INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAO, CINCIA E TECNOLOGIA DO CEAR CAMPUS DE FORTALEZA EIXO TECNOLGICO DE QUMICA E MEIO AMBIENTE DISCIPLINA DE MICROBIOLOGIA

SANITRIA E AMBIENTAL CURSO TECNOLGICO EM GESTO AMBIENTAL

ALAN MAYCON FERREIRA DA SILVA ARTHUR VICTOR QUEIRS ARNOLD FRANCISCO ROBRIO ALBUQUERQUE PACELLI RODRIGO DA SILVA OLIVEIRA

AVALIAO DA QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA PARA BALNEABILIDADE DA LAGOA DO URUBU, FORTALEZA-CE.

FORTALEZA-CE 2011

ALAN MAYCON FERREIRA DA SILVA ARTHUR VICTOR QUEIROS ARNOLD FRANCISCO ROBRIO ALBUQUERQUE PACELLI RODRIGO DA SILVA OLIVEIRA

RELATRIO DE ANLISE MICROBIOLGICA DA LAGOA DO URUBU NO MUNICPIO DE FORTALEZA, CEAR.

Relatrio apresentado como requisito para obteno de nota complementar de avaliao parcial da Disciplina de Microbiologia Sanitria e Ambiental, do Curso Tecnolgico em Gesto Ambiental, do Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Cear IFCE, Campus de Fortaleza sob a orientao da Professora Smara Kersia Melo Sales.

SUMRIO 01 02 03 04 05 06 07 INTRODUO OBJETIVO METODOLOGIA TABELA DE RESULTADOS DISCUSSO DE RESULTADOS CONCLUSO E SUGESTES REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 3 5 5 10 11 14 15

INTRODUO A gua um recurso fixo em sua quantidade, mas em relao qualidade e

disponibilidade para o consumo humano vivencia-se outra realidade, onde os usos indiscriminados da mesma tm dificultado a manuteno da vida no planeta. Esse recurso utilizado na agricultura, onde ocorre o maior consumo, no abastecimento pblico, na hidroeletricidade, que supre cerca de 85% da energia utilizada no Brasil, usos industriais diversos, recreao, turismo, pesca, transporte (navegao), minerao dentre outro usos (TUNDISI, 2005). Ela um fator determinante para o crescimento da populao sendo o uso domstico um dos principais, como: banho, lavagem de roupas e pratos, dessendentao e preparo de alimentos. Essa dependncia ainda mais evidente nas regies altamente industrializadas, nas quais a demanda per capita de gua tem se tornado cada vez maior. neste meio que ela sofre as maiores alteraes e onde lanada nos corpos dgua diretamente, sem tratamento na maioria das vezes, o que acaba acarretando a poluio de muitos ecossistemas aquticos (ESTEVES, 1998). um dos maiores atrativos tanto em reas interioranas como litorneas. As lagoas, grutas, rios, riachos, mares tem o poder de congregar pessoas em seu entorno, devido a suas belezas, constituindo formas de recreao para pessoas da localidade ou de outros lugares que do origem a plos tursticos, tanto em regies rurais como urbanas. O ecoturismo uma atividade cada vez mais presente nos dias atuais desenvolvendo-se nas proximidades de corpos dgua, que explora os potenciais da regio para o lazer (REBOUAS; BRAGA; TUNDISI, 2006). A utilizao dos recursos hdricos para fins de recreao tem apresentado crescente importncia social e econmica ao longo dos ltimos anos, devido, especialmente busca pelo desenvolvimento de atividades de lazer em contato com o meio natural, de forma a contrapor o modo de vida em ambiente urbanizado. O uso da gua para fins de recreao pode ser classificado de acordo com o tipo de contato entre o usurio e as guas. O contato primrio refere-se a atividades como a natao, surfe, esqui-aqutico e mergulho, nos quais h possibilidade de ingesto de quantidades significativas de gua. J o contato secundrio associa-se a atividades de pesca e navegao, em que a possibilidade de ingesto de volume aprecivel de gua baixa (CETESB, 2003). O contato primrio, ou direto, impe condies mais restritivas qualidade da gua, devido ao risco oferecido sade humana pela exposio direta e prolongada a organismos patognicos, metais pesados e leos e graxas (BENETTI & BIDONE, 2001).

