Prof.Dr. Ion PTRA$CU` Prof. Dr. Ing. Daniel BUNEA`` Ing. Florin MICULESCU`` Dr. Lucian Toma CIOCAN` *Catedra de Propedeutic si Materiale Dentare, Facultatea de Stomatologie, U.M.F. ,Carol Davila, Bucuresti ** Catedra de Stiinta Materialelor, Facultatea de Inginerie si Stiinta Materialelor, Universitatea Politehnic, Bucuresti
Rezumat Scopul cercetrii. Aceast lucrare si propune s evalueze interactiunea dintre implantele metalice si tesutul osos periimplantar n Iunctie de compozitia chimic a acestora si de gradul de pregtire al supraIetei. Material yi Metod. Au Iost luate n studiulcomparativ dou aliaje, utilizate, conIorm indicatiilor Iabricantilor, n chirurgia oral: aliaj de titan tip Ti6Al4V si otel inoxidabil austenitic tip 316L, prelevat dintr-o plac de osteosinteza. Din proteze Iunctionale umane s-au pregtit probe paralelipipedice cu dimensiunile 2,5 / 2,5 / 5 mm ( L / l / h ). Fiecare Iat axial a probei a Iost pregtit prin sleIuire pe hrtie abraziv de diIerite rugzitti: P1200 (lustruire metalograIic), P800, P600, respectiv P320. Probele pregtite de dimeniuni si supraIete egale au Iost implantate transcortical n tibia aceluiasi organism (iepure). La 2 luni de la implantare, s-au prelevat probele biologice prin sacriIicarea subiectului. Acestea au Iost supuse investigatiilor imagistice calitative si cantitative cu ajutorul microscopului electronic XL30-ESEM. Discu(ie. Rezultate. Fiecare prob a Iost analizat prin microscopie electronic ESEM, cu ajutorul detectorului de electroni secundari n mediu de vapori de ap (GSE), cu detectorul de electroni retromprstiati (BSE), respectiv analize compozitionale calitative si cantitative de tip EDAX. La analiza de microscopie electronic ESEM s-a identiIicat gradul de pregtire al supraIetei, dimensiunile hiatusului periimplantar si plexul vascular periimplantar pentru Iiecare prob. De asemenea a Iost observat grosimea calusului Iibros periimplantar n curs de calciIiere si morIologia tesutul osos de neoIormatie. Concluzii. IndiIerent de tipul de aliaj s-a observat microscopic o direct proportionalitate ntre gradul de pregtire al supraIetei implantului si viteza transIormrii tesuturilor periimplantare n tesut osos matur (tesut inIlamator cu plex vascular de neoIormatie, tesut Iibros, tesut osos de neoIormatie). Adeziunea maxim a tesutului osos s-a observat la rugozitatea de P320 (cea mai mare) a implantului din Ti6Al4V, hiatusul Iiind minim. 2 Pentru nici unul dintre aliaje nu au Iost observate procese de osteoliz periimplantar, ceea ce dovedeste existenta unei interactiuni Iavorabile ntre biomaterialul implantat si structura biologic (tesutul osos).
INTRODUCERE Comportarea implanturilor n mediul biologic a reprezentat un cmp major de interes n chirurgie. Cu toate acestea, mentinerea direct n tesut osos, Ir Iormarea tesutului conjunctiv, nu a Iost acceptat ca Iiind o caracteristic a bioingineriei pn n momentul n care nu au Iost descrise succesele implantrii titanului n protetica stomatologic, Iolosind conceptul de biointegrare. Biointegrarea este deIinit, n linii mari, ca Iiind ncorporarea permanent a unui component ne-biologic cu Iunctia de a nlocui, endoprotetic sau exoprotetic, structuri biologice si care s Iie capabil s suporte sarcini Iunctionale nelimitate. PerIormanta unui biomaterial depinde de mai multi parametri: structura materialului, design-ul implantului, si mai ales biocompatibilitatea acestuia. Alturi de acesti Iactori dependenti de biomaterial exist si anumiti parametri clinici (procedurile chirurgicale) si biologici (vrst, starea de sntate, etc.) care intervin n procesele complexe de biointegrare a materialelor implantate. Numeroase studii aproIundate au Iost realizate privind aportul sanguin osos si contributia acestuia la biointegrarea intramedular a implantelor metalice. Cu toate acestea, consultnd amnuntit literatura de specialitate, nu au Iost Icute reIeriri privind succesiunea etapelor morIobiologice de biointegrare pentru diIerite aliaje utilizate n implantologie n Iunctie de gradul de pregtire al supraIetei si n concordant cu posibilittile actuale de investigatie eletrono-microscopic.
