2006/2007 Faculdade de Medicina da Universidade do Porto

Embriologia Geral
No somos assim to diferentes da mosca da fruta Esta a imagem de um vulo e de um espermatozide s para que vocs tenham a noo do tamanho destas duas clulas. H a fuso de material gentico. Como vocs sabem os pro-nucleos vo-se encontrar h o resumo da meiose. Os cromossomas do pai e da me encontram-se e do origem ao embrio. Os cromossomas do pai e da me encontram-se e do origem a um novo embrio. Isto aqui representa o ovrio, estas fmbrias puxam o vulo para a trompa uterina, o vulo lanado pelo oviduto e d-se a fertilizao. A partir deste momento e at implantao do embrio no tero vai aproximadamente uma semana e durante essa semana o embrio divide-se vrias vezes. Curiosamente em embries de mamferos no aumenta de tamanho, ainda que se divida vrias vezes, pois a zona pelcida que existe volta do embrio impede que este aumente de tamanho. Na altura da implantao do embrio no endomtrio uterino essa zona pelcida desfaz-se. O embrio consegue fazer um buraquinho nessa zona pelcida e vai escapar por essa zona, dando-se um crescimento exponencial do embrio. Esta zona pelcida tambm importante para que haja uma implantao correcta do embrio no endomtrio uterino. Eu disse-vos que ao longo daquele caminho que o embrio se ia dividindo vrias vezes, iam-se dar vrias clivagens. A clivagem nos mamferos diferente: - uma clivagem lenta: as divises esto espaadas de 12 a 24 horas entre elas. - rotacional: as clulas no se dividem todas pelo mesmo plano. A primeira vez que a clula se divide, divide-se meridionalmente. Das duas clulas a que d origem uma divide-se meridionalmente e a outra equatorialmente. - So divises assncronas: no h um nmero par de clulas no embrio, no sendo um crescimento exponencial, h um desfasamento do nmero que ocorre ao longo das vrias divises. - A partir da primeira clivagem h a activao do prprio genoma do embrio, em muitas outras classes so genes que esto expressos para manter o embrio. Aqui no, o genoma do embrio activado automaticamente. - D-se a compactao: as clulas, que no incio esto um bocadinho soltas havendo muito espao entre elas, medida que o embrio se vai dividindo elas vo ficando cada vez mais compactas. Esta compactao muito importante. Durante a compactao vai haver uma alterao profunda da arquitectura da membrana celular dos blastmeros e isto importantssimo:

No incio as molculas esto aleatoriamente espalhadas pelos blastmeros.

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Mas medida que o tempo vai avanando e ainda no embrio de oito clulas h uma organizao cada vez mais especifica destas molculas ao longo dos blastmeros ou seja h muitas molculas que esto aleatoriamente espalhadas e que a dada altura vo comear a encontrar os seus locais definitivos, o que faz com que haja polaridade, o embrio torna-se polarizado. As clulas comeam a apresentar um lado apical e um lado basal.

No embrio de 16 clulas h clulas que esto localizadas na parte exterior vo comunicando entre si por tight junctions, e no interior as clulas esto to compactadas que vo comunicar entre si por gap junctions, havendo troca de ies e molculas entre as clulas. Ainda na compactao possvel marcar estas molculas que esto a superfcie com marcadores florescentes e reparem no inicio no embrio de 4 clulas estas molculas esto localizadas randomly mais tarde vo localizar-se em locais extremamente definidos. Uma glicoproteina muito importante a E-cadrina que est espalhada aleatoriamente no embrio de 4 clulas. A partir do momento em que o embrio se divide temos o estado de 8 clulas e a E-cadrina torna-se especifica dos locais de contacto entre os blastmeros. muito interessante verificar que o uso de drogas, como a tunicamicina, vo inibir a glicosilao de protenas fazendo com que haja um impedimento da compactao ou seja a parte glicosilada da protena E-cadrina que est a dar informao durante a compactao.

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Resumindo temos o zigoto, vai-se dividir em 2 clulas havendo um aumento exponencial do nmero de clulas. Ao 3 dia temos uma quantidade de clulas que corresponde mrula. Desaparece a zona pelcida e vamos ver um conjunto de clulas que se localizam superfcie do embrio, o trofoblasto, e um conjunto de clulas que se denominam de massa interna celular ou seja o embrioblasto, a partir do qual se origina o embrio propriamente dito - Primeiro momento da diferenciao. O trofoblasto vai dar origem a estruturas no embrionrias que esto na base da placenta, para manter o embrio. Estas clulas do trofoblasto inicialmente vo secretar integrinas que se vo ligar a fibronectina e laminina presente na mucosa uterina materna e que promovem a implantao do embrio no tero materno, fase crucial para a viabilidade do embrio. Se o embrio no se conseguir implantar na mucosa uterina ele no vivel e acaba por ser expulso. A maior parte das clulas do embrio nesta altura vo dar origem a trofoblasto, que comea a invadir o endomtrio e esta invaso faz com que haja adeso. As clulas do trofoblasto existem em maior quantidade que as clulas do embrioblasto. Quantas celulas do embrio naquela fase vo dar origem a embrioblasto e quantas vo dar origem a trofoblasto? Juntaram-se 2 embries no estdio de 4 clulas: 1 embrio homozigtico com plo preto + 1 embrio homozigtico com plo branco Embrio com 8 clulas Deu-se a compactao normal e este embrio foi transferido para o tero de uma me adoptiva e continuou a o seu desenvolvimento. Se por acaso a massa celular interna fosse constituda por: Uma clula

