Universidad Autnoma de Baja California Facultad de Odontologa Tijuana Campus Otay

Biologa Celular Q.F.B. Brenda Linda Alvarado Espinoza, M.C. Grupo A Laboratorio 4 Prctica Nm.5: Modelos animales de experimentacin.

Integrantes (Equipo 9): Camacho Hernndez Luis Adolfo Camacho Ochoa Elvira Chvez Len Rubn Cota Flix Karina Guadalupe De Dios Castro Jocelyn Lizzeth Dorantes Torres Carlos Manuel

Fecha de entrega: 1 de octubre del 2012

Introduccin o antecedentes y tema terico al que apoya

Subcompetencia a desarrollar: Revisa la forma en que se organiza el genoma para identificar como y/o con quien interaccionan las molculas involucradas en la transcripcin con apertura a su aplicacin biotecnolgica. Tema terico al que apoya: Expresin gnica a) Fundamentos tericos o estudios previos La medicina cientfica nace con la observacin y la experimentacin en animales. Desde las experiencias de William Harvey, que compar el latido cardiaco en distintas especies, los datos obtenidos mediante experimentos en animales han sido tema permanente de inters cientfico. Los modelos animales de enfermedades humanas han sido utilizados desde hace muchos aos en distintas reas de la investigacin, constituyendo uno de los pasos fundamentales en la biomedicina. Se requieren tanto para proyectos de investigacin como en pruebas diagnsticas y teraputicas y en los controles de productos farmacolgicos. Los experimentos con animales tienen su fundamento en el hecho de considerar a otras especies animales como modelos en miniatura de los problemas humanos. Se realizan experimentos con animales bsicamente en tres campos: la docencia, la industria y la investigacin. En docencia, las prcticas con animales son para conocer procesos fisiolgicos, caractersticas anatmicas o adquirir habilidades clnicas y quirrgicas como forma de entrenamiento. En la industria, la biotecnologa animal ha experimentado un gran desarrollo en las ltimas dcadas con el uso de tecnologas reproductivas, la creacin de organismos genticamente modificados, la produccin masiva de molculas de inters y la prueba de productos de consumo para confirmar que no son dainos. En investigacin, se han desarrollado modelos de animales para evaluar enfermedades genticas humanas y producir frmacos o vacunas, como fuente donante de clulas y rganos, as como protenas sanguneas o anticuerpos. La vida como la conocemos est especificada por los genomas de los innumerables organismos con los que compartimos el planeta. Todo organismo tiene un genoma que contiene la informacin biolgica necesaria para construir y mantener un ejemplo viviente de ese

organismo. La mayora de los genomas, incluidos el genoma humano y los de todas las dems formas de vida celular, estn compuestos por DNA pero poco virus tiene genomas de RNA.

Objetivo (propsito de la prctica)

Al finalizar la prctica se vern los conceptos generales del proceso de investigacin cientfica y algunos de los modelos animales utilizados en estudios preclnicos, genmicos, protemicos, etc. y su importancia en la generacin de ciencia bsica y aplicada.

Materiales y Mtodos
a) Reactivos, material y equipo utilizados Recursos materiales Computadora Proyector Presentaciones de usos de modelos animales Equipo de seguridad personal requerido: a) Bata larga b) Guantes de ltex

b) Descripcin breve de las tcnicas o mtodos experimentales desarrollados 1) Primeramente se dividieron los temas a exponer acerca de los modelos animales en la experimentacin (un tema a cada equipo del laboratorio). 2) En clase se expuso acerca de las caractersticas biolgicas, fsicas y genmicas de cada animal. 3) En primer trmino se hablo acerca del cerdo, posteriormente del ratn y por ultimo del conejo. 4) Se realizo una discusin sobre los modelos animales.

