Microscopio: Instrumento que amplifica la observacin de objetos diminutos.

La palabra microscopio proviene de dos voces griegas, MIKROS, pequeo y SKOPEIN, observar, ver, mirar, examinar. El descubrimiento del microscopio compuesto es contemporneo al de lupas, se considera a Zacharias Janssen como el primer constructor en 1590. La funcin principal del microscopio es permitir que el observador distinga con claridad estructuras y puntos que estn separados por distancias cortas y que no son perceptibles a simple vista. La propiedad de hacer que las imgenes de las cosas se vean mas grandes e conoce como Ampliacin o Magnificacin, y la capacidad de distinguir detalles entre dos puntos muy cercanos se conoce como Poder de Resolucin (PR) o Poder de Separacin. Partes de un microscopio El microscopio ptico, simple o compuesto (vea tipos de microscopios), tiene una serie de componentes bsicos caractersticos, cada uno con una funcin especfica que se complementa con la funcin de los dems para hacer posible el funcionamiento del microscopio. Sistema mecnico del microscopio

Tornillo micromtrico o microscpico: al mover este tornillo se mueve la muestra de forma vertical pero se producen movimientos muy cortos permitiendo enfocar la muestra de forma ms precisa. La distancia mnima que mueve este tornillo puede variar pero por lo general es de 0,001mm. Platina: la platina es la parte del microscopio dnde se coloca la muestra a observar. Es una pieza plana con un orificio a travs del cul pasar la luz que ilumina la muestra para que pueda ser observada. La platina puede ser fija o mvil horizontalmente. Siempre se mueve verticalmente mediante los tornillos macro y micromtricos para enfocar la muestra. Pinzas: van unidas a la platina y se utilizan para sujetar la muestra. Revlver: el revolver es una pieza circular al que se unen diferentes objetivos de distintas caractersticas. Al girar el revlver se va pasando a trabajar de un objetivo a otro.

Partes del sistema ptico

Todo microscopio cuenta con un sistema mecnico. Esta parte mecnica est compuesta por el soporte o pie, columna o brazo, macromtrico, micromtrico, revolver, pinzas, platinas, etc. Cada parte mecnica del microscopio tiene una determinada funcin. En su conjunto sostienen al sistema ptico y al sistema de iluminacin adems de contar con la estructura adecuada para permitir los movimientos necesarios para enfocar a la muestra que se quiere observar. Pie, soporte o base: Esta pieza consta de la base sobre la que se apoyan todas las dems partes del microscopio. La base suele tener forma rectangular o forma de Y. Si el microscopio lleva incorporada la fuente de iluminacin, esta suele ir integrada en la base. Brazo: El brazo, tambin llamado columna o asa, es una pieza que generalmente tiene forma de C. El brazo se une en su parte inferior a la base, en la parte media va anclada la pletina y en la parte superior del brazo se encuentra el sistema de tubos pticos (oculares y revolver con objetivos). Tambin van unidas al brazo otras partes del microscopio como el condensador, diafragma, tornillos macro y micromtricos, etc. Tornillo macromtrico o macroscpico: este tornillo se utiliza para hacer un enfoque grueso rpido de la muestra. Al mover el tornillo macromtrico, mediante un sistema de cremallera, se producen movimientos largos en sentido vertical de la pletina.

