UNIVERSIDADE ESTADUAL DO PIAU - UESPI FACULDADE DE CINCIAS MDICAS - FACIME CURSO DE MEDICINA - BLOCO IV DISCIPLINA: FARMACOLOGIA PROFESSORES: MARIO

RAULINO E FABRICIO AMARAL

DETERMINAO DA DOSE LETAL EM Mus musculus

JOEUDES DA SILVA BARBOSA (1033345)

TERESINA, AGOSTO DE 2012.

INTRODUO

As substancias qumicas transformadas em frmacos devem ter eficcia teraputica e serem seguras. Infelizmente, todas as substancias qumicas tem potencial para causar efeitos indesejveis. Por essa razo, durante o desenvolvimento dos frmacos, essencial escolher compostos qumicos que tenham uma margem de segurana entre a dose que produz o efeito desejado (teraputico) e a que causa efeitos indesejveis (txicos). A margem de segurana de alguns frmacos pequena e algumas pessoas ingerem doses excessivas intencionalmente. Por esse motivo, os efeitos txicos dos frmacos so encontrados com frequncia. (GOODMAN & GILMAN, 2005, p.51)

O estudo da relao dose-resposta ou de dose-efeito muito importante em toxicologia, pois essa relao gradativa em determinado individuo, levando a um aumento da magnitude da resposta medida que a dose aumenta. Numa relao dose-resposta quntica, a porcentagem de uma populao afetada crescente na medida em que a dose tambm crescente, sendo o efeito especificado como presente ou ausente em determinado individuo. Tal fenmeno dose-resposta quntica usado para determinar a dose letal mdia (DL50) dos frmacos e de outros compostos qumicos. (GOODMAN & GILMAN, 2005). A dose efetiva mediana de um frmaco a dose necessria para produzir um efeito especifico em 50% da populao e abreviada por DE 50 e a razo entre a dose letal e a dose efetiva mediana chamado de ndice teraputico, uma afirmao de quo seletivo o frmaco na produo dos seus efeitos desejados versus (efeitos) adversos (GOODMAN & GILMAN, 2005).

MATERIAIS E MTODOS

Foram utilizados um total de 12 camundongos da espcie Mus musculus distribudos em trs grupos de quatro animais, pincis para marcao dos mesmos, seringas de 1ml munidas de agulhas com calibre 13X4, 5 mm, 3 frascos com soluo anestsica de tionembutal sdico, uma para cada grupo de alunos, bancadas A, B e C nas concentraes respectivas de 5, 10, 20mg/ml, balana digital, relgios com cronmetro. Inicialmente, todos os grupos realizaram a identificao dos seus camundongos a partir da pintura da pelagem com pincel, associando uma determinada numerao aleatoriamente escolhida, ou de uma outra forma (ficou a critrio de cada grupo) e depois os pesaram a fim de calcular a dose de anestsico a ser injetada via intraperitoneal. Para o grupo A, foi estabelecida a dose de 50mg/kg e a concentrao da droga a ser utilizada foi de 5mg/ml. Os grupos B e C utilizaram dose de 100mg/kg e soluo de 10mg/ml; dose de 200mg/kg e soluo de 20mg/ml, respectivamente. Estabelecidas as relaes matemticas adequadas, cada animal recebeu sua injeo de acordo com o seu peso, sendo que os valores obtidos foram os seguintes: grupo A (camundongo rabo cortado, com 28g, recebeu 0,28 ml s 08: 56; camundongo azul, com 31g, recebeu 0,31ml s 09h02min; camundongo azul/preto, com 28g, recebeu 0,28 ml s 09h03min e camundongo branco, com 26g, recebeu 0,26ml s 09h05min. Grupo B (camundongo 1, com 30g, recebeu injeo intraperitoneal de 0,3ml de anestsico s 08h35min; camundongo 2, com 29g, recebeu 0,20ml s 08h56min; camundongo 3, com 24g, recebeu 0,24ml s 08h59min e o camundongo zero, com 30g, recebeu 0,3ml s 09h00min; grupo C animais identificados como cabea, cauda, dorso e sem marca segundo possussem ou no a pintura-controle na pelagem (cabea, com 24g, recebeu 0,24ml s 08h55min; cauda, com 30g, recebeu 0,3ml s 08h56min; sem marca, com 26g, recebeu 0,26ml; dorso, com 33g, recebeu 0,33ml s 09h00min Aps a aplicao, foram esperados 20 minutos, aps os quais foram determinados, para cada dose, a porcentagem e animais anestesiados e a porcentagem de animais mortos. Obtidos os referidos dados em cada grupo, foram completadas tabelas e traados grficos mostrando nas abscissas os valores das doses e nas ordenadas a porcentagem dos efeitos.