Resultados
a) Descripcin de los resultados obtenidos Se presenta a continuacin los resmenes de los temas expuestos en el laboratorio ordenados en sus caractersticas ms importantes de cada modelo animal. 1. Ratn: I. Caractersticas biolgicas

Su manejo resulta fcil, el tamao que poseen es apropiado para la crianza y manipulacin, requiere pocos cuidados, posee un sistema inmune similar al de los seres humanos, tienen un alto nmero de cras, tienen un breve perodo de gestacin (19-21das).Las hembras producen un gran nmero de vulos, los cuales al ser fecundados son muy resistentes. Poseen un genoma muy similar al delos seres humanos. II. Caractersticas fsicas

Su tamao varia; su largo de la cabeza al cuerpo es de 7-9 cm y su largo de la cola es de 5- 7 cm. su peso vara de los 10-20 gramos. Su color vara segn el hbitat, su pelaje es corto (de caf oscuro a caf oxidado, tambin tonos grises que se aclaran en su vientre). Presenta una nariz puntiforme, su olfato es muy desarrollado, sus ojos son negros y pequeos mientras que sus orejas son grandes y amplias, su pelo es escaso en la cola y en las orejas. Sus patas traseras miden menos de 2 cm. del taln a la punta del dedo mas largo. III. Habilidades fsicas

Pueden nadar pero no lo prefieren, pueden brincar verticalmente 40 cm (soportan cadas de 3.5 m sin daos), se adaptan a temperaturas mayores a 10C, pueden atravesar orificios de hasta 6 mm de dimetro. El alcance de la vista es cercano a los 15 cm, pero son capaces de registrar sombras y cambios de luz a 3 metros. IV. Cantidad de cromosomas

Su carotipo es de 40 cromosomas (ratones albinos), su genoma esta agrupado en 20 pares de cromosomas (humano 23, son muy similares). El genoma de los humanos posee 2.900 millones de pares de bases mientras que el del ratn contiene alrededor de 2.600 millones.

El mapeo gentico ha puesto en evidencia que algunos genes que se encuentran en un mismo cromosoma humano, estn ubicados en diferentes cromosomas en los ratones. En el cromosoma 12 de los seres humanos se encuentra agrupados los genes GADP, TPI, LDHB, KRAS2, INT1, GL1 y LALB, en el ratn estos genes se encuentran repartidos en los cromosomas 6, 15, 10 y 4. V. Decodificacin de rutas

El parecido gentico entre las dos especies permite comparar los genes casi directamente, permite a los cientficos encontrar los mismos genes en humanos para decodificar las rutas y mecanismos de las enfermedades humanas. VI. Ratones albinos

Tambin llamado ratn de laboratorio, es un roedor, usualmente de la especie mus musculus , se utiliza para la investigacin cientfica, posee un cariotipo de 40 cromosomas y suelen ser albinos. VII. Experimentos

Para cada experimento se escogen ratones de laboratorio que pertenezcan a una misma cepa pura o endogmica. Los individuos de una misma cepa llevan los mismos genes, por lo cual se facilita la comparacin de los efectos de los diferentes tratamientos experimentales (frmacos, entorno fsico, etc.), sin que se produzca confusin debido a las diferencias genticas. La cepa ms utilizada ha sido la BALB/c (ratn albino). VIII. Ratn Knock-out

IX.

Ratn transgnico

Ratn que porta un fragmento de ADN ajeno a su genoma

2. Conejo I. Caractersticas fsicas

Es un roedor mamfero, mide aproximadamente 40 cm de largo, poseen 2 dientes muy sobresalientes, su peso vara entre 900 y 1.500 gr. posee unasorejas largas y cola muy corta. Esta recubierto de pelo fino (de diversos colores), el color de sus ojos es azul o marrn, tiene 4 dedos en sus partes posteriores y 5 dedos en sus partes anteriores II. Caractersticas biolgicas

De l dependen 40 especies (cadena trfica), se da la mayor mortalidad de jvenes debido al mal clima, las numerosas peleas entre ellos mismos entorpecen la reproduccin y por consecuencia existe un mayor nmero de hembras que machos. Su esperanza de vida promedio en libertad es de 3 a 4 aos y en cautividad de 6 a 8 aos, poseen una extraordinaria fecundidad y capacidad para reproducirse. III. Evolucin

Es un animal mamfero muy primitivo, considerado como uno de los animales ms antiguos, conocindose desde la prehistoria. Se desconoce el origen de esta especie, pero algunos cientficos afirman que procede del Asia central, desde donde emigro hacia Europa. Adems es posible que el clima frio del norte europeo obligara a estos animales a establecerse en climas ms templados como la zona de litoral mediterrneo de Espaa y el norte de frica.