Muitas doenas tm a contribuio da gua para a sua disseminao. 65% das internaes hospitalares no Brasil devem-se a doenas de veiculao hdrica (clera, febre tifide, hepatite e disenteria so as mais comuns) e o abastecimento e saneamento adequados reduz a mortalidade infantil em 50% (TUNDISI, 2005). As doenas relacionadas contaminao proveniente do banho, geralmente, requerem tratamentos simples ou nenhum, e no possuem efeitos de longo prazo na sade humana, sendo que o tratamento, normalmente, apresenta resposta rpida. Apesar de as doenas mais comuns em banhistas serem a gastroenterite e as infeces de olhos, ouvidos, nariz e garganta, em locais contaminados, h o risco dos banhistas de se infectarem com doenas consideradas mais graves, tais como disenteria, clera, hepatite A e febre tifide (CETESB, 2003). A presena de bactrias heterotrficas de grande importncia para determinar a qualidade bacteriolgica da gua (AMARAL, et al.,1992). Bactrias heterotrficas mesfilas aerbias ou facultativas viveis podem indicar a existncia de diversos grupos de microrganismos patognicos e oportunistas que constituem risco aos peixes e sade pblica, alm de serem importantes para determinar a qualidade bacteriolgica da gua (CAHILL, 1990). Os indicadores mais utilizados para a poluio de origem fecal so os coliformes totais, coliformes termotolerantes e os estreptococos fecais. O microrganismos patognicos de origem fecal so de difcil deteco, mas podem ser encontrados de forma intermitente e serem encontrados em baixo nmero nas amostras de gua (MORIIGO et al. 1990). No entanto a Escherichia coli superior aos outros tradicionais indicadores de poluio fecal por sobreviver um tempo menor no meio ambiente, sendo o indicador mais preciso de recente contaminao da gua por material fecal (BAUDISOVA, 1997).

OBJETIVO O presente trabalho teve como objetivo, a avaliao da balneabilidade das guas da

Lagoa do Urubu, localizada em Fortaleza-CE. 3 METODOLOGIA 3.1. Determinao de Coliformes Totais e Escherichia coli. Para contagem de CT e E. coli utilizou-se o teste cromognico COLILERT1 que um mtodo enzimtico auto-anlitico quali-quantitativo que usa a tecnologia de substrato definido para a identificao dessas bactrias. 3.1.1. Material Substrato cromognico Colilert (1 flaconete); Cartela; Pipetas 10 mL 1 unidade; gua de diluio 1 unidade; Estufa incubadora; Descartador. 3.1.2. Mtodo Identificar a cartela com os dados de coleta; Foram retirados 10 mL da amostra bruta para uma diluio de 10-1, levando em considerao as condies do ambiente e pelo pressuposto de possveis contaminaes, no caso da gua da lagoa;
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Adicionar o reagente do flaconete ao frasco contendo a amostra diluda. Fechar e agitar todo o contedo do frasco at total dissoluo do Colilert; Despejar todo o contedo do frasco na cartela para que esta seja lacrada hermeticamente usando a seladora apropriada; Transferir para a estufa bacteriolgica a 35C durante 24 horas.

O Colilert utiliza tecnologia de substrato definido [Defined Substrate Technology (DST)] para deteco de coliformes totais e E. coli em gua. As bactrias coliformes possuem a enzima -galactosidase, medida que estas se reproduzem no Colilert , utilizam a enzima para metabolizar o ONPG (orto-nitrofenol-galactopiranoside), alterando sua cor de incolor para amarelo. As bactrias E. coli possuem a enzima glucoronidase que mataboliza o MUG (4-metil-umbelifenil--d-glucurnico), caso esteja presente no Colilert , originando fluorescncia.

