2 de 83

Objetivos
Introducir los conceptos de :
Desarrollo del protocolo
Calificacin de instrumento
Procedimiento analtico
Extensin de la validacin
Transferencia de mtodos
Validacin de ensayos qumicos, fsicos,
biolgicos y microbiolgicos
Validacin
3 de 83
La validacin de un mtodo analtico es
el proceso por el cual se establece,
mediante estudios de laboratorio, que las
caractersticas de desempeo del mtodo
cumplen con los requisitos para las
aplicaciones analticas previstas.
USP 31NF 26, Captulo General <1225>
Validacin de mtodos farmacopicos
Qu es validacin?
4 de 83
La validacin de mtodos, es el
proceso por el cual se demuestra
que los procedimientos analticos
son aptos para el uso indicado.
FDA draft guidance Analytical
Procedures and Methods Validation
5 de 83
Cul es el objetivo
de la validacin?
El objetivo de la validacin de
un procedimiento analtico es
demostrar que es apto para el
propsito indicado.
ICH Guideline Q2A
Text on Validation of Analytical
Procedures
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ICH Q2(R1)
Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology
Documento principal (parmetros de validacin necesarios,
caractersticas que deben ser consideradas): etapa 5, Oct
94
E UE: Adoptado por CPMP, publicado como
CPMP/ICH/381/95.
E FDA: Registro Federal, volumen 60, N

. 40, 1

de marzo,
1995, pginas 11260-11262
Addendum (datos experimentales requeridos,
interpretacin estadstica): etapa 5, Nov 1995
E UE: Adoptado por CPMP, publicado como
CPMP/ICH/281/95
E FDA: Registro Federal, volumen 62, N

. 96, 19 de mayo,
1997, pginas 27463-27467
http://www.ich.org/cache/compo/276-254-1.html
Caractersticas Analticas
tpicas en la validacin
Linealidad
Especificidad
Limite de Deteccin
Lmite de cuantificacin
Precisin
Exactitud
7 de 83
8 de 83
Componentes de calidad de datos
analticos
Verificacin del CC (calibracin,
materiales de referencia)`
Calificacin de los
instrumentos analticos
Validacin de los
mtodos analticos
Pruebas de aptitud
del sistema
9 de 83
Componentes del Proceso de
validacin
Fase IQ/OQ
(IQ)
(OQ/PV)
Etapa de calificacin
Ciclo de vida del
equipo
Necesidad de
validacin
Papel y
responsabilidad
Usuario del mtodo
Soporte tcnico
Instrumento Mtodo
Fase
DQ
Fase PQ
Calificacin
del
desempeo
Calificacin del
diseo y desarrollo
del mtodo
(DQ)
Calificacin de
La instalacin
(IQ)
Calificacin de
la operacin
(OQ) (PQ)
Preparar
Definir
Disear
Instalar Funcionar Operar
Analista, equipo instrumental y mtodo
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Por qu es necesaria
la validacin analtica?
Cul es el propsito
de la validacin
analtica?
Mtodos confiables
Validacin
Mtodos reproducibles
Etapas de Validacin
Sitio del
Suplidor
Validacin
Estructural y
Software
ISO 9000
Sitio de Uso
Funcional
Cualificacin
IQ OQ PQ
Sitio de Uso
Calibracin,
Mantenimiento
Pruebas de
Ejecutoria
Antes de Comprar Antes de Usar Durante Uso
11 de 83
12 de 83
Cundo Validar ?
El mtodo analtico debe estar
normalizado
antes de iniciar el proceso
de validacin
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Etapas para desarrollar
un mtodo analtico
Prctico : tiempo, recursos
Idneo: preciso, exacto
1
Encontrar las
condiciones ptimas
DEFINIR LAS CONDICIONES
El equipo
Los reactivos
El muestreo
2

