conocidos como superantgenos. Estas toxinas se unen en los macrofagos a molculas del complejo principal de histocompatibilidad de clase II (CPH II), las cuales interaccionan con la subunidad b de los receptores especficos de los linfocitos T y originan una proliferacin inespecfica de estos linfocitos y la liberacin de citocinas, las cuales provocan dao tisular ulterior29.

Toxina alfa La toxina alfa (a), la cual puede estar codificada tanto en el cromosoma bacteriano como en un plsmido, es un polipptido de 33.000 D producido por la mayora de las cepas de S. aureus que causan enfermedad en el ser humano. La toxina altera el msculo liso de los vasos sanguneos y es txica para muchas clulas, como hemates, leucocitos, hepatocitos y plaquetas. Se integra en regiones hidrofbicas de la membrana de la clula del husped y forma poros de 1 a 2 nm. El rpido flujo de salida de K+ y de entrada de Na+, Ca2+ y otras molculas pequeas conduce a aumento de volumen por osmosis y a lisis. La sensibilidad vara segn la especie animal (los hemates del conejo tienen una sensibilidad 1000 veces mayor que las clulas del ser humano) y el tipo de clula (p. ej., los fibroblastos pueden reparar el dao en la membrana de una forma ms eficaz que los hemates). Se cree que la toxina a es un mediador importante del dao tisular en la enfermedad estafiloccica30. Toxina beta La toxina beta (P), conocida tambin como esflngomielinasa C, es una protena termolbil de 3 5.000 D producida por la mayora de las cepas de S. aureus que provocan enfermedad en el ser humano y los animales. Esta enzima presenta especificidad para la esingomielina y la lisofosfatidilcolina, y es txica para diversas clulas, entre las que se encuentran los hemates, los fibroblastos, los leucocitos y los macrfagos. Cataliza la hidrlisis de los fosfolpidos de la membrana en las clulas susceptibles, y la lisis es proporcional a la concentracin de esfingomielina expuesta en la superficie celular. Se cree que este mecanismo es responsable de las diferencias de sensibilidad de las distintas especies a la toxina. En el ser humano no se ha demostrado an la funcin de la toxina p\ aunque se cree que es responsable, junto
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con la toxina a, de la destruccin tisular y la formacin de los abscesos caractersticos de la enfermedad estafiloccica31. Toxina delta La toxina delta (8) es un polipptido de 3000 D producido por casi todas las cepas de S. aureus y la mayora de las restantes especies estafiloccicas (p. ej., S. epidermidis, S. haemolyticus). La toxina tiene un amplio espectro de actividad citoltica, afecta a los hemates, muchas otras clulas de los mamferos y las estructuras de las membranas intracelulares. Esta toxicidad de membrana relativamente inespecfica concuerda con la nocin que afirma que la toxina acta como un surfactante que altera las membranas celulares mediante una accin de tipo detergente. Toxina gamma y leucocidina de Panton-Valentine La toxina gamma (y) (fabricada por la mayora de las cepas de S. aureus) y la leucocidina P-V (elaborada por <5% de las :epas de esta especie) son toxinas formadas por dos componentes que constan de dos cadenas de polipptidos: el componente S (protenas de elucin lenta) y el componente F protenas de elucin rpida). Se han identificado tres protenas S (HlgA [hemolisina g A], HlgC, LukS-PV) y dos protenas F (HlgB, LukF-PV). Las bacterias que producen ambas toxinas codifican todas estas protenas y podran producir seis toxinas distintas. Estas seis toxinas pueden lisar los neutrfilos y los macrfagos, y la actividad hemoltica ms intensa se asocia a HlgA/HlgB, HlgC/HlgB y HlgA/LukF-PV. La toxina leucocidina P-V (LukS-PV/LukF-PV) es leucotxica, pero carece de actividad hemoltica. La lisis celular provocada por estas toxinas est mediada por la formacin de poros con aumento de la permeabilidad a los cationes y la inestabilidad osmtica32. Toxinas exfoliativas El sndrome de la piel escaldada estafiloccica (SPEE), un espectro de enfermedades que se caracteriza por dermatitis exfoliativa, est mediado por toxinas exfoliativas. La prevalencia de la produccin de toxina en las cepas de S. aureus vara en funcin de la distribucin geogrfica, pero generalmente se encuentra entre menos de un 5% y un 10%. Se han identificado dos formas distintas de toxina exfoliativa (ETA y ETB), y ambas pueden producir enfermedad. ETA es termoestable y codificada por un gen cromosmico, mientras que ETB es termolbil y mediada por un plsmido. Los estudios ultra estructurales han puesto de manifiesto que la exposicin a las toxinas, las cuales son serina proteasas, se sigue de separacin de los puentes intracelulares (desmosomas) en el estrato granuloso de la epidermis. Se ignora cul es el mecanismo preciso de esta accin. Las toxinas no se asocian a procesos de citlisis ni inflamacin, por lo que en la capa de la epidermis afectada no estn presentes estafilococos ni leucocitos (lo cual constituye un importante dato diagnstico). Despus de la exposicin de la epidermis a la toxina, se desarrollan anticuerpos neutralizantes protectores, lo que lleva a la resolucin del proceso txico. El SPEE se observa fundamentalmente en nios pequeos, y rara vez se describe en nios mayores o en adultos. Ello podra deberse al hecho que ETA y ETB se unen a los glucolpidos del tipo GM4, los cuales se encuentran en la epidermis de los neonatos susceptibles, pero no en la de los nios mayores o los adultos33.