3.1.3. Coleta Foram coletadas cinco amostras para essa anlise entre os meses de abril e maio de 2011, divididas em cinco semanas consecutivas, sendo realizada uma coleta semanal. Todas foram feitas no perodo da tarde, observando as condies de tempo, situao e local do ponto de amostragem. Os referidos dados foram registrados em ficha de campo apropriada (EM ANEXO). 3.2. Determinao de Coliformes Termotolerantes Para a avaliao de coliformes termotolerantes utilizou-se a tcnica do nmero de tubos mltiplos2 (APHA, 2005) em meio de cultura A1 Medium3. Que consiste na inoculao de volumes decrescentes da amostra em meio de cultura adequado ao crescimento dos microrganismos pesquisados, sendo cada volume inoculado em uma srie de tubos. 3.2.1. Material Meio de Cultura A1 Medium; Tubos de Ensaio; Pipetas 10 mL (5 unidades); gua de diluio (4 unidades); Agitador de tubos (vortex); Estufa incubadora regulada a 35C 0,5C; Banho-Maria regulado a 44,5C 0,2C; Descartador. 3.2.2. Mtodo Tomar uma bateria contendo 25 tubos de ensaio com meio A1 medium (distribudos de 5 em 5);

A quantificao termotolerantes foi realizada atravs de um mtodo simplificado de aproximao, denominado "Nmero Mais Provvel" (NMP), tambm conhecido como "tubos mltiplos", sendo o resultado expresso em NMP por 100 mL (STANDARD METHODS FOR EXAMINATION OF WATER AND WASTEWATER, 2005). A leitura da tcnica do NMP consiste em anotar os tubos turvos e com formao de gs. De posse destas anotaes, os valores so comparados com a tabela do NMP (APHA, 2005) correspondente tcnica utilizada. 3 O Meio A-1 usado para a deteco de coliformes fecais em amostra de guas residuais, esgotos, guas marinhas e alimentos pelo mtodo MPN. SINNIMO: Caldo A-1, A-1 Broth, A-1 Medium. O Caldo A-1 foi desenvolvido por Andrews e Presnell. Este foi capaz de recuperar Escherichia coli de gua estuarina em 24 horas ao invs de 72, por evitar os dois passos de preenchimentos recomendados pela APHA. (SPLABOR, 2010).

Retirar assepticamente 10 mL de amostra e preparar quatro diluies sucessivas (0,1; 0,01; 0,001 e 0,0001). Para cada diluio foram utilizados cinco tubos contendo meio de cultura (que contm concentrao simples) e tubos de Durhan invertidos; Homogeneizar; Incubar a 35C 0,5C durante 3 horas; Retirar da estufa e colocar em Banho-Maria a 44,5C 0,2C por 21 horas; Fazer a leitura (considerar como positivos somente os tubos com formao de gs nos tubos de Durhan). 3.2.3. Coleta Foram coletadas cinco amostras para essa anlise entre os meses de abril e maio de 2011, divididas em cinco semanas consecutivas, sendo realizada uma coleta semanal. Todas foram feitas no perodo da tarde, observando as condies de tempo, situao e local do ponto de amostragem. Os referidos dados foram registrados em ficha de campo apropriada (EM ANEXO).

3.3. Determinao de Bactrias Heterotrficas Mesfilas (BHM) Para contagem de BHM foi utilizada a tcnica de cultivo em profundidade (Pour Plate) utilizando o meio Plate Count Agar4 (PCA), seguindo as orientaes da American Public Health Association (APHA, 2005). 3.3.1. Material Tubos de ensaio com 15ml de meio de cultivo: PCA (Plate Cont Agar); Placas de Petri; Pipetas de 10 mL: 2 unidades; Pipetas de 1 mL: 2 unidades; Frasco com gua de diluio: 2 unidades; Estufa incubadora regulada a 35 0,5C; Descartador.
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O Agar Contagem de Placas foi formulado por Buchbinder et al, o qual recomendado pela APHA (American Public Health Association), FDA (Food and Drug Administration) e pelo Comit da ISO (International Organization for Standardization). A formulao mais recente foi recomendado pela BIS (Bureau of Indian Standards) para enumerao de microorganismos em alimentos, gua e esgoto.