2
VALIDAR
4
3

3
EStANDARIZAR

EL METODO
14 de 83
La validacin de procedimientos analticos
requiere:
Instrumentos calificados y calibrados
Mtodos documentados
Patrones de referencia confiables
Analistas calificados
Integridad de la muestra
Validacin de mtodos
analticos
Documentados
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Plan maestro de validacin debe
incluir:
Val i daci n de Mt odos Anal t i cos
Cal i braci n
Moni t or eo Mi cr obi ol gi co y
Fsi co-Qumi co
Mant eni mi ent o
Cal i f i caci n de Per sonal
Cal i f i caci n de Pr oveedor es
Buenas Pr ct i cas de Labor at or i o
I nspecci ones I nt er nas
16 de 83
Protocolo de validacin para mtodo
analtico debe especificar:
El propsito y el alcance
Responsabilidades y competencias del
equipo de trabajo
Mtodo de ensayo normalizado y
documentado (los pasos del mtodo no
pueden ser modificados durante la
validacin)
Validacin de mtodos
analticos
17 de 83
Protocolos de validacin
Lista de materiales y equipos
Las caractersticas de desempeo que se
evaluarn (especificidad, linealidad, etc)
y el Procedimiento para evaluarlas.
experimentos para cada parmetro)
Anlisis estadstico o frmulas
Criterio de aceptacin para cada parmetro de
desempeo (los criterios de aceptacin no
pueden ser cambiados para ajustarse a los
datos)
18 de 83
Calificacin del instrumento
Marca, modelo y manual del fabricante
Modificaciones
Calificacin de la instalacin y de la
operacin
Programas de calibracin
Cronogramas de mantenimiento
Validacin de mtodos
analticos
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Clase A: Para establecer identidad
Clase B: Para detectar y cuantificar
impurezas
Clase C: Para determinar
cuantitativamente la concentracin
Clase D: Para evaluar las
caractersticas, disolucin,
uniformidad de contenido
Diferentes clases de ensayos
analticos
Clasificacin OMS (Inf. 32, Anexo 5 Validacin de
mtodos analticos)
20 de 83
* Se puede

permitir

un grado

de desviacin
Caracterstica
A
Identificacin
B
lmite

cuantitativa
B
lmite
cualitativa
C
Cuantitativas

producto

terminado
D
caractersticas
Exactitud X X X*
Precisin
X X X
Robustez X
X
X X X
Linealidad e intervalo X X X
Especificidad selectividad X X X X X
Lmite de deteccin X
Lmite de cuantificacin X
Parmetros requeridos para la
Validacin OMS
Categoras A,B,C,D

segn OMS, La USP las clasifica como categora I, II, III, IV
X
21 de 83
Parmetros requeridos para la Validacin
USP 31
Caractersticas de
Desempeo analtico
Categora I
de
valoracin
Prod.Termi.
Graneles,
conservante
Categora II de valoracin Categora III de
valoracin
(caractersticas
de desempeo,
disolucin)
Categora IV
de valoracin
(pruebas de
identificacin)
Prueba de
lmite
Cuantitativa
(impurezas en
frmacos)
Prueba de lmite
Cualitativa
(metales pesados,
etc.)
Exactitud SI SI
* * NO
Precisin SI SI
NO SI NO
Especificidad SI SI SI
* SI
Lmite de deteccin NO NO SI
* NO
Lmite de
cuantificacin
NO SI
NO * NO
Linealidad SI SI
NO * NO
Intervalo SI SI
* * NO
* Puede ser requerido dependiendo de la naturaleza de la prueba especfica
22 de 83
Mtodos nuevos requieren validacin
completa
Mtodos de Farmacopea requieren
validacin parcial (o verificacin)
Cambios significativos implican
revalidacin parcial
E cambios de equipo
E cambios de frmula
E cambios de proveedores de
reactivos crticos
Extensin de la validacin
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Transferencia de mtodos
analticos
Protocolo y procedimiento del mtodo de
transferencia
E precisin
E exactitud
E Robustez
Mtodo cientfico escrito y aprobado
Verificacin de la competencia
Aceptacin formal por el nuevo
laboratorio
24 de 83
Caractersticas generales de
desempeo
- Linealidad
- Intervalo
- Lmites de deteccin
- Lmites de cuantificacin
-Exactitud
-Precisin
-Especificidad (USP 31 ) Selectividad (ICH)
Reproducibilidad
Tolerancia, fortaleza
o resistencia. USP 31
Robustez
Aptitud del sistema
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ESPECIFICIDAD y SELECTIVIDAD
ICH Q2A y USP 31 (United