50%

50%

Duas clulas

25%

50%

25%

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Trs clulas

12,5% Quatro clulas

75%

12,5%

6,25% 87,5% 6,25% Repetiu-se isto n vezes e verificou-se que o ndice de mistura era da ordem dos 73% ou seja a massa interna nesta fase constituda apenas por 3 clulas.

O embrio, acabou de se implantar, esta zona da massa interna celular vaise dividir novamente, estamos na 2 semana j e vai dividir-se em epiblasto ( ectoderme embrionria) e hipoblasto (endoderme primitiva), e temos um embrio bilaminado.

O trofoblasto que vai originar a placenta, comea-se a dividir, no havendo tempo para fazer citocinese. As clulas acabam por no se dividir completamente, assim temos um grupo de clulas onde h muitos ncleos, sinccio. O trofoblasto d origem a clulas do citotrofoblasto e este vai invadir a mucosa uterina, causando eroso, formando lacunas, no seio das quais existem vasos maternos. Muitas vezes nesta fase em que h eroso dos vasos da parede uterina materna, acontece que h sangramento.

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A maior parte das mulheres que no sabe que est grvida pode muito bem pensar que aquilo menstruao, que no tem o aspecto de uma menstruao e ocorre muitas vezes num espao mais curto que uma menstruao normal. O que acontece que na placenta do embrio e na decdua da me h expresso de P-cadrina que expressa pela ectoderme extra-embrionria e necessria para facilitar o contacto do embrio com o tero materno. Expresso de P-cadrina num embrio Imunobloting da P-cadrina em de ratinho de 14 dias tero

Placenta

abcdefg-

Normal 3 dias de gestao 4 dias de gestao 5 dias de gestao 6 dias de gestao Decdua isolada tero e sem decdua

A partir do 5 dia e meio j comeamos a ver P-cadrina (B). Aumenta ao sexto dia e aqui temos uma grande mancha de P-cadrina porque a decidua materna isolada e aqui temos o tero sem decidua materna, reparem que no existe P-cadrina. Mais uma vez a importncia destas glicoproteinas na implantao do embrio, uma vez que facilitam o contacto do embrio com o tero. Quando a implantao no ocorre no tero mas por exemplo ao nvel da trompa temos uma gravidez ectpica.

Temos o embrio, o hipoblasto vai delaminar e formar a membrana de Heuser que vai revestir a cavidade vitelina primitiva. O citotrofoblasto e sinciciotrofoblasto penetram na mucosa uterina, formando lacunas. H o rompimento de alguns capilares maternos que extravasam sangue para as lacunas, onde portanto vai haver circulao materna.

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H a formao de mesoderme extra embrionria. Este cinturo para segurar bem o embrio parede uterina e est na base da formao do cordo umbilical. Forma-se o saco vitelino definitivo e a cavidade corinica expande-se. A cavidade corinica (amnitica?) importante porque evita choques e mantm o embrio hidratado.

Os sangues me/feto no se misturam, no havendo contacto entre as duas circulaes. No inicio h uma barreira muito grande entre a me e o embro,que se vai tronando cada vez menor, tambm porque h desaparecimento das clulas do citotrofoblasto. medida que a gravidez avana, as vilosidades vo ficar cada vez mais finas, permitindo um maior contacto entre circulao materna e fetal de modo a que haja troca de nutrientes, O2, anticorpos e hormonas e expulso de ureia e CO2. Reparem que no lado que est virado para o plo embrionrio, o crion, as vilosidades so mais frondosas, mais exuberantes, enquanto que no plo oposto, medida que a gravidez vai prosseguindo vo degenerando, tornando-se cada vez mais liso.