El sistema ptico es la parte del microscopio encargada de generar la imagen que llega al observador. Las caractersticas del sistema ptico determina el mximo aumento que puede conseguir el microscopio. El sistema ptico de un microscopio ptico se compone del ocular y del objetivo. Ocular: el ocular de un microscopio se sita en la parte superior. Es la parte del microscopio ms cercana al ojo del observador. El ocular aumenta la imagen proyectada por el objetivo. El poder de aumento del ocular no es muy alto comparado con los aumentos de los objetivos. Por lo general, el ocular de un microscopio no es fijo sino que es intercambiable segn las necesidades. El poder de aumento del ocular va desde 5x a 20x. Aunque se pueden encontrar oculares con un poder de aumento superior a 20x, estos son menos comunes y suelen ser oculares especiales. Tambin se pueden encontrar oculares con distintas caractersticas especiales, por ejemplo, hay oculares que llevan grabado una regla micromtrica para medir el tamao de las estructuras observadas al microscopio. Objetivos: el objetivo es la parte del microscopio encargado de la captacin y aumento de la imagen. Esta imagen es proyectada al ocular y el ocular hace otro aumento, aunque por lo general mucho menor del aumento que realiza el objetivo. El objetivo va unido al revlver, al que van unidos otros objetivos con diferentes caractersticas. El objetivo es la parte del sistema ptico de un microscopio ms cercana a la muestra. Hay diferentes tipos de objetivos siendo los ms importantes los objetivos secos y los objetivos de inmersin. Objetivos secos: Lo objetivos secos reciben este nombre porque, a diferencia de los objetivos de inmersin, no necesitan colocar ningn lquido entre el objetivo y la preparacin a observar. El poder de aumento de los objetivos secos ms comunes es de 4x, 10x, 20x, 40x y 60x. En un mismo microscopio puede haber varios

objetivos secos unidos al revlver y se usar uno u otro dependiendo de la finalidad que persigamos. Por ejemplo, se suele hacer un primer enfoque con el objetivo de menor poder de aumento y se van pasando a objetivos de mayor aumento para hacer un enfoque ms fino. Objetivo de inmersin: los objetivos de inmersin consiguen ms aumentos que los objetivos secos, por lo general, de 100x a 200x. El sistema de lentes es ms complejo que el de los objetivos secos. Entre la primera lente del objetivo y la preparacin a observar se coloca una gota de aceite de cedro. El aceite y la lente frontal del objetivo han de permanecer en contacto durante la observacin. Partes del sistema de iluminacin del microscopio

Tipos de microscopios La continua curiosidad cientfica llev al hombre a querer ver ms all de lo que ojo humano puede distinguir y as lleg a la invencin del microscopio. En la historia del microscopio el primero en aparecer fue el microscopio ptico. Para describir los diferentes tipos de microscopios, estos se pueden dividir en dos grandes grupos en funcin de la fuente energtica que utilice: Microscopio ptico: tambin llamado microscopio fotnico. Este tipo de microscopio utiliza la luz como fuente energtico. Microscopio electrnico: este tipo de microscopio utiliza un haz de electrones. Tipos de microscopios pticos Este tipo de microscopios engloban a todos lo que utilizan luz en combinacin con lentes pticas para aumentar la imagen de la muestra que se observa (vea funcionamiento de un microscopio ptico). A su vez, existen varios tipos de microscopios pticos, desde el ms simple que lleva una sola lente convexa doble, a los microscopios compuestos con varias lentes en serie. Los microscopios pticos pueden tener aumentos desde 15x a ms de 2000x. Microscopio compuesto o de campo claro

