DESARROLLO DEL CULTIVO DE LENGUADO, Paralichthys californicus: AVANCES SOBRE LA FISIOLOGIA DIGESTIVA Y NUTRCION DE LARVAS Y JUVENILES

Juan Pablo Lazo Laboratorio de Nutricin de Peces Departamento de Acuicultura CICESE

Esquema de la platica
Introduccin Cultivo larvario
Ontogenia del sistema digestivo y capacidad digestiva Digestibilidad in vitro Microdietas y protocolos de destete Pigmentacin

Cultivo de Juveniles
Temperatura ptima Efecto de la relacin E/P Tasas de alimentacin

Laboratorio de Nutricin de Peces Marinos

Participantes:
Benjamn Barn-Sevilla Emmanuel Martnez Vernica Vizcaino Mario Galaviz Magali Zacarias Jean Benoit Muguet Sharon Herzka Armando Garca-Ortega Mark Drawbridge Nathaniel Schmit Jess Mariscal Daniel Vargas Hctor Canseco Luz Lpez

Por qu cultivar Peces Marinos?

La pesca mundial ha llegado a un tope de cosecha (aprox. 90-100 millones de toneladas) La mayora de las poblaciones naturales estn sobreexplotadas y disminuyendo A travs del cultivo de peces marinos se puede:
Disminuir la presin pesquera sobre las poblaciones naturales Repoblar especies nativas en va de extincin Estudiar la biologa bsica en el laboratorio (ecofisiolga y ontogena)

Excelente fuente alternativa de protena y lpidos Alternativa para la acuacultura en Latino Amrica

Lenguado, Paralichthys californicus

El lenguado es un recurso pesquero nativo de gran importancia en las costas del Pacfico Mexicano y del sur de California de los Estados Unidos Americanos Se distribuye desde Canad hasta Baha Magdalena Baja California, Mxico Es la especie que alcanza mayores tallas de toda la familia Paralichthidae, alcanzando tallas de 1.5 m de longitud total y un peso de 32 Kg Tiene gran aceptacin comercial por la textura y sabor de su carne Se comercializa a precios del orden de $10 a $20 USD, dependiendo de su presentacin

Distribucin natural
Ro Quillayute

o an Oc i fi c Pa c o

Baha Magdalena

Situacin actual pesqueras

Se han reportado reducciones de ms del 80% en la capturas totales multiespecificas de lenguados en las costas de la Baja California A nivel nacional, se puede generalizar que las capturas de lenguado han disminuido en un 33% en los ltimos veinte aos

Estado actual del cultivo

Reproduccin controlada en cautiverio Cultivo larvario con alta supervivencia (hasta un 80%) Produccin comercial de semilla por el CICESE
Capacidad actual 50,000 a 70,000 juveniles Nuevo Laboratorio con capacidad de 250,000

Varias granjas comerciales cultivando juveniles en Baja California Comercializado en Baja California con precios de $10 dlares el kilo pez entero

Nuevo Laboratorio Comercial

Instalaciones de 1000 m2 en el CICESE Capacidad de producir 250,000 juveniles de lenguado y/o jurel aleta amarilla Primer laboratorio comercial de peces marinos en el pas

Laboratorio de Cultivo de Peces Marinos

Reproduccin en cautiverio

Desoves naturales

Desoves inducidos

Cultivo Larvario

DIETA COMPUESTA TIPO DE ALIMENTO

ARTEMIA 5 Rot mL-1 15 Rot mL-1

5-10 naup mL-1

ROTIFEROS

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51

DIAS DESPUES DE LA ECLOSION (DDE)

Protocolo de Alimentacin

Engorda en Granja Comercial

Pezco S.A. de C.V.

