Determinacion De Proteinas Por El Metodo De Lowry Y Bradford

DETERMINACION DE PROTEINAS POR EL METODO DE BRADFORD Y LOWRY.

INTRODUCCION. Mtodo de Lowry: Es un mtodo colorimtrico de valoracin cuantitativa de las protenas. A la muestra se aade un reactivo que forma un complejo coloreado con las protenas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentracin de protenas, segn la ley de Lambert-Beer

Este mtodo consta de dos etapas:

1) Los iones Cu2+, en medio alcalino, se unen a las protenas formando complejos con los tomos de nitrgeno de los enlaces peptdicos. Estos complejos Cu2+-protena tienen un color azul claro. Adems, provocan el desdoblamiento de la estructura tridimensional de la protena, exponindose los residuos fenlicos de tirosina que van a participar en la segunda etapa de la reaccin. El Cu2+ se mantiene en solucin alcalina en forma de su complejo con tartrato.

2) La reduccin, tambin en medio bsico, del reactivo de Folin-Ciocalteau, por los grupos fenlicos de los residuos de tirosina, presentes en la mayora de las protenas, actuando el cobre como catalizador. El principal constituyente del reactivo de Folin-Ciocalteau es el cido fosfomolibdotngstico, de color amarillo, que al ser reducido por los grupos fenolicos da lugar a un complejo de color azul intenso.

Mtodo de Bradford: Est basado en el cambio de color del colorante Coomassie brilliant blue G-250 en respuesta a diferentes concentraciones de protenas. Este compuesto interacciona con aminocidos bsicos (especialmente arginina) y aromticos. Esta unin del colorante con las protenas provoca un cambio en el mximo de absorcin del colorante desde 465 a 595 nm. Por lo tanto, este mtodo se basa en la propiedad del Azul Brillante de Coomasie G-250 de presentarse en dos formas con colores diferentes, rojo y azul. La forma roja se convierte en azul cuando el colorante se une a la protena. Experimentalmente se mide la diferencia de Absorbancias entre 595 y 465 nm (595-465nm).

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Determinacion De Proteinas

ESCUELA PROFESIONAL DE Ing. AGROINDUSTRIAL

PRCTICA N 04 DETERMINACION DE PROTEINAS POR EL METODO DE MICRO KJELDAHL

ASIGNATURA :

ANALISIS DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES

DOCENTE :

Ing. Sal CHUQUI DIESTRA

ALUMNO :

QUISPE RONDINEL, Rubn

CICLO :

2009- II Ayacucho Per 2010

I. INTRODUCCION:

El termino protena fue utilizado por primera vez por el qumico alemn Gerardus Mulder, en 1838 , tomo este nombre del vocablo griego PROTERIOS , que significa primordial nivel primario . Las protenas son un grupo de biopolmeros constituidos de aminocidos que exhiben una amplia gama de estructuras y funciones . Las protenas como un grupo de biomoleculas , desempean una gran variedad de funciones , algunas participan en la contraccin muscular y sirven para dar soporte estructural, otras trasportan y almacenan molculas pequeas. Los anticuerpos (molculas que sirven para como proteccin inmunolgica ) son protenas al igual que las enzimas (catalizadores biolgicos) y algunas hormonas.

Las protenas pueden llevar a cavo funciones tan diversas por la enorme posibilidad de combinaciones en la composicin y secuencia de aminocidos. Las protenas tambin se clasifican segn su composicin, las que se forman solo de residuos de aminocidos y no tienen otras biomoleculas son PROTENAS SIMPLES; no odas las protenas son solubles en agua , de hecho las protenas insolubles son esenciales para dar soporte y mantener la integridad estructural de las clulas y organismos.

II. OBJETIVOS:

* El estudiante conocer el fundamento del anlisis de protenas por el mtodo de Kjeldahl. * El estudiante se familiarizar con los equipos y el procedimiento del anlisis de protenas por el mtodo de Kjeldahl y la recuperacin de amonaco. * El estudiante aprender a...