Otra parte del microscopio es el sistema de iluminacin. El sistema de iluminacin puede hacer uso de luz natural (solar), recogiendo la luz a travs de un sistema de espejos, o puede utilizar un foco de luz artificial. Esta luz se dirige hacia la muestra a observar, la cual se sita entre la fuente de iluminacin y el sistema ptico. En definitiva, el sistema de iluminacin tiene por funcin dirigir la luz a la muestra, modificarla para que llegue de forma adecuada y, en su caso, tambin est encargado de producir la luz. Fuente de iluminacin: en caso de que el microscopio produzca la luz para iluminar la preparacin, llevar una fuente de luz que, por lo general, es una lmpara incandescente de tungsteno, pero se pueden encontrar microscopios ms modernos que utilizan tecnologa LED como fuente de iluminacin. Entre la fuente de iluminacin y la preparacin estar el condensador y el diafragma, cuyas caractersticas veremos a continuacin. Espejo: el espejo dirige la luz hacia la muestra en caso de que la fuente de iluminacin no est incorporada como parte del microscopio. El espejo de los microscopios suele tener dos caras, una cncava que se utiliza preferentemente con luz artificial, y una cara plana que se suele utilizar con luz natural. Condensador: el condensador es un sistema de lentes que concentra los rayos provenientes de la fuente de iluminacin sobre el plano en el que se sita la preparacin. Del condensador sale un cono de rayos de luz que ha de tener el mismo ngulo que el ngulo del campo del objetivo utilizado. Para conseguir que estos ngulos coincidan, el condensador se puede mover en el eje vertical a travs de un sistema de cremallera. De forma general, hay que alejar el condensador si se utilizan objetivos de pocos aumentos y acercalo a la muestra si se utilizan objetivos de mayores aumentos; incluso existen condensadores de inmersin que, al igual que los objetivos de inmersin, necesitan aceite entre la lente y la muestra. Diafragma: el diafragma sirve para reducir o ampliar el dimetro de la abertura por la que pasa la luz. Hay que regular esta abertura para ajustarla a la abertura del objetivo y as conseguir un contraste adecuado. Si la abertura del diafragma es mayor que el campo de observacin habr menos contraste al haber ms luces parsitas.

Este tipo de microscopio es el ms utilizado con diferencia. Se puede llamar microscopio ptico compuesto, microscopio de campo claro o, de forma ms usual, simplemente microscopio compuesto. Se denomina compuesto debido a que lleva dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular (vea partes del microscopio ptico). Ambos sistemas de lentes aumentan la imagen de la preparacin observada. La preparacin debe teirse, para lo cul se utilizan diferentes colorantes segn sus caractersticas y afinidad por las estructuras que se quieren observar. El teido es necesario para que los objetos observados resalten sobre el fondo brillante proveniente de la fuente luminosa, de ah que tambin se llame a este tipo de microscopio con el nombre de microscopio de campo claro. Microscopio de campo oscuro

Este tipo de microscopio permite ver partes internas de la preparacin. Los objetos observados son iluminados de forma intensa, los objetos dispersan la luz y as resaltan sobre el fondo oscuro. El efecto es semejante a cundo se observan las motas de polvo cundo se cuela un rayo de luz por la ventana en una habitacin cerrada que est a oscuras. Microscopio de fase

El microscopio de fase cuenta con un dispositivo que provoca diferencias en la longitud de onda de unos rayos del haz de luz respecto a otros. Esta diferencia hace que la muestra iluminada presente diferencias de luminosidad entre sus estructuras, esto permite observar con mayor detalle y nitidez estructuras internas de la muestra. Microscopio de fluorescencia

observar al microscopio electrnico de transmisin necesita ser cortada en lminas muy finas, del orden de 50 a 200nm.La imagen obtenida con este tipo de microscopio es en blanco y negro y son imgenes en dos dimensiones que se pueden plasmar en una pelcula fotogrfica. Microscopio electrnico de barrido (SEM)

La fluorescencia es un fenmeno por el cul algunas sustancias, al ser iluminadas con una radiacin de onda corta, emiten una radiacin de onda ms larga. Este fenmeno es aprovechado por este tipo de microscopio ptico. El microscopio de fluorescencia presenta una potente fuente de luz que incide sobre la muestra y provoca la fluorescencia de ciertas estructuras que han sido marcadas con sustancias fluorescentes haciendo posible su observacin Otros tipos de microscopios pticos Microscopio petrogrfico o de polarizacin Microscopio de luz ultravioleta Microscopio de campo cercano Tipos de microscopios electrnicos Aunque en teora no hay lmite de aumentos que se pueden conseguir con un microscopio ptico, en la prctica existen limitaciones tcnicas, grandes limitaciones si se compara con los aumentos que se pueden conseguir con un microscopio electrnico. Este tipo de microscopios utilizan un haz de electrones en lugar de un haz de fotones, y campos electromagnticos en lugar de lentes. Aunque los principios bsicos de funcionamiento son similares, el microscopio electrnico consigue aumentos de hasta 1000000x con un poder de resolucin de 0,1nm (0,0000001mm), en comparacin con los aumentos de 2000x y resolucin de 0,2mcm (0,0001mm) del microscopio ptico. Los elementos bsicos de un microscopio electrnico son el can de electrones, que emite un haz de electrones, un campo electromagntico para dirigir y enfocar el haz de electrones sobre la muestra, y un sistema de vaco para eliminar el aire y evitar que sus molculas desven los electrones.Existen dos tipos bsicos de microscopios electrnicos: microscopio electrnico de transmisin (TEM) y microscopio electrnico de barrido (SEM). Microscopio electrnico de transmisin (TEM)