Resumo do que acontece ao nvel da 2 semana

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A circulao materno/fetal A dada altura h a formao de septos cotiledonares que formam compartimentos que so como grandes invases da decdua materna que quase toca o crion, formando varias patilhas. medida que a gravidez vai evoluindo a placenta comea a ficar velha, h grandes diferenas entre placentas jovens e velhas. Os clnicos dividem as varias etapas da placenta em 4 consoante o seu grau de envelhecimento. Uma placenta faz um aporte deficiente de O2 e nutrientes por isso que se pensa que este factor importante para a iniciao do parto. Os mdicos tm de estar cautelosos ao envelhecimento da placenta porque pode se dar o caso de o embrio aumentar de tamanho e estar em sofrimento, havendo necessidade de se antecipar o parto. Gastrulao D-se a formao do embrio trilaminar. As celulas do epiblasto que fazem parte da ectoderme primitiva vo delaminar a partir da linha media e do n ou seja vo entrar e andar para os lados no sentido caudocranial (posterioranterior) formando-se o 3 folheto embrionrio, a mesoderme. H a formao do tubo e placa neural est na base da neurulao do embrio portanto forma-se o sistema nervoso. Antes e durante a gastrulao o embrio vai tomar decises muito importantes para a sua vida, fundamentais para a disposio correcta dos rgos no organismo e correcto desenvolvimento do embrio: vai estabelecer os eixos anterior/posterior, dorso/ventral e esquerdo/direito. Os mamferos tm dois tipos de sinalizadores em locais opostos que funcionam como centros que enviam molculas s clulas com que contactam, dando instrues. Exprimem genes diferentes: No plo anterior est a Endoderme Visceral, que exprime os genes Otx2, Lim1, Hexs1, Cerberus e responsvel pela formao de estruturas da cabea, nomeadamente do telencefalo. No plo posterior o N de Hensen/ Organizer, que exprime os genes Goosecoid, Cordina, Noguina, Folistaina e Nodal, sendo responsvel pela formao de todo o corpo. O que acontece que estes dois funcionam em conjunto na formao das estruturas da cabea e o organizer no resto do corpo. Se fizermos um knockout para a Cordina no verificamos alteraes dramticas no desenvolvimento dos embries. Da mesma forma se delectarmos a Noguina tambm no h alteraes particularmente exuberantes no desenvolvimento. Mas se fizermos um duplo knockout para a Cordina e Noguina estruturas da cabea e da face no aparecem, ou seja estes genes so redundantes, na ausncia de um o outro compensa e vice-versa. Mas na ausncia dos dois no h compensao possvel para as estruturas nas quais estes so precisos. Knockout para o Lim 1 o individuo no tem cabea pois informao que estava na base da formao da cabea desapareceu, o organizer compensa o resto mas no conseguiu compensar l em cima, obviamente isto so embries que no so viveis.

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Um conjunto muito importante de genes Hox so necessrios para estabelecer o eixo Antero/Posterior no inicio da gastrulao. Nos humanos os Hox genes esto distribudos por quatro cromossomas. Hox A B C e D. O ratinho tambm tem quatro, na mosca s um. Existem imensos artigos onde h deleo de um, dois e at trs Hox e h alteraes surpreendentes quando se inicia a gastrulao. Esta polaridade Antero/Posterior especificada por genes Hox, que esto conservados ao longo da escala filogentica. Lateralidade esquerda/direita: Muito importante tambm o estabelecimento da lateralidade esquerda/direita uma vez que h rgos localizados do lado esquerdo e outros do lado direito. necessrio informar o embrio para que lado e que os rgos vo ficar. Inicialmente esta diviso necessria para estabelecer a parte dorsal da parte ventral do embrio. Se ns fizermos knockout do gene Iv a expresso est a montante do nodal o que acontece que a expresso de nodal vai ser dos dois lados, o que vai fazer com que rgos do lado esquerdo apaream do lado direito e vice-versa. Acontece por vezes alteraes de todos os rgos: os do lado esquerdo aparecem do lado direito e vice-versa. a reverso completa, muito rara mas funciona tudo na mesma.

A vermelho temos a linha primitiva. No tubo neural h expresso do gene Shh do lado esquerdo, h expresso do FGF8 que vai sinalizar para o nodal e para o Lefty-2 que so expressos do lado esquerdo. Estes vo induzir a expresso de genes como o Pitx2 que vai conduzir ao estabelecimento de um eixo estrutural esquerda. O Shh vai impedir que o FGF 8 se exprima do lado direito. Assim do lado direito vai surgir uma cascata gentica necessriamente diferente que tem como interveniente o gene NKX3.2

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No lado esquerdo porque exprime Lefty1 e Lefty2 e PITX2 vai conduzir expresso de estruturas esquerda. No lado direito a ausncia destes e a presena de outros vai conduzir formao de estruturas direita. Mais uma vez PITX2 ON estruturas de esquerda geradas Snail ON estruturas de direita geradas Uma falha nestas cascatas leva a que surja tudo ao contrario! Qualquer dvida: ana_rita_fig@hotmail.com P.S. Um grande obrigada Ins que leu a aula com muito carinho antes de a pr no site da CC. Rita Figueiredo, T 10

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