Chap. V. Membrane plasmique ou Plasmalemme I. Dfinition Le plasmalemme fait partie des membranes biologiques.

Ils sont la base le lorganisation spatiale et sont des structures rapidement changeantes. La membrane est une entit structurale qui enveloppe et spare le protoplasme du milieu extrieur, tout en assurant le contact entre ses lments. Le rle de la membrane est multiple: protection, adhsivit, rception et mission d'information, transfert slectif et orient de mtabolites.

La membrane joue principalement les rles suivants: Frontire entre lintrieur et lextrieur de la cellule Contrle les entres et les sorties de la cellule (changes cellulaires) Compartiments intrieurs de la cellule (organites membranaires) La surface de membrane l'intrieur de la cellule est souvent plus grande que la surface autour de la cellule. II. Structure de la membrane plasmique 1. D'aprs les proprits physico-chimiques Avant l'isolement de la membrane plasmique, la dtermination de la structure tait base sur des informations indirectes: * La permabilit de la membrane aux substances solubles dans les solvants lipidiques a amen Overton (1902) a postuler que la membrane plasmique est compose d'une couche lipidique. Plus tard en 1926, Gorter et Grendel ont montr que la teneur en lipides des globules rouges tait suffisante pour donner une membrane plasmique forme d'une double couche de molcules lipidiques. * Des mesures lectriques ont confirm ces rsultats et montrent que les ions traversent difficilement la couche lipidique. * Les mesures de tension de la surface membranaire donnent une faible tension due la prsence d'une couche protique recouvrant les couches lipidiques. D'aprs ces proprits Danielli et dawson (1935) ont avanc l'hypothse du modle lamellaire o la membrane serait forme de 2 feuillets constitus de molcules phospholipidiques et recouverte d'un film continu de protines. Le problme de ce modle c'est qu'il ne saurait expliquer le passage d'eau et des substances non liposolubles.

2. Observation au microscope lectronique a. Observation des coupes minces L'observation a montr que la membrane est forme de 3 couches qui diffrent par leur contraste aux lectrons: on a 2 feuillets denses de 20A d'paisseur intercals par un feuillet clair de 35A d'paisseur, cette structure a t appel structure trilaminaire . Les feuillets denses n'ont pas toujours la mme paisseur car le feuillet dense du ct extracellulaire possde un revtement fibreux appel le cell coat (50 100 ). Quel que soit l'organite considr (membrane du rticulum endoplasmique, appareil de Golgi,..), elle prsente la mme structure trilaminaire. Ceci a permis Robertson (1959) de proposer le modle de membrane unitaire. Cette structure trilaminaire a t interprte d'aprs le modle de Danielli et dawson avec: La couche claire = Chanes hydrocarbones des lipides (rgions hydrophobes). Les couches denses = protines (ples hydrophile).

Photographie au microscope lectronique d'une membrane paisseur : 7 8 nm Deux feuillets visibles au microscope lectronique

b. Observation des rpliques (Dfinitions voir Chap. II) L'observation des rpliques des membranes plasmiques par microscopie lectronique balayage a mis en vidence des particules globulaires de 50 80 A de diamtre enchsses dans la membrane. Cette membrane apparat forme de 2 couches et non de 3 feuillets qui renferment des particules intramembranaires : Structure particulaire. Donc la bicouche lipidique n'est pas continue.

3. Composition chimique a. Isolement de la membrane plasmique Techniquement, l'isolement de la membrane plasmique est trs difficile, d son interfrence avec les membranes des organites. Les hmaties dpourvues de noyau et d'organites cellulaires {le noyau est perdu au cours de leur maturation dans la moelle osseuse} reprsentent un matriel prcieux pour cette tude. La membrane obtenue est appele stroma ou fantme des globules rouges.

b. Analyse chimique La composition chimique de la membrane plasmique des hmaties est la plus connue: Protines, 52%; Glucides, 8% et Lipides, 40%. Les principaux lipides: les phospholipides, 55%; cholestrol 25%, glycolipides 18% et des acides gras entirement hydrophobes.