States

Pharmacopeia):
La capacidad de evaluar en forma inequvoca al
analito en presencia de los componentes cuya
presencia cabra esperar, tales como impurezas,
productos de degradacin y componentes de la
matriz. La falta de especificidad de un
procedimiento analtico individual puede
compensarse mediante otros procedimientos
analticos de apoyo.
La IUPAC, AOAC prefieren el trmino
selectividad
26 de 83
Especificidad y Selectividad
Se utiliza en :
E Identificacin: garantizar la identidad del analito
E Pruebas de pureza: declaracin exacta del contenido de
impurezas de un analito (sustancias relacionadas, metales
pesados, disolventes residuales, etc.)
E Valoracin: un resultado exacto que permite la
declaracin exacta del contenido o potencia del analito en
la muestra
E En anlisis cualitativos: Debe tener la capacidad de
distinguir compuestos de estructura estrechamente
relacionada (productos de degradacin)
USP 31
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caso 1 Productos relacionados
Muestra del
frmaco XX
Enantimero
estndar
Especificidad (USP 29 ) Selectividad

(ICH)
28 de 83
Muestra del
frmaco XX bajo
condiciones
forzadas
-Especificidad (USP 31 )
Selectividad (ICH)
caso 1 Productos de degradacin
29 de 83
En un procedimiento analtico para
impurezas, la especificidad se puede
establecer:
Si se dispone de impurezas la especificidad puede
establecerse por adicin.
E Se agregan cantidades conocidas (del frmaco o
producto farmacutico) con niveles adecuados de
impurezas y/o excipientes
Comparacin con muestras sin agregado de cantidades
conocidas
El resultado de la valoracin no se ve afectado por la
presencia de estos materiales: un resultado exacto que
permite la declaracin exacta del contenido o la potencia
del analito en una muestra
(Mtodo compendial 1225 USP 31)
30 de 83
Pruebas de valoracin y de
impurezas
Si no se dispone de impurezas o de los
productos de degradacin puede demostrarse
la especificidad:
E Comparando los resultados de las pruebas de
muestras que contengan impurezas o
productos de degradacin con los de un
segundo procedimiento bien caracterizado.
(Mtodo compendial 1225 USP 31)
Especificidad
Degradaciones forzadas relevantes
31 de 83
Condiciones Forzadas Relevantes

caso 2
EProducto farmacutico
calor
luz
humedad (85%)
Hidrlisis cida y alcalina
Oxidacin
En algunos casos, pueden ser vlidas otras
condiciones
El tiempo de exposicin, la temperatura y
la concentracin pueden ajustarse para
obtener una degradacin adecuada de la
muestra.
Mtodo compendial

1225 USP 31
32 de 83
caso 2 Cromatograma

del diluyente
No se observan picos en los tiempos de
retencin del componente principal y las
impurezas.
33 de 83
caso 2 Cromatograma

de la solucin
estndar
Las impurezas conocidas deben estar separadas
entre s

y del pico principal (Resolucin

1,5)
34 de 83
caso 2
Cromatograma

de la muestra NO sometida a
condiciones forzadas de degradacin
35 de 83
caso 2
Cromatograma

de la muestra sometida a
condiciones forzadas: los productos de degradacin
estn separados del pico principal, R