Est ya confirmado que el Gnero mono-especie del conejo ibrico, o comn silvestre europeo, y todas las razas de conejos domsticos existentes, tienen un mismo y nico origen. La especie se form en la pennsula ibrica, en el perodo interglaciar, entre los ltimos 150.000 a 50.000 aos. Anteriormente haba habitado en Europa una especie afn al conejo actual, y directo antecesor del mismo, a principios del Pleistoceno, el Cuaternario se caracteriz por sus grandes fluctuaciones climticas las cuales obligaron a los primitivos conejos europeos a descender hacia climas ms benignos, y se fueron refugiando en la pennsula ibrica, llegaron a formar una nueva especie, la actual oryctolagus cuniculus.

IV.

Escala zoolgica

Se incluyeron primitivamente en el orden de los roedores, pero luego se separaron en dos grupos: roedores (orden rodentia) que poseen dos incisivos arriba y dos abajo y lagomorfos (orden lagomorpha) que poseen cuatro incisivos arriba y dos abajo, pasaron a incluirse en este ltimo orden. V. Reino: animal Su reino: metazoos (pluricelulares) Tipo: cordados Sub-tipo: vertebrados Clase: mamferos Sub clase: placentarios Orden: logomorfos Familia: leporiade (tiene labio leporino) Sub familia: leporiade Gnero: oryctolagus Especie: cuniculus Inseminacin artificial

En esta especie la inseminacin artificial no est generalizada ya que este mtodo requiere personal especializado as como instalaciones adecuadas, lo que aumenta en gran medida los costos. Es interesante, por el hecho de poder obtener descendientes de machos mejorados y comprobados. Otra ventaja es que con el esperma de una eyaculacin puede fecundarse a 40 hembras, y se evitan tambin posibles enfermedades transmisibles, por el contacto sexual. El esperma se

recoge en una vagina artificial de un maniqu que lleva piel de coneja. Una vez obtenido se diluye y almacena en las condiciones adecuadas. Este semen se introduce en dosis determinadas en la vagina de la hembra, mediante una jeringa, ala que previamente se la habr inducido a la ovulacin. El conejo es protagonista de las explicaciones tpicas sobre gentica y herencia de los caracteres, ya que segn la presencia de dos de los cuatro alelos distintos posibles para un mismo gen, desarrolla un tipo de pelaje u otro: salvaje o agut, Chinchilla, Himalaya o albino. El conocimiento en gentica ha permitido la mejora extensa en productividad de plantas usadas para el alimento como por ejemplo el arroz, trigo, y el maz. El conocimiento gentico tambin ha sido un componente dominante de la revolucin en salud y asistencia mdica en este siglo. La gentica tiene tambin una gran importancia en la Bioingeniera ya que ha permitido modificar el material gentico de distintos organismos.

Algunos de los aspectos que se realizan en base a las investigaciones son los siguientes: Aplicar el mtodo y las tcnicas para curtir adecuadamente las pieles de conejo, procurando la optimizacin de los ingredientes y de las soluciones utilizadas, as como su disposicin final de manera segura y bajo preceptos ecolgicos apropiados. Comparar de manera objetiva el manejo tradicional vs manejo en bandas como estrategias para organizar el trabajo desarrollado en una granja cuncola. Realizar diversas actividades para reforzar el manejo reproductivo en un centro de produccin cuncola a gran escala (Centro Nacional de Cunicultura): destetes, apareamientos, diagnsticos de gestacin, introduccin y/o retiro de nidales, supervisin de pospartos, etc. Aprender y practicar las tcnicas de sacrificio humanitario en los conejos, la evisceracin de los mismos, la evaluacin de las canales obtenidas y la evaluacin objetiva de su calidad como producto final. Desarrollar habilidades clnicas para lograr el diagnstico, tratamiento, control y prevencin de las principales enfermedades que afectan al conejo de granja. Realizar necropsias de manera sistemtica en conejos enfermos como una herramienta elemental en el diagnstico de enfermedades de esta especie pero a nivel colectivo. Desarrollar habilidades clnicas para lograr el diagnstico, tratamiento, control y prevencin de las principales enfermedades que afectan al conejo como animal de laboratorio.