A diferencia del microscopio electrnico de transmisin, el microscopio electrnico de barrido recoge los electrones que rebotan, en lugar de los que atraviesan la muestra. Se realiza un barrido sobre la superficie de la muestra. No necesitan los cortes microscpicos como el TEM. Su funcionamiento consiste en pasar un haz de electrones muy concentrado por toda la superficie de la muestra, cuyas estructuras dispersan a los electrones. Un dispositivo electrnico situado ambos lados de la muestra recoge los electrones dispersados. Cada punto que recibe electrones representa un pixel en la imagen obtenida, cuntos ms electrones incidan en el mismo punto, ms brillante ser. La imagen obtenida con el microscopio electrnico de barrido es tridimensional, lo que permite estudiar con gran precisin la forma y tamao de estructuras celulares. Esta es la principal ventaja del SEM sobre el TEM. Sin embargo, el microscopio electrnico de barrido tiene menos potencia, slo llega a 100000x y a una resolucin 1000 veces inferior al TEM. Otro inconveniente es que permite observar slo la superficie de los objetos estudiados y no su interior. Existe un tipo de microscopio electrnico de barrido y transmisin a la vez; se combinan las ventajas del TEM y del SEM llegando a poderse visualizar incluso tomos individuales. Otros tipos de microscopios electrnicos

Microscopio sonda de barrido Microscopio de tnel de barrido Microscopio de fuerza atmica TCNICA DE TINCIN HEMATOXILINA - EOSINA La tincin hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla de hematoxilina y eosina. La tincin hematoxilina y eosina es el mtodo mas popular de tincin utilizado en histologa y medicina diagnostica. El mtodo supone la aplicacin de la tincin de hematoxilina, que tie estructuras acidas (basofilas) entonos azul y prpura, y el uso de eosina que tie componentes bsicos (acidofilos) en tonos de color rosa. Hematoxilina Es un producto natural que al ser oxidado constituye una substancia de color morado oscuro denominada hematena. Se utiliza en histologa para teir los componentes aninicos (cidos)

El haz de electrones emitido por el can se dirige sobre la muestra que se quiere observar. Una parte de los electrones chocaran y rebotarn o sern absorbidos, mientras que otra parte atravesarn la muestra. Los electrones que atraviesan la muestran son los que crean la imagen aumentada del objeto.La muestra que se quiere