Problemas
Altos costo de produccin de alimento vivo y mortalidad en el destete (transicin de alimento vivo a microdietas) Produccin de juveniles con pigmentacin anormal Temperatura altas durante la engorda en B.C. Crecimiento moderado (500 a 600 g en 12 meses) Canibalismo en juveniles tempranos

Cultivo de Peces Marinos

La etapa larvaria es considerada la ms crtica La mayora de los problemas estn asociados con la nutricin y alimentacin Para satisfacer sus requerimientos nutricionales las larvas deben: Ingerir alimento Digerirlo a travs de procesos enzimticos Absorber y metabolizar los nutrientes necesarios Se considera que las larvas poseen un sistema digestivo poco desarrollado: carecen de estmago funcional que secrete HCl y pepsina

Alimentacin de larvas
Dos alternativas: 1) La utilizacin de presas vivas como rotferos o Artemia
Difcil de mantener Laborioso y costoso (70-80 % del costo produccin) Valor nutricional subptimo

2) Microdietas formuladas
Buen perfil nutricional Tamao adecuado Poco xito con estas dietas

Dietas formuladas
Crecimiento
6 Longitud (mm) 5 4 3 2 1 0
Zooplancton Microdietas

Supervivencia
45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Sobrevivencia (%)

Zooplancton

Microdietas

Tipo de alimento

Tipo de Alimento

PROBLEMAS CON LA PIGMENTACION

Larvas: Estudios de Fisiologa Digestiva

Estrategias de investigacin
Morfologa e histologa durante la ontogenia del sistema digestivo Estudios de actividad enzimtica: cual es la capacidad digestiva? Digestibilidad in vitro: seleccin de ingredientes adecuados Aplicaciones practicas de la fisiologa digestiva:
Desarrollo de microdietas Protocolos de destete

Ontogenia del sistema digestivo

2 DDE. Zona prevalvular (pr),gota de aceite (), ngulo de constriccin ().

2 DDE. Intestino tubular (it), saco vitelino (s), ojo (o). H-E (10X).

Pncreas
2 DDE. Epitelio cilndrico con microvellosidades eosinfilas formando el borde en cepillo (ep), serosa (). H-E (63X). 3 DDE. Grnulos de zimgeno (z), hgado (h), intestino (i). H-E (40X).

13 DDE. Asa intestinal ().

14 DDE. Asa intestinal (*), pncreas (p), hgado (h), intestino (i). H-E (10X).

Glndulas gstricas

26 DDE; primeros esbozos de las glndulas digestivas H-E, 400X

44 DDE. Regin cardiaca (rc), regin fndica (rf), regin pilrica (rp), hgado (h), pncreas (p), intestino (i), H-E (5X).

Capacidad digestiva

Enzimas Digestivas
Proteasas (digestin de protenas)
Proteasas cidas (pH 2) Proteasas alcalinas (pH 7-10) Tripsina y Quimiotripsina (proteasas pancreticas tpicas) Aminopeptidasa, fosfatasa alcalina (epitelio intestinal) Peptidasas, catepsinas, (intracelulares)

Lipasas (digestin de lpidos)

Lipasas generales Lipasas dependiente de sales biliares, Fosfolipsas

Amilasas (digestin de C.H.)

Amilasas Maltasas

Metodologa para estudiar enzimas digestivas

Muestreo y preparacin de los extractos:
1 larvas larvas 2 h (limpieza del intestino) 2

LE

Diseccin
3

Homogenizado
4

Sistema digestivo

Centrifugado
5

Leu-Aminopeptidasa

Protena disuelta Actividad enzimtica Digestibilidad in vitro

Sobrenadante

Proteasas
70 50

Total activity (U/larvae)

60 50 40 30 20 10 0 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44

Total activity (U/larvae)

40 30 20 10 0 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44

Days post hatch

Days post hatch

Tripsina
30 6

Aminopeptidasas
Total activity (U/larvae)

Total activity (U/larvae)

25 20 15 10 5 0 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44

5 4 3 2 1 0 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44

Destete?

Days post hatch

Days post hatch

Proteasas alcalinas

Protesas acidas

Histoqumica
Enzimas digestivas:
Tripsina (endoproteasa alcalina por excelencia) Lipasas (digestin de lpidos) Amilasas (digestin carbohidratos) Aminopeptidasas (exoproteasa de la membrana intestinal, indicador de maduracin del intestino) Fosfatasa cida (digestin intracelular) Fosfatasa alcalina (enzima de la membrana intestinal)

Histoqumica
100

100
90 80

A AB

AC ab ab

b B bcd ac bc BDEF BC CF I.A. I.P. bcd CD b bc

90

ab B ABC

CB

a a

Nivel de gris (%)

Nivel de gris (%)

70 60 50

80

70 60

a c D DE E

a
40 30

CE AC ad C

50 40 0

I.A I.P.

