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Las poblaciones de la tortuga del desierto, Gopherus agassizii, se han visto gravemente afectados por la enfermedad del tracto

respiratorio superior (URTD), una afeccin potencialmente mortal, causada por Mycoplasma agassizii. Debido a que las comunidades naturales de microorganismos en los animales pueden servir como barreras a la infeccin por patgenos potenciales o pueden influir en el curso de una enfermedad, que se caracteriza a las bacterias en las fosas nasales de desierto en cautiverio Las tortugas ms de una temporada completa. Las tortugas alojados en corrales al aire libre del Adobe Mountain Wildlife Center en Phoenix, Arizona, se dividieron en cuatro grupos: tres tortugas saludables que se realizaron muestreos mensuales, tres tortugas de tierra con signos de URTD que se tomaron muestras mensuales, tres tortugas saludables que se tomaron muestras cada dos meses, y tres tortugas sanos que fueron muestreados una vez al final de la temporada. En cada muestreo tiempo, la salud de cada tortuga fue evaluada y los orificios nasales se probaron con hisopos estriles humedecidos. Las bacterias en las esponjas se suspendieron en solucin salina estril, se diluy en serie, y se sembraron en medio de agar de soja trptico. Total de los recuentos bacterianos vari entre las tortugas de aproximadamente desde 04 10 hasta julio 10 por ml y fueron generalmente ms altos en tortugas con signos de URTD. Las proporciones de diferentes tipos de colonias vari de mes al mes dentro de cada tortuga. Aunque las comunidades microbianas dominadas pigmentada por cocos gram positivos, tambin hemos encontrado bacilos Gram-positivas, gramvariable corineformes, y bacilos Gram-negativos. Muchas de las mismas bacterias se recuperaron de las dos tortugas sanas y URTD, pero otros son exclusivos de las tortugas URTD. Este estudio indica que las fosas nasales de las tortugas del desierto contienen grandes comunidades de bacterias que cambian continuamente, y sugiere que un mayor anlisis de estos microorganismos puede ser til en la evaluacin de la salud o el estrs de las poblaciones de tortugas del desierto y la susceptibilidad de las tortugas individuales a URTD. RESULTADOS El peso medio de las tortugas en el Grupo 1 (tortugas saludables realizaron muestreos mensuales) se increment un 5% durante la primera parte del verano y luego regres al peso se ve al principio de la temporada por el final del otoo. El peso medio de las tortugas en el Grupo 2 (tortugas con signos de URTD mensual de muestreo) mostr un patrn similar. El peso medio de las tortugas en el Grupo 3 (tortugas saludables muestras cada dos meses) mostr pocos cambios, pero no hubo datos suficientes para sacar conclusiones. Los signos clnicos de las tortugas en el Grupo 2 vara de mes a mes, desde la ausencia de espiratoria

problemas a sibilancias leves a un flujo claro nasal a un exudado blanco ms pronunciada. Sin embargo, dos de las tres tortugas no mostraron signos clnicos de UTRD por Octubre. En noviembre, haca demasiado fro para evaluar el comportamiento de las vas respiratorias en la mayora de la salud y las tortugas URTD porque los animales se haba iniciado la hibernacin. Ninguna de las tortugas sanas en los grupos 1, 3 y 4 desarrollado ningn signo de URTD durante el perodo de muestreo. Los microorganismos en las fosas nasales de las tortugas del desierto fueron recuperados mediante la difusin de las muestras obtenidas con hisopos estriles en un medio no selectivo complejo. Los hongos se vieron muy pocas, pero ms de 260 aislamientos bacterianos individuales se obtuvieron y caracterizaron durante el transcurso de este estudio. Cada aislado fue descrito inicialmente en trminos de su morfologa de las colonias (pigmentacin, tamao, margen, textura), y la aparicin de cada colonia importante tipo se expres como un porcentaje del total de bacterias contar. La revista mensual perfiles para uno de los saludable tortugas de Grupo 1 (chip de 559) y un de con las tortugas signos de URTD de Grupo 2 (Chips 270) se muestran como ejemplos en Figura 1. Ms de las muestras Se compone de uno a cinco principales colonia tipos, pero el predominante bacterias en cada tortuga vari desde mes a mes. Haba variaciones en colonia tipos entre las tortugas con en cada grupo y entre las tortugas y sanos aquellos con signos de URTD. Un pequeo nmero de bacterias con diferente colonia morfologas eran a menudo encontrado tambin. El tamao total de la comunidad microbiana en el fosas nasales de cada tortuga se estim por sumando los nmeros de la persona tipos de colonias de ambos orificios nasales (Tabla 1). Haba una variacin considerable entre las tortugas en cada grupo y entre los diferentes grupos, pero el recuento total de bacterias por lo general fue de 10 a 10 7 bacterias por ml. 294 Tortuga en el Grupo 1 dio cuenta consistentemente bajos en comparacin con los otros, y la tortuga 352 en el grupo 2 dio dos cargos de ms de 10 8 bacterias por ml. La cuenta total por ml aumentado en general desde mayo hasta agosto de 2003 y luego disminuy a partir de septiembre a noviembre. Los recuentos totales fueron superiores y ms variables de mes a mes en el Grupo 2 (tortugas con signos de URTD). Los aislados individuales se caracteriza adems por su tincin de Gram-reaccin, oxidasa y actividad de la catalasa, y el crecimiento en condiciones aerbicas o anaerbicas. Para simplificar el anlisis, a continuacin, los aislados fueron divididos en cinco grandes grupos: pigmentadas Cocos Gram positivos, no pigmentada cocos Gram-positivos, bacilos grampositivos, corineformes Gramvariable, y bacilos Gram-negativos. Los porcentajes de estos cinco tipos principales fueron en promedio para las tres tortugas de cada grupo y la comparacin de mes a mes (Fig. 2). Los aislamientos individuales microThe se caracteriza ademspor su tincin de Gram reaccin, oxidasa y actividad de la catalasa, y el crecimiento en condiciones aerbicas o anaerbicas. Para simplificar el anlisis, a continuacin, los aislados fueron divididos en cinco grupos principales: pigmentada cocos Gram positivos, no pigmentada cocos Gram positivos, bacilos Gram-positivas, corineformes Gramvariable, y bacilos Gram-negativos. Los porcentajes de estos cinco tipos principales fueron promediados para los tres tortugas