de los tejidos, a los que da una coloracin violeta. Tie intensamente los ncleos de las clulas, dado que estos contienen cidos nucleicos ricos en radicales cidos. Tal como se obtiene de la planta e incluso luego de sufrir el proceso de oxidacin, su capacidad de tincin es muy limitada. Por lo tanto, debe combinarse con iones metlicos, especialmente las sales de hierro (III) o aluminio (II), que actan como mordientes. Si bien la hematoxilina es una sal neutra, suele ser denominada como un colorante bsico, ya que el componente cromgeno reside en el complejo catinico (bsico) de la misma. Es de notar que la tincin histolgica por hematoxilina no indica tanto la constitucin qumica de los componentes celulares, sino la densidad de cargas elctricas negativas de los mismos. Eosina Se trata de una solucin de eosina. Colorante cido. Utilizado como colorante de contraste de la hematoxilina en la tincin Hematoxilina-Eosina. Aplicaciones: Colorantes y soluciones para: anatoma, citologa, histologa, hematologa .Kits para bacteriologa y productos para qumica clnica Tcnica: Sumergir los preparados histolgicos en xilol para eliminar los excesos de parafina. Luego pasan por una serie de alcoholes (100. 95 y 70).Se lava en agua para eliminar exceso de alcohol Se sumerge en hematoxilina por 10 minutos, luego se lava en agua para eliminar excesos y se pasa rpidamente por alcohol cido. Se lava nuevamente Se sumerge 30 segundos en eosina. Se pasa por otra serie de alcoholes, en orden creciente (70, 95 y 100).Finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol, antes de realizar el montaje final.
TEJIDO EPITELIAL Cubren todas las superficies del cuerpo, excepto las cavidades articulares. Descansa sobre una membrana basal y un tejido conectivo subyacente. Por lo general son avasculares. Se nutren por difusin desde los vasos del tejido conectivo subyacente Posee escasa sustancia intercelular. Posee diversidad de funciones. Posee una amplia multiformidad estructural. Posee una marcada capacidad para renovarse y regenerarse Posee la capacidad para desarrollar cambios morfolgicos y funcionales de un tipo de epitelio a otro (metaplasia) cuando las condiciones del medio local se alteran crnicamente. Derivan de las tres capas germinativas: ectodermo, mesodermo y endodermo.

TEJIDO CONECTIVO Llamado tambin tejido conjuntivo. Es el tejido que forma una continuidad con tejido epitelial, msculo y tejido nervioso, lo mismo que con otros componentes de este tejido para conservar al cuerpo integrado desde el punto de vista funcional. Presenta diversos tipos de clulas. Tiene abundante material intercelular. Tienen gran capacidad de regeneracin. Es un tejido vascularizado.

TEJIDO MUSCULAR Formado por las fibras musculares o miocitos. Compone aproximadamente entre el 40% y 45% de la masa de los seres humanos y est especializado en la contraccin, lo que permite que se muevan los seres vivos. Como las clulas musculares estn altamente especializadas, sus orgnulos necesitan nombres diferentes. La clula muscular en general se conoce como fibra muscular; el citoplasma como sarcoplasma; el retculo endoplsmico liso, retculo sarcoplsmico liso; y en ocasiones las mitocondrias, sarcosomas. A la unidad anatmica y funcional se la denomina sarcmero. Los tres tipos de msculo derivan del mesodermo. El msculo cardaco tiene su origen en el mesodermo esplcnico, la mayor parte del msculo liso en los mesodermos esplcnico y somtico y casi todos los msculos esquelticos en el mesodermo somtico. Hay tres tipos de tejidos musculares clasificados con base en factores estructurales y funcionales. En el aspecto funcional, el msculo puede estar bajo control de la mente (msculo voluntario) o no estarlo (msculo involuntario). En lo estructural, puede mostrar bandas transversales regulares a todo lo largo de las fibras (msculo estriado) o no presentarlas (msculo liso o no estriado).

TEJIDO NERVIOSO Las clulas que lo forman se llaman neuronas y son sumamente modificadas. presentan un cuerpo celular de forma estrellada con un citoplasma con gran cantidad de neurofibrillas. el cuerpo celular posee numerosas prolongaciones exteriores de diferente longitud: las dendritas, cortas y muy ramificadas, y el axn, mucho ms largo y slo ramificado en su extremo terminal. el espacio intercelular est ocupado por clulas de tejido conjuntivo. el tejido nervioso constituye los rganos que integran el sistema nervioso. sus funciones son la recepcin, la conduccin y la transmisin de los Impulsos Nerviosos. El tejido nervioso est formado por 2 tipos de clulas: Neuronas: existen de varias formas y tamaos. Se encargan de recibir y transmitir los impulsos nerviosos. Neuroglias: grupo de clulas que ayudan en sus funciones vitales a la neurona (sostn, nutricin, defensa, etc.)