1,5
36 de 83
Lmite de Cuantificacin
Lmite de Deteccin
Relacin de Seal a Ruido
LdeD, LdeC y RSR
37 de 83
LMITE DE DETECCIN
USP 31 <1225>: la menor cantidad de analito que
puede detectarse en una muestra, aunque no
necesariamente cuantificarse, bajo las condiciones
del experimento indicadas. As, las pruebas de lmite
confirman simplemente que la cantidad de analito se
encuentra por encima o por debajo de un cierto
nivel.
El LD es una caracterstica de las pruebas lmite
La ICH cuando hay ruido de fondo recomienda que el clculo
del LD puede realizarse con un valor con el cual la relacin
entre seal y ruido (S/R) es 2:1

3:1.
38 de 83
Determinacin del LD:

No instrumental
Mtodos no instrumentales:
anlisis de muestras con
concentraciones conocidas de
analitos para establecer la
concentracin mnima a la cual el
analito puede detectarse de
manera confiable.
Ejemplos: TLC, valoraciones
volumtricas, comparaciones de
colores
39 de 83
Determinacin del LD:
instrumental
Mtodos instrumentales:
igual que para los mtodos no instrumentales
anlisis de muestras con concentraciones conocidas de
analitos para establecer la concentracin mnima a la cual el
analito puede detectarse en forma confiable.
Cuando hay ruido de fondo la ICH sugiere una relacin seal ruido aceptable
de 2:1

3:1
40 de 83
Estimacin del LD (ICH)
LD = 3,3

/m
donde:

= desviacin estndar (ruido) de la
respuesta
m = pendiente de la curva de calibracin
para linealidad
El LD puede basarse en cualquiera de los
siguientes:
-

del blanco
-

del punto de linealidad de nivel ms bajo
-

el grfico de calibracin (regresin)
Otro enfoque sugiere la determinacin de la pendiente de la curva de
calibracin y la desviacin estndar de las respuestas.
41 de 83
Ejemplos de pruebas de
lmites (validacin del LD)
Pruebas de comparacin del color
(metales pesados <231>)
Mtodos TLC (impurezas comunes
<466>)
Mtodos de precipitacin (prueba de
plomo en la monografa sobre xido
de zinc)
42 de 83
ruido
Pico A
LdD
Pico B
LdC
Lnea

basal
Relacin entre seal y ruido
Cromatograma

que muestra el ruido de lnea base
43 de 83
Desviacin estndar del blanco
Ejemplo: Integracin de un pico cromatogrfico
Inyeccin
estndar
Inyeccin
blanco
44 de 83
LMITE DE CUANTIFICACIN
La menor cantidad de analito en una
muestra que puede determinarse con
precisin y exactitud aceptables bajo las
condiciones del experimento
establecidas. USP 31 <1225>
En esencia, idntico a ICH Q2A
Lmite de cuantificacin (LC) = lmite de
cuantificacin (LOQ)
45 de 83
Determinacin/Validacin
del LC
No instrumental:
a partir del anlisis de muestras con un
nivel adecuado mnimo de analito
cuantificado con exactitud y precisin
aceptables.
Instrumental:
igual que para los mtodos no
instrumentales, ms el hecho de que el
clculo del LC puede realizarse con un
valor con el cual la relacin entre seal y
ruido es 10:1. USP 31 (1225)
46 de 83
Ejemplos de valoraciones
cuantitativas

