[EFECTO HEPATOTXICO DEL TETRACLOCURO DE CARBONO EN RATA]

Emma Isabel Hidalgo P. , Karla Cruz L. , Alejandra Reyes V. , Ivn Cuellar R. , Paulina Cazares C. , Miriam Cruz R.

Departamento de Toxicologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico Nacional

RESUMEN El tetracloruro de carbono no ocurre naturalmente. La exposicin a esta sustancia ocurre principalmente al respirar aire, tomar agua, o a travs de contacto con suelo contaminado con esta sustancia. La exposicin a cantidades muy altas de tetracloruro de carbono puede daar el hgado, los riones y el sistema nervioso. El tetracloruro de carbono puede producir cncer en animales y se ha encontrado en por lo menos 425 de los 1,662 sitios de la Lista de Prioridades Nacionales identificados por la Agencia de Proteccin Ambiental (EPA). Se evalu el efecto toxico del CCl4 observndose un incremento en la actividad de la alanino amino transferasa (ALT) y perdida en la coloracin del hgado de las ratas administradas por unidosis de este xenobitico a travs de la exposicin de 24h. INTRODUCCIN El hgado es un rgano muy especial: aunque ms del cincuenta por ciento de su masa total este daado - por ejemplo, por intoxicacin - puede regenerarse por completo. Esta asombrosa capacidad es esencial. El hgado es el rgano metablico del cuerpo ms importante y tiene la tarea, entre otros, de desintoxicacin de la sangre. Para que pueda hacer esto, el hgado est equipado con una anatoma muy compleja: en los seres humanos ambos lbulos hepticos estn compuestos de aproximadamente un milln de pequeos lbulos que son un mximo de uno a dos milmetros de tamao. TETRACLORURO DE CARBONO Caractersticas y fuentes de exposicin El tetracloruro de carbono (CCl4) es un lquido incoloro, no inflamable y de olor dulzn. Se ha empleado con fines mdicos, como agente anestsico y como quitamanchas, antihelmntico, desengrasante, etc. Debido a su excesiva toxicidad, su uso ha sido severamente restringido por la FDA, y hoy podemos encontrar este compuesto en extintores de incendios, productos de limpieza e insecticidas. La intoxicacin aguda, voluntaria o accidental, se puede producir tanto en el ambiente industrial como domstico. Toxicocintica y mecanismo de accin La va de entrada del txico puede ser respiratoria, por inhalacin de vapores, digestiva, o a travs de la piel, concentrndose posteriormente en el tejido adiposo. Aproximadamente el 50% de la dosis absorbida se excreta a travs de los pulmones sin metabolizar, y la mayor parte del otro 50% restante se metaboliza en el hgado. Tiene una vida media muy prolongada en el cuerpo. El tetracloruro de carbono es un potente anestsico capaz de causar la muerte por su efecto depresor del SNC. Sin embargo, es tambin un potente txico heptico y renal. En el hgado produce su efecto txico por dos mecanismos diferentes: La exposicin corta a concentraciones txicas de vapores de tetracloruro de carbono produce irritacin de mucosas, nauseas, vmitos, dolor abdominal, cefaleas, sensacin vertiginosa, ataxia y deterioro del nivel de consciencia. Si la exposicin al txico cede de forma rpida, los sntomas habitualmente desaparecen en pocas horas, pero si el tiempo de exposicin se prolonga o se absorben concentraciones elevadas del txico, se produce depresin importante del SNC, que puede llegar hasta el coma, con convulsiones, hipotensin e incluso muerte por depresin respiratoria central. Es posible la muerte sbita por fibrilacin ventricular o depresin de centros bulbares vitales. A menudo se encuentra un perodo de latencia, y pacientes que han sido dados de alta hospitalaria o trasladados a una unidad de hospitalizacin general por recuperacin aparente, desarrollan una lesin heptica y/o renal en las siguientes 24-72 horas. Las enzimas hepticas se elevan de forma significativa en 48 horas tras la exposicin y aparecen signos clnicos de hepatitis en los das siguientes. El fallo renal agudo, causado por necrosis tubular, puede ser evidente en los siete primeros das tras la exposicin. MATERIALES Y MTODO Se marcaron, distribuyeron y pesaron 30 ratas hembra de aproximadamente 250 g de peso en ayunas. Se les fue administrado por va oral lotes tratados con CCl4 a una proporcin 1:1 en aceite de maz, 0.4mL por cada 100g de peso corporal. A los testigos se les administro el mismo volumen de aceite de maz. Figura 3. Comparacin de peso relativo de hgado de dos lotes de rata hembra al ser administrados por va oral despues de 24 horas de tratamiento.