SCOPUL CERCETRII. Aceast lucrare si propune s evalueze interactiunea dintre implantele metalice si tesutul osos periimplantar n Iunctie de gradul de pregtire al supraIetei. Prin aceast cercetare s-a dorit urmrirea etapelor de Iormare si maturare a tesutului osos de neoIormatie periimplantar, ncercnd a Iace o corelatie ntre intensitatea acestor transIormri si tipul compozitional al aliajului de implantat si gradul de prgtire al supraIetei acestuia.
MATERIAL $I METOD. Au Iost luate n studiu dou aliaje, utilizate, conIorm indicatiilor Iabricantilor, n ortopedie: aliaj de titan tip Ti6Al4V si otel inoxidabil austenitic tip 316L, prelevat dintr-o plac de osteosintez. Din proteze Iunctionale umane s-au pregtit probe paralelipipedice cu dimensiunile 2,5 / 2,5 / 5 mm ( L / l / h ). Fiecare Iat axial a probei a Iost pregtit prin sleIuire pe hrtie abraziv de diIerite rugzitti: P1200 (lustruire metalograIic), P800, P600, respectiv P320. Probele pregtite de dimeniuni si supraIete egale au Iost implantate transcortical n tibia aceluiasi organism (iepure) (vezi Iigura 1). 3
Figura 1. Efectuarea geodelor tibiale transcorticale cu afutorul micromotorului cu turatie reglabil in vederea implantrii probelor metalice
La 2 luni de la implantare, s-au prelevat probele biologice prin sacriIicarea subiectului (vezi Iigura 2).
Figura 2. Probele biologice recoltate la dou luni de la implantare, pregtite pentru anali:
Acestea au Iost supuse investigatiilor imagistice calitative si cantitative cu ajutorul microscopului electronic XL30-ESEM.
REZULTATE. Fiecare prob a Iost analizat prin microscopie electronic ESEM, cu ajutorul detectorului de electroni secundari n mediu de vapori de ap (GSE), cu detectorul de electroni retromprstiati (BSE), respectiv analize compozitionale calitative si cantitative de tip EDAX.
4 Proba 1
Figura 3.Spectrul de emisie in radiatii X, obtinut in urma anali:ei compo:itionale efectuate asupra probei 1
La analiza compozitional caliatativ si cantitativ a probei 1, eIectuat cu ajutorul spectrometrului tip EDAX, s-a conIirmat compozitia acestei probe: aliaj tip Ti6Al4V (vezi Iigura 3).
Analiza probei 1 n inciden( axial
La o incident axial pe proba 1 s-a observat macroscopic (X20) att umplerea deIectului periimplantar cu tesutul osos de neoIormatie, ct si (pe anumite zone) acoperirea implantului cu acest tesut (Iigura 4). Ulterior, a Iost analizat interIata os-implant pe Iiecare Iat a probei. 5
a. b. Figura 4. Imagine privind morfologia osului nou format in furul probei din aliaf tip Ti6Al4J (a), Imagine privind topografia aceluiai implant (b)
Fa(a 1 Prin imagistica ESEM se identiIic rugozitatea de supraIat P600. Hiatusul periimplantar are dimensiuni reduse, n medie 5 m, plexul vascular Iiind absent. De asemenea se constat absenta tesutului Iibros. Tesutul osos de neoIormatie prezint un aspect de remodelare (vezi Iigura 5).