Rle des acides gras

satur

insatur

Les acides gras insaturs sont courbs et les saturs sont rectilignes
double liaison

Acide olique (insatur)

Acide palmitique (satur)

Le cholestrol Trs forte concentration dans les cellules eucaryotes, Jusqu une molcule de cholestrol par phospholipide Augmente limpermabilit de la bicouche aux molcules hydrophiles Rigidifie la membrane plasmique

Les glycolipides (en relativement faible quantit) Ressemblent aux phospholipides (GLP) dans leur composition bien quils soient dpourvus de phosphate. Les GLP simples avec un unique rsidu sucr (glycosyle) dans leur rgion polaire. Les GLP complexes contiennent plusieurs groupements sucrs.

Modle de la mosaique fluide

Les molcules sont ordonnes, mais se dplacent sans arrt les mol ordonn d unes par rapport aux autres.

v ~ 2 m / s

Un phospholipide donn change de position avec un autre donn ~10 millions de fois par seconde.

- Les glucides: sous forme de glycolipides et glycoprotines. - Les protines: avec 2 types: *Protines intgres (intrinsques): 70 % de l'ensemble, elles sont assez htrognes quand leur poids molculaires. Ces protines peuvent tre lies des oligosaccharides pour former des glycoprotines et sont amphiphiles. *Protines extrinsques: solubles dans les solutions aqueuses, libres des lipides. Ex.: La spectrine, une protine contractile, enleve du stroma. Dans le globule rouge, Le PM des polypeptides varie entre 20.000 240.000 et dont certains ont des activits enzymatiques: glyceraldhyde 3P-deshydrognase (G-3-PD); actylcholinestrase, ATPase et protine kinase. Le rapport lipide/protine varie largement entre les diffrentes membranes cellulaires: - Prdominance des lipides dans la myline (60 %). - Prdominance des protines dans les globules rouges.

c. Architecture molculaire L'application des techniques biophysiques ont amen Singer et Nicolson (1972) proposer le modle de mosaque fluide {Mosaque: constitu d'units de type diffrents; Fluide: souple et dformable} o les protines globulaires sont insres dans la couche bimolculaire de phospholipides. Les membranes biologiques sont des structures fluides dans lesquelles les lipides et les protines peuvent se dplacer l'intrieur. Dans ce modle, les lipides forment une double couche assez discontinue avec des ples hydrophiles et hydrophobes (amphiphiles). Pour les protines intrinsques qui sont amphipathiques, elles sont intgres dans la bicouche lipidique par leurs groupes apolaires alors que les groupes polaires sont dirigs vers la phase aqueuse. Par contre, les protines hydrophiles sont de part et d'autre de la bicouche lipidique. La fluidit de la membrane dans ce modle dpend du degr de saturation des chanes hydrocarbone et de la T ambiante (le point de fusion est suprieur la T de l'organisme).

III. Rles physiologiques de la membrane plasmique

1. Permabilit l'eau Les changes d'eau travers la membrane plasmique ont t prouvs par l'exprience suivante: Des hmaties ont t places dans des solutions diffrentes concentrations de NaCl, Les variations du volume cellulaire ont t constates. Ces variations sont la consquence de la diffrence de concentration de part et d'autre de la membrane plasmique. On constate que l'eau passe du milieu le moins concentr (hypotonique ou hypoosmotique) vers le milieu le plus concentr (hypertonique ou hyperosmotique): cest la loi de l'osmose.
Cellules d lode en milieu hypotonique et hypertonique

Milieu hypotonique tat de turgescence

EAU

Milieu hypertonique tat de plasmolyse

Que se produit-il si on plonge des fruits dans du sucre?

Losmose, c est leau qui se dplace en suivant d Losmose, est l leau dplace son gradient de concentration
Molcules d'eau libres

Molcules d'eau non libres

Les molcules de solut diminuent le nombre de molcules d'eau qui sont libres de se dplacer. L'eau se dplace de l o les molcules libres sont abondantes l o il y en a moins.