3. Cerdo I. Caractersticas biolgicas

El cerdo (Sus scrofa domestica) es una especie de mamfero artiodctilo de la familia Suidae. Es un animal domstico usado en la alimentacin humana por algunas culturas, en especial las occidentales. Su nombre cientfico es Sus scrofa ssp. domestica, aunque algunos autores lo denominan Sus domesticus o Sus domestica, reservando Sus scrofa para el jabal. Fue domesticado hace unos 5.000 aos. Se encuentra en casi todo el mundo. La distincin entre el cerdo silvestre y domstico es pequea y en algunas partes del mundo (por ejemplo en Nueva Zelanda) el cerdo domstico se ha vuelto cimarrn. Los cerdos cimarrones pueden causar daos sustanciales al ecosistema. La familia de los suidos tambin incluye alrededor de 12 diferentes especies del cerdo silvestre, clasificadas tambin bajo el gnero Sus. II. Tamao de Genoma (diferencia con el humano)

El genoma del cerdo ha sido de gran utilidad para la vida del ser humano, ya que a travs de este se han dado muchos avances cientficos para la salud del ser humano de las cuales podemos mencionar las siguientes: el incremento de vacunas contra enfermedades porcinas y el estudio para mejoramiento de enfermedades cardiovasculares, pulmonares, gastrointestinales e inmunolgicas.

III.

Evolucin

La evolucin de esta especie tal como hoy la conocemos, tiene su origen en el jabal, y puede ser de dos tipos; de Europa, se lo denomina, Sus Scrofa Ferus, de color negro, matizado con gris y castao; o de la India se trata del Sus Vitatus, que carece de cresta o lnea, en la parte superior, de color gris castao, con una franja blanca a ambos lados de la cara. Los cerdos actuales de estos gneros y especies surgen las actuales razas porcinas, que son numerosas, y cada una de ellas tiene un pelaje caracterstico.

IV.

Ubicacin filogentica

Dos estirpes salvajes contribuyeron a la formacin de las razas porcinas americanas y son: jabal europeo y el cerdo de las indias. Se alimentaban de: races, bellotas y los forrajes que pudieran espigar en los campos y bosques. Ambos eran gregarios y tenan la caracterstica de formar grandes manadas.

Existen 2 teoras sobre el origen de los cerdos: la primera en la que el jabal europeo es el antepasado nico y directo del cerdo moderno (Sanson) y la segunda sobre la ascendencia doble, la cual parte del jabal europeo y del jabal asitico (Dechambre).

V.

Utilizacin en procesos de Investigacin Cientfica

Los cerdos y los humanos son similares en tamao y constitucin, por lo que los puercos suelen ser usados en investigaciones para la salud humana, se utilizan para; saber las reacciones de medicamentos, en experimentos en piel de cremas, productos de belleza, entre otros, tambin en procedimientos que se planean hacer en humanos para curar ciertas enfermedades, adems las excretas porcinas, al reciclarse parte de la energa y de sus nutrientes, contribuyen a hacer sostenible en el trpico la produccin porcina y de otras especies animales integradas.

Discusin
a. Anlisis de los resultados obtenidos Con las exposiciones los integrantes del equipo nos dimos cuenta que existen mltiples animales para realizar los experimentos y que no solamente se limitan en uno como nosotros creamos antes, se logro ampliar el panorama que se esperaba para el tema de la practica adems que cada animal es para distintas aplicaciones por sus caractersticas particulares descritas anteriormente.

b. Observaciones En la clase de laboratorio cada equipo expuso su tema y nos percatamos de las caractersticas fsicas y biolgicas de cada animal y sus particularidades, como fueron evolucionando poco a poco y cul es su utilizacin en procesos de investigacin cientfica en la actualidad. Tambin nos dimos cuenta que no todos los integrantes del laboratorio presentaron su modelo animal y eso nos limito solamente a las exposiciones de los compaeros que si las presentaron. c. Conclusiones La biotica es un tema amplio que aborda los problemas morales derivados de los avances en las ciencias biolgicas en general, algunos de los problemas de la investigacin cientfica en los animales es que se utilizan para la investigacin biomdica con la finalidad de ayudar a explicar