Figura 5. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 1 a implantului
Fa(a 2
Rugozitatea supraIetei la acest nivel (P320) a constituit Iactorul determinant al aderentei maxime neoosoase pentru acest implant (2m). Cu toate acestea, procesele de mineralizare a matricei organice proteice sunt ntrziate Iat de cele prezente la nivelul Ietei 1.
Figura 6. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 2 a implantului
6 Fa(a 3 La o rugozitate de P1000 se constat la nivelul hiatusului periimplantar de mari dimensiuni (15m) prezenta unui plex vascular bogat. Tesutul osos de neoIormatie prezint canale Havers largi si la distant.
Figura 7. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 3 a implantului
Fa(a 4 La rugozitatea de P800, hiatusul este de 10m, periimplantar observndu-se prezenta tesutului Iibros necalciIicat, n grosime de 20-25m (vezi Iigura 8). Pe imagine se surprind axele vasculare ale unor canale Havers colaterale.
Figura 8. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 4 a implantului implantat proba din aliaf de titan tip Ti6Al4J
Proba 2 Proba 2, conIorm analizei compozitionale EDAX a Iost conIectionat din aliaj inoxidabil austenitic tip 316L (vezi Iigura 9).
Figura 9. Spectrul de emisie in radiatii X, obtinut in urma anali:ei compo:itionale efectuate asupra probei 2 7 kV:20.00, Tilt: 0.00, Take-oII:35.05, Tc:100.0 Detector Type :UTW-Sapphire, Resolution :128.10, Lsec :199
EDAX ZAF QuantiIication, Standardless, Element Normalized SEC Table : DeIault
Tabelul 2. Compo:itia chimic cantitativ a probei din aliaf tip 316L
Analiza probei 2 n inciden( axial
a b Figura 10. Imagine privind morfologia osului nou format in furul probei din aliaf tip 316L (a), Imagine privind topografia aceluiai implant (b) 8 Att la inspectia direct a probei biologice, ct si microscopic, s-a observat deplasarea extern a implantului, datorat probabil neacolrii optime a periostului dup implantare. Cu toate acestea, n ciuda diIiculttilor de obtinere a unei incidente Iavorabile analizei, au putut Ii obtinute imagini de microscopie de baleiaj sugestive (vezi Iigura 10).
Fa(a 1
La mrire de 250X se identiIic rugozitatea de supraIat P320. Hiatusul periimplantar are dimensiuni medii de 10m, plexul vascular Iiind slab dezvoltat. Tesutul Iibsos, desi de grosime redus, 10m, nu prezint semne de osiIicare (vezi Iigura 11).
Figura 11. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 1 a implantului
Fa(a 2
n prezenta unei rugozitti de P1000, hiatusul periimplantar este de dimensiuni impresionante (50 m). Vascularizatia plexal este total absent, iar tesutul Iibros bine reprezentat (vezi Iigura 12).
Figura 12. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 2 a implantului 9 Fa(a 3
n cazul rugozittii supraIetei de (P800), se observ aceleasi caracteristici structurale ca si cele descrise la Iata 2, cu deosebirea unei reduceri nesemniIicative a spatiului periimplantar de pn la 40m (vezi Iigura 13).
Figura 13. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 3 a implantului
Fa(a 4
Abia la rugozitatea de P600 apare schitat vascularizatia periimplantar, dnd aspectul microstructural de 'ncercare de osteointegrare, similar imagistic unei etape de debut al acestui proces. Hiatusul periimplantar este n continuare lrgit la 20m (vezi Iigura 14).