en cada grupo y comparacin de mes a mes (Fig. 2). Las comunidades microbianas dominadas por pigmentada cocos Gram-positivos, pero otros tipos de bacterias se ven a menudo. En el Grupo 2 (tortugas con signos de URTD), hubo un mayor porcentaje de bacterias corineformes en mayo y un mayor porcentaje de bacterias Gram-negativas en junio y julio. Sin embargo, no haba una correlacin obvia entre la severidad de las condiciones de las tortugas individuales en el Grupo 2 y, o bien el nmero total de bacterias por ml o la diversidad de la omunidad microbiana. No haba indicios de que el muestreo mensual afect a las comunidades microbianas. La estructura de la comunidad en el Grupo 3 era una diversa como la que se observa para el Grupo 1 y Grupo 2, aunque ms bacterias Gram-negativas se observaron en noviembre. La diversidad de bacterias en las tortugas en el Grupo 4, que fueron muestreados slo una vez en octubre, fue similar a los de los otros grupos. Las bacterias con la morfologa de la colonia misma, la reaccin de la tincin de Gram y caractersticas fisiolgicas se observaron repetidamente en las muestras de ambos tortugas sanos y aquellos con signos de URTD. Doce de los organismos ms comnmente recuperado, que fueron designados Ga-1 y as sucesivamente (Gopherus agassizii aislar 1, etc), se estudi con ms detalle. Algunas de las bacterias con la pigmentacin misma colonia result ser idntico, pero otras pueden ser diferenciadas entre s. Aislar Ga-7 fue identificado como el pseudodiphthericum Gram-positivas Coryneforme bacteria Corynebacterium, pero todos los dems eran pigmentados cocos Grampositivos. Usando el sistema BBL Crystal, aislar Ga-3 fue identificado como Staphylococcus xylosus, aislar Ga-8 fue identificado como Staphylococcus vitulinus, asla Ga-10 y Ga-11 fueron identificados como Staphylococcus sciuri, y aislar a Ga-5 fue identificada como Kytococcus sedentarius . Aislar Ga-4 fue identificado como un sp Micrococcus. pero los otros no se encontraron en la base de datos existente. Las bacterias con el rango de temperatura ms alta (crecimiento a temperaturas de hasta 45EC) se encontraron ms a menudo en las muestras de verano. La mayora de las cepas crecieron bien en agar de soja trptico que contiene 1,0 M de NaCl, y muchos podran crecer en presencia de 2,0 M, 2,5 M, o incluso 3,0 M de NaCl. Aunque las bacterias aisladas de los roedores silvestres se han encontrado para ser resistente a los antibiticos (Gilliver et al. 1999), estos aislamientos de tortugas del desierto eran sensibles a los antibiticos ms comunes. Mientras URTD se sabe que est causada por Mycoplasma agassizii, es posible que otros microbios en el sistema respiratorio contribuir a la enfermedad ya sea como secundarias (oportunista) o patgenos como microbios que interfieren con una respuesta inmunitaria normal. De las bacterias que se encuentran slo en las muestras de las tortugas URTD, cuatro fueron seleccionados para analysis.Isolates ms de Ga-13 y Ga-16 fueron bacilos Gram-negativos y asla Ga Ga-14 y 15 fueron bacilos grampositivos. Aislar Ga13 se distingue de las otras cepas por su resistencia a casi todos los antibiticos probados incluyendo amikacina, ampicilina, la bacitracina, la eritromicina, la gentamicina, norfloxacina, novobiocina, penicilina, rifampicina,

estreptomicina, triple sulfa, y vancomicina. Este microorganismo fue identificado como Stenotrophomonas maltophilia, y se observaron para producir un pigmento que difusa en el agar cuando las bacterias se cultivaron a 40EC. Aislar Ga-14 se encontr que era Bacillus sphaericus. Aislar Ga-15 era inusual, ya que creci a 55EC y form una cpsula extensa que cambi a partir de un material mucoide hmeda a un material pegajoso seco como las colonias envejecido. Aislar Ga-16 se parecan ms a Pseudomonas fluorescens, pero dio varias reacciones atpicas.

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