y combatir problemas del hombre, pero de una manera contraria trae como consecuencia la manipulacin gentica y fases de reproduccin de los animales realmente exagerados. En los pases desarrollados, la accin de los grupos protectores de los derechos del animal ha incidido en la opinin pblica que se ha encaminado a limitar severamente la experimentacin sobre animales. Esto ha llevado a la elaboracin de numerosas legislaciones que regulan el uso de animales vertebrados en experimentacin. De la misma manera, se ha fomentado la creacin de organismos internacionales como ICLAS (International Council of Laboratory Animal Science), ILAR (Institute of Laboratory Animal Resources), UFAW (Universities Federation of Animal Welfare) y muchsimas asociaciones dedicadas a la Ciencia de los Animales de Laboratorio como son AALAS (American Association for Laboratory Animal Science), FEELASA (Federation of European Laboratory Animal Science Associations). En los pases de la regin latinoamericana y caribea, en conjunto con el desarrollo de las ciencias farmacutica y biomdica, se ha incrementado el uso de especies animales para el desarrollo de investigaciones y controles de productos farmacuticos y para la enseanza de especialidades biolgicas, a raz de este auge, se han creado dentro de las comunidades cientficas organizaciones nacionales dedicadas al control de las actividades con animales de experimentacin, con fines fundamentalmente educativos, de formacin profesional y de supervisin. Como conclusin final podemos decir que para considerar una experimentacin con animales legal y ticamente admisible su propsito tiene que se para un bien mayor en lo que podra ser la salud humana o la animal, en el caso de los experimentos que no tengan relacin con la salud, solo tendrn justificacin si contribuyen a algn avance cientfico importante en relacin con la fisiologa y constitucin delos seres vivos, y solo tiene que llevarse a cabo si no hay vas alternativas. 1) Ratn: El mapeo gentico ha puesto en evidencia que algunos genes que se encuentran en un mismo cromosoma humano, estn ubicados en diferentes cromosomas en los ratones. En el cromosoma 12 de los seres humanos se encuentran agrupados los genes GADP, TPI, LDHB, KRAS2, INT1, GL1 y LALB. En el ratn estos genes se encuentran repartidos en los cromosomas 6, 15, 10 y 4. El parecido gentico entre las dos especies permite comparar los genes casi directamente. Permite a los cientficos encontrar los mismos genes en humanos para decodificar las rutas y

mecanismos de las enfermedades humanas, esto es un aspecto determinante para poder encontrar las curas a muchas de las enfermedades nuevas y como reaccionaran en el ser humano.

2) Conejo: Es un animal mamfero muy primitivo, considerado como uno de los animales ms antiguos, conocindose desde la prehistoria. Se incluyeron primitivamente en el orden de los roedores, pero luego se separaron en dos grupos: los roedores (orden rodentia) que poseen dos incisivos arriba y dos abajo y los lagomorfos (orden lagomorpha) que poseen cuatro incisivos arriba y dos abajo. El conejo es protagonista de las explicaciones tpicas sobre gentica y herencia de los caracteres, ya que segn la presencia de dos de los cuatro alelos distintos posibles para un mismo gen, desarrolla un tipo de pelaje u otro: salvaje o agut, Chinchilla, Himalaya o albino.

3) Cerdo: El genoma del cerdo ha sido de gran utilidad para la vida del ser humano, ya que a travs de este se han dado muchos avances cientficos para la salud del ser humano de las cuales podemos mencionar las siguientes: el incremento de vacunas contra enfermedades porcinas y el estudio para mejoramiento de enfermedades cardiovasculares, pulmonares, gastrointestinales e inmunolgicas. Los cerdos y los humanos son similares en tamao y constitucin, por lo que los puercos suelen ser usados en investigaciones para la salud humana. Se utilizan para saber las reacciones de medicamentos, experimentos en piel de cremas, productos de belleza, procedimientos que se planean hacer en humanos para curar ciertas enfermedades y las excretas porcinas, al reciclarse parte de la energa y de sus nutrientes, contribuyen a hacer sostenible en el trpico la produccin porcina y de otras especies animales integradas. d. Recomendaciones El da de la exposicin, algunos compaeros de nuestro laboratorio no expusieron y quedaron de mandar sus presentaciones y no lo hicieron, una recomendacin seria que para la prxima haya ms cumplimiento en los trabajos ya que no pudimos poner en la prctica sobre los cinco animales por falta de informacin de los temas que no se vieron en la clase.