(validacin del LC)
Mtodos de valoracin volumtrica
(agua <921>)
Mtodos HPLC/GC (pureza
cromatogrfica)
Mtodos gravimtricos (prdida por
secado <731>)
47 de 83
INTERVALO
El intervalo de un mtodo analtico es la
amplitud entre los niveles superior e inferior
del analito (incluidos estos niveles) que se
demostr que se determin con un nivel
adecuado de precisin, exactitud y
linealidad, utilizando el mtodo segn se
describe en el protocolo.
USP 31
48 de 83
LINEALIDAD
La linealidad de un mtodo analtico es su
capacidad para obtener resultados de
prueba que sean proporcionales ya sea
directamente, o por medio de una
transformacin matemtica bien definida, a
la concentracin de analito en muestras en
un intervalo dado.
USP 31
49 de 83
Evaluacin de linealidad
Debe utilizarse un mnimo de 5
puntos de datos para una
evaluacin adecuada
Inspeccin visual del grfico y
mtodo estadstico (lnea de
regresin, mnimos cuadrados)
50 de 83
Consideraciones de linealidad e
intervalo para el protocolo de
validacin
Los criterios de aceptacin deben equilibrar el
rigor cientfico con las limitaciones prcticas
Linealidad:
E Valor r
2
mnimo: 0,99 hasta 0,9999
E Interseccin-y: estadsticamente no
significativa, dentro del n % de la respuesta de
la solucin estndar
E Apto para la valoracin mediante un estndar
de un solo punto
Intervalo: necesario para resultados exactos y
precisos
51 de 83
Linealidad e intervalo
0.01
0.010
0.015
0.020
0.025
0.030
0.035
0.040
0.015 0.02 0.03 0.035 0.04
Linealidad
de un analito en un material
Material de referencia mg/ml
A
n
a
l
i
t
o

c
a
l
c
u
l
a
d
o

e
n

m
g
/
m
l
0.025
0,0155 2
0.0150
3 0.0200 0,0207
4
0.0250 0.0256
5
0.0300 0.0298
6
0.0400 0.0401
Tabla de valores
(x,y)
x y
Material de
referencia
mg/ml
Material de
referencia
mg/ml
1 0.0100 0.0101
#
52 de 83
Estadstica de linealidad
Una vez realizada la curva hacer el tratamiento estadstico
aplicando el principio de la linealidad:
y = a
y = a
+bx
+bx
a= y
a= y
-
-
bx
bx
Ecuacin de la lnea recta:

(xi
(xi
-
-
x)(yi
x)(yi
-
-
y)
y)

(xi
(xi
-
-
x)
x)
b =
Taller 1
53 de 83
Intercepto (a) -0.00056
Lmite de Linealidad e Intervalo 0.005 0.040
mg/ml
Pendiente (b) 0,988857
Coeficiente de correlacin ( r )
E Pearson 0.99952
E Coeficiente de determinacin (r2) =99,90%
Desviacin estndar relativa (CV%) del
procedimiento 1,37%
Estadstica de linealidad
El test del coeficiente de los factores de respuesta
menor del 5% indica linealidad . AEFI 2001
54 de 83
El grfico muestra que el modelo ajustado corresponde a un
modelo lineal que describe la relacin entre lo esperado y lo
obtenido y que responde a una lnea recta y que permite hacer
predicciones sobre otros valores corregidos
y = 0,00056+ 0,988857*x
Como el P-value

en la tabla ANOVA es menor que 0.01, existe una
relacin estadsticamente significativa entre la concentracin del
material de referencia y el resultado obtenido sobre las soluciones,
a un nivel de confianza del 99%

.
The

R-Squared

estadstico indica que el modelo ajustado explica
el 99,90% de la variabilidad en los resultados obtenidos. El
coeficiente de correlacin igual a 0,99952, indica una relacin muy
fuerte entre las variables. El error estndar estimado, de los
residuales, muestra una desviacin estndar de 0,00038099. Este
valor puede ser usado para construir lmites de prediccin para
nuevas observaciones.
Comentarios con relacin a los
datos ANOVA
55 de 83
0 0,05 0,1 0,15 0,2
Concentracin
R
e
s
p
u
e
s
t
a
Interseccin-
y/x = pendiente