3.3.2. Mtodo Identificar as placas de forma invertida com a sigla do local de amostragem, diluio e data da anlise; Preparar as diluies5 (nessa amostragem foram feitas diluies de 10-2 e 10-3, devido s condies do ambiente e pelo pressuposto de possveis contaminaes, no caso da gua da lagoa); Homogeneizar os frascos com a diluio desejada, obedecendo aos cuidados de assepsia; Inocular 1,0 mL da amostra diluda em placas de Petri estreis, utilizando-se trs placas para cada diluio. As placas devem ser colocadas tambm invertidas na estufa; Aps colocar a amostra em estudo na placa, acrescentar 15ml do meio de cultura fundido e resfriado a temperatura entre 40 e 45C, agitando-se em movimentos delicados em forma de 8; Esperar o meio solidificar, inverter as placas para evitar que haja gua de condensao na superfcie do Agar e transferir as placas de Petri, ainda invertidas, para estufa bacteriolgica a 35 0,5C durante 48 horas. Aps a incubao, realizar a contagem, utilizando contador de colnias (quando houver disponibilidade), caso no haja um contador, contar as colnias com um auxlio de um pincel marcador permanente/retropojetor posicionando a placa contra luz, atentando-se para o no derramamento de algum lquido que possa haver no placa. 3.3.3. Coleta Foi coletada uma amostra para essa anlise no dia 15 de maio de 2011 no perodo da tarde, observando as condies de tempo, situao e local do ponto de amostragem. Os referidos dados foram registrados em ficha de campo apropriada (EM ANEXO). 3.4. Local de Amostragem A Lagoa do Urubu (Figura 1 - C), pertencente Bacia Hidrogrfica Metropolitana (COGERH, 2011), est localizada no Bairro Floresta (Figura 1 - B) no municpio de Fortaleza (Figura 1 - A) no Estado do Cear. um patrimnio daquele bairro, durante muitos anos serviu de lazer para a comunidade local. Pouco conhecida pela populao e negligenciada pelas autoridades locais, hoje em dia sofre com a degradao ambiental causada pela intensa
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Devem-se selecionar as diluies de maneira que o nmero de colnias esperados se situem entre 30 e 300.

urbanizao em entorno, mas mesmo com visvel poluio, atualmente ainda se pode observar banhista no local. A amostra de gua foi colida no ponto de amostragem (Figura 1 - C) defronte ao campo de futebol localizado na Rua Carnaubal, no Bairro Floresta, Municpio de Fortaleza-CE. O ponto escolhido foi pela relevncia que o mesmo representa para a comunidade local. Foi considerando ponto que representasse maior heterogeneidade, como aqueles de maior afluncia de banhistas e que sofram influncia de atividades do entorno. O ponto foi escolhido com base, tambm, na acessibilidade da populao ao local. Recipientes de vidro esterilizados com capacidade de 300 ml foram utilizados nas coletas. Os frascos foram introduzidos fechados na gua a uma profundidade entre 15 a 20 centmetros, aproximadamente, e ento abertos para a entrada desta. Em seguida os frascos foram fechados novamente e conservados sobre resfriamento entre 4C e 10C, at o momento da anlise.

Fonte: Google Earth, 2011. Figura 1: A Municpio de Fortaleza, Cear, delimitao dos bairros; B Bairro Floresta, delimitao geogrfica; C Lagoa do Urubu, em destaque (ponto vermelho) o ponto de amostragem.

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RESULTADOS

Tabela 1 Contagem de Coliformes Termotolerantes (CTT) e Escherichia coli (E. coli) na Lagoa do Urubu. DATA DA COLETA 03/04/2011 10/04/2011 17/04/2011 24/04/2011 01/05/2011 *NMP: Nmero Mais Provvel CTT (NMP*/100mL) 1.350 1.290 1.310 1.320 1.300 E. coli (NMP/100mL) 8.100 8.150 8.155 8.149 8.164

Tabela 2 Contagem de Coliformes Totais (CT) na Lagoa do Urubu. DATA DA COLETA 08/05/2011 CT (NMP/100mL) 24.192

Tabela 3 Contagem de Bactrias Heterotrficas Mesfilas (BHM) na Lagoa do Urubu. DATA DA COLETA 15/05/2011 BHM (UFC*/mL) 4.300

*UFC: Unidade Formadora de Colnia.

