CONCEPTOS DE LA PRCTICA DE ENTEROBACTERIAS 1. Diferencia entre McK y EMB McK: lo compone sales biliares y violeta cristal.

El indicador de pH es el rojo neutro. EMB: Contiene sucrosa y lactosa. Utiliza como inhibidor e indicador a eosina azul de metileno.

McK:

EMB:

2. Qu diferencia existe entre Salmonella-Shigella (SS) y McK SS: contiene Sales biliares, tiosulfato, lactosa y rojo neutro

SS:

En SS las colonias productoras de cido sulfhdrico tienen pigmento negro, como lo ven del lado derecho. 3. Qu papel cumple el tiosulfato en el medio SS? El tiosulfato es la fuente de azufre para la produccin de cido sulfhdrico de las bacterias sulfato-reductoras. Este cido reacciona con la sal de hierro y se forma sulfuro de hierro de color negro. Las colonias de Salmonella se observan transparentes con un precipitado negro en el centro. 4. En el Kligler, indique el significado de: K: alcalino (color rojo) A: Acido (color amarillo)

K/A La bacteria metaboliza slo la glucosa: en la superficie la utilizar por va respiratoria, y donde la tensin de oxgeno disminuya lo suficiente, emplear una pequea proporcin por va fermentativa. Esto generar una pequea cantidad de cidos que sern neutralizados por las aminas derivadas de la decarboxilacin oxidativa de las protenas. Como resultado, el medio mantendr su color rojo en la superficie, al no haber cambiado de pH. Por el contrario, las bacterias crecidas en la profundidad emplearn desde el primer

momento la glucosa por va fermentativa, generando cidos que no sern neutralizados, provocndose un descenso del pH y el color del medio en el fondo del tubo cambiar a amarillo.

A/A Si la bacteria, adems fermenta lactosa: los cidos producidos modificarn tambin el pH de la superficie del medio. Las aminas no son capaces de neutralizar la cantidad de cidos producidos en esta fermentacin, ya que la lactosa se encuentra en el medio a mayor concentracin que la glucosa (10% lact y 1% glucosa). El color del medio en la superficie cambiar a amarillo.

K/K Si la bacteria es aerobia estricta (no fermentadora), el medio permanece de color rojo. Los azcares son respirados, degradndose completamente hasta CO2, que se elimina y no modifica el pH.

A/A(g) aparicin

de

burbujas,

rotura

elevacin

del

agar

del

fondo

del

tubo.

K/A(H2S) aparicin de un precipitado de color negro en el fondo del tubo. Algunas bacterias respiradoras anoxobinticas son capaces de emplear el tiosulfato sdio como aceptor final de electrones en la cadena transportadora. Este compuesto se reduce a cido sulhdrico que reacciona con el hierro Fe2+ presente en el medio formando un precipitado negro de sulfuro de hierro. 5. Qu diferencia existe entre el rojo de metilo y el VP? Se aade rojo de metilo como indicador que es rojo a pH <4.3. y amarillo a pH >4.3. Metabolismo anaerbico (fermentacin) que puede ser de 2 tipos dependiendo de los productos finales obtenidos: 2.1 fermentacin cido-mixta: productos finales son cidos orgnicos (frmico, actico, lctico y succnico) y etanol

2.2 fermentacin butiln gliclica: productos finales son compuestos neutros como el butanodiol y el etanol, producindose acetona como intermediario. La liberacin de cidos orgnicos generar un acusado descenso del pH que podr ser detectado aadiendo al medio un indicador de pH como el rojo de metilo (rojo a pH 4.0). Si la fermentacin que se ha llevado a cabo produce acetona puede ser detectada aadiendo al medio KOH y alfa-naftol que reaccionarn con este compuesto produciendo rojo caracterstico.

6. En qu consiste la prueba del indol?

Se emplea para detectar la presencia de la enzima triptofanasa en bacterias, que degradan el aminocido triptfano a indol. Para observar la reaccin se usa el reactivo de Kovacks o de Erlich.

6. Qu sustancia contiene el reactivo de reactivo de Kovacks o de Erlich? p-dimetilaminobenzaldehdo

7. Qu contiene el citrato? Medio con citrato de Simmons: Este medio indica la capacidad de las bacterias de metabolizar el citrato. Contiene citrato como nica fuente de carbono, fosfato de amonio como nica fuente de fosfato y azul de bromotimol como indicador de pH

8. En qu consiste la fenilalanina?

Las desaminasas catalizan la prdida de NH3 en un aminocido originando un cido carboxlico. El aminocido presente es la fenilalanina, empleado para determinar la presencia de la enzima fenilalanina desaminasa en bacterias. La accin de esta enzima se evidencia por la aparicin en el medio del producto resultado (cido fenilpirvico) que se detecta mediante adicin de cloruro frrico, resultando un compuesto de coloracin verde oscuro

9. Deteccin de la rea. Ureasa Este enzima hidroliza la urea (H2N-CO-NH2) y origina amonio lo que producir un incremento del pH. Las bacterias se inoculan en un medio con glucosa-peptona y urea al 2%. Como indicador de pH se utiliza rojo fenol

Negativo Positivo