RESULTADOS

TABELA 1 DOSE-RESPOSTA COLETIVA RELACIONANDO A PORCENTAGEM DE CAMUNDONGOS DA ESPCIE Mus Musculus QUE RESPONDERAM AO EFEITO E DOSE DA DROGA UTILIZADA, TERESINA, 2012.

DOSAGEM

N ANIMAIS

SEDADOS MORTOS % SEDADOS % MORTOS

GRUPO (50MG/KG)

A 04 00 00 00 00

Grupo

B 04 04 00 100 00

(100MG/KG)

Grupo

C 04 04 04 100 100

(200MG/KG)

LEGENDA: ( N) = NMERO; ( % ) = PORCENTAGEM; ( MG ) = MILIGRAMA; ( KG ) = KILOGRAMA.

FONTE: LABORATRIO DE FARMACOLOGIA DA FACULDADE DE CINCIAS MDICAS, UESPI. ALUNOS DE MEDICINA, 25 TURMA, TERESINA, 2012

GRFICO 1 CURVA DOSE-EFEITO OBTIDA PELA ADMINISTRAO DE TIOPENTAL SDICO POR VIA INTRAPERITONEAL EM ESPCIMES Mus musculus NAS DOSES 50, 100, 200 MG/KG, TERESINA, 2012.

FONTE: LABORATRIO DE FARMACOLOGIA DA FACULDADE DE CINCIAS MDICAS, UESPI. ALUNOS DE MEDICINA, 25 TURMA, TERESINA, 2012.

DISCUSSO

O potencial para causar danos sade humana que determinadas substncias de uso farmacolgico possuem pode ser avaliado a partir de estudos da relao dose-efeito. Testes que busquem analisar esses fatos so realizados para que se possa classificar adequadamente as drogas ou frmacos segundo seu potencial de toxicidade e de letalidade. Outros parmetros podem ser investigados nos estudos de toxicidade sistmica aguda, identificando o potencial toxico em rgos especficos, a toxicocintica, os mecanismos de ao txicos, fornecer parmetro de diagnostico e tratamento das intoxicaes agudas e informaes pra o estabelecimento de comparaes com outras substancias de mesma classe. (VALADARES, 2006). O estudo da dose se chama posologia e a dose de um medicamento no uso clnico deve ser suficiente e nunca em demasia. A regra geral da posologia, segundo os estudiosos, aquela suficiente para produzir o efeito teraputico e timo com a menor quantidade de medicamento, e se possvel, sem se observarem reaes adversas e efeitos colaterais. Em clinica, as doses usadas so as doses mdias interpretadas de acordo com relaes matemticas especficas, pois, mesmo pacientes idnticos em todos os aspectos no respondem de maneira uniforme a uma mesma dose de medicamento. ( PENILDON, 2002).
A dose aplicada visa concentrao do medicamento na biofase (uso sistmico ou tpico) onde ele vai agir, constituindo um meio estimulante ou depressor das clulas atingidas. A concentrao tima representa a dose adequada. Quando surgem reaes adversas, a dose dever ser alterada ou se suspende a medicao. Em certos caos, coma na prtica anestesiolgica, as respostas teraputicas e as reaes adversas podem ser observadas no momento da administrao das drogas. Em outras eventualidades, como, por exemplo, no uso dos antibiticos, a dose correta depender de inmeras outras determinaes: concentrao plasmtica, prova da atividade

bacteriolgica do antibitico, alterao bioqumica etc. (PENILDON, 2002, p. 123 -124).

Para muitas drogas, o peso do paciente, sua idade e condio clinica, sensibilidade e resposta ao tratamento, antagonismo ou sinergismo so fatores que influem na dose correta; quando o caso clinico permite, o estabelecimento da dose pode ser por tentativa cuidadosa.