6 Peso relativo de higado (g) 5 4 3 2 1 0

Testigo

Tratados

TABLA 1. Caractersticas macroscpicas de hgado extraido de ratas embra tras la administracin de CCl4 en un tiempo de 24h.
LOTE TESTIGO TRATADO COLOR PRESENCIA DE GRASA

Transcurridas 24h despus de la administracin, se obtuvieron muestras de sangre por va intracardiaca, la sangre se coloco en tubos de microcentrfuga y se someti a centrifugacin durante 15 minutos a 9 000rpm, se separ el sobrenadante y se determino las concentraciones de alanino amino transferasa (ALT), aspartato amino transferasa (AST) y fosfatasa alcalina (ALP). Como parte del estudio para evidenciar el dao heptico producido por el CCl4, se extrajo el hgado, se peso y se obtuvo el peso relativo de este rgano para cada animal. RESULTADOS Para el tratamiento de los datos de las concentraciones de las enzimas se utilizo el programa Sigma Plot versin 11.0, realizando un anlisis por chi cuadrada para saber si existe diferencia significativa entre los lotes tratados con CCl4 (vase Figura 2 y 3). Ademas tambien se caracteriz macroscpicamente cada uno de los hgados extrados de las ratas hembra; los parmetros fueron peso del rgano y peso relativo (vase Tabla1).

Rojo +++

No se observ No se observ

La escala utilizada es la siguiente, comparndose con el hgado del lote testigo: + Leve; ++ Moderado; +++ Severo; ++++ Muy severo

DISCUSIONES Para los lotes de animales testigo puede evidenciarse (vase Figura 2) que no hay diferencia significativa en el incremento de enzimas hepticas, al contrario de los animales tratados con CCl4 en donde si puede apreciarse el aumento de la actividad enzimtica. La enzima que ms incremento en actividad es la ALT, seguida de la ALP, y para finalizar la AST, realizando el anlisis estadstico puede verse que la comparacin de tener o no la exposicin ante este Xb se puede saber que solo el aumento de ALT y ALP son significativas, mientras que para AST no. Esto nos da un claro ndice de que tipo de dao, el cual se encontraba en una etapa de esteatosis heptica; es decir, signo temprano de hepatotoxicidad, esto debido a que solo se realizo una administracin nica. El principal mecanismo toxicolgico del CCl4 es la LPO (Lipoperoxidacion). En cuanto a la diferencia de peso relativo entre los lotes testigo y lotes tratados, se observ un aumento de peso relativo se puede descartar la teora de que en el periodo de tiempo de exposisicon (24h) el hgado haya incrementado de peso; es quiz que la razn es porque los animales hayan perdido peso debido a que hayan dejado de comer; al momento de la administracin se monitoreo el comportamiento de los animales observndose un comportamiento inusual: bigotes erizados, nerviosismo y letargo, y conforme paso el tiempo los animales comenzaron a experimentar los sntomas por exposicin a esta sustancia toxica. El cambio de color se observ notablemente diferente apara aquel lote tratado con CCl4 se observ una perdida de coloracin del hgado, debido a los efectos de la sustancia en el. CONCLUSIONES Al evaluar la toxicidad de CCl4 administrado por va oral y usando como modelo animal a ratas hembra, hay un aumento de la actividad enzimtica del hgado, siendo esta mayor para ALT seguida de AST. El CCl4 tambin produce perdida en la coloracin del hgado, signos de que la sustancia esta interfiriendo en la actividad celular normal del tejido.

Figura 1. Se muestra una representacin tridimensional de un modelo de estado tpico (un lbulo individual) del modelo 3D del hgado un par de horas despus de la intoxicacin con tetracloruro de carbono. Un nmero creciente de clulas en el centro del lbulo (ms brillante) se estn convirtiendo en necrosis. El color rojo muestra los vasos sanguneos sinusoidales y de color azul marca la

El primero consiste en la alteracin de la capacidad de los hepatocitos para ligar los triglicridos a las lipoprotenas transportadoras, lo que origina acumulacin intracelular de lpidos y degeneracin grasa del hgado. El segundo mecanismo consiste en la formacin de metabolitos extremadamente txicos, que origina muerte celular y necrosis heptica centrolobulillar. Este proceso metablico es mediado por el sistema enzimtico microsomal citocromo P450 y antes de la induccin de este sistema, por agentes como el etanol, metanol y alcohol isoproplico, que aumentan la hepatotoxicidad del tetracloruro de carbono.

Figura 2. Analisis estadistico de la concentracin enzimatica de alanino amino transferasa (ALT), amino transferasa (AST) y fosfatasa alcalina (ALP) de sangre de rata hembra administrada con CCl4. Se realizo el analisis atraves de Chi2. 16 14 12 10 8 6 4 2 0 Testigo ALT AST ALP Tratados 5 5 5 8

14 12

La lesin renal ocurre por efecto directo del tetracloruro de carbono sobre el tbulo renal y el asa de Henle. Por otra parte, una gran variedad de problemas se han atribuido a la exposicin crnica a este txico, incluyendo dermatitis por destruccin de la grasa de la piel, polineuritis, dficits visuales, parkinsonismo, depresin de mdula osea, disfuncin heptica y renal y cirrosis. Cuadro clnico

BIBLIOGRAFA
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2.