Permabilit slective
La double couche de lipides est permable: Aux molcules trs petites (H2O, CO2, O2) Aux molcules liposolubles (hydrophobes, non polaires)

La double couche de lipides est impermable: Aux grosses molcules et la plupart des molcules polaires Aux ions (K+, Cl-, Na+)

Transport passif: Diffusion simple; Diffusion facilite et Osmose Transport actif: Ressemble la diffusion facilite (ncessite un transporteur) MAIS Besoin dune source dnergie (ATP) Peut se faire CONTRE le gradient de concentration

2. Permabilit aux soluts (substances dissoutes) La membrane plasmique n'est pas strictement hmipermable, mais elle permet le passage d'autres substances. a. Substances non lectrolytes A l'oppos de l'eau, les substances non lectrolytes traversent la membrane plasmique selon le gradient de concentration, du milieu le plus concentr vers le milieu le moins concentr. Ce passage se fait par simple diffusion et ne ncessite pas d'nergie. La simple diffusion est lie deux facteurs: - Liposolubilit: La prsence des lipides dans la membrane facilite le passage des substances liposolubles (ex: ther et ctone) travers la membrane plasmique l'oppos des substances hydrosolubles. - Taille des molcules: Les molcules de faible poids molculaire traversent facilement la membrane plasmique, alors que les grosses molcules ont souvent recours aux transporteurs. Certaines substances, non liposolubles et poids molculaire lev, traversent la membrane vers le cytoplasme par un processus plus complexe appel diffusion facilite. En effet, si l'on mesure la cintique de pntration du glucose dans les hmaties on obtient une courbe parabolique. L'analyse de la courbe montre qu' faible concentration de glucose du milieu extracellulaire, le flux travers la membrane plasmique des hmaties est trs important, cependant au del d'une certaine concentration de glucose, on remarque que la vitesse de pntration se stabilise et forme un plateau mme si sa concentration continue d'augmenter. Dans ce type de transport passif particulier, le glucose a besoins, pour traverser la membrane, d'un constituant membranaire qui jouerait le rle de transporteur spcifique. La quantit de ce transporteur devient un facteur limitant la pntration du glucose forte concentration. Celuici est un enzyme appel permase, qui ralise une liaison avec le glucose.

Diffusion facilite

La diffusion se fait par lintermdiaire dune protine de la membrane. N .B. Pas de dpense d nergie Se fait selon le gradient de concentration

Une substance diffuse suivant son gradient de concentration : de la zone la plus concentre la zone qui l est moins. Gradient = diffrence Le gradient de concentration entre deux milieux c'est la diffrence de concentration entre les deux milieux.

b. Substances lectrolytes ExtraCell (mq/l) 145 4 120 7 IntraCell (mq/l) 12 155 3,8 155 PE (potentiel l'quilibre, mV) + 65 - 95 - 90 -

Na+ K+ Cl anions organiques - Concentrations ioniques de la fibre strie de Mammifres (PE = - 90 est le potentiel au repos)

Le sodium et les chlorures ont une concentration leve du ct extracellulaire, alors que le potassium et les anions organiques sont principalement intracellulaires.

La mesure de la diffrence de potentiel transmembranaire a montr que les chlorures sont rpartis de manire passive entre les milieux intra- et extracellulaires, alors que les concentrations du Na+ extracellulaire et du K+ intracellulaire sont loigns des concentrations d'quilibres et ceci devrait entraner un flux de ces ions et tablissement d'un tat stable ou "tat stationnaire". Donc il y a un mcanisme compensateur appel Pompe Na+/K+ ou transport actif qui intervient dans la rpartition de ces ions. Le flux entrant de K+ et le flux sortant de Na+ sont coupls comme il a t montr par les expriences suivantes: a) En absence de tout K+ externe, le flux sortant d e Na+ tombe 30% de sa valeur initiale. b) La mesure de ces flux montre que 3 Na+ sont transports pour 2 ions K+. Pour monter les besoins nergtiques de la pompe Na+/K+, l'application d'un dcoupleur de la synthse d'ATP (ex: dinitrophnol) a provoqu la chute du flux sortant du Na+ et entrant de K+, alors que le flux sortant du K+ et entrant de Na+ ne sont pas affects (flux passive).