Figura 14. Micrografie ESEM asupra interfetei dintre osul nou format i fata 4 a implantului
DISCUTIE. CONCLUZII. Aparitia vaselor de neoIormatie constituie un moment important al procesului de vindecare, datorit Iaptului c, realizndu-se circulatia sanguin n interiorul cheagului perimplantar, devin posibile att o serie de transIormri celulare ct si accelerarea metabolismului. Dup aproximativ o lun, tesutul perimplantar este Iormat dintr-un tesut Iibros care este treptat nlocuit de tesutul osos de neoIormatie. Dup dou luni de la implantare, prin analiza de microscopie electronic de baleiaj, au Iost obtinute imagini ce atest Iaptul c aparitia vaselor de neoIomatie intramedular periimplantar constituie principalul element care Iavorizeaz biointegrarea implantelor metalice. Dup metaplazia Iibroas a tesutului de reactie periimplantar are loc un nou proces de metaplazie osoas. n acest proces, plexul vascular de neoIomatie dezvoltat la periIeria implantului suIer modiIicri de tip sclerozant, calcare. 10 n Iunctie de tipul compozitional al implantului si de gradul de pregtire al supraIetei acestuia, aceste transIormri s-au succedat cu mai multe caracteristici individuale: IndiIerent de tipul de aliaj s-a observat microscopic o direct proportionalitate ntre rugozitatea supraIetelor implantului si viteza transIormrii tesuturilor periimplantare n tesut osos matur (tesut inIlamator cu plex vascular de neoIormatie, tesut Iibros, tesut osos de neoIormatie). Adeziunea maxim a tesutului osos s-a observat la rugozitatea de P320 (cea mai mare) a implantului din Ti6Al4 , hiatusul Iiind minim. Pentru nici unul dintre aliaje nu au Iost observate procese de osteoliz periimplantar, ceea ce dovedeste existenta unei interactiuni Iavorabile ntre biomaterialul implantat si structura biologic (tesutul osos).
Bibliografie 1. Abron A. HopIensperger M. Thompson J. Cooper LF.- Evaluation oI a predictive model Ior implant surIace topography eIIects on early - osseointegration in the rat tibia model. - Journal oI Prosthetic Dentistry. 85(1):40-6, 2001 Jan. 2. Bunea D., Nocivin A Materiale biocompatibile Editura Bren, Bucuresti, 1998. 3. De Benedittis A. Mattioli-Belmonte M. Krajewski A. Fini M. Ravaglioli A. Giardino R. Biagini G. - In vitro and in vivo assessment oI bone-implant interIace: a comparative study. - International Journal oI ArtiIicial Organs. 22(7):516-21, 1999 Jul. 4. Frosch KH. Sondergeld I. Dresing K. Rudy T. Lohmann CH. Rabba J. Schild D. Breme J. Stuermer KM - Autologous osteoblasts enhance osseointegration oI porous titanium implants- Journal oI Orthopaedic Research. 21(2):213-23, 2003 Mar. 5. Hallgren C. Sawase T. Ortengren U. Wennerberg A.- Histomorphometric and mechanical evaluation oI the bone-tissue response ton implants prepared with diIIerent orientation oI surIace topography.- Clinical Implant Dentistry & Related Research. 3(4):194-203, 2001. 6. Manzanares MC. Franch J. Carvalho P. Belmonte AM. Tusell J. Franch B. Fernandez JM. Cleries L. Morenza JL - BS-SEM evaluation oI the tissular interactions between cortical bone and calcium-phosphate covered titanium implants.- Bulletin du Groupement International Pour la Recherche ScientiIique en Stomatologie et Odontologie. 43(3):100-8, 2001 Sep-Dec. 7. Matsuo M. Nakamura T. Kishi Y. Takahashi K. - Microvascular changes aIter placement oI titanium implants: scanning electron microscopy observations oI machined and titanium plasma-sprayed implants in dogs. - Journal oI Periodontology. 70(11):1330-8, 1999 Nov. 8. Ptrascu I. Tehnologia Aliajelor Dentare, Editia II - Ed. Libripress, Bucuresti, 2002; 9. Sanz A. Oyarzun A. Farias D. Diaz I.-Experimental study oI bone response to a new surIace treatment oI endosseous titanium implants.- Implant Dentistry. 10(2):126-31, 2001 10. Simmons CA. Valiquette N. Pilliar RM. - Osseointegration oI sintered porous- surIaced and plasma spray-coated implants - An animal model study oI early 11 postimplantation healing response and mechanical stability. -Journal oI Biomedical Materials Research. 47(2):127-38, 1999 Nov. 11. Tzvetanov L. Nikolaeva S. Michailov I. Tivchev P.- Bone and ceramic interaction in the bone union process. - Ultrastructural Pathology. 26(3):171-5, 2002 May-Jun.