y = residual
x
y
Anlisis de regresin
Interseccin-y, pendiente y residuales
56 de 83
Exactitud
Precisin
Repetibilidad
Reproducibilidad
Caractersticas de los
procedimientos analticos
57 de 83
Relacin entre
exactitud y precisin
inexacto e
impreciso
Exacto pero
impreciso
Exacto y preciso
inexacto
preciso
pero
58 de 83
Exactitud
Calculado como el porcentaje de
analito recuperado o
por la diferencia entre el valor
obtenido y el valor real
evaluado estadsticamente
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Exactitud
5 maneras de determinar la exactitud
E Prueba de un Estndar de Referencia
E Mezcla con excipientes (placebo con una
cantidad agregada conocida)
E Agregado de estndar (muestra con
cantidad agregada conocida)
E Se deduce a partir de los datos de
especificidad y linealidad.
E Comparacin con un mtodo reconocido
como exacto (mtodo de referencia)
60 de 83
PRECISIN
El grado de coincidencia entre los
resultados de las muestras
individuales de una muestra
homognea
La precisin debe evaluarse a travs
del intervalo de cuantificacin
especificado en el mtodo
61 de 83
Precisin comparada
con exactitud
La exactitud se expresa como %
de recuperacin
La precisin se expresa como
Desviacin Estndar Relativa (RSD)
62 de 83
Precisin
Determinacin:
E Valoracin de las muestras individuales de
una preparacin homognea
E Calcular la desviacin estndar o la
desviacin estndar relativa
La precisin del mtodo debe incluir todas las
fuentes de variacin desde la preparacin de la
muestra hasta el redondeo del resultado final de
la prueba
63 de 83
Niveles de precisin ICH-USP
Repetibilidad: coincidencia dentro de un
periodo corto para el mismo analista con la
misma instrumentacin
Precisin intermedia: coincidencia en los
resultados del mismo laboratorio, pero en das
distintos con analistas y equipo diferentes
(segn corresponda)
Reproducibilidad: coincidencia en los
resultados entre laboratorios (como en un
estudio colaborativo).
64 de 83
Precisin
Repetibilidad (5 inyecciones repetidas)
E Lmite de valoracin (%) % RSD mxima
99,0

101,0

0,37
1
98,5

101,5 0,55
1
98,0

102,0

0,73
1
95,0

105,0

1,9
2
90,0

110,0

3,9
2
Impurezas 5 a 25
2
-

dependiendo del nivel
1
Pharmaeuropa, 11(4), 571-577
2
Pharm. Technol., 6(9), 120-137
DER = Desviacin estndar Relativa (RSD)
65 de 83
Precisin
Precisin intermedia:
E La FDA recomienda un mnimo de 2 das distintos con
analistas diferentes.
E FDA (CDER), Gua del revisor: Validacin de
mtodos cromatogrficos, nov. 1994
E Criterios de aceptacin:
Realizar la prueba-F, los resultados intra
laboratorios no deben ser estadsticamente
distintos.
Tpicamente, alrededor de 2 veces la s o el CV% de
la repetibilidad
Sin embargo, una diferencia estadstica puede no
ser significativa (consideracin prctica).
Necesidad de evaluar la aptitud para la indicacin
de los mtodos
66 de 83
Variabilidad causada por :
E Variaciones de da a da
E De analista a analista
E De laboratorio a laboratorio
E De instrumento a instrumento
E De columna cromatogrfica a columna
cromatogrfica
E De estuche de reactivos a estuche de reactivos
E Inestabilidad de los reactivos analticos
TOLERANCIA, FORTALEZA
La tolerancia es el grado de REPRODUCIBILIDAD

del mtodo analtico, en diversas condiciones:
ICH PRECISIN INTERMEDIA
67 de 83
ROBUSTEZ
La USP 31 la define como una medida de la
capacidad del mtodo analtico, y demuestra
que no resulta afectado por pequeas pero
deliberadas variaciones en los parmetros
del mtodo y proporciona una indicacin de
su confiabilidad durante su uso normal.
TRANSFRENCIA DE MTODOS
APTITUD DEL SISTEMA
Si las mediciones son susceptibles a variaciones
en condiciones analticas, stas deben controlarse
adecuadamente o incluirse en el mtodo una
declaracin preventiva.
68

de 83
Las pruebas de aptitud del sistema se basan en
el concepto que el equipo, el sistema electrnico,
las operaciones analticas y las muestras a
analizar constituyen un sistema integral que
puede evaluarse como tal.
USP 31 (621)
Las inyecciones repetidas de una preparacin
estndar empleada en la valoracin u otra solucin
estndar se comparan para determinar si cumplen
con los requisitos de precisin.
APTITUD DEL SISTEMA
69 de 83
R = ( N