A
0 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Das despus de la eclosin (DDE)

Das despus de la eclosin (DDE)

Actividad de la fosfatasa alcalina en el intestino de P. californicus, durante su desarrollo larvario. Media D.E. (n=3).

Actividad de la fosfatasa acida en el intestino de P. californicus, durante su desarrollo larvario. Media D.E. (n=3).

Eclosin

Inicio de alimentacin Estmago incipiente

Metamorfosis Esfago Estmago Intestino anterior Intestino posterior

Sistema digestivo prematuro

Modelo ontognico

Intestino proximal (Digestin de lpidos y protenas) Intestino distal (Absorcin intracelular de protenas)

Embrin
d0 Tripsina Aminopeptidasa Fosfatasa

Etapa larvaria
d 2-5 Quimotripsina Digestin proteica d 30-40 Pepsina

Juvenil

Digestin de pptidos Amilasa Lipasa Carbohidratos Lpidos

Extracelular

Lisosomas

Intracelular

Digestibilidad in vitro

Digestibilidad in vivo
La digestibilidad integra los procesos digestivos con los de absorcin de los nutrientes Permite inferir el grado de aprovechamiento del alimento Limitantes en el estudio de larvas de peces marinos
Muy difcil recolectar heces Difcil cuantificar alimento consumido Muchas especies no aceptan microdietas formuladas al inicio de la alimentacin exgena

Algunos estudios de digestibilidad en larvas peces

Aun no se consideran los cambios ontognicos

Digestibilidad in vitro
Tcnicas alternativas Ensayos sencillos y de bajo costo Evaluacin rpida de la calidad de los ingredientes Uso de extractos enzimticos de larvas o enzimas comerciales Evaluacin de la digestibilidad de:
protenas (por amino cidos) lpidos (por cidos grasos)

Parmetros: tcnica pH-STAT

Extracto de enzimas de larvas de lenguado Proporcin de [E]:[S]
30 Unidades de enzima por ensayo 8 mg/ml protena por ingrediente

Rx: pH 8.0 Base: 0.1 N NaOH Temp: 25 C Tiempo de Rx: 1h

DH (%)
DH (%) 0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500 3.000

0.000
Ca se in a Si

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

SI L VE R C UP
O m eg a P ro t lve rc up

C AS EI N A

O M EG A PR O T
H. de

KR IL L
H. de l kr il

26 DDE

C AL A M A R RO TI FE R O S
TRATAMIENTOS

9 DDE

Ontogenia de la digestibilidad

INGREDIENTES
H. de

ca la m ar ro t if er os Ar te m H. de

AR TE M IA

ia

SO YA G LU TE N

G lu te n

so ya de

tri

go

DH (%)
0.000 1.000 2.000

DH (%) 3.000 4.000 5.000 6.000 7.000

0.000

0.200

0.400

0.600

0.800

1.000

1.200

1.400

1.600

1.800

CA S

SE IN A IL VE R O M E

CA SE IN A SI LV ER

C U G A

P PR O T K

CU O M EG A

P PR O T KR IL L

RI LL CA LA M
INGREDIENTES

15 DDE

39 DDE

AR RO TI FE

CA LA M AR

TRATAMIENTOS

RO

RO S AR TE M IA SO YA G LU

TI FE RO S AR TE M IA SO YA G LU

TE N

TE N

DH (%) 0.000
NA

0.200

0.400

0.600

0.800

1.000

1.200

1.400

1.600

1.800

CA SE I SI LV ER O M EG A PR O T CU P

KR IL L

51 DDE

CA LA M AR

INGREDIENTES

RO

TI FE RO S AR TE M IA

DH (%) 0.5 1.5 2.5 0

IN A UP

C AS E

SO YA

SI LV ER C O M EG A PR O T

G LU TE N

KR C

IL L AL AM

AR R O TI FE R AR

INGREDIENTES

O S TE M

IA SO YA G LU

TE N

39 51

15 26

Microdietas

Diseo experimental
Se formularon 2 dietas, 1 comercial y 1 control Bioensayo por 42 das Larvas alimentadas con alimento vivo enriquecido con HUFA n-3
Rotferos @ 5 por ml iniciando 3 DDE Artemia @ 5-7/ml iniciado 16 DDE