Cuestionario u otros anexos

a) Cuestionario 1) Qu modelos animales han sido utilizados para el entendimiento de la anatoma y / patologas orales? Estandarizacin de piezas dentarias interiores incompletamente formadas de un modelo animal; tiene como objetivo caracterizar las piezas dentarias permanentes en formacin de las ovejas, y lograr as un modelo animal apto para estudios odontolgicos de distinta ndole, en especial a procedimientos relacionados con la pulpa dental tambin conocida como el nervio de los dientes. Manejo de la craneotoma; una operacin quirrgica en que parte del crneo (colgajo seo) se elimina con el fin de acceder al cerebro, se ha utilizado en conejos para analizar las principales ramas que ayudan en la anestesia de un paciente. El uso de modelos animales en investigacin craneofacial ha contribuido a la signicativamente mejora de la gestin clnica de los pacientes con trastornos craneofaciales. Los estudios experimentales se han llevado a cabo con una amplia variedad de modelos animales tales como ratas, conejos, gatos, perros y primates. Las ratas y conejos, que pertenecen a las rdenes Rodentia y Lagomorphia, respectivamente, se utilizan comnmente en modelos animales investigacin craneofacial.

2) Realiza un cuadro comparativo de al menos 5 modelos animales donde plasmes ventajas y desventajas para su uso Ventajas generales 1) Es posible aprender por medio de piezas o modelos anatmicos reales los cuales facilitan el entendimiento. 2) No es necesario utilizar un cuerpo humano. 3)Si se utilizan animales pequeos, su manejo es mas fcil 4)si se presenta alguna anomala, un cuerpo humano no corre peligro 5)Se salvan vidas humanas Desventajas generales 1)El cuerpo humano no se compara en un 100% al de un animal 2)Es cruel utilizar animales para la experimentacin 3)Los resultados no son completamente confiables 4) Se utilizan diferentes especies hasta que se encuentre el resultado deseado 5)Se realizan muchas pruebas hasta obtener un resultado exitoso y mueren muchos animales

Modelo Animal Ratn

Ventajas Manejo fcil Hembras con gran nmero de vulos Genoma similar al del ser humano

Desventajas Posible mortalidad de embriones, impide el estudio de la funcin de algunos genes Modificacin de genes por anomalas Interpretacin confusa de resultados, debido a la plasticidad durante la fecundacin. Dependen de el 40 especies en la cadena trfica Se utilizan para cosmticos los cuales se aplican sobre la piel afeitada de los animales y espuma para afeitar en la que se mete a presin al estomago del animal Inseminacin artificial con altos costos Esperma de una eyaculacin puede fecundar a 40 hembras (enfermedades sexuales) Sus msculos son delgados La digestin del animal puede provocar agentes patgenos que reaccionan con genes y hacen que los resultados no sean siempre los esperados

Conejo

Larga esperanza de vida de 6 a 8 aos Gran capacidad para fecundarse y reproducirse Mejora la productividad de plantas usadas en alimentos

Cerdo

Incremento de vacunas contra enfermedades porcinas Estudio y mejoramiento de enfermedades cardiovasculares, pulmonares, gastrointestinales e inmunolgicas Su corazn es idntica a la humana Se prueban trasplantes de clulas de cerdo en humanos

Ranas

Su piel tiene sustancias que lo protegen de los microbios y virus, para hacer posible las curas de enfermedades Comen insectos, minimizan el contagio de infecciones Se les aplican terapias de anticuerpos monoclonales 99% de relacin con los genes del ser humano

Chimpanc

Muchas especies de ranas suelen confundirse por su cambio repentino de coloracin y resultan ser venenosas y no viables en el resultado final para la creacin de vacunas. Su gestacin dura 8 meses y solo puede tener 1 cra Es un animal prohibido para su estudio en varios pases

Referencias
a) Libros Genomas, Terry Brown, Editorial Medica Panamericana, Buenos Aires , Argentina, Pgina 3. b) Sitios de internet (direccin electrnica) http://la.rsmjournals.com/content/36/1/86.full.pdf+html?sid=60ae9e67-3200-4098-841759b2048aa596