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DISCUSSO DOS RESULTADOS A classificao das condies de balneabilidade de determinado balnerio deve

considerar os resultados da srie de cinco amostragens realizadas, conforme estipulado pela Resoluo CONAMA N. 274 de 2000, onde a categoria de balneabilidade atribuda caso 80% ou mais de um conjunto de cinco amostras atenda os limites da classe correspondente. Desta forma, a classificao das condies de balneabilidade para a Lagoa do Urubu, est representada na Tabela 4.
Tabela 4 Balneabilidade da Lagoa do Urubu

LOCAL Lagoa do Urubu

PERODO 03/04/2011 a 01/05/2011

BALNEABILIDADE* IMPRPRIA

* As guas doces, salobras e salinas destinadas balneabilidade (recreao de contato primrio) tero sua condio avaliada nas categorias prpria e imprpria (CONAMA, 2000).

Os resultados referentes ao NMP de CTT e E. coli mostrados na Tabela 1, mostram para CTT resultados variando entre 1.290 a 1.350 e de E. coli apresenta resultados que variam entre 8.149 a 8.164. Em ambos os resultados observam-se no houve discrepncia significativa. Os altos valores de NMP de CTT e E. coli, em relevncia no local de amostragem, podem estar relacionados ao aporte de efluentes sem prvio tratamento, o que torna a Lagoa da Urubu um corpo receptor de matria orgnica rica em nutrientes, em patgenos e em bactrias que fazem parte da microbiota fecal de animais homeotermos. O observncia no local de resduos slido, de despejo de esgotos e da presena de animais (eqinos e bovinos) dentro do ambiente, refora essa possibilidade. Os maiores valores de NMP de CTT e E. coli foram observados nas amostras de 03/04/2011 e de 01/05/2011, respectivamente. Este fato pode decorrer da influncia de ndices de pluviosidade na regio durante esse perodo, que aumenta o carreamento de matria orgnica para a referida lagoa. Segundo a Resoluo do CONAMA N. 274/2000, artigo 2, pargrafo 4, item d: [...] presena de resduos ou despejos, slidos ou lquidos, inclusive esgotos sanitrios, leos, graxas e outras substncias, capazes de oferecer riscos sade ou tornar desagradvel a recreao [...]. Isso j excluiria os valores de CTT e E. coli, e classificariam a baneabilidade do local com imprpria, independente dos resultados obtidos. Ainda sobre os resultados de CTT e E. coli, a pouca discrepncia, revela ainda que a Lagoa do Urubu recebeu uma carga de matria orgnica constante no perodo da amostragem. Diante disso, percebe-se que no ambiente, as vrias problemticas observadas, afetam diretamente sua autodepurao e favorecem a eutrofizao do meio.

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Com relao ao resultado de Coliformes Totais (CT) em nica coleta realizada no dia 08/05/2011, apresentado na Tabela 2, observou-se o resultado de 24.172 NMP/100ml. De acordo com Siste, Giro e Duncan (2009), a existncia de um grande nmero de colnias de coliformes totais e de poucas ou nenhuma colnia de E. coli na amostra, indica que a maioria ou todos os coliformes totais so de vida livre, ou seja, no so necessariamente de origem fecal. Por esse motivo, os coliformes totais tm valor sanitrio limitado na avaliao da qualidade de guas naturais, uma vez que podem ser encontrados tanto em fezes quanto em guas ricas em nutrientes, solos e matria orgnica em decomposio, por exemplo. A aplicao deste grupo como indicador fica restrita praticamente avaliao da qualidade da gua tratada, apresentada na Portaria 518 do Mistrio da Sade, onde sua presena pode indicar falhas no tratamento ou possveis contaminaes aps o tratamento. Sobre a contagem de Bactrias Heterotrficas Mesfilas (BHM) foi encontrado o resultado de 4.300 UFCs/mL, mostrado da Tabela 3. A determinao da quantidade de bactrias heterotrficas em guas um importante instrumento auxiliar no controle bacteriolgico para avaliao das condies higinicas e de proteo dos poos e fontes. A presena de bactrias heterotrficas em quantidades elevadas pode impedir a deteco de coliformes, seja devido produo de fatores de inibio, seja por um desenvolvimento mais intenso. No h na legislao um valor mximo permitido para a quantidade de bactrias heterotrficas, mas de extrema importncia a determinao da densidade delas, pois assim podemos determinar possveis causas de deteriorao da qualidade da gua. Segundo a Portaria N. 518 do Ministrio da Sade que estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilncia da qualidade da gua para consumo humano e seu padro de potabilidade:
Art. 11 7 Em 20% das amostras mensais para anlise de coliformes totais nos sistemas de distribuio, deve ser efetuada a contagem de bactrias heterotrcas e, uma vez excedidas 500 unidades formadoras de colnia (UFC) por ml, devem ser providenciadas imediata recoleta, inspeo local e, se constatada irregularidade, outras providncias cabveis.