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Enterotoxinas

Se han identificado ocho tipos de enterotoxinas estafiloccicas (A a E; G a I) y tres subtipos de la enterotoxina C. Las enterotoxinas son estables a 100 C durante 30 minutos y resistentes a la hidrlisis de las enzimas gstricas y yeyunales. Por ello, cuando un alimento se ha contaminado por estafilococos productores de enterotoxinas y se han producido las toxinas, el hecho de volver a calentar ligeramente la comida o la exposicin a los cidos gstricos carecen de capacidad protectora frente a la accin de estos compuestos. Estas toxinas son producidas por una proporcin de cepas de S. aureus comprendida entre el 30 y el 50%. La enterotoxina A es la toxina que se asocia con mayor frecuencia a la enfermedad. Las enterotoxinas C y D se encuentran en los productos lcteos contaminados, y la enterotoxina B reduce colitis seudomembranosa estafiloccica. Se conoce en menor medida la prevalencia de las restantes toxinas. Se ignora cul es el mecanismo exacto de accin de la toxina, ya que no se dispone de ningn modelo animal adecuado. Estas toxinas son superantgenos capaces de inducir la activacin inespecfica de los linfocitos T y la liberacin de citocinas. Los cambios histolgicos caractersticos observados en el estmago y el yeyuno consisten en la infiltracin de neutrfilos en el epitelio y la lmina propia subyacente, con prdida de las clulas en borde de cepillo del yeyuno. Se cree que la estimulacin de la liberacin de los mediadores inflamatorios por parte de los mastocitos origina la emesis caracterstica de la intoxicacin alimentaria estafiloccica34.

ENZIMAS Las cepas de S. aureus poseen dos formas de coagulasa: ligada y libre. La coagulasa que se une a la pared del estafilococo puede convertir directamente el fibringeno en fibrina insoluble para forzar la agregacin de los estafilococos. La coagulasa libre logra el mismo resultado al reaccionar con un factor del plasma (una globulina, factor que reacciona con la coagulasa) para originar una estafilotrombina, un factor semejante a la trombina. Este factor cataliza la conversin del fibringeno en fibrina insoluble. El papel de la coagulasa en la patogenia de la enfermedad es especulativo, pero la coagulasa puede provocar la formacin de una capa de fibrina alrededor del absceso estafiloccico, de forma que la infeccin quede localizada y los microorganismos estn protegidos de la fagocitosis. Algunas especies de estafilococos fabrican coagulasa, pero se trata fundamentalmente de patgenos animales que rara vez participan en la infeccin en el ser humano. Catalasa El perxido de hidrgeno se puede acumular durante el metabolismo bacteriano o con posterioridad a la fagocitosis. Todos los estafilococos producen catalasa, la cual cataliza la conversin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. Hialuronidasa La hialuronidasa hidroliza los cidos hialurnicos, los mucopolisacridos cidos que se encuentran en la matriz acelular del tejido conectivo. La enzima favorece la diseminacin de S. aureus en los tejidos. Ms del 90% de las cepas de S aureus es capaz de producir esta enzima35.