) ( - 1 / ) ( k / k + 1 )
E f i c i e n c i a
S e l e c t i v i d a d
C a p a c i d a d
Resolucin R cuando se tiene mas de un analito
USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
A menos que se especifique algo diferente en la
monografa individual, se emplean los datos de cinco
inyecciones repetidas del analito para calcular la
desviacin estndar relativa s, si el requisito es 2% o
menos.
Se emplean los datos de seis inyecciones repetidas si el
requisito de s es ms de 2%.
Las inyecciones repetidas de una preparacin estndar
empleada en la valoracin u otra solucin estndar se
comparan para determinar si cumplen con los requisitos
de precisin.
70 de 83
USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
El factor de asimetra T, es una medida de la asimetra
del pico, es la unidad para los picos perfectamente
simtricos y su valor aumenta a medida que la asimetra
es ms pronunciada. En algunos casos, pueden
observarse valores menores a la unidad A medida que la
asimetra del pico aumenta, la integracin y por lo tanto
la precisin se tornan menos confiables.
71 de 83
USP 31 (621)
Estas pruebas se realizan
mediante la recoleccin de
datos de inyecciones
repetidas del estndar u otras
soluciones, segn se
especifique en al monografa
individual
APTITUD DEL SISTEMA
Aunque una monografa especifique los parmetros definitivos
que se deben utilizar, esto no impide utilizar otras condiciones
operativas adecuadas y puede ser necesario realizar ajustes en
las condiciones operativas, para cumplir con los requisitos de
aptitud del sistema.
A menos que se especifique algo diferente en la monografa,
los parmetros de aptitud del sistema se determinan a partir
del pico del analito.
72 de 83
USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
Se permite ajustes slo cuando se encuentran disponibles
estndares adecuados, (incluyendo los de referencia), de
todos los componentes usados en la prueba de aptitud del
sistema y slo cuando estos estndares sean los usados para
demostrar que los ajustes han mejorado la calidad de la
cromatografa en cuanto a los requisitos de cumplimiento de
aptitud del sistema .
Mltiples ajustes pueden tener un efecto acumulativo en el
desempeo del sistema y deben considerarse antes de
implementarlos.
73 de 83
USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
Se puede considerar cada una de las siguientes variaciones
mximas, a menos que la monografa indique algo diferente.
pH de la fase mvil 0,2 unidades
Concentracin de la solucin amortiguadoras : se permite 10%
siempre y cuando conserve la variacin de pH
Relacin de los componentes de la fase mvil: c10% absoluto y
30% relativo
Longitud de onda del UV-visible: Error permitido mximo del
detector 3 nm
Longitud de la columna puede ajustarse hasta el 70%
Dimetro interno CG, HPLC 25%
Longitud de la columna de HPLC 50%
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USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
HPLC tamao de partcula puede reducirse hasta 50%
CG Tamao de la partcula conserva el cociente de intervalo
entre la ms grande y la ms pequea
Velocidad de flujo puede ajustarse hasta 50%
Volumen de inyeccin reducirse hasta los LD , LC y precisin
aceptados
Temperatura de la columna puede ajustarse hasta 10%
Temperatura de horno puede ajustarse hasta 10%
Programa de Temperatura horno CG hasta 20%
A MENOS QUE SE ESPECIFIQUE OTRA COSA los parmetros
de aptitud del sistema se determinan a partir del pico del
analito.
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USP 31 (621)
APTITUD DEL SISTEMA
Los tiempos de retencin relativos son slo informativos,
facilitan la identificacin de los picos.
Para determinar la eficacia del sistema operativo final, se lo
debe someter a una prueba de aptitud.
Las inyecciones repetidas de la preparacin estndar
requeridas para demostrar que la precisin del sistema es
adecuada , pueden realizarse antes de inyectar las muestras
o intercalarse entre las inyecciones de las muestras.
Se debe demostrar la aptitud del sistema durante toda la
corrida mediante inyecciones de una preparacin control
adecuada a intervalos apropiados, incluso al final del
anlisis.
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APTITUD DEL SISTEMA
La preparacin control puede ser una preparacin estndar o
una solucin que contenga una cantidad conocida, y
cualquier otro material adicional til para el control del
sistema analtico. Como por ejemplo impurezas o
excipientes.
Siempre que haya un cambio significativo en el equipo o en
un reactivo crtico, la prueba de aptitud debe realizarse antes
de inyectar las muestras,
Ningn anlisis de muestras es aceptable a menos que
cumpla los requisitos de aptitud del sistema. Los anlisis de
muestras obtenidos cuando el sistema no cumple con la
condicin de aptitud es inaceptable.
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Verificacin de procedimientos
farmacopicos
Los usuarios de los procedimientos analticos
farmacopicos