Estudo sobre o NMP de CT e E. coli relativo Lagoa do Mondubim (FortalezaCE), realizado por Amarante et al. (2007), mostrou valores distintos no decorrer do perodo de um ano, apresentando altos valores para estes parmetros principalmente no perodo chuvoso, portanto, em perodos secos do ano a lagoa poderia ser considerada de qualidade prpria j em perodos chuvosos considerada de qualidade bacteriolgica imprpria para a balneabilidade.

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Do mesmo modo, Sousa, Ponte e Gomes (2007), em pesquisa sobre a qualidade sanitria de dois ecossistemas lacustres urbanos da bacia do Rio Maranguapinho (Fortaleza-CE) observaram, na Lagoa da Parangaba e Mondubim, condies imprprias para balneabilidade durante o perodo estudado tomando como base os indicadores para essa classificao, a mdia para CTT e E. coli nessa anlise foi de 31.241 e 9.686 NMP/100mL, respectivamente. Sobre a qualidade bacteriolgica da Lagoa da Parangaba (Fortaleza-Cear), Vieira e Oliveira (2001) alertam para os altos ndices de NMP de CTT e E. coli e constatam a ausncia de uma infra-estrutura em todas as cercanias da lagoa. Esses dados podem ser comparados aos resultados deste estudo quando trata da estreita relao entre coliformes totais e termotolerantes com aporte de dejetos sem tratamento prvio eficaz. Em outro estudo realizado na Lagoa da Fazenda (Sobral-CE), Vieira et al. (2008), mesmo o ambiente em estudo ter apresentando classificao em contexto geral como satisfatrio quanto a sua balneabilidade, a elevada concentrao de coliformes termotolerantes, acima de 1.000 NMP/100mL, certamente, reflete-se na qualidade do pescado que capturado naquela lagoa. Esses dados podem ser comparados aos resultados deste estudo quando trata da estreita relao entre coliformes termotolerantes e a E. coli aos padres de balneabilidade, bem como tambm, com aporte de dejetos sem tratamento prvio eficaz.

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CONCLUSO E SUGESTES A partir do estudo realizado, conclui-se que a Lagoa do Urubu, recebe uma elevada

carga orgnica, de origem pontual e difusa, acelerando, desta forma, o processo de eutrofizao deste ecossistema. Considerando o estado de degradao da lagoa e a necessidade de aes de proteo e recuperao, devem ser includos, entre as estratgias de gesto, o monitoramento sistemtico da lagoa em um maior nmero de pontos a fim de conhecer os eventos ocorridos em toda o entorno da lagoa, propiciando a efetivao de medidas adequadas de recuperao. Projetos urbansticos que mencionam o local, como o da HABITAFOR, da Prefeitura Municipal de Fortaleza, possuem em seus planos a reurbanizao e requalificao da rea no entorno da lagoa, mas constatou-se que no local no existia nenhuma meno ao referido projeto, mesmo com longa data de seu planejamento. A importncia local da lagoa para aquela comunidade, requer a devida ateno dos rgos ambientais competentes. O esquecimento local bem como a falta de monitoramento influencia a degradao do ambiente, que mesmo com tantas agresses e impactos causados pelo homem ainda demonstra capacidade de recuperao ainda apresentando significativo reservatrio de seres vivos.

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REFERNCIAS

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