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Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa. Brock. Biologa de los Microorganismos. Octava edicin. Editorial Prentice Hall.

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Fibrinolisina Prcticamente todas las cepas de S. aureus fabrican fibrinolisina, conocida tambin como estafilocinasa, la cual puede disolver los cogulos de fibrina. La estafilocinasa es diferente de las enzimas fibrinolticas producidas por los estreptococos. Lipasas Todas las cepas de S. aureus y ms del 30% de las cepas de Staphylococcus coagulasanegativos producen diferentes lipasas. Como indica su nombre, estas enzimas hidrolizan los lpidos, una funcin esencial para garantizar la supervivencia de los estafilococos en las zonas sebceas del organismo. Se cree que la presencia de estas enzimas es necesaria para que los estafilococos puedan invadir los tejidos cutneos y subcutneos, y para el desarrollo de infecciones cutneas superficiales (p. ej., fornculos, carbunco)36. Nucleasa La nucleasa termoestable es otro marcador de S. aureus, si bien otras especies tambin producen esta enzima. Se desconoce la funcin de esta enzima en la patogenia de la infeccin. Penicilinasa Ms del 90% de los estafilococos aislados eran sensibles a la penicilina en 1941, el ao en que el antibitico se us en clnica por primera vez. Los microorganismos desarrollaron con rapidez resistencia a la penicilina por su produccin de penicilinasa ((3-lactamasa). La amplia distribucin de esta enzima se asegur por la presencia en plsmidos transmisibles37. 5. Epidemiologia El Staphylococcus aureus es un agente patognico que acta como un microorganismo saprofito, se encuentra en la piel del individuo sano pero en ocasiones en que las defensas de la piel caen puede causar enfermedad. El principal grupo de riesgo son pacientes hospitalizados o inmuno comprometidos. Cerca de 2 mil millones de personas han sido colonizadas mundialmente por este microorganismo. Infeccin Infeccin de piel y partes blandas. Neumonia, sialadenitis, sepsis con o sin metastasis (osteitis, artritis, endocarditis, abscesos localizados), orzuelos. Enfermedades por toxinas (sindrome de piel escaldada por estafilococo, sndrome del shock toxico y gastroenteritis). Resistencia S. aureus posee resistencia a travs de una beta-lactamasa inducible que le confiere resistencia ante la penicilina, esta beta-lactamasa esta codificada en un plsmido presente en mas del 90% de las cepas. La resistencia al oxido ntrico es una cualidad peculiar del S. aureus, capacidad que lo distingue de otros patgenos, incluyendo los comensales S. epidermidis y S. saprophyticus. Esa resistencia se debe a que el microorganismo produce una enzima llamada lactatodeshidrogenasa, que la faculta para tolerar el estrs causado por el radical del oxido ntrico.

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Infecciones Producidas por Staphylococcus Aureus, Albert Pahissa, edicin 1,ICG Marge SL; Barcelona, 2009 Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa.