no necesitan validar estos
procedimientos cuando los usan por primera
vez, aun cuando debe establecer evidencias
documentadas de aptitud en las condiciones
reales, FDA estableci

este requisito en el
punto 21 CFR 211.194 a 2 .

Se verificar

la
aptitud de todos los mtodos de prueba
usados bajo las condiciones reales de uso .
No incluye los microbiolgicos
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Verificacin de procedimientos
farmacopicos
EL PROCESO DE VERIFICACION, da confianza en
que los procedimientos se llevan a cabo con la
aptitud requerida
Si la verificacin no es exitosa y la consulta y
asistencia del personal USP, no logra solucionar el
problema, se puede concluir que el procedimiento
posiblemente, no es apto para usar en el artculo que
se est evaluando en el laboratorio y entonces se
hace necesario validar el mtodo analtico.
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USP 31 (1226)
Verificacin de procedimientos
farmacopicos
Evaluar la complejidad del procedimiento y del
material sometido a anlisis. Se usan algunas de las
caractersticas del desempeo analtico, las que se
consideren adecuadas, la extensin depende de la
formacin y competencia del analista, el tipo de
procedimiento, el equipo e instrumentos asociados,
los pasos especficos del procedimiento y el artculo,
por ejemplo exactitud por las diferentes matrices. LD
y LC
USP 31 (1226)
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REQUISITOS DE LA VERIFICACION
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Reporte de Validacin
OObjetivo y alcance del mtodo,
aplicabilidad
OTipo de analito y la matriz sobre
la que se hizo la validacin,
ODetalles del analito, reactivos,
estndares de referencia y control
y estabilidad de las muestras
preparadas.
OProcedimiento para la verificacin de la
calidad de los estndares y reactivos
qumicos usados
OCondiciones de seguridad
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OListado de equipos, funcionamiento,
condiciones de desempeo. IQ,OQ,PQ
ODetalle de las condiciones y cmo
fue realizado el proceso, incluyendo la
preparacin de la muestra
GTratatamiento estadstico y clculos
realizados
Procedimientos de control rutinario
OParmetros crticos establecidos a
travs del test de robustez
OParmetros del mtodo
11 11
Reporte de Validacin
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Resultados de la incertidumbre de
la medicin
Criterios para revalidacin
Persona que desarroll

y valid

el
mtodo inicialmente
Resumen y conclusiones
test de aceptacin de las variables
Registros como cromatogramas,
espectros y curvas de calibracin
17 17
12 12
13 13
14 14
15 15
16 16
Reporte de Validacin