LP1 Izolarea si identificarea alcaloizilor din produsul vegetal Chinae cortex.

Analiza microscopica a produsului vegetal Chinae cortex

I. Izolarea alcaloizilor din Chinae cortex I. 1. Extractia alcaloizilor cu solventi organici nepolari

produs vegetal (0,5 g)

umectare cu o solutie bazica (0,5-1 ml NaOH 30%) extractie cu solvent organic nepolar (25 ml CHCl3)

filtrare

filtrat

concentrare

aducere in palnia de separare

reluare cu HCl 1-5%

25 ml HCl 1-5%

identificare

faza apoasa
1

identificare I. 2. Extractia alcaloizilor cu solventi organici polari

produs vegetal (0,5 g)

extractie cu apa acidulata cu HCl (1-5%) (30 ml) reflux 20 min.

filtrare

filtrat

alcalinizare (pH = 8, NaOH 30%) extractie cu solvent organic nepolar (25 ml CHCl3)

palnie de separare

faza apoasa

faza organica nepolara

HCl 1-5% (25 ml)

separare faza apoasa

identificare

II. Identificarea alcaloizilor din Chinae cortex II. 1. Identificarea alcaloizilor din Chinae cortex prin reactii de precipitare

a.

Reactia

cu

reactivul

Dragendorff

(solutie

apoasa

de

tetraiodobismutat de potasiu): 3-4 mL din faza apoasa obtinuta in urma extractiei alcaloizilor din Chinae cortex se trateaza cu 2-3 picaturi de reactiv Dragendorff precipitat rosu-portocaliu. b. Reactia cu reactivul Bertrand (solutie apoasa de acid silicowolframic): 3-4 mL din faza apoasa obtinuta in urma extractiei alcaloizilor din Chinae cortex se trateaza cu 2-3 picaturi de reactiv Bertrand precipitat galben-brun. c. Reactia cu reactivul Mayer-Valtzer (solutie apoasa de tetraiodomercuriat de potasiu): 3-4 mL din faza apoasa obtinuta in urma extractiei alcaloizilor din Chinae cortex se trateaza cu 2-3 picaturi de reactiv Mayer-Valtzer precipitat alb-galbui.

II. 2. Analiza alcaloizilor din Chinae cortex prin cromatografie pe strat subtire (C.S.S.)

Faza stationara: silicagel G Merck; placi activate 30 minute la 105-110 C. Faza mobila: cloroform dietilamina (90:10). Revelare: a) examinare in UV. b) pulverizare cu reactiv Dragendorff si examinare in vizibil. Inainte de revelare, placile se incalzesc in etuva la 100 C, 10 minute, pentru indepartarea dietilaminei. Etalon: solutii alcoolice de sulfat de chinina 1 % si sulfat de chinidina 1 %. Solutie de analizat: extract cloroformic din Chinae cortex.

Pregatirea probei de analizat: intr-un flacon cu dop rodat se aduc 0,1 g de produs vegetal pulverizat, se umecteaza cu 2 picaturi de hidroxid de amoniu 25% si se extrage cu 5 ml cloroform, prin agitare, la temperatura camerei timp de 10 minute. Se filtreaza la nisa. Filtratul se usuca pe sulfat de sodiu anhidru, dupa care se concentreaza la sec. Reziduul uscat se reia cu 1 ml metanol si se aplica 50-100 l din aceasta solutie la linia de start, sub forma de banda. In UV se observa prezenta unor spoturi alcaloidice cu fluorescenta albastra, iar in vizibil, dupa revelare cu reactiv Dragendorff, pe cromatoplaca apar spoturi portocalii-rosietice.

III. Examenul microscopic al produsului vegetal Chinae cortex Definitie

Aspect macroscopic pulbere

Analiza microscopica Fibre liberiene

Parenchim cu incluziuni de oxalat de calciu (nisip oxalic)

Suber

Observatii