Co-alimentacin al da 20 DDE Completamente destetados para el da 26 Se alimento en exceso (> 3020% peso)

Composition of experimental diets

Ingredient Artemia decapsulated cysts Sardine fishmeal Menhaden fish meal CPS90 (Prot hydrolysate) Skipjack muscle Cod liver oil Skipjack orbit oil Vitamin premix Mineral premix Mesquite gum Carrageen CMC Whey protein concentrate Sodium alginate Proximate composition (% dw) Protein Lipid Ash Dry matter Diets (g/100 g dry weight) QA MC 74 15.7 49.4 9.8 2.6 1.7 1 14.8 2 1 3.1 0.6 0.6 0.6 AL

49.5 18.3 9.7 92.4

67 21 10 93

56 15 12 93

Resultados
Longitud
16.0 14.0 12.0 10.0 8.0 6.0 4.0 2.0 0.0 AL CT Trt MC QA

Peso Humedo
0.0600 0.0500
peso (g)

SL (mm)

0.0400 0.0300 0.0200 0.0100 0.0000 AL CT

Trt

MC

QA

Mortalidad
1000
% Albinos 100 80 60 40 20 0

Albinismo

800 No. org 600 400 200 0 AL CT Trt MC QA

AL

CT Trt

MC

QA

AL= alimt comercial, CT = alimento vivo, MC = Microcapsulas, QA = dieta quistes

Destete

Tiempo del destete

Diseo experimental I
Determinar la fecha mas temprana para realizar el destete Larvas alimentadas inicialmente con rotferos y artemia (tratamiento control) 4 fechas de destete: 16, 26, 36 y 46 DDE 3 das de periodo de co-alimentacin 3 replicas por tratamiento

Evaluacin de edad para el destete

100 90 80 Survival (%)

a
Survival (%)

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

70 60 50 40 30 20 10 0 16 21 26 31 36 dph 41 46 51 56

26

31

36

41

dph

46

51

56

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 36 39 42 45 48 51 54 57

100 90 80 70 Survival (% ) 60 50 40 30 20 10 0 46 48 50 52 54 56 58

Survival (%)

60

60

dph

dph

Figure 1. Survival rate (n=3) of larvae weaned at 16 (a), 26 (b), 36 (c) and 46 (d) dph. Muguet et al., 2004

Actividad enzimtica: tripsina

4.5

A: total activity
4 3.5 3

40

A: total activity
35 30 25

2.5 20 2 1.5 1 0.5 0 15 10 5 0

16W

16C

26W

26C

100 90 80 70 60

A: total activity

180 160 140 120 100

A: total activity

50 40 30 20 10 0 80 60 40 20 0

36W

36C

46W

46C

Muguet et al., 2004

Leucino-aminopeptidasa
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 0 50 100 150 200

A: total activity

250

A: total activity *

16W

16C

26W

26C

800 700 600

1200

A: total activity *
1000

A: total activity

800 500 400 300 200 200 100 0 0 600

400

36W

36C

46W

46C

Efecto del nivel de DHA en el destete

DHA nutrientes esencial Diseo experimental II
Antecedentes en Japn (Kanazawa, 90s) Cuatro niveles de DHA en el enriquecimiento con Artemia DHA 0, 5, 10 y 15 % del total de los cidos grasos en la emulsin enriquecedora Destete total en el da 36 Bioensayo 78 das

Efecto del DHA en el xito del destete

Peso final
0.45 0.4 0.35 0.3 (g) 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 5 10 15 DHA Level (% of Total Fatty acids)

Talla Final
35 30 25 (mm) 20 15 10 5 0 0 5 10 15 DHA Level (% of Total Fatty acids)

No.final 500 400 0 300 200 100 0 0 5 10 15 5 10 15

DHA Level (%of total fatty acids)

Pigmentacin

Causas de la malpigmentacin
Nutricionales
cidos grasos: DHA, EPA y ARA Vitamina A Yodo: hormonas tiroedianas

