Nom dtudiants : TRAN Thi Khanh Minh UE CHM30006L: POLYMERES COMPTE RENDU 05/04/2012 TP3: CALCUL DE DEGRE DE N-ACETYLATION

N DU CHITOSANE PAR SPECTROMETRIES IR ET RMN 1H I. BUT DU TP

La structure du chitine

La structure du chitosane

Le chitosane est prpare par la dsactylation (hydrolyse la fonction amide dans un milieu acide ou basique) de la chitine. Il reste un taux de N-actylation duquel dpendent les proprits physico-chimiques et mcaniques du chitosane. Il est gnralement infrieur 30% pour que le chitosane soit soluble dans leau. Le but de ce TP : calculer le degr de N-actylation rsiduel du chitosane par deux mthodes : spectromtrie Infra-rouge et RMN 1H. II. PRINCIPE DU TP

La Spectroscopie Infrarouge est base sur l'absorption d'un rayonnement infrarouge par le matriau analys. Les rayonnements vont traverser le matriau dans lequel ils sont absorbs certaines longueurs donde correspondantes des vibrations des liaisons du matriau. On obtient le spectre de labsorbance (A=log(Io/I)) en fonction de nombre donde (en cm-1). Le spectre infrarouge de polymre savre de qualit suprieur celui dune pastille KBr ralis avec le mme polymre rduit en poudre. Donc la premire chose faire est de prparer les films de chitosane. Pour filmifier un polymre, il faut quil existe sous forme de solution, cest quil doit tre ionis pour se solubiliser dans leau. Dans le cas du chitosane, la fonction amine doit tre ionise dans un milieu aqueux acide (ici on utilise acide actique). Aprs ltape de mise en solution, la solution de polymre va tre tale sur un support puis vaporer le solvant pour former le film. Ensuite, ce film va tre trait par un milieu basique pour que le chitosane se retouve sous la forme NH2 et pas NH3+ parce que les bandes NH3+ superpose celles de la fonction amide dans lIR.

A partir du spectre IR du chitosane, la mthode de Miya va nous permettre de calculer le taux de Nactylation. La spectromtrie de Rsonance Magntique Nuclaire (RMN) est base sur des proprits magntiques des noyaux. Dans le spectre RMN 1H, les signaux sont quantitatifs, la surface dun signal toujours proportionnelle au nombre de protons de ce signal. Ce fait nous permet de dterminer les quantits des types de protons diffrents et calculer le taux de N-actylation du chitosane. Lanalyse est effectue par prfrence dans un solvant deutr. La mthode Hiral va nous permettre de calculer le taux de N-actylation III. MANIPULATIONS ANALYSES 1) Prparation des films de chitosane : Il dispose de 2 types de chitosane dans la salle de TP : les chitosanes de lot 222 et de lot 1503 - Peser chacun de ces 2 chitosanes dans les fioles : m222 = 169 g m1503 = 171 g - Sous la hotte, ajouter dans chaque fiole : 1 ml de lacide actique (CH3COOH) 10 ml de leau distille 1 barreau aimant - Mettre sous agitation jusqu dissolution totale. - A laide dune pipette, taler chaque solution de polymre sur une coupelle en polystyrne. Il ne faut pas utiliser les coupelles en verre pour viter des fortes interactions avec le polymre (dans le verre il y a des groupements Si-OH qui peuvent faire les liaisons H avec la fonction amine). - Placer les coupelles dans ltuve vide 50oC pendant 1 heure pour vaporer tous les solvants.

Pour protger la pompe vide, il faut condenser les vapeurs des solvants par un systme de condensation dans N2 liquide. Le schage sous vide peut crer les bulles dans les films de polymres, il suffit de casser le vide pour faire tomber les bulles. Aprs avoir enlev du solvant, les films sont rcuprs par la pince et tremps dans une solution NH4OH/MeOH pendant 10 minutes.

 Observation : les films ont tendance resserrer, devenir plus pais. - Sortir les films et les dposer sur les coupelles en verre. - Rincer les films abondamment leau (3 fois) puis les taler au maximum sur les coupelles en verre. - Placer ces coupelles dans ltuve vide 80oC pendant 20 minutes pour scher. - Rcuprer les films de polymre par la pince et les attacher dans un support en papier. Remarque : le film du chitosane 222 est plus facile enlever de la coupelle que celui de chitosane 1503. 2) Analyses IR-TF : On utilise la mthode de Miya. Cette mthode consiste considrer le rapport des absorbances : - Des bandes ~ 1650 cm-1 : bande de vibration dlongation de C=O amide - Des bandes ~ 2800-2900 cm-1 : bande de vibration dlongation des C-H Puisque les liaisons C-H se prsentent dans toutes les molcules (chitosane, chitine), on les sert comme une rfrence interne, donc le rapport de deux absorbances signifie le taux de N-actylation qui ne dpend plus de lpaisseur du film de chitosane tudi. Les spectres IR sont enregistrs laide de lappareil de marque . Il est rgl dabord par un spectre de background fait avec 16 scans lair. Une fois les spectres sont obtenus, il faut tracer manuellement sur lappareil la ligne de base pour savoir laire sous le pic. On a fait les analyses des films disposs dans la salle de TP et des films quon a prpars. IV. RESULTATS 1) Analyse IR-TF Polymre A 07 A 32 A 40 Chitosane 222 Chitosane 1530

Bande C-H 50,17 93,48 58,32 39,15 13,47

Bande C=O 13,57 7,00 4,78 7,25 3,97

Rapport A(C=O)/A(C-H) 0,27 0,07 0,08 0,19 0,29

Daprs la courbe dtalonnage donne dans le fascicule de TP (Annexe 1), on peut trouver le taux de dsactylation puis en dduire le taux dactylation. Polymre Rapport Taux de dsactylation(%) (100 DA) DA(%) A 07 0,27 A 32 0,07 A 40 0,08 Chitosane 222 0,19 Chitosane 1530 0,29 Remarque : Lors de lanalyse du film de chitosane 1530, on a observ une perturbation du au lavage insuffisant. 2) Spectre RMN 1H : Le spectre RMN du chitosane (Annexe 2) comprend les rsonances

des protons H1 5,3 5,4 ppm du massif A : des protons H2 des units actyls + H3 H6 (en particulier 2 protons H6) 4,0 4,5 ppm du massif B : des protons H2 des units dsactyls 3,6 ppm des protons du CH3 de lactyle 2,5 ppm

Le degr de N-actylation (DA) est calcul partir du rapport :

( )

Puisque laire des signaux est quantitative, le rapport l-dessus est aussi celui entre le nombre des molcules de chitosane actyls et le nombre total des molcules de chitosane. Daprs le spectre : la hauteur de lintgrale des CH3 est de 3,6326 la hauteur de lintgrale de lensemble des signaux des H1, massif A et massif B est de 700,00, comme il y a dans cet ensemble 7 protons alors

On a :

( )

V.

COMMENTAIRES En comparant deux mthodes utilises pour dterminer le taux dactylation du polymre, on constate que : - lanalyse par lIR est la mthode plus rapide (une analyse de 16 scans dure environ une minute) mais elle nest pas prcise car la mesure est facilement perturbe par la composition de lair. - lanalyse par RMN est plus prcise mais plus long et cher. CONCLUSION

VI.