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Esta observacin se ha hecho tanto en especies resistentes a la meticilina como en las que son susceptibles al antibitico, asi como en cepas hospitalarias como adquiridas en la comunidad38. Tratamiento Esta bacteria produce la enzima s-lactamasa, pero hay que tomar en cuenta que est logrando un alto grado de tolerancia contra penicilinas resistentes a s-lactamasa como la oxacilina, cloxacilina, dicloxacilina o metecilina (SARM Staphylococcus aureus Resistentes a Meticilina). Estos Staphylococcus resistentes a Meticilina son muy peligrosos ya que provocan multitud de Infecciones nosocomiales (contradas en el hospital) y son multiresistentes a gran cantidad de antibiticos; el siguiente tratamiento usado fue vancomicina pero incluso a este han desarrollado resistencia. Ahora se usan otros antibiticos si existe resistencia, como levofloxacino o daptomicina. Han provocado un gran problema en los pases desarrollados, siendo estas patgenas portadas de peridicos en numerosos pases39. Alternativas Vancomicina (es el antibitico de eleccin en caso de resistencia a la cloxacilina), cotrimoxazol, cefalosporina, amoxicilina asociada a acido clavulanico, imipenem, clindamicina, ciprofloxacino o un aminoglicosido (no debe utilizarse como farmaco nico).Es interesante la actividad de la fosfocina en tratamiento de pacientes nosocomiales alrgicos a los beta-lactamicos. Actualmente se estudia el tratamiento mediante bacterifagos (virus capaces de eliminar a estas bacterias) para prevenir o curar infecciones, tanto localizadas como sistmicas. Tanto el cobre como los cidos oleicos, este ultimo contenido en el aceite de Oliva resultan veneno para el staphylococcus aureus, adems en la actualidad se experimenta con fenoles de los cuales estos no son resistentes40. 5.1. Portadores El estado de portador permanente o temporal de S. aureus en nios mayores y adultos es ms frecuente en la nasofaringe que en la bucofaringe. Aproximadamente el 15% de los adultos sanos son portadores permanentes de S. aureus en la nasofaringe, aunque se ha descrito una incidencia ms elevada en los pacientes hospitalizados, el personal sanitario, los sujetos aquejados de enfermedades eccematosas de la piel y aquellos que utilizan frecuentemente agujas, ya sea de forma ilegal (p. ej., drogodependientes) o por motivos mdicos (p. ej., pacientes con diabetes insulino-dependiente, sujetos que se vacunan frente a la alergia o que se someten a hemodilisis). La adherencia de estos microorganismos al epitelio mucoso est regulada por las adhesinas estafiloccicas de superficie celular. La diseminacin de bacterias es frecuente y la responsable de muchas de las infecciones adquiridas en el hospital como consecuencia de la presencia de los estafilococos en la piel y en la nasofaringe. Los estafilococos son sensibles a las temperaturas elevadas, as como a los desinfectantes y las soluciones antispticas; sin embargo, los microorganismos pueden sobrevivir en las superficies secas durante perodos de tiempo prolongados. Estas bacterias se pueden transferir a una persona vulnerable por contacto directo o a travs de fmites (p. ej., ropa contaminada, sbanas). Debido a ello, el personal sanitario debe utilizar tcnicas adecuadas de lavado de manos para evitar la transmisin de estafilococos a sus pacientes

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Brooks, et. al., Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg, 16a ed. A. Fumarola, et al. Microbiologa y parasitologa medica. Segunda edicin. Editorial Masson.

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Richardson, AR; Libby SJ, Fang FC (marzo 2008). A nitric oxide-inducible lactate dehydrogenase enables Staphylococcus aureus to resist innate immunity.

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o entre los propios pacientes41. 6. Fuente de intoxicacin alimentaria La intoxicacin estafiloccica es una de las ETA ms importantes en el mbito mundial. De los brotes de intoxicacin que se presentan, en promedio, el 20% se debe al consumo de alimentos contaminados con enterotoxinas, bacterias del gnero Staphylococcus y, principalmente, por la especie Staphylococcus aureus. El hbito de tocarse con las manos la cara, mientras se elaboran productos alimenticios, incrementa el riesgo de contaminacin con el microorganismo. En todos los brotes se ha comprobado que los manipuladores de alimentos tenan lesiones en la piel y fue aislada la misma cepa enterotoxignica de Staphylococcus Aureus de la nariz de stos y de los alimentos involucrados42.