Ambientales
Calidad de la Luz Intensidad de la luz UV

Efecto del DHA en la pigmentacin

Pigmentacion
180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 0 5 10 15 Nivel de DHA (%acidos grasos totales)

Albino M achas P entado igm

NIVEL ADECUADO DE DHA ENTRE 10-15 % AGT

Modelo del efecto del UV

Efecto de la luz UV
160.00 140.00 120.00 100.00 80.00 60.00 40.00 20.00 0.00 0% UV 33% UV 66% UV 100% UV PIGM ENT ALBINO

Las larvas requieren niveles de UV normales para una pigmentacin adecuada

Nutricin y Cultivo de Juveniles

Requerimientos nutricionales
Aproximacin utilizando informacin de otras especies similares como el P. olivacius, P. dentatus y P. lethostigma.
Protena (45-55%) Lpidos (10-16%) Energa (18-20 kj/100 g) Cenizas (10%) Carbohidratos (<15%) Vitaminas y minerales (3-5%)

Efecto de la temperatura
Que pasa con los organismos a temperaturas mayores a 20 C?
i.e., durante el verano y en el Centro y Sur de Mxico

Diseo experimental
Cuatro temperaturas: 20, 22.5, 25 y 27.5 C Juveniles de 0.5 g Tres replicas por tratamiento

Efecto de la temperatura (lab)

Talla final
9.00 8.00 7.00 (mm) 6.00 5.00 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 20 22.5 Tem peratura 25 27 8.00 7.00 6.00 5.00 (g) 4.00 3.00 2.00 1.00 0.00 20 22.5 Tem peratura 25 27

Peso

Supervivencia 120.00 100.00 80.00 (%) (g) 60.00 40.00 20.00 0.00 20 22.5 25 27 Te m pe ratura 300.00

Biom asa

250.00 200.00 150.00 100.00 50.00 0.00

20

22.5

25

27

Tem peratura

TCA y TEP menores a mayores temperaturas

Efecto de la temperatura Cultivo en granja

Tasa de Crecimiento Especifico
3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 15 17 19 Tem peratura 21 23 25 y = -0.2685x + 6.9389 R2 = 0.8048

Relacin E/P y la Temperatura

Al incrementar la temperatura se incrementa el metabolismo Mayor costo energtico Se podra mejorar el crecimiento y la supervivencia incrementado la energa en la dieta?

Efecto de E/P vs. Temperatura

Diseo experimental
Incremento de la relacin E/P incrementa TCA y TEP a mayores temperaturas? 3 dietas (50% P) experimentales
(19, 20, 21 kj/100g) evaluadas a 2 temperaturas (20 y 25 C)

Juveniles de 3.9 g Tres replicas por tratamiento (3X2 factorial)

Efecto de E/P vs. Temperatura

Efecto de E/P vs. Temperatura

16 T1 T2 T3 T4 T5 T6 14

12

(19kj,20C) (19kj,25C) (20kj,20C) (20kj,25C) (21kj,20C) (21kj,25C)

Crecimiento (g)

10

4 0 10 20 30 40 50 60

Das

Efecto de E/P vs. Temperatura

Parmetros T1 T2 T3 T4 T5 T6 20C,19 kJ Longitud inicial (cm) Longitud final (cm) Aumento en longitud (cm) Peso inicial (gr) Peso final (gr) Aumento en peso (gr) TCE (% peso corporal/d) Sobrevivencia IHS TCA TEP Digestibilidad (CDA %) 6.60.05 9.90.18 a 3.30.19 a 3.90.02 15.00.38 a 11.00.37 a 5.00.05 a 1000a 1.190.05 1.30c 1.330.04a 66.40.50a 25C, 19kJ 6.60.04 9.50.11 a 2.90.15 a 3.90.03 14.70.17 a 10.80.16 a 4.90.02 a 92.52.5e 1.300.10 1.40b 1.200.05b 67.10.84a 20C, 20kJ 6.50.05 9.80.09 a 3.20.08 a 3.80.05 14.70.58 a 10.80.57 a 4.90.08 a 98.3.83cab 1.350.20 1.40b 1.280.08a 60.21.43d 25C, 20kJ 6.50.06 9.70.37 a 3.10.31 a 3.90.04 14.20.66 a 10.30.67 a 4.90.10 a 88.38.2f 1.270.13 1.40b 1.100.14c 64.71.1b 20C, 21k 6.70.06 10.10.25a 3.40.29 a 3.90.03 15.10.5 a 11.00.4 a 5.00.07 a 99.2.83ba 1.530.14 1.30c 1.320.05a 62.40.26c 25C, 21kJ 6.50.05 9.10.09b 2.50.04b 3.90.02 12.70.51 b 8.70.52 b 4.60.09 b 951.4dabc 1.140.09 1.60a 1.010.07c 63.12.20b