Por outro lado, nos casos mais graves, a pode-se empreender um tratamento agressivo e, em ambas as possibilidades, a posologia inadequada da substncia indicada to prejudicial quanto o uso da droga no indicada. Embora as doses usuais constituam bons guias, os seus limites no so rigorosos (rgidos), e os nveis superiores sugerem que doses maiores aumentam a possibilidade de toxicidade ou podem no trazer vantagem teraputica, assim como doses tambm menores. Dose inicial mnima aquela dada a um paciente que jamais tomou certa droga e representa a menor quantidade capaz de produzir um efeito teraputico. Se o efeito satisfatrio, mantm-se a dose; se desejado um efeito mais intenso, aumenta-se a dose. A dose mxima representa a maior dose que se pode tolerar sem sintomas txicos. (PENILDON, 2002).
A dose mnima mortal ou letal se refere menor quantidade de droga capaz de produzir a morte. A dose letal ou mortal mediana a dose que se determina em animais de laboratrio em condies controladas. Significa que a dose mortal para uma porcentagem de animais, usualmente 50%, de onde surgiu a expresso dose letal 50% (DL50). A dose teraputica ou eficaz se situa entre as doses teraputicas, mnima e mxima. (PENILDON, 2002, p.124)

A dose efetiva mediana de um frmaco aquela necessria para se conseguir um efeito especificado em 50% da populao conhecida, abreviada por DE50. A relao entre DL 50 e DE 50 expressa o ndice teraputico, uma descrio do grau de seletividade do frmaco proporcionar os efeitos indesejveis em detrimento dos efeitos teraputicos (BRUTON, 2007). No trabalho com animais de laboratrio, a letalidade representa um dos efeitos de maior convenincia a ser observado sobre a toxicidade de uma droga. Todas as drogas tem a capacidade de causar a morte, que representa um ponto definido e de fcil percepo, rpida e reconhecida inequivocadamente e, como j referido, a dose capaz de levar morte 50% dos animais testados em determinado perodo de tempo designada dose letal mediana, representada por DL50. (BRUTON, 2007) Um ndice teraputico (relao DL50/DE50) superior a 10 indica que o frmaco razoavelmente seguro, por conta do seu grau de seletividade de especificidade, que so elevados, o que significa que as respostas observadas geralmente so decorrentes de um nico mecanismo de ao, concorrendo para uma menor oportunidade para efeitos indesejveis. (FERREIRA, 2006).

Dessa forma, observando o grfico de relao dose efeito, construdo a partir dos dados coletados nas experincias que foram realizadas, com a aplicao intraperitoneal de doses especficas do anestsico tionembutal sdico em espcimes de Mus musculus pode-se verificar que a dose efetiva aproximadamente 70mg/kg e a dose letal aproximadamente 150mg/kg, com uma relao DL50/DE50 (ndice teraputico) aproximadamente igual a 2.14, demonstrando que o frmaco em questo tem um baixo nvel de segurana, j que esse valor est muito menor do que 10. A droga dever ser utilizada com muita cautela porque a dose teraputica e a txica tem valores muito proximos

CONCLUSO

Atravs do experimento observou-se o resultado da dose letal de um medicamento, quando administrado em quantidades acima das doses teraputicas. Pde-se tambm evidenciar o tamanho da importncia de se conhecer o ndice teraputico de um frmaco para a formulao de uma nova droga, bem como do uso da dose letal para o estabelecimento de classes toxicolgicas de produtos qumicos e farmacolgicos a fim de orientar a escolha de uma teraputica para tratamento clinico, correlacionando seus riscos e benefcios.

REFERNCIAS

BRUTON, L.L ; ET AL. Goodman & Gilman: As Bases Farmacolgicas da Teraputica. 11 ed. Rio de Janeiro: Mcgraw-Hill Interamericana, 2007.

SILVA, P. Farmacologia. 6 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002.

VALADARES, M.C. Avaliao de Toxicidade Aguda: estratgias aps a era do teste DL50. Revista Eletrnica de Farmcia Vol. 3(2), 93 98, 2006, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal de Gois GO. DISPONVEL EM: < HTTP:// EBAH.COM.BR/CONTENT/ABAAABProAIdose-letal > ACESSADO EM 30/08/12

WANNMACHER, L. FERREIRA, M.B.C. Farmacologia Clnica para Dentistas. 3 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007 . DISPONVEL EM: < HTTP:// EBAH.COM.BR/CONTENT/ABAAABProAIdose-letal > ACESSADO EM 30/08/12.