El equipo contaminado tambin se ha relacionado como fuente del microorganismo, pues en varios brotes donde se involucr al jamn, la mquina rebanadora tena la misma cepa enterotoxignica que la presente en el alimento que caus la intoxicacin. Otra forma de contaminacin de los alimentos es a partir de la leche proveniente de vacas con mastitis, sobre todo cuando los derivados lcteos son elaborados en forma artesanal con leche sin pasteurizar43. La mayora de las carnes crudas se contaminan en los rastros, ya que stas son ampliamente manipuladas. En condiciones normales, el microorganismo no se desarrolla rpidamente y se destruye durante el proceso de coccin. Se ha visto que los estafilococos presentes en la carne antes de ser procesada raramente se involucran en brotes, por lo que la contaminacin de productos crnicos ocurre postproceso. La intoxicacin estafiloccica es una de las ETA ms importantes en el mbito mundial. De los brotes de intoxicacin que se presentan, en promedio, el 20% se debe al consumo de alimentos contaminados con enterotoxinas, bacterias del gnero Staphylococcus y, principalmente, por la especie Staphylococcus aureus44. Alimentos involucrados Para que un alimento pueda ser involucrado en un brote de intoxicacin alimentaria, ste debe ser un buen medio de cultivo que permita el crecimiento del estafilococo y permanecer cierto tiempo en condiciones adecuadas de temperatura, que permitan el desarrollo y produccin de las enterotoxinas. Por ejemplo, en algunos productos, como los vegetales cocidos, el Staphylococcus aureus crece bien, ya que en productos crudos el microorganismo es inhibido por la biota normal. Existen reportes ocasionales de brotes donde se involucraron
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Microbiologa Medica, Patrick R. Murray, edicin quinta; GEA CONSULTORA EDITORIAL, S.L.L.,Espaa. Microbiologa General, Hans G. Schlegel; edicin sptima; editorial Omega S.A,Barcelona,1997

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Microbiologa General, Hans G. Schlegel; edicin sptima; editorial Omega S.A,Barcelona,1997

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productos vegetales cocidos y papas fritas. Productos enlatados como duraznos, hongos, jamn y sardinas contaminados antes de ser sometidos al proceso de enlatado, tambin han ocasionado brotes. Alimentos fermentados elaborados a partir de carne, leche y vegetales, as como productos deshidratados y de pastelera, se han reportado como responsables de brotes. Los alimentos involucrados en los brotes de intoxicacin estafiloccica varan con cada pas, de tal manera que en los Estados Unidos, Inglaterra, Gales y Checoslovaquia son principalmente las carnes rojas (jamn) y las de aves (pollo y pavo); mientras que en Espaa son la mayonesa y los alimentos aderezados con ella. En Checoslovaquia, adems, los productos lcteos tambin juegan un papel importante en esta ETA, siendo responsables de casi el 38% de los brotes. En Mxico, en cambio, los alimentos principalmente involucrados son los quesos y otros derivados lcteos (29%), los pasteles rellenos de crema (16%) y la leche en polvo (14%). Los alimentos involucrados en brotes en los distintos pases, las condiciones climticas, costumbres alimenticias, etc., resaltan la importancia de llevar a cabo estudios epidemiolgicos que permitan conocer los alimentos y los factores que se involucran en la presentacin de brotes y no inferir que lo que sucede en un pas obligatoriamente se deber presentar en otro diferente.

Factores que contribuyen a la intoxicacin Son varios los factores que intervienen en la presentacin de brotes. En primer trmino pueden sealarse las temperaturas de conservacin, por negligencia o descuido, debido principalmente a fallas en los sistemas de refrigeracin o congelacin. Otro factor es el equipo contaminado, ste representa un peligro cuando hay deficiencias de limpieza o desinfeccin, as como los utensilios para la elaboracin de alimentos. Un factor ms se refiere a las deficiencias en la higiene personal. La mayora de estos problemas podran evitarse por parte de quienes manejan o preparan los alimentos, ya sea en una industria o lugar de elaboracin. En pases que cuentan con todos los recursos para una buena conservacin de los alimentos, as como para ofrecer la capacitacin para dar un adecuado manejo a los productos, la

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intoxicacin estafiloccica es una de las principales ETAs, lo que refleja una deficiente conservacin y manipulacin de los alimentos. Por lo anterior, es conveniente resaltar que no basta con tener los recursos materiales y econmicos, si los individuos que tienen bajo su responsabilidad la elaboracin de los alimentos no logran entender el papel relevante que juegan al tener en sus manos la salud de los consumidores45.

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