Mayor aprovechamiento del alimento a 20 C comparado con 25 C Porque??

Efecto de la temperatura en la digestibilidad

Actividad Proteolitica Alcalina
Actividad acalina total (U/org) 600 500 400 300 200 100 0 E19T20 E19T25 E20T20 E20T25 E21T20 E21T25 Tratamiento

Digestibilidad In vitro 1.8 1.6 1.4 DH (%) 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 E19T20 E19T25 E20T20 E20T25 E21T20 E21T25 TRATAMIENTO a,b b,c c c a

Efecto de la tasa y frecuencia de alimentacin Antecedentes en Japn (optimo 3-5 % p.c) Informacin anecdotal de alta TCA si no se alimenta diariamente Diseo experimental
Estudios de condicin nutricional y tasas de crecimiento juveniles silvestres Cuatro tasas de alimentacin: 1.5% diario, 3% cada dos das, 3% diario y 6% cada dos das Alimentados 2 veces por da 3 replicas por tratamiento Se evalu el consumo real cada semana

70.00 60.00 50.00 40.00 30.00 20.00 10.00 0.00 0

Efecto de la tasa y frecuencia de alimentacin

1.5%Daily 3%EOD 3%Daily 6%EOD

RESULTADOS Crecimiento

Semanas
45.00 40.00 35.00 30.00 25.00 20.00 15.00 10.00 5.00 0.00 1.5%Daily 3%EOD 3%Daily 6%EOD

Peso Final

Efecto de la tasa y frecuencia de alimentacin

1.5% diario Ganancia en peso g Peso final (g) Supervivencia % Tasa de Crec. Esp. Consumo terico Consumo real TCA terico TCA real Consumo Protena terica TEP de C.P.T. Consumo Protena real TEP de C.P.R. 33.58 57.39 100.00 1.28 32.35 27.26 0.97 0.82 17.47 1.92 14.72 2.28 3% C2D 19.66 41.38 100.00 1.03 26.13 16.83 1.34 0.86 14.11 1.40 9.09 2.18 3% diario 36.63 59.76 100.00 1.34 70.20 30.93 1.92 0.85 37.91 0.97 16.70 2.20 6% C2D 21.59 44.37 100.00 1.06 55.02 22.90 2.58 1.07 29.71 0.73 12.37 1.74

Conclusiones
Se puede realizar el destete temprano premetamorfosis (36 DDE) Muy importante considerar cambios en la capacidad digestiva de las larvas en la formulacin de microdietas para el destete
Elaborar dietas estadio especificas

Se requiere 15% DHA en el enriquecedor de alimento vivo para un buen xito en el destete

Conclusiones
No cultivar juveniles a temperaturas superiores 22 C Tasa de alimentacin del 1.5 a 2% peso corporal y alimentados diariamente en por lo menos 2 raciones

Perspectivas
Incrementar tasas de ingestin de microdietas Evaluar efecto la relacin DHA/EPA en el proceso de pigmentacin Incrementar las tasas de crecimiento con cultivos mosexuales (hembras crecen hasta 3 veces mas) Densidad de siembra (500, 750, 1000 o 1500 org/m2) Densidad de cultivo (15, 30 o 45 kg/m2)? Inters actual de producir 500 TM en los siguientes 2 aos

Gracias por su atencin

Nota: Aquellos interesados en aspectos prcticos del cultivo del lenguado maana habr un taller sobre su cultivo de las 9 a las 12 am