3 types de protines de transport selon la direction du transport :

Uniport : une substance dans une direction unique (cas le plus frquent). Symport : deux substances, ensemble dans la mme direction (l'une ne passe pas sans l'autre, les deux doivent passer ensemble).

A A B

A B

A Antiport : deux substances en sens contraire (l'une est change B contre l'autre).

A B

 Antiport

A B

Un ion (Na+ en gnral) diffuse en suivant g gnral) son gradient de concentration ou par transport actif . Ce dplacement permet d dplacement une substance de traverser en sens inverse CONTRE son gradient de concentration.
Pompe Na+ / K+ : le transport actif du Na+ dans une direction permet le transport du K+ dans l'autre.

Symport :

A B

Un ion (Na+ en gnral) diffuse en suivant son g gnral) gradient de concentration. Cette diffusion permet une substance de traverser en mme temps CONTRE son gradient de concentration. Pompe Na+ / glucose (cellules de l'intestin) Le Na+ traverse en suivant son gradient de concentration et le glucose le suit CONTRE son propre gradient.

Des protines de la membrane permettent le passage de ce qui ne peut passer travers les lipides : Forment des canaux travers la membrane

OU sassocient aux molcules transporter et les dplacent dans la membrane

Transporteurs de membrane:

Peuvent se faire et se dfaire rapidement ==> leur nombre peut varier Certains peuvent se fermer et souvrir Sont souvent trs slectifs

DONC la permabilit de la membrane certaines substances peut se modifier

Modalits du transfert de petites molcules travers les membranes biologiques

3. Endocytose et exocytose a. Endocytose L'endocytose est la capture par la cellule d'une substance par invagination de la membrane plasmique puis sa pntration l'intrieur de la cellule sous forme d'une vsicule. Il y a 2 types d'endocytoses: - La phagocytose (Grec phagein=manger): les particules captures sont solides et de grande taille (les bactries de taille de 1 m ou plus). Il y a formation d'une vacuole de phagocytose. - Pinocytose (pinein=boire): des gouttelettes de liquides renfermant des particules ou non sont emprisonnes dans des vsicules d'endocytose suivant 2 phases: *Phase d'accolement: les particules s'attachent aux "cell coat".

*Phase d'ingestion: les particules sont entranes dans la cellule par des mouvements d'invagination de la membrane plasmique grce aux microfilaments. Cette 2me phase ncessite une activit cellulaire et un apport d'nergie (car inhib basse T, en manque d'oxygne et par des poisons mtaboliques).
Phagocytose d une bactrie par un globule blanc

Rle de l'endocytose: L'endocytose intervient dans divers processus: - Digestion cellulaire: chez les protozoaires (amibe). - Stockage des rserves: grains de vitellus des ovocytes et chez certains insectes et vertbrs. - Phnomne de dfense: Phagocytose des bactries par les globules blancs. -Transit des molcules: transport des substances d'une face l'autre des cellules endothliales des capillaires sanguins sans contact avec l'hyaloplasme. b. Exocytose C'est le phnomne inverse de l'endocytose, les substances contenues dans des vsicules sont rejetes dans le milieu extracellulaire sans traverser de la membrane, ceci se fait en plusieurs tapes: - Migration intracellulaire: les vsicules sont entranes par des courants cytoplasmiques et guides par les microtubules. - Apposition: Accolement de la membrane de la vsicule la membrane plasmique, la fusion de ces deux membranes donne le diaphragme. - Dcharge: Rejet du contenu de la vsicule. Un des rles de l'exocytose est l'puration cellulaire, qui ncessite la prsence des ions Ca2+.

