EQUIPO No.

2: AVILEZ VENCES ALBERTO CASTRO ESTRADA DIANA KAREN ELIZALDE VELZQUEZ ARMANDO RODRGUEZ ROSALES DANIELA ISABEL VELZQUEZ VELZQUEZ JOSU ADRIN

 Los lpidos son indispensables para la vida porque son

fuente de energa, sirven para la sntesis de hormonas, protegen nuestras vsceras, entre otras funciones.
Su distribucin por el cuerpo se produce a travs de la

sangre, pero su exceso o defecto, conocido como dislipemia, puede provocar alteraciones que ocasionen graves efectos en el corazn, arterias y cerebro.

 La concentracin de lpidos en sangre est

determinada en gran medida por la dieta y el estilo de vida. Es decir, las concentraciones de colesterol total y de triglicridos que son considerados como indicadores de un exceso se fijan en funcin de los valores de distribucin de cifras en la poblacin general. conveniente que el paciente lleve el estilo de vida cotidiano los das previos al examen, manteniendo la dieta habitual y que el peso est estable. Por otra parte se debe evitar el ejercicio fsico intenso durante las horas previas de la extraccin, ayunar de 10 a 15 horas y suspender los tratamientos farmacolgicos.

Para las determinaciones de lpidos es

 Los lpidos son compuestos orgnicos cuya funcin ms

importante es la de actuar como combustible. Gran parte del inters en el estudio del aumento de estos compuestos se debe a la conexin entre hiperlipemia y arteriosclerosis, diabetes y enfermedad cardiaca. Los lpidos insaturados reaccionan con el cido sulfrico en caliente con formacin de iones carbonio. En una segunda etapa, stos, en presencia de fosfovainillina dan una coloracin rosada. La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de lpidos totales presente en la muestra ensayada.

Mtodo Sulfo-fosfo vainillina. (Quimico; colorimtrico):

 Muestra: Suero o Plasma

Estabilidad de la muestra: Los lpidos totales son estables 24 h a temperatura ambiente Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 546 (490-550) nm

BLANCO Reactivo 1 Muestra Acido Sulfurico PATRON 0.05 mL 2.0 mL MUESTRA 0.05 mL 2.0 mL

Incubar 10 minutos en un bao de agua hirviendo (100C). Enfriar en bao de agua fra y pipetear en tubos secos:
BLANCO PATRON MUESTRA

Soln anterior
Acido sulfrico Reactivo 2

0.1 mL 2.5 mL

0.1 mL
2.5 mL

0.1 mL
2.5 mL

Dejar reposar 30 min a temperatura ambiente Leer las absorbancias

 Clculos:

Para calcular la concentracin total de lpidos en la muestra:

= 10 = 1000
Valores de referencia:

Suero: 4-10 g/L (400-1000 mg/dL)

 El colesterol es uno de los lpidos ms

importantes. Su funcin principal es formar parte de las membranas plasmticas de las clulas eucariotas; tambin es esencial para el crecimiento y viabilidad celular.
peligrosa cuando se encuentra en grandes cantidades en la sangre. colesterol se combina con protenas denominadas LDL.

Se trata de una molcula que slo es

Para poder circular en la sangre, el

unas

 Existen

mtodos tanto de tipo qumico como enzimtico.

Los qumicos se utilizaron durante mucho tiempo para

determinar el colesterol colorimtricamente, aunque suelen ser poco precisos, presentan interferencias, y resultan difcilmente automatizables. Por ello se han sustituido casi por completo por los mtodos enzimticos, que determinan el colesterol total directamente en plasma en una serie de reacciones en que se hidrolizan los steres de colesterol, se oxida el colesterol y el agua oxigenada resultante se determina enzimticamente.

 Mtodo enzimtico: Se es hidrolizado los esteres de

colesterol seguida de la oxidacin enzimtica del colesterol resultante. El indicador oxidado puede medirse mediante espectrofotometra o cuantificarse por fluorometra o con un electrodo de O2 que mida la el consumo de O2.
Mtodo qumico: Se basa principalmente en la coloracin,

para identificar el colesterol. Se coloca cido actico a 1ml de solucin del esteroide en cloroformo. Se aade 1ml de cido sulfrico concentrado. Luego se observara un tono verde-azul que significa que la prueba es positiva. El colesterol rpidamente se torna a un color rojizo.

 Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) transportan

el colesterol desde las clulas perifricas hacia el hgado, donde es convertido a cidos biliares y es excretado hacia el intestino.
Mtodo

qumico: Los quilomicrones, VLDL (lipoprotenas de muy baja densidad y LDL (lipoporteinas de baja densidad) se precipitan por adicin de acido fosfotungstico y cloruro de magnesio. Despus de centrifugar el sobrenadante contiene las HDL (lipoprotenas de alta densidad en las que se determina HDL-colesterol.

 Estudios sealan al LDL colesterol como el factor clave

en la patognesis de la ateroesclerosis y la enfermedad cardaca coronaria (ECC), mientras que el HDLcolesterol es considerado como factor protectivo.
Mtodo

enzimtico: El colesterol liberado es consumido por la colesterol esterasa y la colesterol oxidasa en una reaccin sin desarrollo de color. Un segundo tensoactivo (Reactivo 2) solubiliza las partculas de LDL formndose, por la presencia de enzimas y un reactivo cromognico, un color proporcional a la cantidad de LDL colesterol presente en la muestra.

 Esta determinacin es recomendada, para que sea

evaluado en el paciente un riesgo de enfermedad cardiovascular en adultos sanos, sin embargo dicha determinacin no suele ser solicitada, debido a que el riego cardiovascular est basado en concentraciones de colesterol. La determinacin de triglicridos es utilizado para verificar la eficacia del tratamiento preescrito a pacientes con aumento de las concentraciones de triglicridos. Estas concentraciones se depositan mayormente en clulas grasas (adipocitos) y constituyen un depsito de combustible metablico.

 Los triglicridos (TAG) se acumulan principalmente en las

clulas grasas (adipocitos) y constituyen un depsito de combustible metablico. Para su determinacin se utilizan mtodos qumicos y, sobre todo, enzimticos:
Mtodo enzimtico: Se lleva a cabo al hidrolizar los triglicridos, y el

glicerol obtenido se somete a reacciones enzimticas donde se forman un compuesto denominado NADP (nicotinamida adenina di nucletido fosfato), que se puede medir por espectofometra.
Mtodo qumico: Trata de extraer los triglicridos y otros lpidos con

disolventes orgnicos, luego se aslan los TAG, separando el glicerol de los cidos grasos. El glicerol aislado es oxidado a formaldehido, que se determina posteriormente por diferentes mtodos.

 En los casos que existe un exceso de colesterol

(hipercolesterolemia) o de triglicridos (hipertrigliceridemia), se realiza un anlisis de las lipoprotenas, es decir, protenas que van asociadas a lpidos. Para poder ser analizadas, las lipoprotenas requieren una etapa previa de separacin. Existen diferentes mtodos de separacin:

 Por ultracentrifugacin: Esta tcnica permite separar las

diferentes familias de lipoprotenas en base a sus densidades. Est basada en dos propiedades, una es la baja densidad que tienen las lipoprotenas respecto a otras macromolculas plasmticas, y la otra es que cada tipo de lipoprotena tiene una densidad diferente; as las lipoprotenas pueden ser separadas de otras protenas plasmticas y a su vez ser separadas entre ellas. poli aniones como el sulfato de heparina o en presencia de cationes divalentes como el Ca, el Mg y el Mn. Dicha precipitacin est influida por varios factores pero se han establecido condiciones para que las principales protenas precipiten escalonadamente, empezando por las de menor densidad.

Por precipitacin: La protenas precipitan en presencia de

 Los

fosfolpidos son otros componentes de la membrana plasmtica. Se puede determinar su presencia en sangre por mtodos qumicos y enzimticos. Los primeros se basan en la determinacin del contenido de fsforo de los fosfolpidos. Los segundos se basan en la hidrlisis de los fosfolpidos y en la posterior determinacin de algn producto de la reaccin.

 Garca, Y. Anlisis Clnicos. Estudio y clasificacin.

Recuperado el 05 de junio de 2011. http://www.mailxmail.com/curso-analisisclinicos/analisis-bioquimicos-lipidos-proteinas