Transport des macromolcules Exocytose Endocytose

4. Proprits de la surface cellulaire a. adhsion cellulaire Trois principaux types de contacts: - Revtement de plusieurs cellules par une mme substance (cellulose). - L'agrgation des cellules par du matriel intercellulaire tel que les mucoprotines (lyse par les protases et mucases). - L'agrgation peut impliquer la prsence de canaux intercellulaires. Ex.: chez les vgtaux, prsence de pont cytoplasmiques ou plasmodesmes (connexion troite entre les cellules). b. Inhibition de contact Lorsque les cellules normales sont mises en culture, elles se multiplient et forment un film monocellulaire puis il y a inhibition de division cellulaire par le contact des cellules entre elles. Par contre les cellules cancreuses ou malignes cultives dans les mmes conditions perdent cette inhibition de contact, se multiplient et se dposent en plusieurs couches. Ceci est d un changement dans les oligosaccharides de leur surface cellulaire.

c. Spcificit cellulaire Dans le systme ABO, les molcules responsables du groupe sanguin (glycoprotines) sont la surface des globules rouges. Les individus du groupe A et de B, diffrent seulement par l'ose terminal (N-actyle galactosamine ou galactose). Cette spcificit est due la prsence de 2 enzymes hrits et qui conduisent l'ajout du dernier ose. d. Transmission d'information Chez les organismes pluricellulaires, la transmission de l'information implique la membrane plasmique et peut se faire par 2 voies: - Transmission nerveuse: la communication se fait travers le systme nerveux dont l'unit est la neurone. -Transmission humorale: la communication se fait par la libration des hormones par les glandes dans le sang. 5. Spcialisation de la membrane plasmique La membrane plasmique est capable de diffrenciations structurales qui permettent l'augmentation de la surface cellulaire et l'optimalisation des relations intercellulaires. a. Microvillosits et invaginations Ce sont des expansions qui augmentent la surface de la membrane et par consquent plus d'changes avec le milieu extrieur. Ex: cellules pithliales. b. Contacts intercellulaires Si certaines cellules, comme les hmaties restent isols pendant leur vie, d'autres sont groupes en tissus, leurs membranes cellulaires dveloppent par endroit des zones de jonctions. b. 1. Espace intercellulaire C'est un espace large de 150 200 rempli de ciment glycoprotine (collagne, lastine et polysaccharides) qui a besoins d'ions bivalents (Ca2+, Mg2+) pour assurer cette cohsion. b. 2. Les complexes jonctionnels: Selon leurs fonctions, on distingue: - Jonction de type occludens / Tight jonction: soudure de l'espace intercellulaire certains endroits et assure l'tanchit de l'espace intercellulaire. Ex: cellule pithliale (pas dchanges entre les cellules). - Gap junction / Jonction lacunaire: lespace intercellulaire trs rduit (20). Les cellules sont communicantes et permettent le passage des petites molcules hydrosolubles grce des particules intramembranaires( infrieur 100 daltons). - Desmosomes ou "macula adhrens": 0,5 m de diamtre et 200 ou plus d'espace intercellulaire qui est large et rempli d'un ciment dense aux lectrons. Les membranes plasmiques voisines sont rectilignes et parallles, les faces internes des membranes sont recouvertes des faisceaux et de tonofilaments. Ex.: cellules de l'piderme et des muqueuses.

6. Biogense de la membrane cytoplasmique La membrane plasmique se renouvelle continuellement et ceci tous les stades de la vie cellulaire (division, croissance ou maturit). La vitesse de renouvellement dpend de la demi-vie de ses constituants (demi-vie: dure correspondant au remplacement de la moiti des molcules d'origine par des molcules nouvelles): - Les polypeptides (PM lev): demi-vie 2 5 jours. - Les polypeptides (PM faible): demi-vie 7 13 jours. - Les lipides : demi-vie de 3 5 jours. Lieu de synthse des constituants membranaires: - Les lipides amphiphiles au niveau des membranes du rticulum endoplasmique. - Les polypeptides par les ribosomes: les protines priphriques du ct hyaloplasmique par les ribosomes libres, celle situes sur le ct externe et les protines intgres par les ribosomes attachs aux membranes du rticulum endoplasmique.